Mechanism of regulating immune dysfunction of sepsis based on network pharmacology and experimental verification北大核心CSCD

目的验证升降散在脓毒症中的作用并探讨其分子机制。方法通过TCMSP、Disgenet等数据库搜索药物活性成分作用靶点与疾病相关靶点,并将二者取交集。采用DAVID数据库对交集靶点进行GO、KEGG通路富集分析,将药物活性成分与关键通路的核心基因进行分子对接。采用盲肠结扎穿刺(cecal ligation puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型,收集小鼠脾脏组织与血清,采用流式细胞术检测脾脏中不同T细胞亚群百分比,采用ELISA检测血清中IL-6、IL-10水平。结果网络药理学分析搜索获得升降散活性成分25个,活性成分作用靶点238个,疾病相关靶点2797个,活性成分与疾病相关靶点交集基因有90个,潜在靶标为AKT、JUN、EGFR、MMP9等;GO功能富集分析,得到条目数1021条,其中生物过程942条,细胞组成23条,分子功能55条。KEGG通路分析发现交集基因主要富集在PD-1/PD-L1信号通路、HIF-1信号通路、TNF信号通路、炎症介质信号通路等,表明其治疗效果可能和这些通路有关。分子对接结果显示,槲皮素、山奈酚、大黄素等核心化合物与关键基因都能较好的结合。流式细胞术结果显示,CLP 7 d后小鼠脾脏CD4^(+)T细胞比例减少,CD4^(+)PD-1^(+)T细胞比例增加,IL-6释放减少,IL-10含量增加,小鼠呈免疫抑制状态。给予升降散灌胃治疗后小鼠脾脏CD4^(+)T细胞百分比增加,CD4^(+)PD-1^(+)T细胞数量减少,IL-6释放增强,IL-10含量降低,小鼠免疫抑制得以改善。结论升降散能增加脓毒症晚期促炎症细胞因子IL-6释放,提高CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞比值,降低抗炎性细胞因子IL-10表达,以改善脓毒症晚期免疫抑制,提高小鼠生存率。     

葛根素改善动脉粥样硬化大鼠血脂异常及炎症反应的作用机制

目的 观察葛根素对动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂代谢及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β,以及丝裂原活化激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨葛根素抗AS的机制.方法 成年雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组(15只)与模型组(45只),模型组大鼠给予高脂饲料+腹腔注射维生素D...     

穿心莲酸对高脂饲料喂养C57BL/6及NLRP3基因敲除小鼠脂质及炎症水平的影响

目的研究穿心莲酸对高脂饲料喂养C57BL/6及NLRP3基因敲除小鼠脂质及炎症水平及其相关蛋白的影响。方法将18只C57BL/6小鼠和18只NLRP3基因敲除小鼠分别随机分为3组,每组6只,雌雄各半。分别为对照组(Control)、模型组(HFD)、穿心莲酸(ANDA,12.5 mg·kg-1)组。对照组小鼠给予维持饲料,其余小鼠每笼每天给予20 g高脂饲料喂养(high fat diet,HFD),连续8周。第5周起,ANDA组连续灌胃给药4周,其他组小鼠灌胃给予蒸馏水,每天1次。收集血样及肝脏,测定血清中TC、TG、HDL-c、LDL-c及IL-1β水平;Western Blot测定肝脏中caspase-1、IL-1β、CYP7A1及LXRα的蛋白表达水平。结果给予高脂饲料喂养后,WT小鼠和NLRP3-/-小鼠血清TC、TG、LDL-c水平均较对照组显著升高、HDL-c水平显著下降(P<0.01);与对应模型组相比较,穿心莲酸均能降低高脂饲料喂养的WT小鼠和NLRP3-/-模型小鼠血清TC、TG、LDL-C含量,提高HDL-c含量(P<0.01或P<0.05)。穿...     

体外阻断CD137-CD137L途径抑制移植物抗宿主病的免疫效应

目的探讨体外阻断活化的供鼠T淋巴细胞CD137-CD137L共刺激途径抑制供鼠淋巴细胞的免疫反应。方法应用雄性供鼠BALB/c脾淋巴细胞为反应细胞,雌性受鼠C57BL/6脾淋巴细胞为刺激细胞,进行混合淋巴细胞培养(MLC)。设单抗实验组(加抗CD137L单抗)和对照组(不加抗CD137L单抗),初次和再次MLC第1、3、5、7天采用流式细胞术检测CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞;RT-PCR法检测培养的细胞IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果实验组CD3+CD8+T细胞明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-2、IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-10表达明显高于对照组(P<0.01)。结论体外MLC中,应用抗CD137L单抗孵育供鼠脾T淋巴细胞主要抑制供鼠CD3+CD8+T细胞的增殖,抑制Ⅰ类细胞因子IFN-γ及IL-2的表达,促进Ⅱ类细胞因子IL-10的表达。     

中药罗汉果抗血脂紊乱的实验研究

目的观察中药罗汉果对实验性血脂紊乱SD大鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-c)、三酰甘油(TG)及高密度脂蛋白(HDL-c)水平的影响。方法 50只雄性SD大鼠(体质量180g-220g)适应性饲养7d后随机分为空白对照组和造模组,造模组上午8时至下午18时给予普通饲料喂养,18时至次日上午8时高脂饲料喂养,共4周。4周后禁食12h断尾采血测两组空腹血清TC、LDL-c、TG、及HDL-c水平,造模组血脂各指标显著升高具有统计学意义者,确定为模型建立成功。将造模成功的模型组大鼠再随即分为药物实验组(20只,给予含生药4g/(kg d)罗汉果水溶液灌胃)和模型对照组(20只),后者继续高脂饲料喂养。至第八周后测血清TC、LDL-c、TG、及HDL-c水平。结果实验组血清TC)和LDL-c)的水平显著低于对照组(P<0.05);TG水平较对照组有下降趋势,HDL-c水平较对照组有上升趋势。结论中药罗汉果可显著降低实验大鼠血清TC和LDL-c,可通过调节血脂代谢紊乱发挥抗动脉粥样硬化作用。     

急性支气管哮喘病人外周血程序性死亡因子 -1及其配体的表达

目的探讨急性支气管哮喘病人外周血程序性死亡因子 -1(PD-1)及其配体 PD-L1的表达水平及意义。方法选择 2017年 2月至 2019年 3月无锡市第五人民医院收治的 101例急性支气管哮喘病人作为病例组,同期体检正常 40例健康者为对照组;病例组病人分为轻中度组 46例、重度组 34例、危重组 21例。采用流式细胞术法检测外周血 CD4+T淋巴细胞中 PD-1表达( CD4+PD-1)、 CD8+T淋巴细胞中 PD-1表达( CD8+PD-1)CD19+B淋巴细胞中 PD-L1(CD19+PD-L1)表达,采用单因素方差分析其与疾病严重程度的关系;采用化学发光分析仪检测呼出,气一氧化氮( FeNO)水平,酶联免疫吸附法( ELISA)检测外周血白细胞介素 4(IL-4)、白细胞介素 17(IL-17)水平。结果病例组外周血 CD4+PD-1、CD19+PD-L1表达水平及 PD-1/PD-L1值均高于对照组高［ 17.98±4.16比 5.43±1.52、3.13±0.75比 1.08±0.27、5.75±1.62比 5.03±1.11］(P<0.05);病例组 FeNO及外周血 IL-17水平高于对照组［( 29.74±6.08)μg/L比( 16.38±4.12)μg/L、(38.66±8.27)ng/L比( 24.73±5.21)ng/L］,外周血 IL-4水平低于对照组［(9.14±2.47)ng/L比( 12.86±3.65)ng/L］(P<0.05);病例组不同严重程度外周血 CD4+PD-1、CD19+PD-L1表达水平及 PD-1/PD-L1值由高至低为危重组、重度组、轻中度组(P<0.05);病例组外周血 CD4+PD-1、CD19+PD-L1与 FeNO呈正相关关系(r=0.61、0.55, P<0.05)与 IL-17呈正相关关系( r=0.51、0.50,P<0.05)与 IL-4呈负相关关系(r=.0.43、.0.38,P<0.05)。结论急性支气管哮喘病人外周血,PD-1/PD-L1(CD4+PD-1/CD19+PD-L1)表达异,常,病情越严重,其表达水平可能越高。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的 探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义.方法 取40例AS患者(分AS病情稳定组、活动组各20例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选CD4~+ T细胞,用或不用非特异性刺激剂(A-CD3、A-CD28),然后加PMA/Ion,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术(FCM)检测CD4~+T细胞内白细胞介素17(IL-17~+)/γ于扰素(IFN-γ~+)、IL-17~+/IL-6~+水平.结果 免疫磁珠阴选CD4~+T细胞纯度达90% 以上.AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高(P<0.01).用A-CD3、A-CD28和IL-23刺激后,CD4~+ T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加.AS患者CD4~+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现卜IL-17表达相似的特点.AS患者IL-17胞内表达水平与IFN-γ和IL-6无显著相关.结论 AS患者外周血CD4~+ T细胞胞内IL-17和IFN-γ高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程.     

复合纤维素与烟酸肌醇酯降脂作用的比较

目的　观察和比较以燕麦麸、沙棘皮为主要原料的复合纤维素和烟酸肌醇酯对大鼠脂质代谢的影响。方法　SD雌性断乳大鼠经高脂饲料诱导高脂模型后随机分为三组:A复合纤维素,B高脂饲料+1.2%烟酸肌醇酯,C高脂饲料(对照组)。大鼠均单笼饲料,自由进食饮水。结果　与对照组相比,复合纤维素可显著降低高脂大鼠血TC、TG和LDL-c水平(P<0.05),并可显著升高大鼠血HDL-c水平和HDL-c/LDL-c(P<0.05),大鼠的肝TC水平也明显下降(P<0.05)。烟酸肌醇酯也有明显升高大鼠血HDL-c、HDL-c/LDL-c(P<0.05)和降低大鼠肝TC作用(P<0.05)。但对大鼠血TC、TG、LDL-c水平的影响,未出现显著差异(P>0.05)。结论　复合纤维素是较理想的降低人群血脂水平和防治动脉粥样硬化的膳食成分。     

补肾和脉方治疗动脉粥样硬化炎症的效果及机制探讨

目的 研究补肾和脉方（HMF）对载脂蛋白 E 基因敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）的治疗效果及可能机制。方法 将 24 只 ApoE-/-小鼠随机分为高脂组、 HMF 组和阿托伐他汀组, 每组 8 只。高脂组给予高脂饲料（0.25%胆固醇和 15%可可脂） 喂养, HMF 组给予高脂饲料+HMF[1.37 g/(kg·d)]喂养, 阿托伐他汀组给予高脂饲料+阿托伐他汀[5 mg/(kg·d)]喂养。8 周后, 戊巴比妥钠（0.8%, 0.05 mL/10 g）腹腔注射麻醉, 取小鼠胸主动脉切片, 行常规 HE 染色观察胸主动脉斑块大小; 行免疫组化染色检测巨噬细胞 CD68、 肿瘤坏死因子 （TNF） -α、 白细胞介素 （IL） -1β 和 IL-8 的表达水平。并采用日本全自动生化分析仪测量小鼠总胆固醇 （TC） 和总三酰甘油 （TG） 水平。结果 HMF 组胸主动脉斑块大小, 胸主动脉斑块内 CD68、 TNF-α、 IL-1β和 IL-8 的表达水平, TC、 TG 水平均明显低于高脂组, 高于阿托伐他汀组 （均 P＜0.05）。结论 HMF 具有抗动脉硬化作用, 可抑制 AS 进展, 其机制可能与降低血脂, 减轻斑块炎症细胞浸润, 减少炎症因子分泌有关。     

顺铂联合吉西他滨对肺癌PD-1/PD-L1途径的影响

目的 探讨PD-1/PD-L1途径在肺癌中表达情况及顺铂联合吉西他滨的干预效果.方法 将就诊于丽水市中心医院的80例肺癌患者随机分为对照组(A组)、顺铂治疗组(B组)、吉西他滨治疗组(C组)和顺铂联合吉西他滨治疗组(D)组,每组20例,收集各组患者手术切除的肿瘤组织,再以10例良性肺部疾病患者(E组)的手术切除组织作参照,采用Western blot法检测各组组织中PD-1、PD-L1的表达.选择10例同期来医院体检的健康人员(F组)外周血为空白对照,采用流式细胞仪检测B、C、D、F组治疗前后外周血中PD-L1+ CD68+巨噬细胞的表达,ELISA法检测B、C、D、F组治疗前后血清中IL-2、IL-4、IL-10的含量.结果 E组PD-1、PD-L1未见表达,A组PD-1、PD-L1的表达较E组上调(P＜0.01),B、C、D组较A组显著降低(P＜0.05),B、C组比较差异无统计学意义,D组与B、C组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);B、C、D、F组均可检测到PD-L1+ CD68+巨噬细胞的表达,但B、C、D组中PD-L1+ CD68+巨噬细胞的比例显著高于F组(P＜0.01).B组和C组均可降低PD-L1+ CD68+巨噬细胞的比例(P＜0.05),而D组PD-L1+ CD68+巨噬细胞比例显著下调(P＜0.01).B、C、D组治疗前外周血血清中IL-2和IL-4含量较F组低(P＜0.01),IL-10含量较F组高(P＜0.01),治疗后B、C、D组外周血血清中IL-2和IL-4的含量较治疗前均有一定程度的上升(P＜0.05),IL-10含量有一定程度的降低(P＜0.05).结论 顺铂联合吉西他滨可下调肺癌组织中PD-1/PD-L1的阳性表达率及表达量,降低PD-L1+ CD68+巨噬细胞阳性表达,恢复PD-L1对IL-2、IL-4,IL-10所产生的影响,较单独用药效果明显.     

调脂方对血液透析患者脂质代谢紊乱的临床观察

目的:分析调脂方对血液透析患者脂质代谢紊乱的临床疗效,旨在为临床提供指导。方法:抽取来某院治疗的70例血液透析患者(2015年11月~2016年9月)作为本次实验的目标对象,对70例血液透析患者实施随机分组(对照组和治疗组)。对照组35例血液透析患者实施常规维持透析+辛伐他汀治疗,治疗组35例血液透析患者在对照组的基础上加用自拟调脂方治疗,分析比较对照组和治疗组患者CRP、IL-6、TNF-a、TG、TC、HDL-c、LDL-c、BUN、Scr、ALT及AST水平。结果:治疗后,两组患者CRP、IL-6、TNF-a、TG、TC、HDL-c、LDL-c、BUN、Scr、ALT及AST均较治疗前有所改善,但治疗组患者CRP、IL-6、TNF-a、TG、HDL-c、LDL-c、Scr、ALT及AST水平显著低于对照组患者(P0.05),而TC、BUN水平无显著区别(P0.05)。结论:对血液透析患者采取调脂方治疗,能显著改善患者脂质代谢,临床效果显著。     

卡瑞利珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇+顺铂化疗用于局部晚期食管癌术前的效果及对PD-1、PD-L1水平的影响研究

目的 研究卡瑞利珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇+顺铂化疗用于局部晚期食管癌术前的效果以及对外周血T淋巴细胞程序性死亡受体-1(PD-1)、程序性死亡配体1(PD-L1)水平的影响。方法 73例局部晚期食管癌患者,采用电脑系统随机分为对照组(36例)和研究组(37例)。对照组术前采用白蛋白结合型紫杉醇+顺铂化疗治疗,研究组术前在对照组基础上加用卡瑞利珠单抗治疗。比较两组患者PD-1、PD-L1水平,免疫功能指标(CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺),疗效,不良反应发生情况。结果 治疗前,两组患者的PD-1、PD-L1水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的PD-1、PD-L1水平均低于本组治疗前,研究组患者的PD-1(244.47±15.72)ng/L、PD-L1(292.13±21.67)ng/L均低于对照组的(258.89±13.64)、(314.98±22.54)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者CD3⁺、CD4...     

早期肠内营养对创伤大鼠β-EP、TNF-α、IL-10的表达及免疫功能的影响

目的探讨早期肠内营养对创伤大鼠β内啡肽(β-EP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)的表达及免疫功能的影响。方法选择10只SD大鼠为A组(正常对照组),30只SD大鼠构建双侧股骨离断创伤大鼠模型,分为B组(创伤对照组)、C组(早期肠内营养组)、D组(延迟肠内营养组),于肠内营养7 d后,分别测量CD3^+、CD4^+、CD8^+水平及β-EP、TNF-α、IL-10水平。结果 B组术后CD4^+细胞数量与CD4^+/CD8^+比值显著低于A组(P<0.05);C组和D组CD4^+与CD4^+/CD8^+比值相对于A组均有下降(P<0.05),但均高于B组(P<0.05),C组CD4^+与CD4^+/CD8^+比值显著高于D组(P<0.05);与A组比较,B组β-EP、TNF-α、IL-10均显著升高(P<0.05)。与B组比较,C组和D组β-EP、TNF-α水平均显著降低,IL-10显著升高(P<0.05)。与D组比较,C组β-EP、TNF-α水平均显著降低,IL-10显著升高(P<0.05)。结论对大鼠实施早期肠内营养可以调节大鼠促、抗炎细胞因子平衡及改善机体免疫功能。     

雷公藤甲素对类风湿性关节炎患者外周血T细胞的免疫抑制作用

目的:研究雷公藤甲素对类风湿性关节炎(RA)患者外周血T细胞免疫功能的抑制作用。方法:在RA患者外周血T细胞中加入T细胞多克隆刺激剂(0.2μg/ml)以活化淋巴细胞并分泌细胞因子。实验分为空白对照(常规培养液)组、抗人CD3抗体(anti-CD3)刺激(0.2μg/ml)组、雷公藤甲素(anti-CD3 0.2μg/ml+雷公藤甲素1 mmol/ml)组。采用密度梯度离心法分离RA患者的外周血单核细胞(PBMCs),加入雷公藤甲素,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞仪检测分泌IFN-γ、白细胞介素(IL)-2、IL-4与T细胞活化分子CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比。结果:与anti-CD3刺激组比较,雷公藤甲素组PBMCs中IFN-γ含量减少,分泌IFN-γ、IL-2、IL-4的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,分泌CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:雷公藤甲素可能通过抑制T细胞活化和细胞因子分泌来发挥免疫抑制作用,从而发挥对RA的临床治疗作用。     

高胆固醇血症大鼠自由基代谢紊乱及阿托伐他汀的干预作用

目的:研究阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠低密度脂蛋白氧化修饰的干预作用。方法:采用脂肪乳剂灌胃的方法建立高胆固醇血症大鼠模型,30只wistar大鼠随机分为对照组、模型组和阿托伐他汀(ATV)组(5mg/kg.d),每组10只。给药4周后,采用酶法、ELISA等方法测定血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),并计算(TC-HDL-c)/HDL-c和LDL-c/HDL-c。结果:模型组TC、LDL-c、(TC-HDL-c)/HDL-c、LDL-c/HDL-c、ox-LDL、MDA显著高于对照组,HDL-c、SOD显著低于对照组(P<0.01);同模型组比较,阿托伐他汀能够显著降低TC、LDL-c、ox-LDL、MDA,升高HDL-c、SOD(P<0.01)。结论:阿托伐他汀能够降低循环系统氧化低密度脂蛋白水平,具有较好抗脂质过氧化的作用,可能是其抗动脉粥样硬化机制之一。     

基于肺与大肠相表里理论的健脾固肠方对非小细胞肺癌患者肠道菌群及免疫功能的影响

目的探讨基于肺与大肠相表里理论的健脾固肠方对非小细胞肺癌(NSCLC)患者肠道菌群及免疫功能的影响。方法将2019年7月至2021年6月我院呼吸内科收治的64例NSCLC患者随机分为观察组和对照组,各32例。对照组给予标准化疗治疗,观察组在此基础上给予健脾固肠方行肺肠同治,疗程为4周。比较两组患者肠道菌群、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)等T细胞亚群变化,记录两组化疗期间的不良反应。结果治疗后,观察组乳酸菌、双歧杆菌数目均较治疗前明显增加(P<0.05),肠球菌数目明显减少(P<0.05),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组CD3^(+)、CD4^(+)明显升高(P<0.05),CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前差异无统计学意义(P>0.05),且观察组T细胞亚群各指标均明显优于对照组(P<0.05)。化疗期间,观察组恶心呕吐、腹泻的程度低于对照组(P<0.05)。结论基于肺与大肠相表里理论的健脾固肠方治疗NSCLC患者,不仅有助于调节胃肠道菌群平衡,还可改善免疫功能状态,减轻化疗所致毒副反应。     

益气养血汤联合小剂量利妥昔单抗治疗难治性免疫性血小板减少症的效果观察

目的 探讨益气养血汤联合小剂量利妥昔单抗治疗难治性免疫性血小板减少症(rITP)的效果及对免疫功能、血清炎性因子的影响。方法 选取2018年1月—2021年12月我院收治的71例rITP,按照治疗方法不同分为观察组36例和对照组35例。观察组予益气养血汤联合小剂量利妥昔单抗治疗;对照组予小剂量利妥昔单抗治疗。比较2组临床疗效,治疗前后血小板计数、血小板平均体积(MPV)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平变化,以及2组不良反应发生率。结果 观察组治疗总有效率显著高于对照组,复发率显著低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,2组治疗后血小板计数、IL-10、CTLA-4、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平升高,MPV、IL-17、IL-21、CD8+水平降低,且观察组较对照组变化更显著(P<0.05)。与治疗前比较,2组治疗后PT及APTT时间均缩短(...     

慢性丙型肝炎患者免疫细胞PD-L1表达特点及临床意义

目的 观察慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面程序性死亡配体1(PD-L1)的表达水平以及与HCV RNA载量的关系.方法 流式细胞仪检测外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面PD-L1的表达,荧光定量PCR检测HCV RNA载量,基因芯片检测HCV基因型.结果 CHC患者外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面PD-L1的表达水平较健康人明显上调,与HCV RNA和ALT无相关性.结论 PD-L1在CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表面的高表达,抑制免疫细胞清除HCV的能力,导致感染的慢性化.     

重组人IL-21对人外周血淋巴细胞的活化作用

目的 观察重组人白细胞介素21(IL-21)对健康人外周血淋巴细胞的活化作用,检测IL-21对外周血B细胞表面抗原提呈相关分子的表达及对淋巴细胞亚群的影响.方法 重组人IL-21与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养48h,用流式细胞技术检测T、B淋巴细胞表面CD69的表达,并与未加IL-21组进行比较;同时用流式细胞术检测B细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ及Ⅱ类分子(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)、CD80及CD86的表达量.细胞培养96h后检测淋巴细胞亚群的变化.结果 重组人IL-21能显著提高T、B淋巴细胞表面CD69的表达量,与未加IL-21组相比差异有统计学意义(P<0.05),但却不能提高B细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达量.经IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及自然杀伤T细胞(NKT)细胞比例明显增加.结论 重组人IL-21可以活化人的T、B淋巴细胞,同时IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及NKT细胞比例明显增加.     

炎调方通过PD-1/PD-L1通路抑制脓毒症大鼠T淋巴细胞衰竭的实验研究

目的 研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响。方法 SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组。盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各5只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4⁺及CD8⁺表面PD-1、PD-L1表达水平。结果 白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组12 h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组24 h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在12 h降低IL-6的水平(P<0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P<0.01)。模型组CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P<0.01);炎调方组在...