CXCL16/CXCR6与炎症性疾病

多种临床疾病(包括肿瘤的发生)与炎症相关,因而趋化因子及其受体愈来愈受到广泛关注.近年有研究发现:人CXC型趋化因子配体16(CXC chemokine ligand 16,CXCL16)及其受体CXC型趋化因子受体6 (CXC chemokine receptor 6,CXCR6)在肾炎、肺部疾患、动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、类风湿性关节炎等多种炎症性病变组织中表达;并且,在前列腺癌、结肠癌、乳腺癌等炎症相关肿瘤的肿瘤细胞或浸润性淋巴细胞上也有表达.CXCL16通过CXCR6介导免疫细胞向病变组织趋化,影响疾病转归,甚至参与肿瘤细胞增殖或血管生成.对CXCL16/CXCR6的深入研究,将为炎症性疾病的诊断和炎症相关肿瘤的预后提供参考.     

骨髓微环境中CXC趋化因子配体8介导急性髓系白血病发生、发展的调控机制与临床意义

目的：通过检测不同病情阶段急性髓系白血病（AML）患者CXC趋化因子配体8(CXCL8)的水平变化,分析其与AML患者临床病情及预后的关联性,探索骨髓微环境中CXCL8对白血病发生、发展及恶性生物学行为的调控机制,为AML的基础研究和临床诊治提供借鉴与参考。方法：收集不同病情阶段AML患者骨髓标本,采用ELISA检测CXCL8含量;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同AML细胞系中CXCL8特异性受体CXCR1/2表达情况;选取U937细胞为AML疾病模型,给予不同浓度外源性rCXCL8干预U937细胞,观察细胞形态学变化,并利用CCK-8法检测细胞增殖,qRT-PCR检测CXCR1/2表达变化;将初诊AML患者BM-MSC与U937细胞共培养,ELISA检测共培养体系CXCL8变化差异;Annexin V/PI双染流式细胞术分别检测rCXCL8、anti-CXCL8对U937细胞凋亡的影响,Western blot揭示其间伴随的分子机制。结果：初诊及复发AML患者CXCL8水平显著高于健康者（P<0.05）,复发阶段CXCL8水平显著高于其他病情阶段（P<0....     

趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞生物学功能的影响北大核心CSCD

目的:探究趋化因子CXCL12及其配体CXCR4、CXCR7对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养HER2阳性乳腺癌细胞BT474,应用siRNA转染技术单独或联合沉默CXCR4、CXCR7,RT-PCR与Western blot检测转染效率;应用CXCL12刺激上述转染细胞,并将其分为5组,A组:正常培养的BT474细胞;B组:CXCL12处理的BT474细胞;C组:CXCL12处理的转染si-CXCR4细胞;D组:CXCL12处理的转染si-CXCR7细胞;E组:CXCL12处理的联合转染si-CXCR4与si-CXCR7细胞;应用CCK-8、流式细胞术、划痕实验、侵袭实验及Western blot分别检测沉默CXCR4和(或)CXCR7对CXCL12诱导的乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭和EMT行为的影响。结果:转染siRNA能显著降低BT474细胞中CXCR4和(或)CXCR7的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);单独或联合沉默CXCR4与CXCR7均能明显抑制CXCL12对乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭行为的促进作用(P<0.05或P<0.01),并以联合沉默CXCR4与CXCR7时效果最为显著(P<0.01),与单独沉默CXCR7相比,沉默CXCR4更能抑制CXCL12对乳腺癌EMT的促进(P<0.05)。结论:沉默CXCR4或CXCR7表达均能抑制CXCL12对HER2阳性乳腺癌细胞增殖、细胞周期进展、迁移、侵袭的促进功能,但CXCL12主要通过与CXCR4相互作用来促进乳腺癌的EMT行为,而同时抑制CXCR4或CXCR7能更有效地抑制CXCL12的上述功能。     

普鲁卡因调控CXCR7并影响AKT和STAT3信号通路从而抑制膀胱癌细胞活力、迁移和侵袭

目的:探讨普鲁卡因(PCA)及CXC趋化因子受体7(CXCR7)对膀胱癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法:用不同浓度PCA处理人膀胱癌RT4细胞,并将细胞分为PBS组(无PCA处理)、PCA组(4 mmol/L PCA处理)、siRNA阴性对照(si-Con)组(转染si-Con)、CXCR7 siRNA(si-CXCR7)组(转染si-CXCR7)、PCA+pcDNA组(4 mmol/L PCA处理并转染pcDNA)和PCA+pcDNA-CXCR7组(4 mmol/L PCA处理并转染pcDNACXCR7),siRNA和pcDNA均用脂质体法转染至RT4细胞。运用RT-qPCR检测RT4细胞中CXCR7的mRNA表达水平;采用CCK-8法检测各组细胞的活力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力;Western blot检测各组细胞中CXCR7、AKT、STAT3、p-AKT和p-STAT3的蛋白水平。结果:相较于PBS组,不同浓度PCA处理后RT4细胞的活力、迁移能力和侵袭能力显著降低(P<0.05),PCA组RT4细胞中CXCR7的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。相较于si-Con组,si-CXCR7组RT4细胞中CXCR7的mRNA和蛋白表达水平显著降低,且细胞的活力、迁移能力和侵袭能力显著降低(P<0.05);相较于PCA+pcDNA组,PCA+pcDNA-CXCR7组RT4细胞中CXCR7的mRNA和蛋白表达水平显著升高,且细胞的活力、迁移能力和侵袭能力显著提高(P<0.05)。相较于PBS组,PCA组的p-AKT和p-STAT3蛋白水平显著降低;相较于PCA+pcDNA组,PCA+pcDNA-CXCR7组的p-AKT和p-STAT3蛋白水平显著升高(P<0.05)。AKT和STAT3的蛋白水平在各组之间的差异无统计学显著性。结论:PCA可能通过抑制CXCR7的表达抑制膀胱癌细胞的活力、迁移和侵袭。过表达CXCR7可逆转PCA的作用,其机制可能与AKT/STAT3信号通路有关。     

CD47对卵巢癌细胞释放趋化因子的作用

该文旨在探索敲低整合素相关蛋白CD47对卵巢癌细胞生物学行为和功能的作用。在卵巢癌细胞转染靶向CD47的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)后,采用Western blotting、 qRT-PCR、流式细胞术验证敲低效率;采用CCK-8、划痕实验、 Transwell观察细胞增殖、迁移和侵袭情况;采用qRT-PCR检测细胞中CD47、IL-6、 C-X-C基序趋化因子配体1(C-X-C motif chemokine ligand 1,CXCL1)、CXCL8、 C-C基序趋化因子配体20(C-C motif chemokine ligand 20,CCL20)mRNA表达;采用ELISA检测细胞上清IL-6和CXCL8的释放;采用Transwell观察敲低CD47后卵巢癌细胞对巨噬细胞迁移的影响。结果发现敲低CD47分子对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭无明显作用;而敲低CD47可降低卵巢癌细胞趋化因子CXCL1、 CXCL3、 CXCL8、 CCL20和IL-6的表达,且明显地降低巨噬细胞的迁移能力。该研究表明卵巢癌细胞中CD47分子能够通过调节自身...     

CXCL1促进乳腺癌细胞增殖和迁移及其作用机制的研究

目的体外研究CXCL1对乳腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法选取人乳腺癌细胞进行分组处理:空白对照组、CXCL1组、anti-CXCR2中和抗体组,用CCK8、克隆形成实验、流式凋亡、细胞划痕及Transwell迁移实验分别对各组细胞增殖活性、凋亡率、迁移侵袭能力进行检测,并用ELISA法对各组细胞内MMP-9蛋白、磷酸化AKT及活化NF-κB水平进行检测。结果 CCK8与克隆形成实验结果显示,与空白对照组相比CXCL1处理组细胞增殖活性提高,细胞克隆形成率增加(P0.05),与空白对照组相比anti-CXCR2处理组细胞增殖活性降低,细胞克隆形成率降低(P0.05);流式凋亡检测结果显示,与空白对照组相比CXCL1处理组细胞凋亡率降低(P0.05),与空白对照组相比anti-CXCR2处理组细胞凋亡率增高(P0.05);细胞划痕、Transwell迁移实验及细胞内MMP-9蛋白表达水平表明,与空白对照组相比CXCL1处理组细胞迁移侵袭能力增强(P0.05),与空白对照组相比anti-CXCR2处理组细胞迁移侵袭能力减弱(P0.05);细胞内p AKT/NF-κB蛋白检测表明,与空白对照组相比CXCL1处理组细胞内AKT磷酸化水平及NF-κB活化水平升高(P0.05),与空白对照组相比anti-CXCR2处理组细胞内AKT磷酸化水平及NF-κB活化水平降低(P0.05)。结论 CXCL1通过与CXCR2结合促进乳腺癌细胞增殖和迁移侵袭,其机制可能是激活了AKT/NF-κB信号转导通路。     

沉默CXCL12抑制ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7泡沫化和凋亡

目的探讨CXC趋化因子配体12(CXCL12)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7泡沫化和凋亡的作用及其机制。方法用60 mg/L的ox-LDL诱导RAW264.7泡沫化,记为ox-LDL组,不添加ox-LDL的作为对照(NC)组;将si-con和si-CXCL12转染至RAW264.7细胞中再用60 mg/L的ox-LDL处理,分别记为ox-LDL+si-con组、ox-LDL+si-CXCL12组。油红O染色法检测细胞泡沫化; Western blot检测ABCA-1、SRB-1、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、CXCL12、p38MAPK和p-p38MAPK蛋白表达;流式细胞计量术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测CXCL12 mRNA表达。结果 ox-LDL处理的RAW264.7细胞体积增大,形状变为圆形,胞质中可明显见到大量红色脂滴;ABCA-1和SRB-1表达水平显著升高(P0.05),cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达水平显著升高(P0.05),细胞凋亡率显著升高(P0.05),CXCL12表达水平显著升高(P0.05),p-p38MAPK表达水平显著升高(P0.05)。沉默CXCL12,大部分细胞内未见红染脂滴,仅少数细胞内有部分脂滴,ABCA-1和SRB-1表达水平显著降低(P0.05),cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率显著降低(P0.05),p-p38MAPK表达水平显著降低(P0.05)。结论沉默CXCL12抑制ox-LDL诱导巨噬细胞RAW264.7泡沫化和细胞凋亡,其可能与p38MAPK信号通路有关。     

IL-8/CXCR1/2轴与膀胱癌关系的研究进展

白细胞介素8(IL-8)是一种具有趋化作用的小分子分泌型炎症性细胞因子,属于CXC趋化因子家族的成员,又名CXC趋化因子8(CXCL8).近年研究发现体内多种细胞如单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、角质形成细胞、肿瘤细胞等都具有分泌IL-8的能力.IL-8与其相应受体CXCRl/2结合后,除了对中性粒细胞有趋化和诱导其脱颗粒作用外,还可以通过促进血管形成、影响肿瘤细胞增殖、存活及运动,在肿瘤的发生、发展和转移中发挥重要作用.本文主要综述了IL-8及其受体与膀胱癌生物学行为的关系.     

CXCR4 siRNA通过抑制STAT3信号通路抑制肺癌细胞活力

目的:初步探索CXC趋化因子受体4(CXCR4)与人肺癌NCI-H292细胞活力和凋亡的关系及其作用机制。方法:采用RNA干扰技术沉默肺癌细胞中CXCR4基因的表达,将CXCR4小干扰RNA(siRNA-CXCR4)转染至NCI-H292细胞中,分为空白对照组(未转染的细胞)、阴性对照组(转染无关序列RNA)和siRNA-CXCR4组(转染siRNA-CXCR4),使用信号转导子及转录激活子3(STAT3)抑制剂NSC 74859作用于已转染肺癌细胞48 h,观察细胞的活力、凋亡及磷酸化STAT3(p-STAT3)水平的变化,用CCK-8实验检测干扰CXCR4基因表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,采用Western blot检测CXCR4、STAT3、p-STAT3、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cleaved caspase-3和多聚ADP-核糖聚合酶1(PARP-1)的蛋白水平。结果:Western blot检测结果显示siRNACXCR4组细胞中CXCR4蛋白的表达量显著低于对照组(P0.05)。干扰CXCR4表达显著抑制细胞的活力(P0.05),促进其凋亡(P0.05),显著增加cleaved caspase-3和PARP1的蛋白水平。siRNA-CXCR4组细胞中STAT3、p-STAT3和cyclin D1的蛋白水平显著降低(P0.05);加入STAT3抑制剂后细胞中p-STAT3蛋白水平和细胞活力显著低于siRNA-CXCR4组(P0.05),凋亡率显著增加(P0.05)。结论:CXCR4通过调控STAT3信号通路介导下游靶基因的表达,参与肺癌细胞的生长、凋亡。这一结果为肺癌的治疗提供了新的治疗靶点。     

慢性乙肝患者CXC趋化因子IP-10的表达

趋化因子（chemokine）是反映炎症活动的指标，CXC趋化因子7干扰素诱生蛋白10（interferon γ-inducible protein10，IP-10）与其受体CXCR3相互作用，对表达该受体的NK细胞、单核，巨噬细胞等的活化、增殖，在机体抗感染、抑病毒过程中起重要作用。为了解IP-10在慢性乙肝致病过程中的作用，本文选择45例慢性乙肝患者动态检测IP-10水平，现将结果报道如下。     

IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡能力的影响北大核心CSCD

目的:探究过表达IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡的影响与机制。方法:免疫组织化学染色(IHC)检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织CXCR4与其配体CXCL12表达,并分析其相关性;Western blot检测CXCR4在人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中的表达;采用慢病毒稳转技术在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中过表达IL-24,免疫荧光显微镜、RT-PCR和ELISA检测感染效率;将细胞分为5组:LV-IL-24组(感染过表达IL-24慢病毒)、LV-NC组(感染阴性对照慢病毒)、AMD3100组(采用CXCR4/CXCL12轴阻滞剂AMD3100进行培养)、LV-IL-24+AMD3100组(采用AMD3100进行培养的感染过表达IL-24慢病毒的细胞)、阴性对照组(正常培养的MDAMB-231细胞);Transwell、划痕实验和Annexin V-FITC细胞凋亡实验检测上述各组细胞侵袭、迁移及凋亡;Western blot检测各组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平及凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达。结果:CXCR4与CXCL12在乳腺癌组织中的表达均显著高于正常乳腺组织,且二者表达呈正相关;与MCF-10A细胞相比,CXCR4在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453及MDA-MB-231中表达明显增加(P<0.05),以MDA-MB-231最为显著(P<0.01)。转染过表达IL-24的慢病毒后,MDA-MB-231细胞IL-24 mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05);与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.05),而凋亡率明显提高(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),而凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达明显增加(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中过表达IL-24可抑制CXCR4表达,通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路降低肿瘤细胞侵袭、迁移能力,促进其凋亡,联合使用CXCR4/CXCL12阻滞剂AMD3100可显著提高IL-24的上述抑癌效应。     

P130CAS对食管癌细胞ECA109中Angiopoietin-2表达及其生物学行为的影响

目的探讨抑制P130CAS(P130 Crk-associated substrate)基因对食管癌细胞ECA109中Angiopoietin-2表达和生物学行为的影响。方法构建P130CAS基因siRNA慢病毒载体,感染ECA109细胞,荧光显微镜观察感染效率,应用RT-PCR和Western blot法检测其干扰效率。应用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验、Western blot法检测抑制P130CAS基因表达对ECA109细胞增殖、迁移、侵袭能力和对Angiopoietin-2蛋白表达的影响。结果成功构建PLVT716 siRNA慢病毒载体,ECA109细胞P130CAS mRNA和蛋白表达明显下调(P0.05),并建立稳定细胞株;抑制P130CAS基因表达导致ECA109细胞增殖、迁移和侵袭能力显著减弱(P0.05),同时Angiopoietin-2表达明显下调(P0.05)。结论抑制P130CAS基因表达可抑制食管癌ECA109细胞的增殖、迁移和侵袭,同时可下调Angiopoietin-2表达。     

情志刺激加速小鼠动脉硬化进展与SDF-1/CXCR4失衡的相关性研究

目的:通过观察情志刺激对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠血浆、血小板、主动脉、海马及骨髓组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)和CXC趋化因子受体4(CXCR4)表达的影响,揭示情志刺激加重动脉粥样硬化斑块易损性的可能机制.方法:30只8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为正常对照组、高脂组和情志刺激模型组,每组...     

CXCR7在动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠的表达及阿托伐他汀的干预作用

 目的: 研究CXC趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)在动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠中的表达并探究阿托伐他汀的干预作用。方法: 8周龄ApoE^-/-雄性小鼠,随机分为正常对照组、高脂组与高脂+阿托伐他汀组,实验干预12周建立动脉粥样硬化模型;油红O及HE染色观察动脉粥样硬化病变,Western blot及免疫组化法检测动脉CXCR7的表达,Western blot检测动脉eNOS和Akt的表达。结果: (1)动脉油红O及HE染色示高脂组可见有明显粥样核心及纤维帽的显著斑块,高脂+阿托伐他汀组也可见斑块,但斑块负荷较模型组减轻,正常对照组未见明显斑块形成;(2)免疫组化示高脂组动脉细胞着色浅,CXCR7表达量少,高脂+阿托伐他汀组与高脂组比较,细胞着色增加,CXCR7表达量增加,正常对照组颗粒呈深棕黄色,示CXCR7大量表达;(3)Western blot结果示高脂组CXCR7、eNOS和Akt的表达较正常对照组降低,给予阿托伐他汀干预后CXCR7、eNOS和Akt的表达较高脂组增加,较正常对照组相比CXCR7、eNOS和Akt的表达下降,但磷酸化eNOS的水平未见差异。结论: 高脂血症可损伤血管内皮,促进动脉粥样硬化的发展,下调动脉CXCR7、eNOS和Akt的表达;阿托伐他汀可改善动脉粥样硬化,缓解ApoE^-/-小鼠动脉CXCR7、eNOS和Akt蛋白表达的下调。     

ELR+ CXC趋化因子诱导NETs生成的作用机制

目的探讨ELR~+ CXC趋化因子诱导中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)生成的作用及机制。方法分离人外周血中性粒细胞,通过荧光染色和总MPO定量检测比较ELR~+ CXC趋化因子、ELR-CXC趋化因子和非趋化性细胞因子对NETs的诱导作用。以CXCL8为代表性ELR~+ CXC趋化因子,检测其诱导NETs的时效、量效关系,明确参与NETs生成的酶类成分,胞膜受体以及胞内信号分子机制。检测CXCL8对中性粒细胞ROS的上调效应及其在介导NETs生成中的作用。结果仅有ELR~+ CXC趋化因子可刺激NETs释放(P0.05或0.01)。其代表性因子CXCL8诱导NETs具有时间和剂量依赖性。抑制MPO、NE和PAD4活化,或者抑制CXCR1受体内化以及胞内ERK和p38的磷酸化,均可显著下调CXCL8诱导的NETs生成(P0.01)。CXCL8还通过上调NOX2并增加胞内ROS水平介导NETs生成。结论 ELR~+ CXC趋化因子可诱导NETs生成,该作用与其结合CXCR1,激活ERK和p38,诱导NOX2活化和上调ROS生成有关。     

CXCL13在恶性肿瘤中的研究进展

趋化因子是一类由其受体介导的细胞因子, 除了具有趋化炎症细胞定向迁移的作用外, 还与细胞归巢、迁移、血管生成及增殖活性的调节相关。CXCL13(C-X-C motif Chemokine Ligand13)是趋化因子CXC家族中的一员, 在多种恶性肿瘤中存在异常表达的情况, 如乳腺癌、肺癌、结直肠癌等, 且与肿瘤的增殖、侵袭、转移及治疗等方面存在着密切的联系。这提示CXCL13可能有助于恶性肿瘤的诊断及预后的评估, 为恶性肿瘤的治疗提供新的思路。文章对CXCL13在恶性肿瘤中的新进展进行综述。     

紫檀芪对人结直肠癌细胞生物行为的影响及作用机制研究北大核心CSCD

目的:探讨紫檀芪对人结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其对LncRNA ELFN1-AS1/miR-1205的调控作用。方法:体外培养结直肠癌细胞Caco-2,加入不同剂量的紫檀芪处理细胞,将正常培养的Caco-2细胞作为对照组;si-NC、si-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞(si-NC组、si-ELFN1-AS1组),pcDNA、pcDNA-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞后加入含有紫檀芪的培养基处理细胞(紫檀芪+pcDNA组、紫檀芪+pcDNA-ELFN1-AS1组);qRT-PCR检测ELFN1-AS1、miR1205的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验与Transwell小室分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测ELFN1-AS1与miR-1205的靶向关系。结果:与对照组相比,紫檀芪不同剂量组ELFN1-AS1的表达水平均降低(P<0.05),miR-1205表达水平均升高(P<0.05),并可抑制细胞活性、克隆形成、迁移及侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05);与si-NC组相比,si-ELFN1-AS1组miR-1205表达水平升高(P<0.05),可抑制细胞活性、克隆形成、迁移及侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05);ELFN1-AS1可靶向调控miR-1205;ELFN1-AS1过表达可明显逆转紫檀芪对结直肠癌细胞生物学行为的调控作用。结论:紫檀芪可通过调控ELFN1-AS1/miR-1205从而降低结直肠癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力,并可促进细胞凋亡。     

趋化因子受体CXCR3与其配体在小鼠暴发性肝炎发病中免疫学机制研究

目的 探讨趋化因子受体CXCR3与其配体(CXCL9/Mig,CXCL10/IP-10)在小鼠暴发性肝炎淋巴细胞迁移和急性肝衰竭中的作用.方法 6～8周龄雌性BALB/cJ小鼠腹腔注射100 PFU 3型鼠肝炎病毒(MHV-3),采用流式细胞术检测感染MHV-3后的BALB/cJ小鼠肝脏、脾脏和外周血T细胞和NK细胞的比例、数量以及其表面趋化因子受体CXCR3的表达频率.实时定量PCR技术检测感染MHV-3后的BALB/cJ小鼠肝内趋化因子CXCL9和CXCL10 mRNA的表达水平.Transwell细胞迁移试验评估病毒感染的肝细胞及CXCL10对脾脏淋巴细胞的趋化作用.结果 BALB/cJ小鼠感染MHV-3后,肝脏T细胞和NK细胞的数量及CXCR3的表达频率均显著增加,然而在脾脏和外周血均显著减少.实时定量PCR检测证实,感染MHV-3 48 h后,肝内趋化因子CXCL9和CXCL10 mRNA的表达比感染前分别上升了15.6和98.8倍.体外Transwell试验表明,病毒感染的肝细胞及重组CXCL10/IP-10蛋白对脾脏T细胞和NK细胞具有明显的趋化作用,并且这种趋化作用能被抗-CXCL10抗体显著阻断.结论 趋化因子受体CXCR3与其配体(CXCL9和CXCL10),尤其是CXCL10的相互作用在小鼠暴发性肝炎肝内淋巴细胞的募集及随后的坏死性炎症和急性肝衰竭中可能发挥着重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of the chemokine receptor CXCR3 and its ligands in the migration of lymphocytes and acute hepatic failure. Methods BALB/cJ mice (6-8 weeks, female) were intraperitoneally injected with 100 PFU mouse hepatitis virus-3(MHV-3). The proportions and numbers of T cells and NK cells in liver, spleen, and blood as well as the expression of CXCR3 in T cells, and NK cells post MHV-3 infection was analyzed by flow cytometry. The hepatic mRNA level of the CXCR3-associated chemokines(CXCL9 and CXCL10) was detected by real-time PCR. A transwell migration assay was used to assess the chemotactic effect of MHV-3-infected hepatocytes and CXCL10 on the splenic lymphocytes. Results Following MHV-3 infection, the number of hepatic NK cells and T cells and the frequencies of hepatic NK cells and T cells expressing CXCR3 increased markedly; however, in the spleen and peripheral blood, they both decreased significantly. Moreover, the hepatic mRNAs levels of CXCL9 and CXCL10 were significantly elevated post infection. The transwell migration assay demonstrated that MHV-3-infected hepatocytes have the capacity to attract and recruit the splenic NK cells and T cells, and CXCL10 plays a key role in lymphocyte mobilization from the spleen. Conclusion Interactions between CXCR3 and its ligands (CXCL9 and CXCL10),especially CXCL10 may play a key role in the recruitment of intrahepatic lymphocytes and subsequent necroinflammation and acute hepatic failure in MHV-3 infection.     

趋化因子CXCL1及受体CXCR2在骨癌痛小鼠背根神经节中的表达变化

目的:观察骨癌痛小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中趋化因子CXCL1和受体CXCR2的表达变化。方法:单侧股骨内注射前列腺癌细胞RM-1诱导小鼠产生骨癌,用行为学检测小鼠抬爪次数和缩爪时间自发痛情况,用实时定量PCR和免疫荧光染色技术观察小鼠DRG中CXCL1和CXCR2的表达变化和细胞定位。结果:骨癌组小鼠的抬爪次数和缩爪时间,从术后10 d开始均较对照组明显上升(P0.05),并持续到21 d以上。骨癌组小鼠同侧L3-5 DRG中CXCL1和CXCR2 mRNA在手术后7 d时表达较正常小鼠明显增加(P0.05),并能持续到21 d以上。CXCL1和CXCR2表达于DRG神经元内,骨癌组同侧L3-4 DRG中CXCL1和CXCR2阳性神经元在手术后7,14 d和21 d时较正常组明显增多(P0.05)。结论:骨癌小鼠DRG中CXCL1和CXCR2表达增加,DRG中的CXCL1及其受体CXCR2可能参与骨癌痛的调节。     

移植物抗宿主病小鼠肝脏及异体CD8~+T细胞趋化因子和趋化因子受体表达分析

为探讨趋化因子及其受体介导的效应性细胞迁移在移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生发展中的重要作用,采用次要组织相容性抗原异配的GVHD小鼠模型,应用流式细胞分选术(FACS)、实时荧光定量聚合酶链反应等方法,分析GVHD靶器官和异体CD8+T细胞趋化因子及受体的表达。肝脏高表达干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、干扰素诱导的T细胞趋化因子(ITAC)、γ干扰素诱生单核因子(MIG)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α/β等趋化因子。异体CD8+T细胞上则高表达CXC趋化因子受体(CXCR)3和CC趋化因子受体(CCR)5。随着肝脏趋化因子的表达增加,异体CD8+T细胞迁移浸润的数量也增高。因而趋化因子及异体CD8+T细胞上趋化因子受体的特异对应关系,促使大量异体CD8+T细胞迁移浸润并造成肝脏损伤。