结合网络药理学从JAK2/STAT3信号通路探讨麻杏甘石汤抗流感病毒的效应机制

目的结合网络药理学探索JAK2/STAT3信号通路在A型流感病毒感染所致肺组织损伤中的影响,并探讨麻杏甘石汤对该通路的干预作用。方法通过网络药理学方法筛选麻杏甘石汤作用于流感病毒的潜在靶点所富集的信号通路;以BLAB/c小鼠为研究对象,用A型流感病毒进行滴鼻感染,设置正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组和麻杏甘石汤组,给予相应药物3、7 d后,处理动物。常规法检测小鼠体质量并计算肺指数,观察肺组织病理变化,RT-PCR法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β、IL-4 mRNA表达水平,Western blot法或ELISA法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β和IL-4的蛋白的表达水平;利用AutoDock Vina软件对STAT3与靶点化合物进行分子对接。结果麻杏甘石汤主要活性成分与流感病毒有110个交集靶点,富集于170条信号通路;麻杏甘石汤治疗组小鼠体质量增加,肺组织病理损伤减轻,肺指数下调,肺组织中JAK2、STAT3、IL-1βmRNA和蛋白的表达水平下调,IL-4 mRNA和蛋白的表达水平上调;STAT3与麻杏甘石汤中活性化合物甘草查尔酮A有较好的结合活性。结论麻杏甘石汤能有效地减轻肺部病理变化、调节免疫平衡,其可能的作用机制是通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活而缓解A型流感病毒感染所致的肺损伤。     

芍药苷通过JAK2/STAT3信号通路抑制高糖诱导的RAW264.7巨噬细胞激活

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)抑制高糖(high glucose,HG)诱导的RAW264.7巨噬细胞激活是否通过JAK2/STAT3信号通路。方法体外HG激活巨噬细胞RAW264.7, PF及JAK2/STAT3干扰RNA(siRNA)进行干预,分别检测巨噬细胞的增殖、趋化、炎症因子表达分泌、JAK2和STAT3蛋白表达及其磷酸化水平。结果在HG刺激下,巨噬细胞趋化功能增强,诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及单核细胞趋化因子1(MCP-1)的mRNA表达,以及细胞培养基中TNF-α、IL-1β、MCP-1分泌水平均增加(P<0.05,P<0.01),JAK2、STAT3蛋白磷酸化表达明显增加(P<0.05)。JAK2/STAT3基因沉默可抑制HG刺激下iNOS和炎症因子(TNF-α、IL-1β、MCP-1)mRNA水平和细胞培养液中炎症因子的分泌,抑制JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。PF能明显下调HG诱导的巨噬细胞趋化迁徙、炎症因子表达分泌及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论 HG可通过诱导JAK2/STAT3信号通路刺激巨噬细胞激活,PF抑制巨噬细胞激活的机制主要与抑制JAK2/STAT3信号通路相关。     

丹皮酚对小鼠酒精性脂肪肝中Adip/CaMKKβ/AMPK通路的影响

目的研究Adip/CaMKKβ/AMPK通路是否参与丹皮酚(paeonol,Pae)治疗小鼠酒精性脂肪肝的过程。方法在小鼠酒精性脂肪肝模型的基础上给予丹皮酚治疗后,通过ELISA法检测小鼠血清中各炎症因子和TG、TC,同时用ELISA法检测小鼠血清中Adip和ACC表达水平,用qPCR法及Westren blot法检测小鼠肝组织Adip、CaMKKβ、AMPKα和SREBP1c核酸和蛋白水平。 结果 Adip表达水平在各处理组无显著变化;酒精诱导增加炎症因子和TG、TC表达,降低了CaMKKβ和AMPKα在核酸和蛋白磷酸化水平上的表达,水飞蓟宾与丹皮酚降低了炎症因子和TG、TC表达,提高了CaMKKβ和AMPKα在核酸和蛋白磷酸化水平上的表达;酒精诱导增加了SREBP1c在核酸和蛋白水平上的表达,水飞蓟宾与丹皮酚降低了SREBP1c的表达。 结论 从Adip/CaMKKβ/AMPK信号传导的变化验证了丹皮酚可通过此信号转导来减轻酒精性脂肪肝的脂肪变性损伤和炎症水平。     

利奈唑胺在重症患者中药动学研究进展

目的 探讨不同提取工艺大黄外用对肺炎支原体（MP）感染小鼠JAK2/STAT3信号通路的影响，探究其改善小鼠肺部炎症的效应靶点。方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、生粉组、醇提组，每组10只。除正常组小鼠外，其余3组采用滴鼻法进行MP感染。造模后，将各组对应药物贴于小鼠背俞穴区30分钟/天，连续敷药7天。给药后第7天取材，光镜下观察小鼠肺组织、皮肤病理切片，计算肺组织病理评分、肺指数，采用ELISA法检测血清及肺组织中IL-6含量，运用Western Blot法及qPCR法检测STAT3、JAK2蛋白、mRNA的表达。结果 MP感染后肺泡间隔增厚，细支气管壁增厚，炎性细胞浸润，小鼠肺指数、肺组织炎症病理评分、血清及肺组织中IL-6含量、肺组织中STAT3和JAK2的蛋白表达及mRNA含量均升高（P＜0.05）。治疗后小鼠肺指数、肺组织炎症病理评分、血清及肺组织中IL-6含量均降低（P＜0.05），且醇提组作用效果较生粉组明显，但血清中含量差异不显著（P＞0.05）。与模型组比较，醇提组、生粉组STAT3、JAK2蛋白及mRNA含量下降（P＜0.05）。结论 大黄醇提物外用可有效改善MP感染小鼠肺部炎症，下调IL-6、JAK2及STAT3的表达，为其治疗肺炎支原体肺炎（MPP）提供了新的实验依据。     

JAK2/STAT3信号通路在人参皂苷Re预处理预防异丙肾上腺素致急性心肌缺血损伤中的作用

目的观察人参皂苷Re预处理对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌JAK2/STAT3通路的影响。方法应用异丙肾上腺素建立SD大鼠急性心肌缺血模型,将75只大鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、葛根素对照组(PUE)、Re高剂量组(Re-H,20 mg·kg^-1)、Re低剂量组(Re-L,10 mg·kg^-1)。Moor激光血流成像系统观测各组大鼠心脏表面血流值;ELISA法测定各组大鼠心肌中CK、LDH、SOD、MDA、GSH的含量;免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白表达;Western blot方法检测各组大鼠心肌JAK、p-JAK、STAT3、p-STAT3蛋白的表达变化。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏表面平均血流量明显下降,心肌CK、LDH、MDA含量升高,GSH、SOD含量下降,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),JAK2/STAT3通路蛋白的表达有所增加;与模型组比较,Re-H组心肌表面平均血流有明显提升(P<0.05);CK、LDH、MDA含量降低,GSH-Px含量升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.05),JAK2/STAT3通路蛋白的表达明显增强(P<0.05)。结论人参皂苷Re预处理对急性心肌缺血大鼠心肌有较好的保护作用,该作用可能与JAK2/STAT3通路的激活有关。     

和厚朴酚对咪喹莫特诱导小鼠银屑病的干预作用

目的探索和厚朴酚达到血药稳态浓度后,对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型的干预作用及其机制。方法将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、地塞米松阳性组、脂质体溶剂对照组及和厚朴酚高、中、低剂量组。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(PASI)评分观察疾病进展,HE染色观察皮肤细胞形态学改变,测量皮肤厚度,免疫组织化学法半定量分析IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α的表达。结果模型组小鼠皮肤肥厚,长出鳞屑,表皮出现棘层增生变厚,真皮层出现炎症性浸润和微脓肿,IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α均比正常组表达增加。与模型组相比,和厚朴酚能减轻表皮厚度,减少炎症性浸润和微脓肿,降低IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α的表达,并且有剂量依赖性。结论和厚朴酚能通过抑制IL-17/IL-23炎症轴,改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损变化。     

JAK2/STAT3信号通路在胃癌发病机制中的作用及AG490干预研究

目的以重组人白介素-2(IL-2)作用于胃癌细胞系AGS,观察其对胃癌细胞生长增殖的影响;利用蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)特异性抑制剂AG490阻断JAK2/STAT3(信号传导子与激活子3)的异常激活,研究JAK2/STAT3信号传导通路在胃癌发病中的作用。方法以重组人IL-2干预、四唑鎓盐(XTT)法检测胃癌细胞系AGS增殖活性;以特异性抑制剂AG490抑制JAK通路,XTT法检测细胞增殖活性,并检测干预前后JAK蛋白、STAT3蛋白、p-STAT3蛋白表达水平。结果重组人IL-2可呈浓度依赖性抑制AGS细胞增殖,JAK特异性抑制剂AG490可呈浓度依赖性抑制AGS细胞增殖,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),AG490可显著抑制JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结论 JAK2-STAT3信号传导通路可能参与了早期胃癌的生物学行为。     

益肾排毒丸调节AMPK/ACC信号通路对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的：探究益肾排毒丸（YSPDW）对db/db小鼠肝损伤的保护作用及其对脂代谢通路的影响机制。方法：C57BL/6小鼠作为空白对照组、8周龄的db/db小鼠分为非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）模型组、益肾排毒丸治疗组和二甲双胍阳性对照组。给药8周后检测小鼠肝脏系数、随机血糖、肝功能（丙氨转氨酶ALT、谷草转氨酶AST）、血脂（总胆固醇TC、三酰甘油TG、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇LDL-C）、肝脏脂质（TC、TG）、肝脏抗氧化因子（谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽GSH、超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA、过氧化氢酶CAT）、肝脏炎性因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1）等指标的变化。HE和PAS染色评估小鼠肝脏形态变化、脂肪变性和糖原沉积。Western blot检测脂代谢AMPK/ACC信号通路相关蛋白表达。结果：与模型组相比,益肾排毒丸给药组和二甲双胍组小鼠随机血糖和肝脏系数显著降低。生化指标检测结果显示益肾排毒丸可显著降低NAFLD模型小鼠血清AST、ALT、TC、TG水平和肝组织TC、TG、MDA水平,升高HDL-C含量,发挥肝保护作用;ELISA结果表明益肾排毒丸能明显升高NAFLD小鼠肝组织GSH-Px、GSH和SOD活性,显著降低肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1的水平,表明益肾排毒丸可增加机体抗氧化能力,抑制炎症因子释放。HE和PAS结果显示益肾排毒丸可明显减轻肝组织脂肪变性和炎症细胞浸润,改善肝细胞的结构和形态完整。Western blot结果表明,益肾排毒丸能激活AMPK/ACC信号通路,显著增加模型小鼠肝脏p-AMPK和p-ACC蛋白表达。结论：益肾排毒丸可能通过促进AMPK/ACC信号通路来改善肝脏氧化应激、炎性反应,减少脂质合成,从而改善NAFLD的肝损伤。     

丹皮酚对急性哮喘模型小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响

目的观察丹皮酚对急性哮喘小鼠模型气道炎症以及对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达的影响。方法 BALB/c小鼠48只随机分成正常对照组、哮喘模型组、丹皮酚组、布地奈德组,每组12只。卵蛋白致敏,气道激发,丹皮酚组给予丹皮酚100 mg/kg灌胃,1次/d,末次激发24 h后,检测各组小鼠气道反应性。HE染色观察气道炎症变化;采用ELISA观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,real-time PCR观察TSLP的表达,Western-blot观察TSLP蛋白表达。结果哮喘组小鼠气道炎症和气道高反应性明显加重,丹皮酚能够显著抑制慢性哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,哮喘BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE含量显著降低。丹皮酚治疗后哮喘小鼠肺组织高表达的TSLP的mRNA和蛋白水平显著降低。结论丹皮酚能够抑制哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,其机制可能通过抑制TSLP的的表达而实现。     

白术内酯Ⅰ调控Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3通路对分泌性中耳炎大鼠听功能及炎症反应的影响

目的 探究白术内酯Ⅰ调控Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对分泌性中耳炎(SOM)大鼠听功能及炎症反应的影响。方法 用卵清蛋白和氢氧化铝致敏构建SOM模型大鼠,并随机分为模型组、联合组和低、高剂量实验组,每组12只;另选12只正常SD大鼠做对照组。低、高剂量实验组分别灌胃给予120和240 mg·kg^-1白术内酯Ⅰ,联合组灌胃给予240 mg·kg^-1白术内酯Ⅰ+21 mg·kg^-1 RO8191;对照组和模型组均灌胃给予等量0.9%NaCl。5组大鼠每天给药1次,连续给药14 d。用听觉脑干诱发电位(ABR)仪检测大鼠听功能(ABR反应阈值),用蛋白质印迹法检测大鼠中耳黏膜组织JAK2/STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果 低、高剂量实验组和联合组、模型组、对照组的ABR反应阈值分别为(47.26±5.91)、(26.89±3.75)、(63.37±9.87)、(68.71±10.32)和(24.62±3.53)dB SPL,p-JAK2/JAK2分别为0.48±0.09、0.1...     

IL-21／STAT3通路在溃疡性结肠炎小鼠发病中的表达及其意义

目的探讨IL-21／STAT3通路在溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis,UC）小鼠肠道中的表达及其作用。方法20只BALB／C小鼠随机分为正常组和DSS模型组各10只。小鼠UC模型用葡聚糖硫酸钠dextransodiumsulphate,DSS）诱导,观察小鼠疾病活动指数（DAI）评分、病变结肠常规病理切片,采用ELISA法检测血清IL-6、IL-21含量,免疫组化检测结肠STAT3表达。结果模型组小鼠DAI评分、血清IL-6和IL-21含量、结肠病理评分、黏膜STAT3表达水平均较正常组高,差异有显著性（P〈0．05）。结论溃疡性结肠炎小鼠血清炎症介质及肠道STAT3表达水平明显升高,推测IL-21／STAT3通路可能参与UC小鼠肠道炎症损伤,阻断病变肠道IL-21／STAT3通路,减少STAT3蛋白表达或许是治疗UC的作用靶点。     

氧化苦参碱对脂多糖诱导的胰腺星状细胞NOD样受体蛋白3活化的影响

目的 研究氧化苦参碱（OM）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠胰腺星状细胞株（PSCs）NOD样受体蛋白3（NLRP3）活化的影响。方法 通过设置不同剂量（0、2.5、5、10、20、40 μg/mL）的LPS并设置相同剂量（10 μg/mL）的LPS刺激LTC14细胞不同时间（0、1、3、6、9、12 h）,利用Western blotting检测技术,考察LPS引起炎性小体活化的量效关系;使用OM、Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）抑制剂AG490干预LPS诱导的LTC14细胞株后,通过Westernblotting技术检测Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路中相关分子以及NLRP3炎性小体相关蛋白表达的变化。结果 与对照组比较,LTC14细胞接受不同浓度的LPS刺激后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白表达呈显著增高趋势;与对照组比较,LTC14细胞接受相同浓度LPS刺激不同时间后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、IL-1β蛋白表达呈显著增高趋势;与LPS组对比,OM和LPS共同处理组、AG490和LPS共同处理组JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1及IL-1β的蛋白表达显著降低。结论 LPS呈一定的时间-剂量关系激活LTC14细胞JAK2/STAT3信号通路及NLRP3炎性小体;OM可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路起到抑制NLRP3炎性小体活化的作用。     

芍药苷对脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究芍药苷对小鼠急性炎症肝损伤的保护作用。方法小鼠分为对照组（生理盐水）、模型组(脂多糖,5 mg·kg^-1)、单用芍药苷组(30 mg·kg^-1)、脂多糖(5 mg·kg^-1)+小剂量芍药苷组(10 mg·kg^-1)、脂多糖(5 mg·kg^-1)+大剂量芍药苷组(30 mg·kg^-1),给药体积为0.2 m L/10 g。腹腔注射给药7 d后建立急性脂多糖炎症模型。酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素1-β（IL-1β）水平;比色法检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、还原型谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）和诱导型一氧化氮合酶（i NOS）水平;蛋白质印迹法检测转录因子（NF-κB）蛋白表达水平。结果芍药苷使小鼠TNF-α、IL-1β、ALT、AST、MDA、NO水平和i NOS活力下降,SOD、CAT、GSH-Px活性和GSH水平升高;IκB磷酸化蛋白表达减少,NF-κB p65的核转移显著抑制。结论芍药苷对小鼠急性炎症肝损伤具有一定的保护作用。     

复方守宫散对Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响

目的观察复方守宫散对Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响。方法将55只C57BL/6J小鼠按常规方法接种Lewis肺癌瘤株,6d后选取荷瘤成功的小鼠50只随机分为5组:阳性对照组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组10只。阳性对照组:灌服生理盐水0.2mL,1次/d;中药组灌服复方守宫散高剂量组0.6mL(相当于120mg/kg),中剂量组0.4mL(相当于60mg/kg),低剂量组0.2mL,(相当于40g/kg),1次/d;顺铂组按1mg/kg给药,0.1mL/只腹腔注射。每天1次,共14d。在光镜下用HE染色法观察肿瘤组织病理形态学改变情况,用Western Blot法检测JAK2、STAT3蛋白的表达水平。结果各给药组JAK2、STAT3蛋白的表达水平出现不同程度降低,且JAK2降低较为明显。结论复方守宫散能够抑制肿瘤生长,降低Lewis瘤细胞中JAK2、STAT3蛋白的表达,并通过此方式阻断JAK2-STAT3信号转导。     

当归对阴虚哮喘小鼠气道杯状细胞及JAK1/STAT6信号通路的影响

目的 探讨当归对阴虚哮喘小鼠气道杯状细胞增生及JAK1/STAT6信号通路的影响。方法 采用卵清白蛋白与甲状腺复制阴虚哮喘动物模型,观测当归对阴虚哮喘小鼠肺通气功能、哮喘气道杯状细胞增生、肺组织中Muc5ac、IL-13、IL-4含量以及JAK1与STAT6表达水平的影响。结果 当归可明显缓解阴虚哮喘小鼠呼吸频率、潮气量及增强呼气间歇的异常变化,改善肺功能,降低肺指数及肺组织湿干重比值,抑制气道杯状细胞增生,降低肺组织中Muc5ac、IL-13及IL-4含量,抑制肺组织JAK1及STAT6蛋白的表达(P＜0.05, 0.01)。结论 当归具有明显缓解气道杯状细胞增生及Muc5ac高表达而平喘的作用,抑制JAK1/STAT6信号通路是其改善哮喘气道黏液分泌失衡的作用机制之一。     

黄连素对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 探讨黄连素对四氯化碳(CCl₄)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法 30只C57小鼠,♂,随机分为对照组、CCl₄组和黄连素组,每组10只。黄连素组在CCl₄注射前1 h腹腔注射黄连素(10 mg·kg^-1),CCl₄组和黄连素组腹腔注射CCl₄橄榄油溶液(0.5%,5 mL·kg^-1),对照组腹腔注射橄榄油溶液(0.5%,5 mL·kg^-1)。24 h后麻醉下处死小鼠,收集血清和肝脏标本,采用生化检测ALT和AST,HE染色后观察肝脏病理学形态,western blot检测JAK2和STAT3,p-JAK2和p-STAT3。RT-PCR和ELISA检测炎症因子白介素-6(IL-6)和白介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达和分泌。结果 与对照组相比,CCl₄组病理改变明显增加,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达量明显增加,JAK2和STAT3表达无明显变化,IL-6、IL-8和TNF-α表达和分泌明显增加。与CCl₄组相比,黄连素组病理改变明显减轻,p-JAK2、p-STAT3表达明显减少,IL-6、IL-8和TNF-α表达和分泌也明显减少,但JAK2和STAT3表达仍无明显变化。结论 黄连素预处理可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活而减少炎症反应,从而减轻CCl₄诱导的急性肝损伤。     

绞股蓝皂苷通过Nrf2/NF-κB信号通路发挥抗小鼠急性酒精性肝损伤作用

目的研究绞股蓝皂苷抗小鼠急性酒精性肝损伤作用及机制。方法 BALB/c小鼠分为对照组、酒精肝损伤模型组和绞股蓝皂苷3个剂量保护组。皂苷保护组每日给予低、中、高剂量绞股蓝皂苷灌胃连续1周。HE染色观察肝组织病理学改变;全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6 mRNA水平;试剂盒检测氧化损伤相关指标; Western blot检测Nrf2和NF-κB信号通路蛋白水平。结果与对照组相比较,酒精模型组动物ALT、AST、TC和TG水平明显升高; TNF-α和IL-6表达水平明显升高;氧化损伤产物明显升高,抗氧化蛋白活性明显降低; Nrf2信号通路蛋白明显降低;细胞核内p65蛋白水平明显升高。不同剂量绞股蓝皂苷能够明显抑制模型组上述各项指标的变化。结论绞股蓝皂苷通过激活Nrf2/NF-κB信号通路有效地保护小鼠急性酒精性肝损伤。     

黄芩苷对脂多糖诱导的人牙周膜干细胞增殖、迁移作用及机制

目的 探究黄芩苷对脂多糖（LPS）诱导的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）增殖、迁移及Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法 将hPDLSCs分为对照组、LPS组、黄芩苷不同浓度（0.1、1、10 mg/L）组,采用ELISA法和CCK-8法测定细胞炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量和细胞活力,以筛选最适黄芩苷浓度并进行后续通路验证实验。随后将细胞分为对照组、LPS组、最适黄芩苷浓度组、抑制剂组（10μg/mL LPS+1 mg/L黄芩苷+3μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490）,干预24 h后检测hPDLSCs增殖率、凋亡率、迁移率、侵袭细胞数、细胞周期素D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶3(caspase-3)mRNA和蛋白表达及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 根据细胞炎症因子含量和细胞活力结果选择1 mg/L为黄芩苷最适浓度。与对照组比较,LPS组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低,细胞...     

山奈酚阻滞JAK2/STAT3通路抑制宫颈癌细胞的增殖及糖酵解的作用研究

探究山奈酚对人宫颈癌细胞增殖、黏附、糖酵解及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)信号通路的调控作用。体外培养人宫颈癌HeLa细胞,分为对照组(不做干预)、10、20、40、80μmol/L山奈酚组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法筛选出细胞活力接近50%的山奈酚(40μmol/L)用于后续实验。而后取对数生长期的HeLa细胞,分为对照组、实验组(40μmol/L山奈酚)、阳性药物组(20μg/mL 5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(40μmol/L山奈酚+50μmol/L JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490)和激活剂组(40μmol/L山奈酚+0.5μmol/L JAK2/STAT3信号通路激活剂Colivelin)。干预24 h,采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法、细胞黏附实验、乳酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒、蛋白免疫印迹(WB)法对细胞增殖、黏附能力、乳酸含量、葡萄糖消耗水平及JAK2/STAT3信号通路关键蛋白表达水平进行分析。40μmol/L山奈酚干预后细胞活力接近50%,故选取此浓度进行后续实验。与对照组相比,实验组和阳性...