长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探究长链非编码RNA (LncRNA)小核仁RNA宿主基因（SNHG） 22调控微小RNA (miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞（CAL-27、SCC-25和HSC-3）,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组（未进行转染）、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数（PI）];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR...     

HOXC9对人口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

目的 研究HOXC9基因对口腔鳞癌细胞系CAL-27生物学行为的影响。方法 构建HOXC9过表达质粒载体,HOXC9过表达质粒转染CAL-27细胞,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染后细胞中HOXC9 mRNA表达水平,Western blotting检测转染后HOXC9蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测过表达HOXC9对细胞增殖能力的影响,克隆形成实验检测过表达HOXC9对细胞克隆形成能力的影响,划痕实验检测过表达HOXC9对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测过表达HOXC9对细胞侵袭能力的影响。结果与空载对照组相比,转染HOXC9过表达质粒后,细胞中HOXC9 mRNA表达水平明显升高（P<0.001）。实验组细胞中HOXC9蛋白表达明显升高,过表达HOXC9对CAL-27细胞的增殖能力无明显影响（P>0.05）,过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的克隆形成能力（P<0.05）,过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的迁移能力（P<0.05）,过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的侵袭能力（P<0.001...     

大黄素对口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭和迁移的影响

目的:探讨大黄素对人口腔鳞状细胞癌CAL-27及SCC-15的增殖、侵袭和迁移能力的影响及作用机制.方法:采用不同浓度的大黄素处理CAL-27及SCC-15细胞,使用CCK-8法检测其增殖活性,根据结果计算不同作用时间细胞抑制率为50％时对应的药物浓度(IC50);划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测大黄素对两种细胞迁移、侵袭能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大黄素对细胞中金属基质蛋白酶-2(MMP-2)和金属基质蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平的影响;实时定量PCR(qRT-PCR)检测大黄素对细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平的影响.结果:与对照组相比,不同浓度的大黄素均可抑制CAL-27和SCC-15细胞的增殖能力(P<0.05),且呈时间-浓度依耐性;与对照组相比,大黄素可明显降低两种细胞划痕的愈合率和侵袭细胞数(P<0.05),具有浓度依耐性;与对照组相比,经大黄素处理的两种细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05).结论:大黄素在体外可以显著抑制人OSCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用可能与下调MMP-2、MMP-9的表达有关.     

环状RNA hsa＿circ＿0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探究环状RNA hsa＿circ＿0085576对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法 使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa＿circ＿0085576、微小RNA-498 (miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1 (BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果 OSCC细胞中hsa＿circ＿0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调（P<0.05）。下调hsa＿circ＿0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调（P<0.05）;抑制miR-498表达可减弱下调hsa＿circ＿0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对...     

miR-127-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及Zwint-1基因表达的影响

目的 探讨miR-127-3p调控Zeste white 10(ZW10)相互作用着丝粒蛋白1(Zwint-1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 体外培养OSCC细胞系PE/CA-PJ15、CAL27,对其转染并分为空白对照组(NG组)、阴性转染组(NC组)、过表达miR-127-3p组(m...     

白细胞介素1β增强口腔鳞状细胞癌细胞体外侵袭能力及其机制研究

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞体外侵袭能力的影响及相关机制。方法以OSCC系SCC-9为研究对象,用IL-1β与其体外共培养。CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α、VEGF、CXCR1的mRNA的表达情况。结果 IL-1β刺激对SCC-9细胞的增殖能力无影响;IL-1β与SCC-9细胞共培养8h可显著增强其细胞侵袭能力(P<0.05);IL-1β可以显著地提高CXCR1和HIF-1α的转录水平(P<0.05);SCC-9细胞经600ng/ml的IL-1β刺激后,VEGF的mRNA表达出现上调(P<0.05)。结论 IL-1β可以增强SCC-9细胞的体外侵袭能力,并可能与HIF-1α、VEGF、CXCR1等基因的上调有关。     

母系表达基因3通过p53途径抑制口腔鳞癌SCC25细胞生物学活性

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)母系表达基因3(maternally expressed gene 3, MEG3)在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)组织及细胞系中的表达,研究其对OSCC细胞生物学行为和患者预后的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测OSCC组织和细胞系中lncRNA MEG3的表达,分析其表达与患者预后的关系。采用脂质体法将lncRNA MEG3过表达质粒及对照质粒分别转染OSCC SCC25细胞,利用MTT实验检测OSCC SCC25细胞生长增殖能力的变化、划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力的变化、流式细胞术检测细胞凋亡的变化、蛋白质印迹法和qRT-PCR检测p53表达水平的变化。结果 LncRNA MEG3在OSCC组织和细胞系中的表达较正常组织和细胞明显降低,其低表达的OSCC患者有着较短的无进展生存时间和总生存时间。lncRNA MEG3过表达,可以抑制OSCC SCC25细胞的增殖、迁移、侵袭...     

miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究

目的 探讨垂体肿瘤转化基因1 (PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞Cal-27、 HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法 生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）中的表达。蛋白质印迹法（Western blot）实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测该miRNA在组织中的表达。结果 ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低（P<0.05）。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR...     

沉默长链非编码RNA HOTAIR对舌鳞状细胞癌细胞放射敏感性的影响

目的:研究下调长链非编码RNA HOTAIR的表达水平对舌鳞状细胞癌细胞株CAL-27和SCC-9放射敏感性的影响。方法:设计3条干扰HOTAIR的序列,通过慢病毒载体转染至CAL-27和SCC-9中,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证干扰效率。将细胞分为空白组(CAL-27、SCC-9)、实验组(si-HOTAIR CAL-27、si-HOTAIR SCC-9)、阴性对照组(si-NC CAL-27、si-NC SCC-9),再将以上细胞给予8 Gy电子线照射,MTT法检测各组细胞增殖,划痕实验检测各组细胞迁移,流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况。结果:在3条慢病毒载体中,si-2及si-3可下调HOTAIR在CAL-27和SCC-9中的表达(P<0.05),且si-3干扰效率最高(P<0.05),在接受8 Gy电子线照射后,与对照组(si-NC CAL-27、si-NC SCC-9)相比,实验组(si-HOTAIR CAL-27、si-HOTAIR SCC-9)的增殖能力明显减弱(P<0.05);细胞凋亡率增加[(23.87±1.97)%vs.(46...     

过表达TAZ促进口腔舌鳞癌细胞增殖迁移和侵袭的作用机制研究

目的 :探究过表达Tafazzin(TAZ)对口腔舌鳞癌CAL-27、SCC-15细胞增殖迁移侵袭的影响及其作用机制。方法:利用成功过表达TAZ的慢病毒载体转染CAL-27、SCC-15细胞,分为过表达TAZ组(overexpression TAZ, OE TAZ)和对照组(negative control, NC)。用CCK-8实验检测细胞增殖;用划痕实验检测细胞的迁移;用Transwell实验检测细胞侵袭。相关基因的mRNA水平和蛋白水平分别利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测。结果:qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达TAZ病毒转染成功;过表达组较对照组增殖升高,迁移侵袭明显增强;增殖相关蛋白p-Erk,p-Akt表达量升高,上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏连蛋白(E-Cadherin)降低,波形蛋白(Vimentin)升高。结论:过表达TAZ可能通过影响p-Erk、p-Akt、E-Cadherin、Vimentin的表达促进口腔舌鳞癌CAL-27、SCC-15细胞的增殖迁移和侵袭。     

SREBP2对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响及其调控机制

目的： 探讨胆固醇调节元件结合蛋白2（SREBP2）在口腔鳞癌（OSCC）中的调控机制,通过敲低和过表达SREBP2,分析其对口腔鳞癌细胞CAL27增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法： 采用实时定量反转录PCR（qRT-PCR）检测SREBP2在OSCC中的表达量。构建siRNA和过表达质粒并转染 CAL27细胞,通过细胞计数（CCK-8）实验和EdU染色检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染实验检测细胞凋亡水平,划痕愈合和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,通过蛋白免疫印迹法检测SREBP2调控MVA通路相关蛋白表达的改变。数据使用Graphpad 5.0软件绘图,组间比较采用t检验。结果： SREBP2在50对口腔鳞癌组织和OSCC细胞系中表达较正常对照组显著降低。敲低及过表达实验表明,SREBP2表达的变化影响OSCC细胞的增殖、迁移、侵袭,并通过MVA信号通路影响OSCC的发展。结论： SREBP2在OSCC中抑制癌细胞增殖、迁移、侵袭并促进凋亡。     

β肾上腺素受体在舌癌CAL-27细胞系的表达及β受体阻滞剂对其增殖、迁移、侵袭的影响

目的: 研究舌癌CAL-27细胞系中β-AR的表达及β受体阻滞剂对其增殖、迁移、侵袭的影响。方法: 采用Pan CK抗体对培养的正常口腔上皮细胞进行鉴定;免疫组织化学法及qRT-PCR法检测β-AR在舌癌CAL-27细胞的表达;CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell法分别检测普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞增殖、迁移、侵袭的影响。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果: β1-AR、β2-AR在CAL-27细胞的表达均显著高于正常口腔上皮细胞（P<0.05）;β2-AR在CAL-27细胞的mRNA水平表达低于正常口腔上皮细胞而β1-AR表达高于正常口腔上皮细胞;两种药物对CAL-27细胞增殖均有抑制作用,药物浓度>50 μmol/L时,普萘洛尔抑制增殖的作用更强（P<0.05）;2种药物浓度>2.5 μmol/L,对CAL-27细胞迁移均有抑制作用,普萘洛尔的抑制作用更强;药物浓度>1.0 μmol/L,2种药物对CAL-27细胞侵袭均有抑制作用（P<0.05）,普萘洛尔对CAL-27细胞迁移抑制作用更强。结论: 在舌癌CAL-27细胞中, β1-AR在mRNA水平的表达高于正常口腔上皮细胞而β2-AR的表达低于正常口腔上皮细胞;低浓度普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞的增殖无明显抑制作用,但能抑制CAL-27的迁移和侵袭。     

微小RNA663b对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化的影响

目的　探讨微小RNA663b（miR-663b）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞迁移、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响。方法　通过基因表达数据库（GEO）使用R Studio进行OSCC组织与癌旁正常组织的差异表达分析。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-663b在组织和细胞中的表达。检测miR-663b敲除质粒的HN30细胞转染效率，Transwell法检测迁移、侵袭能力。生物信息学方法预测miR-663b的靶向mRNA，双荧光素酶实验验证结合情况。Western blot检测EMT相关标志物的表达。结果　miR-663b在OSCC组织中表达上调，在HN30、CAL27、SCC-9细胞中表达较HOEC细胞高（P<0.05）。敲除miR-663b可以抑制HN30细胞的迁移和侵袭（P<0.05），抑制EMT的发生。生信预测SH3BP2与miR-663b靶向结合，SH3BP2低表达的患者预后较差（P<0.05）。双荧光素酶实验证明miR-663b可以与SHBP2靶向结合（P<0.05）。敲除miR-663b的OSCC细胞中SH3BP2的表达增加，EMT的发生受到抑制。结论　敲除miR-663b可靶向调节SH3BP2抑制OSCC细胞的迁移、侵袭和EMT。     

EGCG对舌鳞癌细胞CAL-27的EGFR、67LR及VEGF表达的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对舌鳞癌细胞CAL-27的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、相对分子质量为67 000的层粘连蛋白受体(67 000 dalton lamininreceptor,67LR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor receptor,VEGF)表达的影响,从而揭示EGCG抑致舌鳞癌细胞增殖的可能机制。方法:不同浓度EGCG处理CAL-27细胞24h后,MTT法检测细胞增殖活性;RealTime PCR法和Western Blot法分别检测CAL-27细胞EGFR、67LR、VEGF的mRNA及蛋白表达情况;Western Blot法检测磷酸化EGFR(p-EGFR)的蛋白表达水平。结果:EGCG浓度依赖性抑制CAL-27细胞的增殖,且抑制其EGFR、67LR、VEGF的mRNA和蛋白、p-EGFR的蛋白表达。结论:EGCG能影响EGFR、67LR及VEGF的转录和翻译水平以及p-EGFR蛋白表达,这可能是EGCG抑制舌鳞癌细胞CAL-27增殖的重要机制。     

circRNA EPB41L2通过调控miR-1270促进口腔鳞癌细胞的增殖和转移

目的 本研究旨在探讨环状RNA(circRNA) EPB41L2通过调控miR-1270/TFRC轴对口腔鳞癌（Oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。方法 qRT-PCR分析circRNA EPB41L2、miR-1270和TFRC的表达水平,克隆形成、Transwell实验分别分析OSCC细胞增殖、迁移和侵袭,蛋白质免疫印迹法分析上皮-间充质转化（epithel-mesenchymal transition,EMT）标记物的表达。双荧光光素酶和RIP实验以探索circRNA EPB41L2、miR-1270和TFRC之间的相互作用。结果 circRNA EPB41L2在OSCC细胞中上调,细胞功能实验表明,敲低circRNA EPB41L2抑制了细胞增殖、迁移和侵袭。此外,机制研究表明circRNA EPB41L2可以与miR-1270结合并上调其靶基因TFRC,从而促进OSCC细胞的EMT。结论 本研究的结果证明了circRNA EPB41L2在OSCC肿瘤发生和转移中的作用,circRNA EPB41L2通过OSCC中m...     

沙利霉素对舌鳞癌细胞体外增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨沙利霉素对口腔舌鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步分析其影响机制。方法:CCK8法检测沙利霉素和顺铂分别作用于CAL-27细胞和EA.hy926细胞后,对细胞增殖的影响;Transwell小室法检测沙利霉素对CAL-27细胞侵袭和迁移能力的作用;Western 免疫印迹检测沙利霉素对CAL-27细胞中E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）和β连环蛋白（β-catenin）表达的影响。采用SPSS20.0 软件包对数据进行统计学分析。结果:沙利霉素抑制CAL-27细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性,且其增殖抑制作用强于顺铂（P<0.05）;经过沙利霉素(4 μmol/L）处理过的CAL-27细胞,其侵袭和迁移能力均显著低于空白对照组(P<0.05);沙利霉素上调CAL-27细胞中E-cadherin蛋白的表达水平,并且下调vimentin和β-catenin蛋白的表达水平。结论:沙利霉素能够明显抑制CAL-27细胞的增殖能力,显著减弱CAL-27细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制癌细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)有关。     

POLD1对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭的影响及调控机制

目的： 探讨人源DNA 聚合酶δ催化亚基（POLD1）的表达对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期的影响及其相关机制。方法： 使用生物信息数据分析POLD1在头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达,利用免疫组织化学染色检测POLD1在40对口腔鳞癌及癌旁组织中的表达。慢病毒感染SCC9及CAL27细胞系,蛋白免疫印迹检测POLD1在稳转细胞系中的表达。CCK-8实验和EdU实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。流式细胞周期实验检测POLD1对细胞周期的影响。蛋白免疫印迹法研究POLD1影响细胞周期的相关通路。采用SPSS 21.0软件包和GraphPad Prism 进行数据分析和绘图。结果： POLD1在头颈部鳞癌及40对OSCC组织中的表达显著高于癌旁组织（P<0.001);慢病毒感染SCC9及CAL27细胞系后,POLD1的表达显著下降,且在细胞核及细胞质中的表达降低。实验组SCC9及CAL27细胞的增殖、迁移、侵袭能力下降。流式细胞周期实验检测到实验组细胞在G2/M期阻滞,G1期缩短。蛋白免疫印迹结果： 显示,实验组P-Cdc2(Tyr15)、P-Rb(Ser807)表达显著升高。结论： 敲低POLD1的表达可抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。     

Claudin-7在口腔鳞状细胞癌中的表达和作用研究

目的 探究Claudin-7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及作用。方法 通过免疫组化实验和蛋白质免疫印记实验检测OSCC中Claudin-7的表达情况,并分析Claudin-7和不同病理参数的关系。通过慢病毒转染Cal27和HN6细胞系上调Claudin-7表达,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖及迁移能力的变化;通过蛋白质免疫印迹实验和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测Claudin-7对上皮间充质转化(EMT)指标的影响。结果 Claudin-7在OSCC中低表达(P<0.05),其表达水平和OSCC患者肿瘤大小、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05)。过表达Claudin-7可抑制Cal27和HN6细胞增殖和迁移,并且上调E-钙黏蛋白(E-cadherin)及下调N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白和mRNA(P<0.05)。结论 Claudin-7在OSCC中低表达,上调其表达可通过影响上皮间充质转化抑制OSCC细胞的增殖和迁移。Claudin-7可作为OSCC治疗的一个新靶点。     

干扰FGF4表达可抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力

目的 探索干扰成纤维细胞生长因子4(fibroblast growth factor 4,FGF4)表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 培养5株OSCC细胞株并检测FGF4 DNA拷贝数及mRNA的表达变化;转染siRNA干扰FGF4表达并进行验证;干扰FGF4表达后,采用CCK-8检测OSCC细胞株HSC-3、H314细胞增殖能力的变化,采用Transwell方法检测细胞迁移及侵袭能力的变化.结果 同对照组相比,干扰FGF4表达后,HSC-3、H314细胞增殖能力明显下降(P<0.05).在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数分别下降了64.52％、66.81％;在H314细胞系中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数下降了66.81％、82.01％.同对照组相比,在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了52.34％、49.89％.在H314中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了75.3％、90.63％.结论 在OSCC细胞中,干扰FGF4表达可抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力.