癫(癎)患儿血清白介素-6、肿瘤坏死因子水平测定

癫(癎)的发病机制极为复杂,且尚未完全阐明,神经免疫调节网络失衡是其发生、发展的重要因素之一,诸多细胞因子参与癫(癎)的发病过程[1].白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)是具有广泛生物学作用的细胞因子,参与了细胞免疫调节作用.本文检测了癫(癎)患儿血清中IL-6和TNF的水平,旨在探讨癫(癎)的免疫作用机制.     

依达拉奉对戊四唑点燃小鼠癫(癎)的影响

目的 研究新型自由基清除剂依达拉奉对戊四唑(PTZ)化学性点燃小鼠癫癎的保护作用.方法 建立PIZ化学性点燃小鼠模型,观察依达拉奉对PTZ点燃急性癫癎大发作和慢性点燃形成进程的影响.结果 每天给予依达拉奉10 mg/kg腹腔注射显著抑制PTZ慢性点燃癫癎的发展进程(P<0.05);给予1周依达拉奉10 mg/kg腹腔注射对PTZ急性点燃发作级别无明显抑制作用,但能够明显延长发作潜伏期(P<0.05),显著降低小鼠病死率(P<0.05).结论 依达拉奉对癫癎的慢性点燃过程有抑制作用,而对急性癫痫发作无显著抑制作用,但是能明显延长其发作潜伏期、缩短发作时间及降低病死率.     

依达拉奉预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护机制

目的探讨依达拉奉预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护机制。方法将36只SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌注组和依达拉奉组。依达拉奉组术前给予60 mg/(kg.d)的依达拉奉灌胃,共3 d。采用大脑中动脉线栓法制备大鼠缺血-再灌注损伤模型。比较各组神经功能缺损评分、脑梗死体积、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量及脑组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果与缺血-再灌注组比较,依达拉奉组的神经功能缺损评分显著下降,脑梗死灶体积显著缩小,血清NSE含量明显降低(均P<0.01);脑组织IL-1β和TNF-α含量显著降低(P<0.05～0.01)。结论依达拉奉预处理可减少大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑组织IL-1β和TNF-α表达,保护脑组织。     

癫(癎)患儿血清白介素-6、肿瘤坏死因子水平测定

癫痫的发病机制极为复杂，且尚未完全阐明。神经免疫调节网络失衡是其发生、发展的重要因素之一．诸多细胞因子参与癫痫的发病过程。白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）是具有广泛生物学作用的细胞因子，参与了细胞免疫调节作用。本文检测了癫痫患儿血清中IL-6和TNF的水平，旨在探讨癫痫的免疫作用机制。     

依达拉奉对脑出血大鼠脑组织含水量、肿瘤坏死因子-α含量、血清基质金属蛋白酶-9水平和超氧化物歧化酶活性的影响

目的 探讨依达拉奉对脑出血大鼠脑组织含水量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、血清基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.方法 36只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组和依达拉奉治疗组,每组12只大鼠.采用自体血注入法制作大鼠脑出血模型.依达拉奉治疗组术后予以依达拉奉注射液3 mg/kg腹腔注射治疗,每12 h注射1次,直至处死前12 h.术后72 h时,采用于湿重法检测各组脑组织含水量,双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测脑组织TNF-α含量及血清MMP-9水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD活性.结果 与脑出血模型组比较,依达拉奉治疗组及假手术组大鼠脑组织含水量及TNF-α含量明显减少,血清MMP-9水平明显降低,血清SOD活性明显增高(P ＜0.05～0.01).与假手术组比较,依达拉奉治疗组脑组织含水量差异具有统计学意义(P＜0.05).脑出血模型组大鼠脑组织含水量与血清MMP-9水平呈正相关(r=0.956,P=0.003);与血清SOD活性呈负相关(r=-0.945,P=0.004).结论 依达拉奉能降低脑出血大鼠的脑组织含水量、TNF-α含量和血清MMP-9水平,以及提高SOD的活性;其可能通过这些机制对脑出血大鼠的脑组织起保护作用.     

依达拉奉对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子和肿瘤坏死因子水平的影响

目的 探讨依达拉奉对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响.方法 84例急性脑梗死患者随机分为依达拉奉组和对照组;在脑梗死常规治疗的基础上,依达拉奉组加用依达拉奉60 mg/d静脉滴注14 d.治疗前、治疗后14 d及28 d应用改良爱丁堡斯堪的那维亚量表( SSS)对患者进行临床神经功能缺损程度评分;应用酶联免疫吸附测定法检测患者发病3d、7d及14 d血清VEGF及TNF-α水平.结果 两组患者治疗14 d及28 d时SSS评分均较治疗前明显降低(P＜0.05 ～0.01),依达拉奉组各时间点SSS评分明显低于对照组(均P＜0.05).两组血清VEGF及TNF-α水平发病后各时间点较正常值明显增高,发病第7d时明显高于第3d和第14 d(均P＜0.05);依达拉奉组各时间点血清VEGF水平明显低于对照组(均P＜0.01);两组各时间点血清TNF-α水平差异无统计学意义.结论 依达拉奉可明显降低急性脑梗死患者血清VEGF水平,减轻脑梗死后自由基导致的脑损害.     

依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注后IL-1β表达的影响

目的 观察依达拉奉对IL-1β表达的影响,探讨它的保护作用及机制.方法 Wistar雌、雄性大鼠共42只,随机分为假手术组、盐水对照组及依达拉奉用药组,对照组及用药组再进一步分为3h、6h、24h组,根据Koizumi线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO),用免疫组化方法检测IL-1β表达的变化.结果 鼠脑缺血再灌注后缺血区脑组织 IL-1β含量,假手术组几乎无表达,盐水组IL-1β表达3h开始升高,于6h到高峰,后逐渐下降.用药组IL-1β的含量较盐水组减少(P＜0.05).结论 依达拉奉可减少大鼠脑缺血再灌注后IL-1β表达,起到脑保护作用.     

依达拉奉对癫痫大鼠脑内谷氨酸的影响

目的 探讨依达拉奉对戊四氮致痫大鼠脑中谷氨酸的影响.方法 30只成年SD大鼠随机分为对照组、癫痫组和治疗组,癫痫组和治疗组大鼠腹腔注射戊四氮60mg/kg,诱导癫痫发作.治疗组于注射戊四氮之前1h经腹腔注射依达拉奉30mg,并观察1h.然后处死大鼠取脑,应用柱前衍生HPLC-荧光法测定大鼠脑皮质谷氨酸(Glu)的含量.结果 治疗组痫性发作潜伏期、平均痫性发作等级及脑内谷氨酸含量与癫痫组相比差异均有显著性(P<0.01).结论 依达拉奉可以通过拮抗氧自由基并抑制谷氨酸的释放,在癫痫发作中发挥保护作用.     

依达拉奉对戊四唑点燃小鼠癫痫的影响

目的研究新型自由基清除剂依达拉奉对戊四唑（PTZ）化学性点燃小鼠癫痫的保护作用。方法建立PIZ化学性点燃小鼠模型，观察依达拉奉对PTZ点燃急性癫痫大发作和慢性点燃形成进程的影响。结果每天给予依达拉奉10mg／kg腹腔注射显著抑制PTZ慢性点燃癫痫的发展进程（P〈0．05）；给予1周依达拉奉10mg／kg腹腔注射对PTZ急性点燃发作级别无明显抑制作用，但能够明显延长发作潜伏期（P〈0．05），显著降低小鼠病死率（P〈0．05）。结论依达拉奉对癫痫的慢性点燃过程有抑制作用，而对急性癫痫发作无显著抑制作用，但是能明显延长其发作潜伏期、缩短发作时间及降低病死率。     

microRNA-146a对癫(癎)大鼠脑内P-糖蛋白表达的影响

目的 观察microRNA-146a(miR-146a)对癫(癎)大鼠脑内P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机分为3组:miR-146a给药(miR-146a)组(n=8),经立体定向侧脑室注射给药;正常对照组(n=8)和癫(癎)组(n=8)给予相同体积的0.9％氯...     

依达拉奉对戊四唑点燃小鼠癫的影响

目的研究新型自由基清除剂依达拉奉对戊四唑(PTZ)化学性点燃小鼠癫的保护作用。方法建立PIZ化学性点燃小鼠模型,观察依达拉奉对PTZ点燃急性癫大发作和慢性点燃形成进程的影响。结果每天给予依达拉奉10mg/kg腹腔注射显著抑制PTZ慢性点燃癫的发展进程(P<0.05);给予1周依达拉奉10mg/kg腹腔注射对PTZ急性点燃发作级别无明显抑制作用,但能够明显延长发作潜伏期(P<0.05),显著降低小鼠病死率(P<0.05)。结论依达拉奉对癫的慢性点燃过程有抑制作用,而对急性癫发作无显著抑制作用,但是能明显延长其发作潜伏期、缩短发作时间及降低病死率。     

喹啉对癫(癎)大鼠海马神经元连接蛋白36表达的影响

目的:探讨喹啉对癫癎大鼠海马神经元连接蛋白36(Cx36)表达的影响.方法:64只SD大鼠随机分为正常对照组、癫癎模型组、地西洋治疗组和喹治疗组,每组16只大鼠.采用氯化锂-匹罗卡品诱导制作癫癎大鼠模型,地西泮治疗组子以1mg/kg地西泮治疗,喹啉治疗组予以60mg/kg喹啉治疗.术后分别采用Racine评分和脑电图检查判断癫癎发作情况.分别用免疫荧光染色法、Western blot法检测各组大鼠术后2h、4h时海马神经元Cx36的表达.结果:与正常对照组比较,癫癎模型组和地西泮治疗组大鼠术后2h、4h时海马神经元Cx36表达水平显著升高(均P<0.01).癫癎模型组和地西泮治疗组大鼠术后2h、4h时海马神经元Cx36表达水平比较差异无统计学意义.与癫癎模型组及地西泮治疗组比较,喹啉治疗组大鼠术后2h、4h时海马神经元Cx36表达水平显著降低(均P<0.01).结论:癫癎大鼠海马神经元Cx36表达水平升高,喹啉能抑制这一变化.     

褪黑素对癫(癎)大鼠海马神经元凋亡及半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的观察褪黑素（Mel）对癫癇大鼠海马神经元凋亡及半胱氨酸蛋白酶（caspase）-3表达的影响。方法采用匹罗卡品（Pilo）制作大鼠癫癇持续状态（SE）模型,随机分为Pilo组、Mel组和对照组,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色和免疫组化技术检测大鼠海马神经元凋亡数和caspase-3的表达,并与对照组比较。结果SE后6h,Pilo组开始出现少量TUNEL阳性细胞;SE后72h,达到高峰;SE后7d,TUNEL阳性细胞开始减少。SE后6h,Pilo组大鼠海马caspase-3阳性细胞数增多,主要集中于CA1和CA3区;SE后48h,达到高峰;SE后72h,阳性细胞数开始减少;SE后7d,caspase-3表达基本恢复正常。Mel组各时间点大鼠海马TUNEL阳性细胞数和caspase-3表达均明显低于Pilo组大鼠（均P〈0.01）。结论Mel可减少癫癇大鼠海马神经元凋亡,抑制caspase-3的表达,起到神经保护作用。     

颞叶癫(癎)大鼠海马区NCX3 mRNA和蛋白的表达变化

目的:动态观察钠-钙交换体(NCX)mRNA和蛋白在氯化锂-匹罗卡品致(癎)模型大鼠海马CA1、CA3及齿状回区表达的变化,探讨其在癫(癎)发生发展中的作用.方法:用氯化锂-匹罗卡品制备癫(癎)动物模型;应用原位杂交和免疫组化技术检测各时间点NCX3 mRNA和蛋白的表达.结果:急性期(6～24 h)海马各区NCX3 mRNA表达均随时间的延长逐渐减少;进入静止期各区表达趋向回升,慢性反复自发发作期(30、60 d)各区表达又出现不同程度的两次下调.除致(癎)后6 h大鼠海马各区的NCX3蛋白表达无明显变化外,NCX3蛋白变化趋势与NCX3 mRNA基本一致.结论:NCX3表达下调可能通过增加神经元钙超载,改变海马神经元的兴奋性,促使癫(癎)发生.     

依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠脑自由基代谢及海马CA1区HIF-1α表达的影响

目的:观察依达拉奉对慢性脑低灌注大鼠前脑组织SOD、MDA代谢变化及海马CA1区HIF-1α表达的影响,并探讨其意义。方法:实验分假手术组,模型组及依达拉奉组,后两组采用永久性大鼠双侧劲总动脉结扎术(2-vesselocclusion,2VO)制备慢性脑低灌注模型,各组在术后八周后行水迷宫试验后断头,取前脑组织制备成10%脑组织匀浆检测其SOD活性及MDA含量,并采用免疫组化技术观察海马CA1区HIF-1α表达变化。结果:模型组与假手术组相比水迷宫完成时间显著延长(P<0.05),前脑组织SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.01),海马CA1区可见HIF-1α少量表达。依达拉奉组较模型组水迷宫结果显著改善(P<0.01),前脑组织SOD活性增加,MDA含量减少(P<0.01),且海马CA1区可见HIF-1α大量表达。结论:慢性脑低灌注可显著损害大鼠空间学习记忆能力,依达拉奉可能通过抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶活性,降低羟自由基的浓度,促进HIF-1α表达等多种途径改善血管性认知障。     

低频电刺激丘脑底核对癫(癎)大鼠海马谷氨酸和γ-氨基丁酸表达的影响

目的 探讨低频电刺激(LFS)丘脑底核对癫(癎)大鼠海马谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)表达的影响.方法 用30只大鼠制备杏仁核电刺激点燃模型,同时在丘脑底核埋置刺激电极;制模成功的大鼠随机分为LFS组及对照组;两组大鼠每日点燃1次,共10 d;LFS组大鼠每次点燃前予以LFS丘脑底核.观察10 d后两组大鼠癫(癎)发作程度和持续时间,应用免疫组化法测定大鼠海马Glu、GABA阳性细胞数及灰度值.结果 与对照组比较,LFS组癫(癎)发作的Racine评分明显降低,癫(癎)发作持续时间明显缩短;海马GABA阳性细胞数明显增多、灰度值降低;Glu阳性细胞数明显减少,灰度值明显增加(均P＜0.05＝.结论 LFS丘脑底核能有效抑制大鼠杏仁核点燃发作,其作用机制可能是改变了脑内Glu、GABA的表达.     

重组人白介素-10对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞及syndecan-4蛋白表达的影响

目的 观察重组人白介素-10(rhIL-10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和syndecan-4蛋白表达的影响.方法 体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分别应用终浓度为20 ng/mL TNF-α、100 ng/mL rhIL-10、200 ng/mL rhIL-10、20 ng/mLTNF-α+100 ng/mL rhIL-10、20 ng/mE TNF-α+200 ng/mL rhIL-10作用24 h,并设立对照组进行比较(对照组应用含5%FBS的DMEM培养基).采用MTS/PMS法确定VSMCs的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定VSMCs中syndecan-4蛋白的表达.结果 (1)MTS/PMS法测定各组细胞增殖率分别为:对照组1.822±0.455,20 ng/mL TNF-α组2.130±0.270,rhIL-10 100 ng/mL组1.989±0.309,rhIL-10 200 ng/mL组2.010±0.370,TNF-α 20 ng/mL+rhlL-10 100 ng/mL组1.918±0.322,TNF-α20ng/mL+rhIL-10 200ng/mL组1.924±0.145.统计分析显示:与对照组比较,TNF-α组能明显刺激大鼠VSMC的增殖(P<0.05),而rhIL-10不同剂量组单独应用对大鼠VSMCs的增殖均无明显作用(P>0.05).TNF-α联合rhIL-10共同作用组与TNF-α组比较均对VSMCs增殖有显著抑制作用(P<0.05).(2)Western blot蛋白免疫印迹法测定显示:与对照组比较,TNF-α组能明显刺激VSMCs的syndecan-4蛋白表达(P<0.05),而rhIL-10不同剂量组单独应用对VSMCs的syndecan-4蛋白表达均无明显影响(P>0.05).TNF-α联合rhIL-10共同作用组与TNF-α组比较对VSMCs的syndecan-4蛋白表达均有明显抑制作用(P<0.05).结论 rhIL-10可明显抑制TNF-α诱导的大鼠VSMC增殖及syndecan-4蛋白的表达.     

依达拉奉对脑缺血再灌注大鼠海马一氧化氮的影响

目的研究依达拉奉对脑缺血再灌注大鼠海马一氧化氮(NO)产生的影响。方法大鼠脑缺血采用四血管阻断法,选择性测定电极检测的浓度。实验分为生理盐水组、依达拉奉组(Edaravone)和7-Nitroindazole(7-NI)组。结果依达拉奉和7-NI皆未影响大鼠的血压和海马血流量,均显著减少了缺血再灌注时海马内NO的产生(均P<0.001)。结论依达拉奉可能通过抑制神经型一氧化氮合酶(nNOS)或减少NO而起到神经保护作用。     

糖原合成酶激酶-3β及其磷酸化产物在难治性癫(癎)患者颞叶前部的表达

目的 探讨糖原合成酶激酶-β(CSK-3β)及其磷酸化产物(p-GSK-β)在难治性癫(癎)(RE)患者颞叶前部的表达.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量(FQ)PCR、免疫组化及免疫印迹法检测36例RE患者颞叶前部GSK-3β及其p-GSK-3β的mRNA和蛋白的表达,并与8例对照者进行比较.结果 RE患者脑内神经元及胶质细胞GSK-3β mRNA及蛋白表达明显增多(均P<0.05),p-GSK-3β表达明显减少(P<0.05).结论 GSK-3β及其磷酸化产物表达异常,可能与RE的发生和发展有关.