生物套管小间隙桥接修复周围神经的实验研究

目的　探讨用部分脱乙酰甲壳质生物套管小间隙桥接修复周围神经损伤的可行性。方法　将SD大鼠双侧坐骨神经切断后 ,按手术方法随机分为 5组。A组 :神经外膜原位缝合 (n =10 ) ;B组 :生物套管小间隙原位桥接 (n =10 ) ;C组 :断端旋转 180°外膜缝合 (n =10 ) ;D组 :断端旋转 180°生物套管小间隙桥接 (n =10 ) ;N组 :正常对照 (n =10 )。术后 6周行电生理学检查 ,光镜下作再生有髓神经纤维计数。结果　A、B、D组的运动神经传导速度快于C组但慢于N组 ,5组间差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。有髓神经纤维计数数目 ,A >B >D >C >N组 ,A、B、D组与C组相比 ,两者差异有显著意义 (P <0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;但A、B、D 3组间的差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论　部分脱乙酰甲壳质生物套管小间隙桥接修复周围神经的效果好于断端转位的外膜缝合 ,具有替代外膜缝合的可行性。     

甲壳质套管桥接周围神经长度极限的研究

目的 通过采用不同间隙套接修复大鼠坐骨神经损伤的实验研究,探讨甲壳质套管桥接修复周围神经损伤的长度极限.方法 SPF级健康成年雄性SD大鼠24只,于大鼠右侧坐骨神经分叉处以上5 mm建立坐骨神经离断伤模型,部分切除坐骨神经后使用甲壳质套管桥接修复,使神经断端间留有2、5、8和10 mm间隙.8周后常规锇酸染色,镜下观察套管远端有髓神经纤维数目、轴突平均面积、髓鞘平均厚度及腓肠肌平均湿重,并进行定量组织学分析.结果 术后8周显示2 mm小间隙组神经纤维已有80%再生,再生效果最佳,与其他组相比差异有统计学意义(P＜0.01).随着间隙距离逐渐增加,神经纤维再生效果逐渐变差;5 mm间隙组再生约60%,效果优于8 mm间隙组(P＜0.01);8 mm间隙组再生约20%,优于10 mm间隙组(P＜0.01);10 mm间隙组只有1%有髓神经纤维成功长入远端,肌肉湿重降至正常的42.9%.结论 使用甲壳质套管桥接修复大鼠坐骨神经损伤时,2 mm左右小间隙套接修复效果最佳,5 mm间隙是修复后周围神经功能得到恢复的极限间隙,10 mm是神经单靠趋化性、营养作用再生的最大间隙.     

自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂的实验研究

目的 探讨应用自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂的可行性和优越性.方法 取SD大鼠40只,体质量250～350g,随机分成2组,每组20只.实验组:坐骨神经切断后采用自体神经外膜小间隙桥接法缝合;对照组:坐骨神经切断后采用神经外膜原位缝合.术后2、4、6、8、10、12、14及16周时,分别从2组中各取出2只大鼠,大体观察实验动物肢体恢复自主活动的时间,显微镜视下观察神经再生室及缝合口的大体形态,光镜及电镜下对2组再生神经纤维进行观察.结果 实验组大鼠恢复肢体自主活动快,缝合口与周围组织粘连轻.形态学观察发现小间隙神经纤维排列有序,结缔组织增生明显减少.电镜观察显示神经间隙远端再生神经髓鞘板层呈同心圆状排列致密、整齐,雪旺细胞增生明显.而对照组没有上述改变.结论 自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂是可行的,优于神经外膜原位缝合法,是修复周围神经断裂的一种新方法.     

替代神经外膜缝合─小间隙套接法修复周围神经损伤

目的：在动脉套接的基础上，尝试一种海洋生物套管小间隙套接修复周围神经损伤，代替传统外膜缝合法的可行性方法：将SD大鼠坐骨神经切断后用不同的方法进行修复，进行动脉套接的早期和远期的组织学和电生理学观察，其后进行海洋生物套管桥接的组织学及电生理观察。结果：原位和旋转的动脉套接组与外膜原位缝合组取得了相似组织学和电生理学恢复效果，且明显好于旋转的外膜缝合组；此种海洋生物套管取得了与动脉套管相似的结果。结论：本实验结果提示动脉套接模型有利于神经再生，此种海洋生物套管小间隙套接的修复效果好于断端转位的外膜缝合，有可能成为替代临床外膜缝合的新方法。     

周围神经小间隙动脉桥接后的组织学观察

目的探讨动脉套管内神经间隙缝合后神经再生的机理。方法在ＳＤ大鼠腓总神经切断后，行外膜直接缝合及用２ｍｍ间隙自体动脉套接作比较。术后７、１４、２１、２８天取两组样本，采用多种染色法染色后，在光镜及电镜下观察神经的再生过程。结果动脉桥接组神经再生时间比直接缝合组慢２周，但再生速度基本相同。动脉套管内神经纤维向远端生长的有效率较直接缝合组大。结论神经缝合段留出供神经自然随机选择及化学特异选择的空隙，有益于混合神经修复后的有效再生     

大鼠坐骨神经损伤修复后近端轴突再生的初步研究

目的 采用生长相关蛋白-43(GAP-43)对SD大鼠坐骨神经近端新生轴突进行标记,观察坐骨神经损伤修复后近端轴突再生过程.方法 64只SPF级SD大鼠于右侧坐骨神经分叉以上5mm处切断坐骨神经,分别采用原位缝合以及生物可溶性甲壳质套管小间隙(2 mm)缝合方法进行修复,分别于术后1、3、7及14 d取材.观察神经缝合处组织大体形态;套管内坐骨神经生长状态;近端新生轴突形态,并应用图像分析方法对新生轴突数目进行定量分析.结果 套管小间隙缝合组大鼠神经缝合处粘连情况较轻.免疫荧光染色显示:术后14 d,新生纤维神经干形成圆锥形向前生长.形态规则均一.原位缝合组大鼠缝合处粘连较重,新生轴突于7 d左右长过缝合点,坐骨神经远端新生轴突散在分布,形态不规则.免疫荧光染色图像分析结果显示:大鼠坐骨神经损伤修复后,术后3 d原位缝合组新生轴突数目较套管缝合组多.差异有统计学意义(P<0.01);术后7 d套管小间隙缝合组大鼠坐骨神经开始大量再生;术后14 d左右,套管小间隙缝合组新生轴突数目显著高于原位缝合组(P<0.05).结论 甲壳质套管具有良好的生物相容性,套管内新生轴突前沿以圆锥形向前生长,新生轴突形态较原位缝合组好,套管小间隙修复7 d后新生轴突数目开始较原位缝合组多.本实验主要观察了两种术式修复后大鼠坐骨神经新生轴突的生长规律,也从组织学角度解释了生物套管小间隙套接方法的再生效果比原位缝合效果好的可能原因所在.     

周围神经小间隙动脉套接的免疫组织化学观察

目的:观察周围神经在动脉套管内的再生机制,比较小间隙套接法和外膜直接缝合的再生时相差别。方法:在大鼠腓总神经上分别做成2mm 间隙动脉套接和原位外膜缝合两组模型,于7、14、21及28天取材。采用免疫组化 ABC 法观察雪旺细胞及新生轴索的增殖和生长。结果:雪旺细胞沿动脉套管壁大量增殖,新生索轴沿雪旺细胞通过动脉套管达远侧神经断端;套接组新生纤维到达远端神经的时间比直接缝合组迟约2周;3周后远端神经断面的新生轴索数两组相近。结论:小间隙套接法有可能成为解决神经断端定位难及提高神经再生效果的有效手段。     

小间隙桥接周围神经损伤Gap-43表达变化的实验研究

目的 观察采用小间隙桥接法修复大鼠坐骨神经损伤时套管内Gap-43 mRNA含量的变化.方法 SD 大鼠78只,随机分为13组,每组6只.其中6组切断右侧坐骨神经并原位缝合,另6组切断右侧坐骨神经采用小间隙桥接法修复.1组为正常对照.分别于术后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、28 d以吻合口为中心,取上下各5 mm共1 cm坐骨神经提取总RNA,采取实时荧光定量反转录聚合酶链(Real-time RT-PCR)技术检测组织中Gap-43 mRNA含量变化.结果 鼠周围神经中Gap-43 mRNA含量在正常组织有低水平表达,在损伤后1 d即升高,在损伤后28 d降低,但仍高于正常坐骨神经内表达水平.桥接缝合组Gap-43表达高于外膜缝合组.结论 大鼠坐骨神经损伤后采用不同修复方法其Gap-43基因表趋势相似,但由套管形成的封闭空间蕴含了较高的神经再生相关因子,有利于神经再生.     

周围神经端侧动脉套接后神经再生的研究

目的研究周围神经端侧动脉套接后神经再生的可能性及其特点. 方法取SD大鼠75只,在股骨中下段切断腓神经,将近断端逆转90度包埋于肌肉中.随机分为5组.A组:将截取的左颈总动脉套接于右侧正常胫神经侧方与腓总神经远端2 mm距离之间,缝合部胫神经外膜不予切除;B组:在胫神经套接部外膜开窗1.0 mm;C组:腓总神经切断14天后再予动脉套接,余同B组;D组:同B组,且于动脉套接部注入神经生长因子(neural growth factor, NGF)1 ml;E组:将腓总神经远端以端侧缝合形式直接缝合于胫神经的一侧,外膜开窗1.0 mm.术后4、8和12周分别行组织学、电镜和神经纤维计数等检查. 结果 4周时C、D及E组周边区域有神经纤维轴突和髓鞘再生,A组则无神经纤维生长; 8周时C、D及E组再生神经纤维较B组多,E组神经纤维较C、D组多,差异有统计学意义(P<0.05); 12周时C、D及E组神经纤维多于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组及D组有较丰富的神经再生,与神经端侧直接吻合的E组差异无统计学意义(P>0.05). 结论神经端侧2 mm距离动脉套接可作为修复周围神经损伤的一种可行方法.     

不同对位情况下神经直接缝合与小间隙套管法修复的疗效比较

目的比较不同对位情况下神经直接缝合与小间隙套管修复神经的疗效。方法取ＳＤ大鼠４０只，解剖并分离出右侧坐骨神经后于股中部切断，随机分为４组，每组１０只。Ａ组：行神经原位直接缝合；Ｂ组：将神经远端旋转１８０度后直接缝合；Ｃ组：用硅胶管套接原位修复神经，神经间隙为５ｍｍ；Ｄ组：神经远端旋转１８０度后用硅胶管套接修复，神经间隙为５ｍｍ。术后４、８、１２周检测坐骨神经功能指数（ＳＦＩ），神经电图和组织形态学变化。结果Ｂ组ＳＦＩ、运动神经传导速度（ＭＮＣＶ）比Ａ、Ｃ、Ｄ三组恢复均差（Ｐ＜０．０１），Ａ、Ｃ、Ｄ三组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。再生有髓纤维计数各组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论神经断端对位正确时，无论是直接缝合还是用小间隙套管法修复，两者疗效一致；神经断端错位对合时，小间隙套管法修复的疗效优于神经直接缝合。     

Comparison of the neurotropic effects of motor and sensory Schwann cells during regeneration of peripheral nerves.

We examined the inductive ability of motor and sensory Schwann cells on regeneration of motor and sensory axons using a silastic Y chamber, and Lewis rats L5 ventral root (motor) and saphenous nerve (sensory). We developed four experimental models: motor-motor nerve group-proximal motor stump with distal fresh and frozen/thawed motor nerve segments (n = 7); sensory-sensory nerve group-proximal sensory stump with distal fresh and frozen/thawed sensory nerve segments (n = 7); motor-sensory nerve group-proximal motor stump with distal fresh and frozen/thawed sensory segments (n = 8); and sensory-motor nerve group-proximal sensory stump with distal fresh and frozen/thawed motor segments (n = 8). The gap was set at 4 mm. Six weeks postoperatively we compared the number of regenerated myelinated axons in the two distal channels, and found that sensory Schwann cells have a strong inductive ability for regeneration of both sensory and motor axons. Motor Schwann cells have weak inductive ability for regeneration of motor axons and no inductive ability for regeneration of sensory axons.     

纤维蛋白胶粘合修复周围神经损伤的实验研究

目的 比较纤维蛋白胶粘合法与神经外膜缝合法修复周围神经损伤的效果。方法 将雄性Wistar大鼠20只随机分为两组，即粘合组和缝合组，每组10只。以大鼠左侧坐骨神经为修复神经模型进行实验。术后8周，各组取8只大鼠进行电生理、组织学检查，每组其余2只取标本做透射电镜观察。结果 术后8周粘合组神经纤维较缝合组平直，粘合组与缝合组比较，运动神经潜伏期延迟比、吻合口神经纤维通过比、有髓纤维截面积恢复比、肌湿重恢复比差别具有显著性意义(t值分别为2．32、2．43、2．39、2．36，P值分别为0．032、0．029、0．030、0．031)。结论 应用纤维蛋白胶粘合修复周围神经损伤是一种较为有效的神经接合方法。     

大鼠神经端侧缝合的实验研究

目的：为进一步了解神经端侧缝合后再生的可能性。方法：用大鼠进行研究，实验分五组：Ａ组，将切断的腓神经远端与正常胫神经干行端侧缝合，保留缝合部胫神经外膜；Ｂ组，同Ａ组，缝合部胫神经外膜予以去除（“开窗”）；Ｃ组，将一神经移植段的两端分别与正常胫神经干和切断的腓神经远端神经干行“开窗”的端侧缝合；Ｄ组，将胫神经切断，近端与切断的腓神经远端神经干行“开窗”的端侧缝合。Ｅ组对照：仅切断腓神经。术后不同时期分别行电生理、组织学、神经纤维计数等检查。结果：鼠神经端侧缝合后腓神经远端有不同数量的有髓神经纤维再生。结论：动物鼠类神经端侧缝合能够再生     

Both stump area and volume of distal sensory nerve segments influence the regeneration of sensory axons in rats.

We examined the influence of both stump area and volume of a distal sensory nerve segment on neurotropic induction of regenerating sensory axons in a rat saphenous nerve model. In group 1 (n = 10) the proximal stump of the severed saphenous nerve was inserted into the proximal channel, and a 2 cm free nerve segment and a double-barrelled 1 cm free nerve segment were inserted into the distal two channels of a silicone Y-chamber. In group 2 (n = 10), 2 cm and 1 cm free nerve segments were inserted into the distal two channels of a Y-chamber. The gap between the stumps was set at 4 mm. After six weeks, we counted and compared the number of regenerated myelinated sensory axons in the distal two channels. Significantly more axons regenerated in the wider stump area channel of group 1 and in the larger volume channel of group 2 than in the opposite channel in either group (p < 0.05 in each case).     

Use of the turnover epineurial sheath tube for repair of peripheral nerve gaps

Autologous nerve grafting is the conventional technique for bridging nerve gaps, despite its various disadvantages. In this study, the authors investigated the effects of the turnover epineurial sheath tube (TEST) as an alternative to nerve grafting for the repair of nerve gaps, using a rat sciatic nerve model in four groups: Group 1 (n = 5): sham control; Group 2 (n = 10): segmental nerve resection + no repair; Group 3 (n = 10): segmental nerve resection + nerve grafting; Group 4 (n = 15): segmental nerve resection + TEST. Functional recovery was evaluated by walking-track analysis. The sciatic nerves and gastrocnemius muscles were harvested for histologic and quantitative histomorphometric evaluation at 12 weeks. Sciatic functional indices and histomorphometric analyses revealed statistically significant differences between the sham control and the three experimental groups (p < 0.001). The difference between the TEST group and the nerve graft group was not significant; however functional recovery was significantly improved in these two groups, compared to the non-repaired group (p < 0.05). The authors suggest that the TEST provides a suitable conduit between two stumps, eliminates donor-site morbidity, reduces the number of suture sites, fibrosis, and operating time, and might be an alternative to nerve grafting for nerve gap repair.     

COMPARISON OF THE NEUROTROPIC EFFECTS OF MOTOR AND SENSORY SCHWANN CELLS DURING REGENERATION OF PERIPHERAL NERVES

We examined the inductive ability of motor and sensory Schwann cells on regeneration of motor and sensory axons using a silastic Y chamber, and Lewis rats L5 ventral root (motor) and saphenous nerve (sensory). We developed four experimental models: motor-motor nerve group-proximal motor stump with distal fresh and frozen/thawed motor nerve segments (n = 7); sensory-sensory nerve group-proximal sensory stump with distal fresh and frozen/thawed sensory nerve segments (n = 7); motor-sensory nerve group-proximal motor stump with distal fresh and frozen/thawed sensory segments (n = 8); and sensory-motor nerve group-proximal sensory stump with distal fresh and frozen/thawed motor segments (n = 8). The gap was set at 4 mm. Six weeks postoperatively we compared the number of regenerated myelinated axons in the two distal channels, and found that sensory Schwann cells have a strong inductive ability for regeneration of both sensory and motor axons. Motor Schwann cells have weak inductive ability for regeneration of motor axons and no inductive ability for regeneration of sensory axons.