硫氧还蛋白-1在急性坏死性胰腺炎大鼠肺组织中的表达及褪黑素干预的影响

目的:探讨内源性硫氧还蛋白-1(Trx-1)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型肺组织中的表达:观察褪黑素对ANP胰和肺脏的保护作用和对肺组织Trx-1表达的影响.方法:将72只SD大鼠随机分成对照组(C组,n=24)、急性胰腺炎组(A组,n=24)、褪黑素前干预组(M组,n=24).A组用6%的左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)腹腔内注射,每次25 mL/kg体质量,共3次,注射间隔1 h,诱导ANP模型,在首次注射L-Arg前30 min腹腔注射生理盐水20mL/kg体质量1次;C组同法注射相当于A组各次注射用量的等容积生理盐水:M组在诱导胰腺炎前30 min腹腔内注射0.25%褪黑素(20mL/kg体质量)干预.在注射完L-Arg后的6、12、24 h三个时点分批处死大鼠.应用免疫组织化学技术检测各组ANP肺组织Trx-1的表达.并观察各组对应各时点胰腺、肺组织病理学和肺免疫组织化学的改变;抽取动脉血测定Trx-1和淀粉酶.结果:A组大鼠胰腺和肺组织病理损伤在6、12、24 h时点比C组明显加重(均P＜0.01);M组胰腺和肺组织病理损伤在6、12、24 h时点较A组明显减轻(P＜0.01或0.05).A组、M组肺组织表达Trx.1量在6、12、24 h时点较C组显著升高(均P<0.01).在24 h,A组血清淀粉酶较C组显著升高(4 598 U/L±2 274 U/L vs2 033U/L±863 U/L,P＜0.01);M组较A组低(3 990U/L±1 146 U/L vs 4 598 U/L±2 274 U/L,P＜0.05).A组大鼠血清Trx-1含量在6、12 h时点显著降低,24 h时点显著升高,呈前低后高趋势;与A组比较,M组血清Trx-1在6、12 h时点显著升高,24 h时点显著降低,量的峰值前移.结论:Trx-1在ANP肺损伤组织中的过度表达与急性胰腺炎相关性肺损伤关系密切.褪黑素影响Trx-1表达,并可能在一定程度上减轻ANP的胰、肺组织损伤.     

硫氧还蛋白-1 在急性坏死性胰腺炎大鼠中的表达及褪黑素对其的影响

目的 观察硫氧还蛋白-1(TRX-1)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺组织的表达和褪黑素干预对其的影响.方法 72只雄性SD大鼠随机分成ANP组、褪黑素组和对照组,每组24只.以腹腔注射6%L-Arginine 25 mL/kg体重3次、每次间隔1 h的方法制备ANP模型.褪黑素组在制模前30min腹腔注射0.25%褪黑素20 ml/kg体重;ANP组和对照组大鼠腹腔注射等容积生理盐水.术后6、12、24 h分批处死大鼠.抽血测定血清淀粉酶含量;取胰腺组织行病理学检查,并评分;检测胰腺组织丙二醛(MDA)、髓过氧化酶(MPO)含量;免疫组化检测胰腺组织TRX-1蛋白表达;RT-PCR检测胰腺组织TRX-1 mRNA的表达.结果 ANP组12 h点血清淀粉酶、胰腺组织MDA和MPO以及TRX-1 mRNA和蛋白表达水平分别为(3 012±1 425)u/L、(4.13±1.85)nmol/mg prot、(7.45±1.26)nmol/mg prot、0.68±0.18、66.8±8.1;褪黑素组分别为(1 835±499)U/L、(3.03±2.12)nmol/mg prot、(5.32±1.06)nmml//mgprot、0.50±0.09、80.29±8.14,两组比较均有显著差异(P<0.05).褪黑素组胰腺TRX-1 mRNA和蛋白表达峰值从ANP组的制模后12 h提前到制模后6 h.结论 ANP大鼠胰腺组织TRX-1 mRNA和蛋白表达增高;褪黑素干预能促进胰腺组织早期表达TRX-1 mRNA和蛋白,减轻胰腺组织的损伤.     

替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白与硫氧还蛋白相互作用蛋白表达的影响

目的探讨替米沙坦对糖尿病大鼠胰岛硫氧还蛋白（TRX）与硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达的影响。方法SD大鼠分为正常对照（NC）、糖尿病（DM）和替米沙坦干预（TM）组。DM组和TM组大鼠高脂高糖喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（30mg／kg）构建2型糖尿病（T2DM）模型,TM组予替米沙坦10mg·kg^-1·d^-1干预,8周后测定血浆生化指标、胰岛中胰岛素、TRX和TXNIP的表达。结果DM组和TM组空腹血糖、丙二醛以及胰岛中TXNIP水平均较NC组高（P〈0．05）,TM组血糖与DM组差异无统计学意义,但TM组上述其余指标水平较DM组低（P〈0．05）;DM组和TM组空腹胰岛素、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及胰岛中胰岛素和TRX水平低于NC组（P〈0．05）,但TM组高于DM组（P〈O．05）。结论T2DM大鼠胰岛TRX表达较正常大鼠降低,而TX—NIP升高;氧化应激水平和低胰岛素血症的改善可能与替米沙坦干预了这种变化有关。     

硫氧还蛋白-1在胰腺炎时的表达及其作用

硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)是一种广泛分布的氧化还原蛋白,通过二硫化物活性中心可逆地催化许多氧化还原反应,具有抗氧化和抗炎作用.胰腺炎的病程存在着氧化应激和炎性细胞浸润,Trx-1作为一种内生的抗氧化剂,通过直接清除活性氧发挥抗氧化作用,通过减少致炎细胞因子的表达,发挥间接抗炎、抗氧化作用.重组Trx-1能抑制中性粒细胞浸润,减轻胰腺和肺的炎症,可作为一种新的治疗急性胰腺炎的策略.     

应激对大鼠心肌硫氧还蛋白还原酶表达的影响

目的 探讨硫氧还蛋白还原酶在大鼠心肌抗氧化应激反应中的作用。方法 将Wistar大鼠冰泳5min，采用Northern blot和Western blot检测大鼠冰泳前后心肌硫氧还蛋白还原酶的表达情况。结果 应激后大鼠心肌中硫氧还蛋白还原酶的基因和蛋白表达均增加。结论 硫氧还蛋白还原酶增加有利于大鼠心肌对应激损伤的预防与修复。     

硫氧还蛋白结合蛋白-2与肿瘤的关系

尽管目前研究肿瘤的报导很多,肿瘤发病的分子机制仍不清楚.硫氧还蛋白结合蛋白-2(TRX-binding protein-2,TBP-2)又被称为维生素D3上调蛋白1(Vitamin D3 up-regulated protein1,VDUP1)或硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,Txnip),它与硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)的活性部位结合,抑制其活性,除了参与多种氧化应激反应,还具有多种生物学功能.最近的研究显示:TBP-2与肿瘤密切相关,有些肿瘤组织中,TBP-2表达降低或缺失.TBP-2表达增高时,细胞周期停滞,肿瘤细胞繁殖受到抑制.因此,它已成为近年肿瘤研究的重要靶点.     

重组人硫氧还蛋白对小鼠病毒性心肌炎的保护作用

目的 观察重组人硫氧还蛋白(TRX)对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用.方法 给予Balb/c小鼠腹腔注射0.1 ml 100TCID50(50%细胞感染率)的柯萨奇B3m病毒(CVB3m),建立病毒性心肌炎模型,同时给予尾静脉注射2 mg/kg的重组人TRX加以保护,对照组给予等量的生理盐水,7 d后处死动物,检测血清乳酸脱氢酶(LDH) 活性,采用光镜观察心肌组织损伤情况.结果 病毒感染组小鼠血清LDH活性[(313030±390.57)U/L)]明显高于对照组[(1617.86±155.42)U/L]和TRX保护组[(1959.43±540.75)U/L],两两比较差异有统计学意义(P<0.05);TBX保护组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05).光镜结果显示,病毒感染组8只小鼠有5只检出心肌病变,小鼠心脏病理切片可见局灶性心肌坏死和炎细胞浸润;而TRX保护组小鼠未出现心肌损伤.结论 重组人TBX可以减轻CVB3m病毒感染导致的心肌损伤,起到心肌保护作用.     

普罗布考对2型糖尿病大鼠肾脏硫氧还蛋白系统表达的影响

目的 观察硫氧还蛋白系统在2型糖尿病大鼠肾脏组织的表达及早期普罗布考干预对硫氧还蛋白系统表达的影响.方法 将30只雄性SD大鼠分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)、糖尿病普罗布考治疗组(P组),普罗布考干预8周后,通过免疫组化、RT-PCR、Western免疫印迹技术观察普罗布考对硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)及硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,Txnip)表达的影响,并检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、胰岛素、肾功能、丙二醛、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的含量.结果 P组与C组比较,Trx表达明显降低(0.162±0.008对0.239±0.006,P＜0.05),Txnip表达明显升高(0.159±0.003对0.091±0.016,P＜0.05).P组与D组比较,Trx表达升高(0.162±0.008对0.108±0.013,P＜0.05),Txnip表达降低(0.159±0.003对0.236±0.009,P＜0.05).与C组比较,D组大鼠氧化应激指标升高、肾功能受损、抗氧化酶降低,而P组大鼠上述指标(除FPG外)有所改善(P＜0.05).结论 普罗布考通过部分恢复Trx功能,降低Txnip表达,减少氧化应激,发挥对2型糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用.

Abstract：

Objective To observe the expression of thioredoxin (Trx) and thioredoxin-interacting protein (Txnip) in the kidney of type 2 diabetic rats induced by streptozotocin and the effect of probucol treatment on thioredoxin system. Methods Thirty male SD rats were divided into control group( C, n = 10), diabetes group ( D, n =10), and probucol treated diabetic group ( P, n = 10). After eight weeks of probucol treatment, the expressions of Trx and Txnip in the kidney of three groups were measured by RT-PCR, Western blot, and immunohistochemistry. Body weight,24 h microalbuminuria( ALB), fasting plasma glucose( FPG), fasting insulin( HNS), blood urea nitrogen (BUN), creatinine (Cr), malondialdehyde ( MDA ), superoxide dismutase ( SOD ), and catalase (CAT) were determined. Results Compared with group C, Trx was markedly decreased in group P (0. 162 ±0. 008 vs 0. 239 ±0. 006, P＜0.05 ), while Txnip was significantly increased (0. 159±0.003 vs 0. 091 ±0.016, P＜0.05 ). Trx in group P was increased as compared with group D (0. 162 ±0. 008 vs 0. 108 ± 0. 013, P ＜ 0. 05 ), while Txnip was lowered (0. 159±0.003 vs 0. 236±0.009 ,P＜0.05 ). FPG, 24 h ALB, BUN, Cr,and MDA levels in group D were markedly increased as compared with group C (P＜0. 05), while the activity of SOD, CAT, and FINS levels were decreased apparently (P＜0.05). The above markers except for FPG in group P were ameliorated (P＜0. 05 ).Conclusions Probucol attenuated oxidative stress by means of partially restoring Trx function and reducing Txnip expression, and thus played a major role in renoprotection of type 2 diabetic nephropathy.     

细胞外硫氧还蛋白的作用

硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)是具有多种生物学功能的一种小分子蛋白质.它和硫氧还蛋白还原酶及NADPH组成硫氧还蛋白系统,具有抗氧化、促细胞生长、抗细胞凋亡和调节转录因子活性作用.近年研究发现,Trx可以分泌到细胞外,而胞外Trx与许多疾病有关.胞外Trx抑制中性粒细胞到炎症反应部位,抑制促炎因子的表达释放.因此,胞外Trx即可作为一些疾病的标志,同时又具有重要的免疫调节作用.     

硫氧还蛋白-2在急性坏死性胰腺炎大鼠肺的表达及意义

硫氧还蛋白-2（thioredoxin-2,Trx-2）是存在于细胞线粒体的一种氧化还原蛋白,研究显示TⅨ-2在阻止线粒体氧化应激方面较Trx-1更具重要作用[1].为此,本研究检测Trx-2在急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肺的表达,探讨TⅨ-2在对抗肺氧化应激方面的作用.     

硫氧还蛋白对缺氧/复氧人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的 探讨硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)对缺氧/复氧损伤内皮细胞(ECV)的保护作用.方法 对体外培养的内皮细胞株ECV304(缺氧/复氧组)及TRX修饰的ECV304(TRX组)进行缺氧/复氧实验,另一组ECV304细胞不作缺氧/复氧作为正常对照组,检测复氧不同时间点细胞培养上清液中丙二醛(MDA)、内皮素-1(ET-1)及一氧化氮(NO)的含量变化.结果 正常对照(ECV304组),细胞内的MDA、ET-1及NO含量在24 h内变化不大;转染空载体的ECV304细胞在缺氧3h时,MDA、ET-1含量显著增加,复氧12 h时,MDA、ET-1含量达到最高,然后缓慢下降;ECV304/Trx组与转染空载体组相比,在3h及12时,MDA含量极显著下降(P＜0.01),而在24 h MDA水平显著下降(P＜0.05).ET-1水平在复氧的各时间点均比有下降,在复氧24 h下降最明显(P＜0.01);转染空载体的ECV304细胞在缺氧3h时,NO含量显著下降,复氧12 h时,NO含量下降到最低,然后缓慢上升;ECV304/Trx组与转染空载体组相比,在3h及12时,NO含量极显著上升(P＜0.01),在12 h NO水平最高.ECV304/TRX组与正常对照组相比,在12 h时,有显著差异.结论 TRX能抑制缺氧/复氧对ECV的损伤,对缺氧/复氧环境下的ECV起保护作用.     

硫氧还蛋白、硫氧还蛋白相互作用蛋白与消化系疾病的关系

硫氧还蛋白系统是一类具有氧化还原活性的小分子蛋白系统,由硫氧还蛋白(TRX)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和硫氧还蛋白还原酶(TRX-R)3部分组成,具有调节细胞氧化还原状态、对抗氧化应激、激活转录因子促进细胞生长以及抑制细胞凋亡等作用.硫氧还蛋白相互作用蛋白\硫氧还蛋白结合蛋白2\维生素D3上调蛋白1(TXNIP\TBP-2\VDUP-1)属于硫氧还蛋白结合蛋白的家族成员,通过抑制硫氧还蛋白系统的功能而发挥介导氧化应激、抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡等作用,是TRX的负性调节因子.氧化应激与细胞凋亡参与了许多消化系疾病的发生发展.TRX与TXNIP作为氧化应激相关因子,可能在消化性疾病中发挥一定的作用.本文就TRX及TXNIP的结构特点、生物学功能以及与消化系疾病的关系等方面作一综述.     

硫氧还蛋白对缺血再灌注保护机制研究进展

硫氧还蛋白与缺血再灌注相互作用:心肌缺血再灌注下调硫氧还蛋白表达并抑制其活性.硫氧还蛋白在细胞质、线粒体、细胞核及细胞外作用,平衡氧化还原状态、抗凋亡、抗炎、保护心肌细胞.     

应激对大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶表达的影响

目的探讨线粒体型硫氧还蛋白还原酶（mitochondrial thioredoxin reductase，TR2）在大鼠心肌抗氧化应激反应中的作用。方法将Wistar雄性大鼠分成非应激组和应激组，应激组大鼠在处死前一天在冰水浴中泳动5min，采用Northern blot和Western blot检测大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶和蛋白的表达。结果应激组大鼠心肌中线粒体型硫氧还蛋白还原酶基因和蛋白表达均高于非应激组。结论线粒体型硫氧还蛋白还原酶基因和蛋白表达的增加有利于大鼠心肌抗氧化损伤。     

硫氧还蛋白和硫氧还蛋白相互作用蛋白与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,临床上一旦发生,肾脏损害常呈不可逆进展,透析病人中DN患者占20%~40%[1],故DN的早期诊断及治疗对于改善患者生活质量及预后具有重要的临床意义.     

人硫氧还蛋白对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨人硫氧还蛋白（hTrx）对肺缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及可能机制。方法将健康清洁级Wistar大鼠84只随机分为对照组12只、I/R组和Trx组各36只,后两组复制I/R肺损伤模型,Trx组于缺血前10 min和再灌注前10 min腹腔注射重组hTrx注射液0.75 mg/kg。于再灌注1、3、5 h分别取三组肺组织检测超氧化物歧化酶（SOD）活性,丙二醛（MDA）含量;原位缺口末端标记（TUNEL）法测定细胞凋亡指数（AI）;原位杂交法检测Caspase-3 mRNA表达。结果 I/R组各时点MDA含量、细胞AI和Caspase-3 mRNA表达均显著高于对照组（P均〈0.01）,而SOD活性则随再灌注时间延长有所降低;Trx组MDA含量、AI、Caspase-3 mRNA表达均显著低于I/R组（P均〈0.01）。AI与MDA、Caspase-3 mRNA呈显著正相关（r分别为0.844,0.775,P均〈0.01）;与SOD呈显著负相关（r为-0.820,P〈0.01）。结论 Trx对I/R后肺组织细胞凋亡具有抑制作用;其机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化、下调Caspase-3 mRNA表达有关。     

硫氧还蛋白系统在骨质疏松症中的作用

越来越多的研究表明氧化应激与骨质疏松症的发生密切相关,而硫氧还蛋白(Trx)系统其中一个重要作用就是参与调节细胞氧化还原状态以对抗氧化应激,其是由Trx、硫氧还蛋白还原酶(TrxR)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)以及硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)组成的多功能小分子蛋白系统,因此在骨质疏松症的发生发展中扮有重要角色。本文综述了硫氧还蛋白系统和骨质疏松症之间的联系。     

人硫氧还蛋白真核载体的构建及表达

目的构建人硫氧还蛋白基因的重组真核表达载体。方法人硫氧还蛋白的cDNA克隆至pGEM-TEasy载体,经DNA测序证明后,将其克隆至真核表达载体pShttle构建重组pShttle-hTRX,pShttle-hTRX转染Hela细胞系进行瞬时表达,通过Westernblot、免疫组化、活性测定、酶切、PCR扩增等方法证实构建载体的正确性。结果构建携带人硫氧还蛋白基因的真核表达载体pShttle-hTRX,转染HeLa细胞后可检测到hTRX的转录和表达。结论正确构建了携带人硫氧还蛋白基因的真核表达载体,本结果可用于探讨硫氧还蛋白的生物学作用。     

刚地弓形虫硫氧还蛋白基因的克隆 表达及鉴定

目的 目的 克隆刚地弓形虫硫氧还蛋白 （Thioredoxin,Trx） 基因, 构建原核表达载体, 通过诱导表达和纯化蛋白, 免 疫家兔制备多克隆抗体。方法 方法 采用PCR技术扩增刚地弓形虫Trx基因, 克隆至原核表达载体pET?28a （+） 中, 转化大肠 埃希菌 （E. coli） Rosetta, 用IPTG诱导目的蛋白表达, 采用镍亲和层析法获得纯化蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体。利用 Western blotting技术鉴定多克隆抗体的特异性。结果 结果 成功从刚地弓形虫 cDNA 中扩增出 Trx 目的基因, 构建了 Trx/pET?28a （+） 重组质粒, 获得抗Trx重组蛋白的多克隆抗体。Western blotting技术检测出弓形虫Trx蛋白的特异性条 带。结论 结论 用制备的兔抗Trx多克隆抗体能检测弓形虫Trx在速殖子内的表达, 为进一步深入研究刚地弓形虫Trx功能 奠定了基础。     

硫氧还蛋白和硫氧还蛋白相互作用蛋白与糖尿病及其并发症关系的研究进展

硫氧还蛋白系统是由硫氧还蛋白、NADPH和硫氧还蛋白还原酶三部分组成的氧化还原敏感的多功能小分子蛋白系统。硫氧还蛋白系统在细胞内外行使着多种功能,如调节细胞氧化还原状态以对抗氧化应激,激活转录因子如NF-κB和AP-1促生长,以及与ASK-1作用抑制细胞凋亡等。硫氧还蛋白相互作用蛋白\硫氧还蛋白结合蛋白2\维生素D3上调蛋白1为硫氧还蛋白结合蛋白之一,是硫氧还蛋白功能和表达的一种负性调节因子,通过抑制硫氧还蛋白系统功能而发挥介导氧化应激、诱导细胞凋亡及对抗细胞增殖等作用。高糖可以通过相互作用蛋白启动子上的CREs(碳水化合物反应元件)刺激硫氧还蛋白相互作用蛋白的产生而抑制硫氧还蛋白,进而促进氧化应激,损伤胰岛B细胞;诱导B细胞凋亡增加,促进糖尿病及其并发症的发生。因此,硫氧还蛋白相互作用蛋白或许在糖毒性和B细胞凋亡、糖尿病及其并发症之间起着重要作用。