喉癌肿瘤组织HIF-1α与COX-2蛋白和mRNA的表达及意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白质和mRNA的表达,以期有助于喉鳞状细胞癌发生、发展和转移机制的进一步阐明。方法:用免疫组织化学和RT-PCR方法检测76例喉鳞状细胞癌组织和9例癌旁正常组织中HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达,并按T分期、病理分级分别探讨HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达与各临床病理参数的关系。结果:①HIF-1α、COX-2蛋白表达在喉癌标本的表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05),随T分期的增加而增高;中、低分化的喉癌组织中HIF-1α表达显著高于高分化喉癌;COX-2蛋白表达与病理分级无关。②HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率分别是67.11%和75.00%,明显高于癌旁正常组织(P<0.05),癌旁正常组织未检测到COX-2mRNA表达。HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率与T分期有关(P<0.05),标本的表达量随T分期的增加而增高,但是与病理分级无关(P>0.05)。③HIF-1α蛋白表达阳性病例中,COX-2的阳性率为78.72%。结论:HIF-1α与COX-2在喉鳞状细胞癌组织的表达增高并密切相关,可能是喉癌发生发展的原因之一。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

程序性细胞死亡因子5在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨程序性细胞死亡因子5（PDCD5）在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理指标的相关性。方法 采用逆转录多聚酶链式反应（RT PCR）技术和Western blot免疫印记技术检测41例喉鳞状细胞癌及29例癌旁正常黏膜组织中PDCD5mRNA和蛋白的表达情况,进一步应用免疫组化方法验证其在喉鳞状细胞癌组织中的定位表达。结果 PDCD5 mRNA喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.006）;Western blot结果显示PDCD5 蛋白在喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.012）。肿瘤组织中PDCD5 mRNA表达缺失与PDCD5蛋白表达缺失之间存在明显的相关性（Pearson r= 0.695, P<0.01）。免疫组化进一步证实PDCD5在肿瘤组织中的高频率缺失。χ2检验分析发现PDCD5蛋白表达缺失与喉鳞状细胞癌患者的年龄、性别、肿瘤原发部位和有无淋巴结转移无相关性,但是与肿瘤TNM分期以及组织学分级之间相关(mRNA P=0.032, P=0.021;蛋白 P=0.027, P=0.016)。结论 PDCD5在喉癌中多呈低表达,在喉鳞状细胞癌的发生、发展过程中可能起重要作用。     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

E-cadherin and Smad4在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨E-cadherin（E-钙黏蛋白）、Smad4（家族成员4）在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法分析E-cadherin、Smad4在喉鳞状细胞癌和癌旁正常黏膜中的表达情况,并结合临床病理参数分析两者的临床意义。结果 E-cadherin蛋白和Smad4蛋白在喉鳞癌组织的表达明显低于癌旁正常喉黏膜组织（P〈0.01）。E-cadherin、Smad4表达的改变与喉鳞癌淋巴结转移有关,同时E-cadherin表达变化与喉鳞癌分化程度有关（P〈0.01）;E-cadherin、Smad4在喉癌中低表达呈正相关趋势（P〈0.05）。结论 E-cadherin、Smad4蛋白的低表达可促进喉癌的发生、发展,可能在喉癌分化、浸润、转移的过程中发挥重要作用。     

高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

抑癌基因CX26在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:观察抑癌基因CX26的mRNA和蛋白质在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CX26基因与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系,及其与喉鳞状细胞癌发生和发展的分子机制。方法:38例喉鳞状细胞癌患者,每例患者均同时在喉癌切除手术时从喉癌肿瘤组织中心部位取癌组织(喉癌组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取喉癌旁组织(对照组),分别采用半定量RT-PCR检测CX26mRNA的表达水平,冷冻切片免疫组织化学方法检测CX26蛋白的表达情况。结果:RT-PCR结果显示,CX26mRNA在喉癌组和对照组中均呈阳性表达;经半定量分析,CX26mRNA在喉癌组中的表达较对照组明显降低(P<0.05);免疫组织化学发现,CX26蛋白在18例(47.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在34例(89.5%)患者的喉癌旁组织呈强阳性表达,CX26蛋白在两者中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),并且伴有细胞内定位的改变;同时发现,CX26蛋白阳性表达率和CX26基因mRNA的表达水平在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显低于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),有颈淋巴结转移者明显低于无转移者(P<0.05),并且其表达水平随病理分化程度的降低而降低(P<0.05)。结论:CX26与喉癌的发生和发展关系密切,并可能与喉癌的预后有关。     

c-Cbl在喉癌中的表达及临床意义CSCD

目的探讨c-Cbl在喉癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化(SP)法检测40例喉癌组织、15例癌旁组织和8例喉正常黏膜组织中c-Cbl蛋白的表达情况。应用流式细胞术定量检测40例喉癌组织、13例癌旁组织和5例喉正常黏膜组织中c-Cbl的含量。结果免疫组化示喉癌组织、癌旁组织及喉正常黏膜组织中c-Cbl的表达强度呈下降趋势,3组相比有显著性差异。应用流式细胞术检测c-Cbl蛋白在喉癌组织、癌旁组织及喉正常黏膜组织中的表达量分别为1.8424±0.1814、1.6350±0.3889、1.1026±0.0181,3组相比有显著性差异。在喉癌组织中c-Cbl蛋白表达与其病理分级有关。结论 c-Cbl蛋白与喉癌的发生发展有关。     

MMP-2和MMP-9及胃蛋白酶对喉鳞状细胞癌侵袭作用的机制研究

目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及胃蛋白酶(Pepsin)对喉鳞状细胞癌局部侵袭的作用。方法收集2020年10月—2022年3月柳州市人民医院耳鼻咽喉科住院手术并经病理确诊的32例喉鳞状细胞癌患者的癌组织及其癌旁组织新鲜标本,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测MMP-2、MMP-9及Pepsin mRNA在上述组织标本中的表达情况,结合临床资料分析。结果喉癌组织中MMP-2、MMP-9及Pepsin mRNA表达高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P＜0.05);Ⅲ、Ⅳ期组表达水平高于Ⅰ、Ⅱ期组(P＜0.05),淋巴结转移组高于无转移组(P＜0.05);MMP-2、MMP-9 mRNA在中-低分化鳞状细胞癌组的表达高于高分化组(P＜0.05);Pepsin mRNA在60岁及以上喉癌组中表达高于60岁以下组(P＜0.05)。结论MMP-2、MMP-9和Pepsin在喉鳞状细胞癌的局部侵袭过程中发挥协同促进作用,预防和治疗咽喉反流是防止喉癌局部侵袭的重要环节。     

喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体基因过表达的研究

目的：研究喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体（EGFR）基因的异常表达与喉鳞状细胞癌发生的相关性.方法：应用RT-PCR方法检测50例喉鳞状细胞癌患者组织标本和喉癌Hep-2细胞系中EGFR基因mRNA表达水平.结果：在60%（30/50）喉鳞状细胞癌及喉癌Hep-2细胞系中检测到EGFR基因的过表达.结论：EGFR基因的过表达与喉癌发生及发展有关.     

喉癌组织中程序性细胞死亡因子4的表达及临床意义

目的:探讨程序性细胞死亡因子4(PDCD4)基因在喉鳞状细胞癌中的表达情况及PDCD4蛋白表达水平与喉癌临床病理学特征的关系。方法:应用Westernblot检测8例喉鳞状细胞癌患者喉癌组织及癌旁正常鳞状上皮组织中PDCD4蛋白的表达水平。应用免疫组织化学SP法检测PDCD4蛋白在54例喉癌组织及部分癌旁正常组织中的表达情况及PDCD4蛋白在这些组织中的细胞定位,观察PDCD4蛋白表达情况与喉癌临床病理学参数之间的关系。结果:PDCD4蛋白在癌旁正常组织中呈高表达,在喉癌中呈低表达或缺失(P<0.05)。PDCD4蛋白在喉正常鳞状上皮细胞核、细胞质表达,在喉癌组织中呈细胞质表达甚至缺失。PDCD4蛋白表达水平在喉癌病理分级各组间不相等(P<0.05),肿瘤分化程度越高,PDCD4蛋白表达越高(P<0.05)。结论:PDCD4基因是抑癌基因,其表达和缺失与喉癌的发生、肿瘤细胞的分化有关,有望成为喉癌基因治疗的新靶点。     

喉鳞状细胞癌与原癌基因eIF4E的相关性研究

目的研究原癌基因eIF4E(真核细胞翻译起始因子4E)在喉鳞状细胞癌与喉良性病变中的表达,探讨eIF4E与喉鳞状细胞癌的相关性。方法取喉鳞状细胞癌组织标本蜡块40例,取声带息肉组织标本蜡块20例作为对照。采用免疫组化SP法,用eIF4E多克隆抗体检测eIF4E在喉癌组织和声带息肉组织中的表达,并进行统计学分析。结果喉鳞状细胞癌eIF4E的表达高于声带息肉组织中的表达(P<0.01)。eIF4E在喉鳞状细胞癌中的表达与喉癌患者的临床分期、病理分级及患者年龄无明显相关性(P>0.05)。结论原癌基因eIF4E在喉鳞状细胞癌中的表达高于声带息肉,而与喉癌组织的病理分级和临床分期及患者的年龄无相关性。     

蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的研究蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及其与喉鳞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR及免疫组化方法检测40例喉鳞癌组织与25例癌旁组织中CIP2A的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果与癌旁组织相比,CIP2A mRNA在喉鳞癌组织的表达量增加（Z=-3.182,P〈0.05）。CIP2A蛋白阳性表达定位于细胞膜与细胞质,癌组织与癌旁组织的阳性表达率分别为70.0%（28/40）和40.0%（10/25）,差异具有统计学意义（χ^2=5.70,P〈0.05）;CIP2A mRNA的表达水平和蛋白阳性表达率在III期和IV期喉癌组明显高于I期和II期病例组（Z=-2.610,χ2=5.560,P〈0.05）,有淋巴结转移组明显高于无转移组（Z=-3.346,χ^2=3.815,P〈0.05）。结论 CIP2A与喉鳞癌的发生及浸润转移密切相关,有望成为喉鳞癌治疗的靶点。     

KAI1基因在喉癌及转移淋巴结中的表达

目的 通过研究KAI1基因在人类喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的蛋白表达情况,试图阐明KAI1基因蛋白的表达与喉癌转移之间的关系。方法 取喉鳞状细胞癌组织标本蜡块40例及转移的淋巴结13例,以癌旁正常组织标本蜡块30例作为对照,采用免疫组织化学SP法,检测KAI1单克隆抗体在喉鳞状细胞癌、转移淋巴结及癌旁正常组织标本中蛋白的表达,并结合患者临床病理资料进行统计学分析。结果 KAI1基因在癌旁正常组织、喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的表达率分别为93.33%（28/30）、62.50%（25/40）、30.77%（4/13）,且各组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1基因的蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床分期差异有统计学意义（P＜0.05）,与性别、年龄、原发部位、病理学分级及有无淋巴结转移无关(P＞0.05)。 结论 KAI1基因在喉鳞状细胞癌转移淋巴结中的表达较在喉鳞状细胞癌中的表达呈显著性下降,该基因可能在喉癌转移过程中起一定作用。     

喉癌组织中血管内皮生长因子-C表达及淋巴管计数

目的研究喉鳞状细胞癌(简称喉癌)及其癌旁组织中(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)表达水平和淋巴管(lympha vessels,LV)计数,探讨两者的临床病理意义及相互关系.方法 41例喉癌和20例癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,VEGF-C和LV染色方法为EnVision<'TM>免疫组化法.结果喉癌VEGF-C表达阳性率和评分及LV计数明显高于癌旁组织(VEGF-C,56.1%对25.0%,χ<'2>=5.24,P<0.05;2.72±1.61 对 1.14±1.28,t=3.85,P<0.01.LV:12.44±5.78 对 6.82±4.33,t=3.82,P<0.01);组织学分级Ⅰ级、临床分型T1和无转移喉癌VEGF-C表达阳性率和评分及LV计数均明显低于组织学分级Ⅲ级,临床分型T3和转移病例(P<0.05或P<0.01).VEGF-C表达阳性喉癌LV计数(14.82±5.25)明显高于阴性病例(9.12±6.32,P<0.01),其评分值与LV计数呈高度密切正相关(r=0.47,P<0.01).结论 VEGF-C表达和LV计数均为反映喉癌进展、生物学行为和预后的重要生物学指标,VEGF-C具有明显的促喉癌LV生成作用.     

基因芯片筛选喉鳞状上皮细胞癌相关基因的实验研究

目的:进行喉鳞状上皮细胞癌相关基因的验证研究,为喉鳞状上皮细胞癌相关基因的进一步研究打下基础。方法:在基因芯片筛选结果中挑出部分基因(SENP1、CD109、Lamininα2、Lamininα3),应用RT-PCR、Western blot进一步检测这些基因在12例喉鳞状上皮细胞癌及其癌旁正常组织中mRNA和蛋白水平的表达。结果:RT-PCR结果显示SENP1、CD109、Lamininα3基因在喉鳞状上皮细胞癌组织中表达上调,Lamininα2基因表达下调。Westernblot结果显示SENP1、CD109蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达明显高于对应的癌旁正常组织。结论:SENP1、CD109、Lamininα2、Lamininα3可能与喉鳞状上皮细胞癌的发生、发展相关,这对从分子水平研究喉癌的发病机制提供了有益的线索。     

Beclin1在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨自噬相关基因Beclin1在喉鳞状细胞癌(简称喉癌)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Beclin1蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉组织中的表达情况,RT-PCR方法检测41喉癌组织、41癌旁组织和11例声带息肉组织中Beclin1 mRNA...     

微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况.采用RT-PCR法检测LC3 mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%.LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P＜0.01).RT-PCR检测结果显示LC3 mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P＜0.01).LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关.     

Survivin在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及意义

目的 探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及其意义。方法 应用免疫组化对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织、20例喉乳头状瘤、28例喉黏膜白斑和16例正常喉黏膜中Survivin的表达情况进行检测。结果 Survivin蛋白在喉癌组织和癌旁组织、喉黏膜白斑及喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71．74％（33／46）、33．33％（8／24）、46．43％（13／28）；40％（8／20），在正常黏膜组织中无表达。喉癌组中的阳性表达率显著高于癌旁组织、喉黏膜白斑、喉乳头状瘤及正常黏膜组织中的表达率。且喉乳头状瘤组及喉黏膜白斑组中发生恶变的组织中Survivin蛋白均为阳性表达。Survivin蛋白的阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级无关。结论 Survivin在喉癌组织中过度表达参与了喉癌的形成，对喉癌的癌前病变发展成恶性肿瘤的潜在可能性有预测作用。     

喉鳞状细胞癌中的C-Met与VEGF-D蛋白表达及其意义

目的 观察喉鳞状细胞癌组织中C-Met和VEGF-D蛋白的表达活性及其临床病理意义.方法 喉鳞癌42例,声带息肉20例,均取其石蜡包埋标本,应用免疫组织化学S-P法检测其中的C-Met和VEGF-D蛋白表达活性,并分析其表达水平的临床病理学意义.结果 声带息肉标本C-Met蛋白平均OD为4.68±1.98,喉癌组织为11.68±4.20,组间差异有统计学意义(P<0.05),且阳性表达水平与临床分期、病理分级及颈淋巴结转移显著相关(P<0.05).同时,VEGF-D表达水平又与C-Met表达水平显著相关(P<0.001).结论 喉癌组织中C-Met与VEGF-D表达活性与喉癌发生发展及转移有密切关系,可以作为喉癌预后判断的参考因素.