热休克蛋白70对肝硬化门静脉高压性胃病大鼠胃黏膜损伤的保护作用

背景:临床上重度门静脉高压性胃病(PHG)常可引起上消化道致命性大出血。热休克蛋白70(HSP70)是加强胃黏膜防御功能的主要热休克蛋白。目的:探讨HSP70对肝硬化PHG大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法:以CCl_4制备肝硬化PHG大鼠模型,实验分为正常对照组、PHG组和三组热处理组。以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测胃黏膜HSP70和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,并观察胃黏膜病理变化。结果:与正常对照大鼠相比,PHG大鼠胃黏膜HSP70水平明显降低而TNF-α水平明显升高,胃黏膜出现明显病理损伤;热处理组正常大鼠胃黏膜HSP70水平明显升高,TNF-α水平无变化,胃黏膜无明显损伤。与PHG大鼠相比,热处理组PHG大鼠胃黏膜HSP70水平明显升高,TNF-α水平明显降低,胃黏膜损伤明显减轻。结论:HSP70能减轻肝硬化PHG大鼠胃黏膜损伤,其保护作用可能与胃黏膜TNF-α水平降低有关。     

热休克蛋白70对大鼠脊髓损伤后凋亡的影响

热休克预处理能减轻脊髓损伤后的凋亡,其机理可能同热休克蛋白70合成增加,并进一步抑制NF-κB的表达有关。     

黄芪、三七及其配伍对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜热休克蛋白70基因表达的影响

目的:阐明黄芪、三七及其配伍对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜热休克蛋白70基因表达的影响.方法:健康、清洁级♂Wistar大鼠64只,随机分为空白组9只、假手术组10只,模型组9只,替普瑞酮组9只,黄芪组9只,三七组9只,黄芪+三七组9只.运用幽门弹簧配合高盐热淀粉糊灌胃法制备萎缩性胃炎模型,治疗期共1mo,治疗期间空白组、假手术组、模型组予生理盐水2mL/d灌胃;黄芪组予黄芪水煎剂3.5g/(kg.d)灌胃;三七组予三七粉冲剂0.7g/(kg.d)灌胃;黄芪+三七组予黄芪三七溶液灌胃[其中黄芪3.5g/(kg.d),三七0.7g/(kg.d)];替普瑞酮组治疗期予200mg/(kg.d),治疗结束后,各组取3只,实时定量PCR法测定各组大鼠胃黏膜中Hsp70 mRNA表达量,Western blot法测定Hsp70/Hsp72蛋白表达量,余大鼠HE法观察胃黏膜病理变化.结果:模型组与假手术组相比,其胃黏膜体积构成比明显下降(P<0.01);替普瑞酮组较模型组胃黏膜体积构成比明显升高(P<0.01),黄芪组、三七组和黄芪+三七组与模型组相比,可以明显提高胃黏膜体积构成比(P<0.01),与替普瑞酮比较,差异无统计学差异(P>0.05),黄芪组、三七组、黄芪+三七组之间亦没有统计学差异(P>0.05).黄芪组、三七组胃黏膜中Hsp70 mRNA表达与模型组比较显著升高(P<0.01).各组Hsp70/72蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论:黄芪、三七及其配伍可以明显改善萎缩性胃炎大鼠胃黏膜的萎缩状态.诱导热休克蛋白70基因表达可能是黄芪、三七治疗萎缩性胃炎的作用机制之一.     

艾灸足三里和梁门穴诱导热休克蛋白70抗大鼠胃黏膜氧化损伤作用

目的:观察艾灸足三里和梁门穴对应激性溃疡大鼠胃黏膜热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨艾灸足阳明经穴抗胃黏膜氧化损伤的作用机制.方法:将SD大鼠60只完全随机平均分为空白组、模型组、艾灸足三里等穴组和艾灸非穴对照点组,采用水浸-束缚应激法制备应激性溃疡模型.按Guth法计算胃黏膜损伤指数(UI),用激光多普勒血流仪测定胃黏膜血流量(GMBF),用免疫组织化学法和硫代巴比妥酸染色法对处理后大鼠检测其胃黏膜HSP70的表达和丙二醛(MDA)的含量.结果:与模型组和艾灸非穴组比较,艾灸足三里等穴可使应激性溃疡大鼠胃黏膜损伤指数明显下降(14.100±5.425vs26.800±9.807,26.200±7.729,P<0.01),HSP70表达上调(0.133±0.035vs0.077±0.057,0.059±0.038,P<0.01)、血流量增高(279.827±172.862mL/minvs139.489±33.133,141.512±58.450mL/min,P<0.05)、MDA含量减少(2.586±0.252μmol/Lvs3.906±0.768,3.464±1.502μmol/L,P<0.05).结论:艾灸足三里和梁门穴能诱导胃黏膜HSP70高表达并降低MDA含量,以达到其抗氧化损伤作用,并有相对的穴位特异性.     

热休克预处理对大鼠烧伤后急性胃黏膜损伤的保护作用

目的观察热休克预处理对严重烧伤大鼠胃黏膜的影响。方法热休克预处理诱导热休克蛋白产生,然后制作烧伤大鼠急性胃黏膜损伤模型,进行胃黏膜损伤指数评分。运用免疫组化方法,检测胃黏膜热休克蛋白的表达,并进行图像分析。结果热休克预处理组胃黏膜损伤积分显著低于对照组(P<0.01)。免疫组化分析显示其胃黏膜热休克蛋白表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论热休克预处理对烧伤大鼠胃黏膜具有保护作用,其保护机制可能与热休克蛋白诱导表达增强有关。     

银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤热休克蛋白70表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对大鼠缺血再灌注损伤热休克蛋白70表达的影响。方法42只大鼠随机分为3组:假手术组、单纯缺血再灌注组、缺血再灌注+银杏叶提取物组,每组14只。通过免疫组织化学方法和原位末端标记法(TUNEL)检测热休克蛋白70表达及凋亡细胞数,TTC染色观察梗死体积。结果3组均可检测到热休克蛋白70的表达,单纯缺血再灌注组热休克蛋白70的表达较假手术组增强(P<0.01),缺血再灌注+银杏叶提取物组较缺血再灌注组表达增强(P<0.05)。缺血再灌注+银杏叶提取物组梗死体积及凋亡细胞数明显少于缺血再灌注组(P<0.01)。结论银杏叶提取物可能通过上调缺血缺氧后热休克蛋白70的表达减少神经细胞凋亡。     

七方胃痛胶囊对实验性胃溃疡大鼠一氧化氮与热休克蛋白70的影响

[目的]探讨中药七方胃痛胶囊抗溃疡的机制及提高溃疡愈合质量(QOUH)的应用价值.[方法]40只Wistar大鼠制作乙酸诱发大鼠胃溃疡模型后第3天随机分为4组:对照组,雷尼替丁胶囊组,七方胃痛胶囊大、小剂量组.用硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO).取大鼠胃组织,测量溃疡面积.以免疫组化染色切片观测溃疡边缘黏膜组织炎症细胞数、新生血管数,并测定溃疡边缘黏膜组织热休克蛋白(HSP)70的表达情况.[结果]七方胃痛胶囊组的溃疡指数明显低于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01);再生黏膜的新生血管数明显高于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01);固有层炎症细胞浸润数明显低于雷尼替丁组和对照组(P＜0.01,＜0.05);血清NO溃疡边缘黏膜组织的HSP70水平均明显高于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01).[结论]七方胃痛胶囊抗溃疡的作用机制与提高血清NO及溃疡边缘黏膜组织HSP70水平有关,且能降低溃疡指数与炎症细胞浸润,增加再生黏膜的新生血管生成,对于提高QOUH有一定的价值.     

褪黑素对糖尿病大鼠心肌热休克蛋白70表达的影响

目的研究褪黑素对糖尿病大鼠心肌组织热休克蛋白(HSP)70表达的影响及其作用机制。方法高脂高糖饮食配合中等剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型,高剂量(20 mg/kg体重)和低剂量(10 mg/kg体重)褪黑素灌胃16 w,测量心脏重量,计算心脏指数;HE染色观察心肌组织形态;免疫荧光检测心肌HSP70含量。结果褪黑素对糖尿病大鼠体质量、心脏指数和血糖值的变化无影响。褪黑素可以下调HSP70在心肌的表达,改善心肌功能。结论褪黑素可以下调HSP70在糖尿病大鼠心肌的表达,对糖尿病大鼠心肌起保护作用。     

左归丸对大鼠转化生长因子-α、β及其受体表达的影响

为探讨左归丸通过调节神经-内分泌-免疫网络而影响肝再生的作用机制，采用免疫组织化学法、地高辛标记探针原位杂交法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)加Dot Blot定量法对实验大鼠下丘脑弓状核(ARN)、再生肝的转化生长因子(TGF)-α、TGF-β及其受体的表达进行了研究。     

外源性皮质酮对大鼠主动脉内皮细胞热休克蛋白70表达的影响

目的在细胞水平观察皮质酮对热休克蛋白70（HSP70）表达的影响及量效动态变化。方法采用培养的大鼠主动脉内皮细胞,观察在不同剂量皮质酮（0．1μM,50μM,100μM）干预2h～72h后,内皮细胞热HSP70的表达情况。结果皮质酮干预大鼠主动脉内皮细胞后,HSP70蛋白表达在4h达到高峰,其中干预浓度为0．1μM组的HSP70蛋白含量增加最为明显,到72h时与正常对照组已无显著差异。结论不同干预剂量的皮质酮均可促使大鼠主动脉内皮HSP70表达增加,应激时大量分泌的皮质酮可能是通过HSP70表达增加参与内皮细胞的保护。     

川芎嗪对脑缺血—再灌注损伤热休克蛋白70表达的影响

研究了大鼠脑缺血－再灌注时热休克蛋白７０表达及川芎嗪对ＨＳＰ７０表达的影响。方法 采用大鼠左侧叫动脉并滴注生理盐水脑ＣＩＲＩ模型，以免疫细胞化学法检测２４只鼠脑ＣＩＲＩ及川芎嗪干预ＣＩＲＩ脑组织ＨＳＰ７０表达，并与病理组织这改变进行对照研究。     

川芎嗪对脑缺血再灌注损伤热休克蛋白70表达的影响

目的研究大鼠脑缺血再灌注（ＣＩＲＩ）时热休克蛋白（ＨＳＰ）７０表达及川芎嗪对ＨＳＰ７０表达的影响。方法采用大鼠左侧颈总动脉结扎并滴注生理盐水脑ＣＩＲＩ模型，以免疫细胞化学法检测２４只鼠脑ＣＩＲＩ及川芎嗪干预ＣＩＲＩ脑组织ＨＳＰ７０表达，并与病理组织学改变进行对照研究。结果（１）非缺血侧脑组织无ＨＳＰ７０表达，缺血３０分钟缺血侧大脑皮层可见ＨＳＰ７０表达；再灌注３０分钟组仅１只大鼠（１／６）缺血侧大脑皮层有ＨＳＰ７０表达。（２）与单纯缺血大鼠相比，川芎嗪干预组缺血侧大脑皮层ＨＳＰ７０表达明显增强，计算机辅助图像半定量分析，ＨＳＰ７０免疫阳性细胞数，分别为平均４３６±１２５个／片和８５０±１６７个／片，两组间差异非常显著（Ｐ＜０００１）。（３）缺血侧皮层神经细胞呈现轻度缺血改变，部分细胞核固缩深染，细胞缩小，细胞周围间隙增大；川芎嗪干预大鼠缺血损伤程度有减轻，细胞核固缩减轻，细胞无缩小。结论脑缺血时可诱导缺血脑细胞部分ＨＳＰ７０表达，川芎嗪干预可使缺血大脑皮层ＨＳＰ７０表达明显增强，皮层神经细胞的缺血损伤减轻。     

葛根素对大鼠心肌缺血再灌注后热休克蛋白70表达的影响

目的探讨葛根素对大鼠心肌缺血再灌注后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立心肌缺血/再灌注模型,运用免疫组化法观察心肌细胞HSP70表达情况及血清髓过氧化物酶(MPO)活性。结果与对照组相比,葛根素组于心肌缺血/再灌注后0.5、4、8h时间点显著上调HSP70表达(P<0.01),抑制血清MPO活性(P<0.01)。结论葛根素可明显减轻心肌缺血再灌注损伤,其心肌保护机制可能是通过上调HSP70的表达、降低血清MPO的活性来实现的。     

热休克蛋白7O对大鼠脊髓损伤后凋亡的影响

热休克预处理能减轻脊髓损伤后的凋亡，其机理可能同热休克蛋白70合成增加，并进一步抑制NF-kB的表达有关。     

热休克蛋白70表达对离体大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

本实验旨在观察腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素 (NE)诱导大鼠心肌细胞中热休克蛋白 (HSP)的表达及其对缺血再灌注损伤 (I R)心肌的影响。一、材料和方法1 实验对象及分组 :3月龄Sprague Dawley大鼠2 4只 (由华中科技大学同济医学院动物中心提供 ) ,雌雄不拘 ,体重 2 5 0～ 32 0g ,随机分为 3组 :对照组、E12h组和E2 4h组 ,每组各 8只。2 实验方法 :( 1)对照组 :腹腔注射 0 4ml生理盐水 2 4h后取大鼠建立Langendorff灌注模型 ,平衡灌注 2 0min ,夹闭灌注管全心停灌 4 5min ,再灌注 1h ,其中再灌注 15min时取冠状窦流出液 2ml,冷冻储存…     

大鼠孤束核微量注射γ-氨基丁酸对电针抗应激性胃黏膜损伤的影响

[目的]探讨孤束核内γ-氨基丁酸(GABA)对电针(EA)抗应激性胃黏膜损伤的影响及机制。[方法]70只健康SD大鼠随机分为5组:单纯应激组、EA+应激组、0.85%氯化钠+EA+应激组、GABA+EA+应激组、荷苞牡丹碱+EA+应激组,每组14只。采用冷束缚法制备大鼠应激性胃溃疡模型,通过脑立体定位仪进行孤束核微量注射GABA和荷苞牡丹碱,测定各组大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)、胃黏膜血流量(GMBF)、胃液酸度的变化。[结果]EA+应激组大鼠胃黏膜UI、胃液酸度降低,GMBF增加,与单纯应激组比较差异有统计学意义(P0.01)。预先孤束核给予GABA处理,可减弱EA抗胃黏膜损伤的作用,胃黏膜UI、胃液酸度增高,GMBF减少,与NS+EA+应激组比较差异有统计学意义(P0.01)。荷苞牡丹碱则明显加强EA对胃黏膜损伤的保护作用,胃黏膜UI、胃液酸度降低,GMBF增加,与NS+EA+应激组比较差异有统计学意义(P0.05)。[结论]GABA能削弱EA抗应激性胃黏膜损伤作用,其作用部分是通过孤束核内GABAA受体介导的。     

热休克蛋白70对供心细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠供心心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠18只,分为两组:对照组(C,n=9),腹腔注射生理盐水0.5ml,24h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),腹腔注射24h后取离体心脏,处理方法同C组。运用免疫组化SP法测定心肌HSP70含量、Bcl-2、Bax蛋白的含量以及相关生化指标并进行统计学处理。结果HSP70含量E组(17.78±1.82)较C组(5.22±1.05)明显增高(P<0.01),Bcl-2的表达E组(41.88±5.09)较C组(31.36±3.27)明显增多(P<0.01),Bax的表达E组(22.61±3.49)较C组(40.52±4.17)明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值E组(1.86±0.11)较C组(0.77±0.01)明显增高。生化指标E组明显优于C组。结论心肌HSP70高表达对供心具有明显的保护效应,其促进心肌抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2/Bax比率,以此抑制心肌细胞凋亡,从而发挥其对供心心肌细胞保护作用。     

银杏叶提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤热休克蛋白表达的影响

目的:观察热休克蛋白70(HSP70)在心肌缺血再灌注损伤过程中的表达规律及银杏叶提取物(EGB)干预后的变化.方法:65只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组.试验前30 min,治疗组大鼠腹腔注射银杏叶提取物50 mg/kg,结扎左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型.于再灌注不同时间点(1、3、6、12、24、48 h)取出心脏左前降支支配区的全层心肌组织,用免疫组织化学和Western Blot方法观察心肌HSP70的表达.结果:心肌缺血再灌注损伤时HSP70主要表达在心肌细胞和微血管上,表达水平随再灌注时间延长而增加,24 h时达高峰;与模型组相比,治疗组心肌组织HSP70表达水平明显上调,表达时间明显延长.结论:EGB促进HSP70在心肌表达增强和延长,可能与其提高心肌对缺血再灌注损伤的耐受性有关.