肺癌细胞及组织中miR-181a、miR-200a、miR-200c表达变化及意义

目的：观察肺癌细胞及组织中 miR-181a、miR-200a、miR-200c 的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择人肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H358、H460、A549及人正常支气管上皮细胞HBE,10例肺癌患者的癌组织及其相应癌旁组织。采用RT-PCR法检测各细胞系及组织中的miR-181a、miR-200a、miR-200c,并分析miRNA表达与临床参数的关系。结果 NCI-H1299、NCI-H358、A549细胞中miR-181a相对表达量均低于HBE细胞,NCI-H1299、NCI-H358、H460、A549细胞中miR-200a相对表达量均低于HBE细胞,NCI-H358、H460细胞中miR-200c相对表达量均高于HBE细胞,P均＜0．05。肺癌及癌旁组织中miR-181a和miR-200a相对表达量比较,P均＞0．05;肺癌组织中miR-200c相对表达量高于癌旁组织,P＜0．01。有淋巴结转移的肺癌患者miR-200a相对表达量低于无淋巴结转移者,P＜0．01;其余miRNA相对表达量与临床病理参数均无关,P均＞0．05。结论 miR-181a、miR-200a在肺癌细胞株中表达普遍降低,而miR-200c在肺癌细胞及组织中表达普遍升高,可能与肺癌的发病有关。     

miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的表达

背景:miR-181b与多种肿瘤的形成相关,但其在结肠炎相关结肠癌中的表达情况尚不明确。目的:探索miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的变化,并初步筛选其下游可能的靶基因。方法:联合使用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)制备结肠炎相关结肠癌小鼠模型。以实时荧光定量PCR(qP CR)检测不同时期小鼠结肠组织miR-181b表达。利用全基因组表达谱芯片结合miRNA靶基因预测软件TargetS can、PicTar和miRDB初步预测miR-181b的下游靶基因,并以qPCR法检测结肠炎相关结肠癌小鼠中靶基因的表达。结果:miR-181b表达在结肠炎相关结肠癌形成过程中逐渐升高,但单独使用AOM或DSS均不会改变miR-181b水平。结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件初步筛选出miR-181b可能的下游靶基因为Ipmk、E2f5、Klf6、Prkcd、Bai3和Hic2,qPCR法显示Ipmk、Prkcd、Bai3、Hic2表达明显低于对照组。结论:miR-181b表达随结肠炎相关结肠癌的发展而升高,该变化与单纯慢性炎症无关。     

miR-181a及其靶基因Atg5在胃癌中的表达及临床意义

目的研究miR-181a及其靶基因Atg5在人胃癌细胞株和胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法体外培养人胃癌细胞株(MGC-803、SGC-7901、BGC-823)和正常胃黏膜细胞株(GSE-1),收集30例胃癌血清和手术切除的癌组织及癌旁正常组织,并以30名正常人血清标本为对照,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清、细胞株、组织中miR-181a及细胞株、组织中Atg5 mRNA的表达情况。结果胃癌细胞株、组织、血液中miR-181a的表达较正常细胞、癌旁正常组织及正常人血清明显升高(P0.05);Atg5 mRNA相对表达量在胃癌细胞株和胃癌组织中均分别低于正常胃黏膜细胞株和癌旁正常组织(P0.05)。在胃癌组织和癌旁正常组织中,miR-181a与Atg5 mRNA表达呈负相关。结论 miR-181a在胃癌细胞株、胃癌组织和血清中显著高表达,提示其有望成为潜在的胃癌标志物。Atg5在胃癌中低表达并与miR-181a表达呈负相关,提示其可能是miR-181a在胃癌中的潜在作用靶基因。     

miR-204在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞凋亡的影响

目的探讨miR-204在胃癌组织中的表达与临床病理参数的关系及其对胃癌细胞凋亡的影响。方法接受手术治疗的胃癌患者53例,收集手术切除的胃癌组织作为胃癌组标本,并收集其癌旁(3 cm)正常组织作为对照组标本,同时培养人胃癌细胞株(BGC823、SGC7901)和永生化胃上皮细胞株(GES-1)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组标本、对照组标本、BGC823、SGC7901、GES-1细胞株中的miR-204表达,分析胃癌组组织miR-204相对表达量与临床病理参数的关系,对部分BGC823、SGC7901细胞株进行转染miR-204,对比转染miR-204组与未转染miR-204组的BGC823、SGC7901细胞株的细胞增殖和细胞凋亡情况。结果胃癌组标本中的miR-204相对表达量明显低于对照组标本中miR-204的相对表达量(P0.05)。BGC823细胞株和SGC7901细胞株中的miR-204相对表达量明显低于GES-1细胞株中的miR-204相对表达量(P0.05)。胃癌组组织标本中miR-204相对表达量与患者的年龄、性别无关(P0.05),与TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(P0.05)。第3天的BGC823、SGC7901细胞株中,未转染组的吸光度高于转染miR-204组(P0.05),未转染组的细胞凋亡百分比显著低于转染miR-204组(P0.05)。结论 miR-204在胃癌组织以及胃癌细胞株中呈现低表达,且其表达与TNM分期、淋巴结转移以及分化程度有关,转染miR-204后能抑制胃癌细胞株的细胞增殖,并能促进其细胞凋亡。     

血清miR-21、miR-148b、miR-200a、miR-200b在原发性肝癌患者中的表达及临床诊断意义

目的研究原发性肝癌(HCC)患者血清中微小RNA(miR)-21、miR-148b、miR-200a、miR-200b的表达及临床诊断意义。方法应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测西南医科大学附属医院收治的93例HCC患者(病例组)、48例肝脏良性病变(良性组)、48例慢性肝病患者(慢性肝病组)和50例健康体检者(对照组)血清中miR-21、miR-148b、miR-200a、miR-200b的表达。统计学分析各指标与临床病理特征之间的关系,受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标的诊断价值。结果病例组血清miR-21与miR-200b表达显著高于良性组、慢性肝病组及对照组(均P<0.05),miR-200a与miR-148b表达显著低于良性组、慢性肝病组及对照组(均P<0.05)。HCC患者血清miR-21与miR-200b表达与病理分期、病理分级及肿瘤直径有关(均P<0.05),与性别、年龄、有无肝硬化及乙型肝炎病毒(HBV)抗原是否阳性无关(均P>0.05)。血清miR-200a与miR-148b表达与病理分期、病理分级有关(均P<0.05),与性别、年龄、肿瘤直径、有无肝硬化及HBV抗原是否阳性无关(均P>0.05)。miR-21、miR-148b、miR-200a、miR-200b及四项指标联合的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.821、0.668、0.772、0.734、0.922。联合诊断的敏感性和特异性均高于任一单一指标。结论HCC患者血清miR-21与miR-200b表达上调,而miR-200a与miR-148b表达下调。并且其表达与病理分期、病理分级有关,联合检测血清miR-21、miR-148b、miR-200a、miR-200b有希望成为新的诊断HCC的肿瘤标志物。     

miR-92b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨miR-92b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义.方法 选取2012年4月至2014年4月在山东省立第三医院行手术切除的非小细胞肺癌患者103例,实时荧光定量PCR术检测非小细胞肺癌和癌旁组织中miR-92b表达,所有患者从术后第1d起随访至2019年4月30日,记录患者5年生存率及总生存时间,采用Kapl...     

miR-25在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨miR-25在胃癌组织中的表达及与临床病理因素和预后之间的关系.方法 用茎-环RT-qPCR检测86例胃癌组织和20例正常胃组织中miR-25的表达情况,分析miR-25的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系.结果 茎-环RT-qPCR能特异扩增miR-25.miR-25在胃癌组织中的表达量高于正常胃组织(7.495±1.073vs 1.083±0.126,P＜0.001);在有淋巴结转移的胃癌组织中的表达高于无淋巴结转移的胃组织(8.589±0.964 vs 5.649±1.257,P ＜0.001);在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌组织中的表达高于Ⅰ～Ⅱ期(8.117±1.002vs 6.273±1.215,P＜0.001).miR-25高表达组的中位生存期和3年生存率低于miR-25低表达组(34.9个月vs 43.8个月,38.7％ vs66.2％,P=0.006).结论 胃癌组织高表达miR-25,miR-25可能是胃癌的诊断、预后判断标志和治疗靶标.     

miR-451在胃癌组织中的表达及临床意义

目的观察miR-451在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集18例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR技术检测miR-451的表达水平(以U6为对照),并分析其与胃癌相关临床因素的关系。结果与胃癌旁组织相比,miR-451在胃癌组织中明显下调(P<0.05)。其中上调6例,下调12例,下调比率66.67%(12/18)。miR-451的表达水平与胃癌的分化相关(P<0.05),与年龄、性别、TNM分期、Borrmann分型、浸润深度、淋巴结转移等无明显相关。结论 miR-451在胃癌组织中低表达,并与胃癌的分化程度密切相关,表明其可能参与了胃癌的发生和发展过程。     

miR-181a在老年急性心肌梗死血清中的表达及其临床意义

目的研究mi R-181a在老年急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达及其临床意义。方法随机选取2016年1月~2017年3月于鹤壁市人民医院收治的AMI患者56例为AMI组,并选取同期体检的健康老人52例为老年健康受试者(HE)组,实时荧光定量PCR检测血清mi R-181a的相对表达量,Pearson法分析其表达与血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、心肌肌钙蛋白I(c Tn I)的相关性,ROC曲线法分析其对老年AMI的诊断价值。结果 mi R-181a在老年AMI血清中的相对表达量为(1.60±0.27),显著高于其在健康人血清中的表达(1.18±0.30)(P0.05);在老年AMI患者血清中,mi R-214相对表达量与血清AST(r=0.647,P0.05),c Tn I(r=0.712,P0.01)均呈正相关;mi R-181a诊断老年AMI曲线下面积为0.834,诊断的灵敏度和特异性分别为83.9%和69.2%。结论 mi R-181a在老年急性心肌梗死患者血清中呈现高表达,并且其可能是诊断老年急性心肌梗死潜在的生物标志物。     

miR-26b在卵巢癌组织中的表达与功能

目的探讨microRNA-26b(miR-26b)在卵巢癌组织中的表达情况,并探讨其对卵巢癌细胞株HO8910恶性行为的影响。方法采用实时定量PCR(q PCR)检测72例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本(卵巢癌组)中的miR-26b水平,同时选取26例正常卵巢上皮组织(正常组)和45例良性卵巢上皮囊肿组织(良性组)作对照,分析miR-26b表达与临床病理参数(年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移)的关系。将化学合成miR-26b前体分子mimics和无关序列转染卵巢癌细胞株HO8910,采用MTT法检测转染24、48、72、96 h后的细胞增殖情况,采用流式细胞仪PI/Annexin V-FITC双染法及PI单染法检测转染48 h后的细胞凋亡及细胞周期情况。结果卵巢癌组的miR-26b水平均低于正常组和良性组(P<0.05),且其表达与临床分期、分化程度及淋巴结转移均有关(P<0.05)。与对照组相比,过表达组(转染miR-26b mimics)的增殖抑制率和凋亡率均升高,且细胞周期中G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低(P<0.05)。结论在卵巢癌细胞中上调miR-26b表达可抑制增殖并诱导凋亡及细胞周期组织,在卵巢癌防治中有一定价值。     

胃癌患者血清miR-21、miR-181表达与临床病理参数、预后的关系

目的 探究胃癌患者血清微小RNA-21(miR-21)、miR-181的表达水平,并分析二者与胃癌患者临床病理参数、预后的关系。方法 收集于2012年6月至2014年4月入住我院的97例胃癌患者的血清样本,另收集同期100例在我院体检的健康志愿者的血清样本。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测血清样本中miR-21、miR-181的表达水平,同时分析miR-21、miR-181与患者临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-21、miR-181的表达与患者预后的关系;并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-21、miR-181表达对胃癌预后的预测价值。结果 胃癌患者血清中miR-21、miR-181表达水平均明显高于健康志原者,差异具有统计学意义(P 0. 05)。患者血清中miR-21表达水平与有无淋巴结转移、分化程度、浸润深度相关; miR-181的表达水平与有无淋巴结转移、肿瘤TNM分期相关,差异具有统计学意义(P 0. 05)。KaplanMeier生存曲线显示,miR-21高表达胃癌患者5年累积生存率为18. 4%,低于低表达胃癌患者的25. 0%(P 0. 05); miR-181高表达胃癌患者的5年累积生存率为14. 3%,低于低表达胃癌患者29. 2%(P 0. 05)。血清miR-21、miR-181两指标对胃癌预后具有较高的辅助预测价值,曲线下面积(AUC)均高于0. 7,而二者联合应用,其诊断效能更高,敏感度、特异性、和约登指数分别为0. 908、0. 667、0. 574。结论 胃癌患者血清miR-21、miR-181表达水平高于健康人群,且与患者不良预后相关,二者可作为胃癌预后预测的潜在生物标志物。     

miR-596在老年胃癌组织中的表达及临床意义

目的分析miR-596在老年胃癌组织中的表达及临床意义。方法选取90例老年胃癌患者作为研究对象,检测对比患者胃癌组织和癌旁正常组织中的miR-596表达水平,对比分析miR-596高表达水平与低表达水平患者的临床特征,利用CCK-8实验与Transwell穿孔实验分析AGS细胞的增殖与侵袭能力。结果患者胃癌组织中的miR-596平均表达水平为(1.31±0.14),显著低于癌旁正常组织中的(2.21±0.44,P0.05)。90例患者中miR-596高表达水平患者42例,低表达水平患者48例,两组患者的性别、肿瘤细胞分化程度差异无统计学意义(P0.05),老年胃癌患者的miR-596表达水平和患者的淋巴结转移情况、TNM分期及肿瘤直径具有显著的相关性(P0.05);正常胃癌细胞的相对OD值为(1.01±0.08),显著低于转染miR-596胃癌细胞(0.57±0.04,P0.05),miR-596具有显著的抑制胃癌细胞增殖的作用;Transwell穿孔实验中,正常胃癌细胞的相对细胞数为(1.02±0.17),显著低于转染miR-596胃癌细胞(0.59±0.10,P0.05),miR-596对于胃癌细胞的侵袭具有显著的抑制作用。结论老年胃癌组织中的miR-596表达水平与癌旁组织具有显著差异,并且与患者的病情病症具有显著相关性,通过miR-596表达水平能够对老年胃癌进行科学监测分析,并且miR-596具有显著的抑制胃癌细胞增殖与侵袭的作用。     

miR-551b在溃疡性结肠炎组织中的表达及意义

目的 探讨miR-551b在溃疡性结肠炎(UC)组织中的表达及临床意义.方法 选取2015年9月至2018年9月在东莞市人民医院接受治疗的75例U C患者作为研究对象.采用实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测UC患者miR-551b的相对表达量,并分析其与预后的关系.结果 75例U C患者随访期间的...     

SB-525334下调肝星状细胞miR-19b和miR-29b的表达

目的了解TGF-β1刺激HSC后SB-525334对I型胶原分泌、miR-19b和miR-29b表达的影响。方法用MTT法检测TGF-β1与SB-525334干预LX-2细胞的最适药物浓度、最佳作用时间。LX-2细胞干预分为4组,对照组、TGF-β1干预组、SB-525334干预组、TGF-β1和SB-525334共干预组。通过蛋白质印迹法分析I型胶原蛋白的表达。反转录实时定量聚合酶链反应(RT-qRCR)分析各组miR-19b和miR-29b的表达。结果 TGF-β1浓度为10 ng/mL时,HSC生存率最高,为132.0%。当SB-525334浓度为10μmol/l时,其抑制率最强,为38.4%。TGF-β1干预组LX-2细胞I型胶原蛋白的表达量(82.80±4.39)%较对照组(17.89±4.27)%显著增高(P0.01),TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞I型胶原蛋白表达量为(62.62±3.72)%低于TGF-β1组(82.80±4.39)%(P0.05)。RT-qPCR结果显示SB-525334可下调miR-19b的表达,TGF-β1干预组、SB-525334干预组、以及TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞miR-19b相对表达量分别为0.62±0.07、0.28±0.06、0.64±0.20,较对照组明显降低(P0.01),TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞miR-19b的相对表达量较SB-525334组高(P0.05),TGF-β1和SB-525334共干预组与TGF-β1干预组LX-2细胞miR-19b的相对表达量比较无明显差异(P 0.05)。SB-525334可下调miR-29b的表达,TGF-β1干预组、SB-525334干预组、以及TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞miR-29b相对表达量分别为0.77±0.05、0.44±0.04、0.61±0.06,较对照组降低(P0.05),TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞miR-29b的相对表达量较TGF-β1干预组降低(P0.05),TGF-β1和SB-525334共干预组LX-2细胞miR-29b的相对表达量较SB-525334干预组升高(P0.05)。结论 TGF-β1抑制剂SB-525334可抑制HSC分泌I型胶原,并下调其miR-19b和miR-29b的表达。     

胃癌组织中miR-200a、miR-92a表达变化与患者临床病理参数和预后的关系

目的 探讨胃癌组织中微小RNA(miR)-200a、miR-92a表达变化及与患者临床病理参数和预后的关系.方法 选择104例胃癌患者,采用RT-qPCR法检测胃癌及癌旁正常胃组织中miR-200a、miR-92a表达.分析miR-200a、miR-92a表达与胃癌患者临床病理参数的关系.Kaplan-Meier生存分...     

miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在慢型克山病患者血清中表达及意义的研究

目的通过检测慢型克山病和对照组外周血中miR-320a、miR-18b、miR-22、Let-7b的表达水平,探讨其作为疾病鉴别诊断的生物标志物的意义。方法收集克山病病区慢型克山病患者(40例)、非病区对照组(40例)及病区对照组(40例)的血样标本,采用实时荧光定量PCR技术检测各组研究对象血清中目标miRNA的表达水平。结果 miR-320a、miR-18b和Let-7b在两对照组间比较有统计学意义(P0.05);比较克山病组和病区对照组,miR-320a和Let-7b有统计学意义(P0.05),提示这3个目标miRNA与高血压具有相关性。miR-22在三组比较中均无意义。结论 miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在克山病患者中未见显著表达,为慢型克山病的鉴别诊断提供了新思路。     

SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义

目的观察SIRTl在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRTl同胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用Real．timePCR方法检测SIRTlmRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Westernblot和Real．timePCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRTl蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系。结果SIRTImRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）,SIRT1mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高（P均〈0．05）。免疫组化染色结果表明,SIRTl蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高（P〈0．05）。SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关（P均〈0．05）,同生存时间呈负相关（r=-0．5023,P〈0．05）。结论SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色。