汉防己甲素抗实验性肝纤维化的对照研究

目的：通过大鼠免疫性肝纤维化模型,观察应用汉防己甲素对肝化的治疗作用,并探讨可能的机理。方法：将50只雄性Wistar大鼠随机分为模型对照组,正常对照组,大剂量、中剂量及小剂汉防己甲素（Tet)治疗组（n=10)治疗组大鼠以不同剂量Tet灌胃8周。治疗结束后,测大鼠肝功能指标,血清LN、HA及PCⅢ水平,并作肝组织病理学检查。结果①Tet治疗可改善肝纤维化时的肝功能指标,对肝细胞具有保护作用;②Tet治疗治疗可抑制肝纤维化时细胞外基质的过量合成与分泌;③肝脏病理学显示：Tet治疗可减轻肝纤维化程度,结论Tet具有抗实验性肝纤维化的作用,Tet5mg/(kg.d)的剂量治疗大鼠肝纤维化的最佳剂量。     

汉防己甲素对脂多糖刺激的大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的观察汉防己甲素对脂多糖刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及瘦素表达的影响,并观察Ⅰ型胶原表达的变化。研究汉防己甲素抗肝纤维化过程中的作用和机制。方法用脂多糖刺激大鼠肝星状细胞后,加汉防己甲素分组培养。采用MTT法测定细胞增殖,ELISA法检测其上清液瘦素和Ⅰ型胶原水平。结果脂多糖可刺激HSC增殖,汉防己甲素抑制脂多糖刺激的HSC增殖,并抑制瘦素和Ⅰ型胶原的表达。结论汉防己甲素可能通过抑制HSC增殖和抑制瘦素的分泌发挥抗纤维化作用。     

中药抗肝纤维的实验研究概况

肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的主要病理变化 ,中医药在抗肝纤维化方面有潜在的优势 ,其实验研究日益受到重视 ,报道较多 ,现将近年来的实验研究综述如下。1　中药单体有效成份的研究葫芦素 (瓜蒂成份 )和齐墩果酸 (女贞子的有效成份 ) [1 ] 是较早用于防治实验性肝硬化的中药有效成份 ,其中前者的抗肝纤维化作用被认为是通过抗肝纤维增生和促进纤维降解来实现的 ,而后者的抗肝纤维化作用则是通过抑制肝细胞变性坏死和非特异性消炎作用而间接发挥的。汉防己甲素 (Ｔｅｔ) [2 ]是从防己科植物汉防己根中提取的一种生物碱 ,在肝硬化门脉高…     

汉防己甲素抑制一氧化氮合酶活性防治肝硬化门脉高压症

为探讨汉防己甲素抑制肝纤维化和改善门脉高动力循环的作用机制，分３组测定肝组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性和血清中一氧化氮（ＮＯ），观察门静脉血流量（ＰＶＦ）、门静脉压力（ＰＶＰ）、门静脉阻力（ＰＶＲ）及肝脏病量学改变。结果显示，钙拮抗剂汉防己甲素显著抑制ＮＯＳ活性和ＮＯ生成，明显降低ＰＶＰ和ＰＶＦ，病理切片显示汉防己甲素明显防止肝细胞坏死，阻止肝纤维化发展。提示抑制ＮＯＳ活性和ＮＯ生成是汉防己甲素防治肝硬化门脉高压症的主要作用机理。     

汉防己甲素对脂质过氧化肝损伤的保护作用

本文报告用汉防己甲素治疗ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化的实验研究，并以生理盐水作对照。结果表明治疗组肝组织、血清脂质过氧化物含量及血清丙氨酸转肽酶明显低于对照组，而血清胆碱酯酶则高于对照组（Ｐ＜０．０５）。治疗组肝组织中肝细胞变性及坏死显著轻于对照组，提示汉防已甲素具有防治脂质过氧化肝损伤的作用。     

汉防已甲素治疗博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化实验研究

目的　观察中西药钙拮抗剂对肺间质纤维化的治疗作用。方法　将 72只SD大鼠一次性气管内注入博莱霉素A5制备肺纤维化模型 ,次日随机给药 ,并测定分析各组给后d7、d14、d2 8肺组织内羟脯氨酸、脂质过氧化物含量、组织病理学变化以及比较各组d2 8肺系数。结果　汉防己甲素组及维拉帕米组各期肺组织脂质过氧化物及羟脯氨酸含量均较模型组明显降低 (p <0 .0 5 ,p<0 .0 1) ,肺系数明显减小 (p <0 .0 1,p<0 .0 1) ,组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻 ,其中汉防己甲素优于维拉帕米。结论　中药钙拮抗剂汉防己甲素治疗肺间质纤维化疗效满意 ,值得进一步研究。     

汉防己甲素联合泼尼松对阿霉素肾纤维化大鼠的保护作用及机制

目的:研究汉防己甲素联合泼尼松对阿霉素肾纤维化大鼠的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠42只随机分为正常对照A组、肾纤维化模型B组、泼尼松+汉防己甲素低剂量C组[5 mg/(kg·d)]、泼尼松+汉防己甲素中剂量D组[10 mg/(kg·d)]、泼尼松+汉防己甲素高剂量E组[20 mg/(kg·d)]、汉防己甲素F组[10 mg/(kg·d)],泼尼松G组,每组6只,实验中所用泼尼松剂量均为10 mg/(kg·d)。于实验开始第1天、8天给予除A组外所有大鼠阿霉素(4 mg/kg、2mg/kg)尾静脉注射,A组给予等量生理盐水,自首次注射阿霉素第8周末给予C、D、E、F、G组相应药物灌胃,16周末收集大鼠24 h尿液,留取血液和肾组织标本。双缩脲法检测大鼠24 h尿蛋白,全自动生化分析仪检测大鼠血清总蛋白(TP)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、三酰甘油(TG)水平。HE染色和VG染色分别观察各组大鼠肾组织病理和胶原纤维的变化。RT-PCR法检测大鼠肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA的表达;免疫组化法检测肾组织中CTGF蛋白、MMP13蛋白的表达。结果:与B组大鼠24 h尿蛋白量、BUN、Scr、TG、CTGF表达高于A组,差异有统计学意义(P<0.05),而TP、MMP13的水平低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);C、D、E、F、G组24 h尿蛋白量、BUN、Scr、TG、CTGF表达水平低于B组,差异有统计学意义(P<0.05),TP、MMP13的水平高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);与单一用药组比较,联合用药D组和E组上述指标变化更显著,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:汉防己甲素联合泼尼松对阿霉素肾纤维化大鼠有保护作用,其机制可能是抑制促纤维化因子CTGF表达,促进抗纤维化因子MMP13表达;且这种保护作用具有剂量依赖性,以中、大剂量效果较好。     

汉防己甲素降低大鼠血尿酸水平的机制研究

目的 探讨汉防己甲素对高尿酸血症大鼠血尿酸（uricacid,UA）的影响。方法 将40只SPF级别雄性大鼠按照随机数字表法分成空白对照组、高尿酸血症模型组、别嘌醇模型组、汉防己甲素低剂量模型组和汉防己甲素高剂量模型组,每组8只。用腺嘌呤（200mg/kg）与氧嗪酸钾（250mg/kg）联合饲喂酵母饲料（10g/kg）的方法构建高尿酸血症的大鼠模型,空白对照组喂普通饲料。造模成功后,从第8天起,每天下午给予别嘌呤模型组大鼠灌胃别嘌呤醇（40mg/kg）,汉防己甲素低剂量模型组、汉防己甲素高剂量模型组分别灌胃16mg/kg和32mg/kg汉防己甲素,空白对照组与高尿酸血症模型组灌胃同等体积的生理盐水。给药后每周采集大鼠血液检测UA、血肌酐（serum creatinine,Scr）及血尿素氮（blood uric nitrogen,BUN）水平,处死后取肝脏检测黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）和腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）活性。结果 干预1周时,除空白对照组外,各组UA水平均显著升高（P<0.05）,造模成功。与高尿酸血症模型...     

中药有效成分抗肝纤维化研究现状与展望

本文对近二十多年来中药有效成分抗肝纤维化的研究进行了总结和分析。分别阐述了迄今发现的中药有效成分加桃仁提取物、汉防己甲素、丹酚酸B、川芎嗪的不同程度的抗肝纤维化作用及其部分作用机制。     

汉防己甲素对肾小球硬化大鼠肾皮质Ⅳ型胶原基因表达的影响

目的探讨中药汉防己甲素(Tetrandrine)对单侧肾切除加两次注射阿霉素肾小球硬化大鼠肾皮质Ⅳ型胶原基因表达的作用.方法将实验动物分为正常对照组、汉防己甲素治疗组、氨氯地平治疗对照组和模型组,于第12周留取尿标本.肾组织病理学检查、用Northem blot杂交检测皮质Ⅳ型胶原基因表达mRNA表达.结果汉防己甲素治疗组和氨氯地平治疗对照组,肾病理损伤减轻,肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达下调.结论汉防己甲素可延缓肾小球硬化.     

四氯化碳肝纤维化大鼠的Ⅳ型胶原水平和超微结构的动态变化

目的：观察四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠的Ⅳ型胶原水平和超微结构的动态变化。方法：采用CCl4后腿皮下注射复制大鼠肝纤维化模型。结果：模型组大鼠病理片呈肝纤维化变,贮脂细胞增生活跃,有较大量的Ⅳ型胶原沉积。超微结构可见大量的胶原纤维生成和成纤维细胞。结论：CCl4肝纤维化大鼠3周的胶原沉积量并不高,6周起胶原纤维沉积量逐渐增大,并向肝细胞延伸。从9周开始分割肝小叶,在第12周已有假小叶生成。     

三甲益肝颗粒对大鼠肝纤维化的抑制作用

目的研究三甲益肝颗粒（SJG）对四氯化碳（CCl4）诱导的实验性大鼠肝纤维化的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法健康SD大鼠50只随机分为3组。模型组（18只）和SJG组（17只）均采用40％CCl4花生油溶液皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,每周2次;对照组（15只）皮下注射生理盐水。从实验开始之日起,模型组给予蒸馏水灌胃,SJG组每天给予SJG灌胃。分别于6周末、8周末收获大鼠肝组织做Masson染色,检测胶原纤维的表达;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果模型组胶原纤维所占面积多于对照组（P〈0．01）,SJG组胶原纤维所占面积少于模型组（P〈0．01）。正常对照组大鼠肝组织α-SMA仅在汇管区的小叶间动脉、静脉血管壁处表达,模型组α-SMA的表达多于正常对照组（P〈0．01）,SJG组α-SMA的表达较模型组减少（P〈0．01）,8周α-SMA的表达虽比6周有所增加,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SJG可能抑制肝星形细胞的活化,抑制胶原纤维的沉积,从而有效地减轻肝纤维化的程度。     

大鼠酒精性肝纤维化模型的构建

目的：探索简便、经济的大鼠酒精性肝纤维化造模方法。方法：33只大鼠随机分为2组。模型组予酒精灌胃，于实验的第4、12、24周末分批采血，以测定生化指标，后行放血法处死。将取出的肝脏进行常规切片、HE染色及Masson三色胶原染色后行病理学观察。正常对照组以等量饮用水代替酒精灌胃，于实验第24周末处死，处理同模型组。结果：于实验第24周时观察到了除酒精性肝硬化外酒精性肝病的各种病理表现，并且随着酒精刺激时间的延长肝纤维化程度逐渐加重。结论：应用酒精灌胃法可成功复制大鼠酒精性肝纤维化模型，该方法简便、经济。     

小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达干预研究

目的:研究肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化情况,探讨不同剂量小柴胡汤对实验性模型大鼠肝纤维化程度的影响。方法:肉眼观察、常规HE染色法和免疫组化染色法观察小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响。结果:6、12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与正常对照组比较显著增加(P<0.01);12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较6周肝纤维化模型组显著增加(P<0.05)。小柴胡汤治疗组与同期肝纤维化模型组相比,肝纤维化程度显著减轻(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少(P<0.05)。不同剂量小柴胡汤组间Ⅰ、Ⅲ型胶原含量比较无显著性差异(P>0.05)。结论:肝纤维化发生、发展过程中,Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著增加,小柴胡汤能减轻模型大鼠肝纤维化程度,下调Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。     

三甲益肝颗粒对肝纤维化大鼠Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达的抑制作用

目的研究三甲益肝颗粒(SJG)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化(HF)的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法健康SD大鼠50只分为3组:模型组(n=18)和SJG组(n=17)采用体积分数40%CCl4花生油溶液皮下注射,每周2次,诱导HF模型;同时,SJG组给予SJG灌胃,模型组给予蒸馏水灌胃,每天均1次;对照组(n=15)采用皮下注射生理盐水,每周2次,并给予蒸馏水灌胃,每天1次。分别于第6周末、第8周末取肝组织观察病理组织学变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原(Ⅰ-PC、Ⅲ-PC)mRNA的表达。结果与同期模型组相比,SJG组坏死、炎症反应及纤维化程度显著减轻(P<0.01);第6周末时胶原纤维集中在中央静脉和汇管区周围,少数汇管区纤维化扩大,形成细小、菲薄的纤维间隔,但小叶结构保留;第8周末时可见较宽的纤维间隔,但未形成假小叶。模型组Ⅰ-PC、Ⅲ-PC mRNA的表达较正常对照组显著增加(P<0.01),SJG组与模型组相比显著减少(P<0.01)。结论SJG能减轻中毒大鼠肝脏坏死及炎症,抑制Ⅰ-PC、Ⅲ-PC mRNA的表达,从而抑制HF。     

不同剂量刀豆蛋白A诱导Balb/c小鼠肝纤维化的量效关系

目的观察不同剂量刀豆蛋白A（Con A）诱导小鼠肝纤维化的效果,探讨建立小鼠肝纤维化动物模型所需最佳剂量及成模时间。方法实验组Balb/c小鼠18只,再分为A组、B组、C组,每组6只,经尾静脉分别注射10 mg/kg、12.5 mg/kg、15 mg/kg的Con A,每周1次。对照组6只,经尾静脉注射等量PBS,每周1次。各组均于每次注射后24 h采血,测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）;于实验第5、7、9周,每组各处死2只小鼠,取血清检测血清透明质酸,留肝脏作病理检查。结果A组第9周、B组第7周出现肝纤维化,C组第5周出现肝纤维化,但死亡2只。实验组ALT、AST、明显高于对照组（P〈0.05）。结论12.5 mg/kg Con A经尾静脉注射小鼠是合适的剂量,每周1次,注射6次可建立肝纤维化动物模型。     

一贯煎对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:探讨一贯煎对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响.方法:腹腔注射CCl4 9周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组.干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃.第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhmitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、-2,基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、-14,α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),I型胶原(collagen type I,Col I)等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性.结果:与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColI、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻(P<0.05),肝组织α-SMA、Col I、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低(P<0.01).结论:一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成.     

从超微结构看党参花粉对实验性肝纤维化的治疗作用

用四氯化碳造成C_(57)小鼠肝纤維化,然后饲喂含党参花粉的饲料。电镜观察表明,党参花粉降低了中央静脉下成纤维细胞和血窦储脂细胞的活性,降低了Disse 腔胶原纤维的分级(P<0.01),其结果是减缓了肝纤维化的形成和发展。     

磷酸化肌球蛋白轻链在大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化中的表达

目的探讨运用高脂饮食联合小剂量四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝纤维化模型的特点,以及磷酸化肌球蛋白轻链[P-MLC(Thr18/Ser19)]在该纤维化模型中的作用。方法 70只SD大鼠随机分为正常对照组(N)、CCl4组(M1)和高脂饮食联合小剂量CCl4组(M2)。N组皮下注射花生油3 ml/kg,2次/周;M1组采用400 ml/L CCl4花生油混合液,3 ml/kg,2次/周皮下注射;M2组采用高脂饮食联合小剂量CCl4造模,其CCl4用量2 ml/kg,浓度和频次同M1组。造模后8周末、10周末分批处死,检测肝功能、血脂、光镜观察大鼠肝脏脂肪变性及肝纤维化程度。免疫组化法检测肝脏P-MLC的表达。结果与N组比较,8周和10周末,M1组血浆球蛋白(GLO)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,P-MLC的表达及肝脂肪变性,纤维化程度均升高,但白球比(A/G)下降。与M1组比较,8周末,M2组ALT、AST下降,但脂肪变性增强;10周末,M2组白蛋白(ALB)、A/G下降,而ALT、AST上升明显;8周和10周末M2组P-MLC的表达及肝纤维化程度均强于M1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高脂饮食联合小剂量CCl4皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,具有造模时间短,成功率高的优点。P-MLC的表达随着肝纤维化的进展而增加,P-MLC在非酒精性脂肪性肝纤维化中起着一定的作用。     

Scanning electron microscopic observation: three-dimensional architecture of the collagen in hepatic fibrosis rats

Background In the process of hepatic fibrosis, the accumulation of collagen fibers is strongly related to the hepatic function. The aim of this study was to investigate the three-dimensional architecture of the collagen network in the liver of rats with hepatic fibrosis. Methods Healthy adult male Wistar rats （n=32） were randomly divided into a control group （n=16） and a hepatic fibrosis group （n=16）. In the control group, the rats were treated with peanut oil while the rats in hepatic fibrosis group were treated for 10 weeks with 60% CCI4 diluted in peanut oil. The quantity of collagen fibers was detected by Western blotting; distribution of the collagen was detected by sirius red staining and polarized microscope; the three-dimensional architecture of collagen in the liver was observed under the scanning electron microscope after fixed tissues were treated with cell-maceration using NaOH. Statistical analysis was performed using the u test. Results The quantity of collagen fibers increased significantly in the hepatic fibrosis group. With the aggravation of hepatic fibrosis, collagen fibers gradually accumulated. They interlaced the reticulation compartment and formed a round or ellipse liver tissue conglomeration like a grape framework that was disparate and wrapped up the normal liver Iobule. The deposition of collagen fibers was obvious in adjacent hepatic parenchyma, especially around the portal tracts. Conclusion Our experiment showed the collagen proliferation and displays clearly the three-dimensional architecture of collagen fibers in rat liver with hepatic fibrosis by scanning electron microscope. It can provide a morphological foundation for the mechanisms of changed haemodynamics and portal hypertension in hepatic fibrosis.