甲状腺手术中预防甲状旁腺损伤的体会

目的探讨在甲状腺手术中预防和处理甲状旁腺损伤的方法。方法切除甲状腺时注意保留腺体背面部分的完整，切下甲状腺标本时要立即仔细检查其背面有无误切下甲状旁腺，发现时设法移接到胸锁乳突肌中。结果3672例甲状腺手术中，发生暂时性甲状旁腺功能减退47例，大部分患者在术后4d-2周功能恢复，少部分在4周-6周功能恢复正常，无一例永久性甲状旁腺功能减退。结论术中切除腺体时注意保留腺体背面部分的完整，有助于减少甲状旁腺损伤。     

大脑锥体细胞标本浸银染色法的改进

目的　探讨适用于大批制作大脑锥体细胞教学标本切片浸银染色方法。方法　应用大脑锥体细胞组织块浸银染色 ,石蜡包埋切片显微镜观察大脑锥体细胞。结果　组织块经过硝酸银块染色后制出的切片 ,其锥体细胞显示清晰。结论　此法经过反复操作 ,结果稳定 ,比传统方法减少了步骤 ,且能连续切片 ,适于大批教学标本的制作     

应用切片镀银技术显示甲状腺滤泡旁细胞

甲状腺滤泡旁细胞又称亮细胞或Ｃ细胞 ,位于甲状腺滤泡上皮细胞之间和滤泡之间 ,单个或成群存在 ,在苏木素、伊红染色标本中 ,滤泡旁细胞比滤泡上皮细胞稍大 ,位于基膜上。一般认为甲状腺滤泡旁细胞来源于神经嵴 ,可合成和分泌降钙素 ,能加强成骨细胞的活性、抑制破骨细胞的活动 ,并抑制肾和胃肠道钙的直接或间接吸收使血钙降低。此外 ,还产生、贮存和分泌其他几种活性物质[1 ] 。多年来人们显示甲状腺滤旁细胞的方法 ,大部分是组织块侵银法 (即块染法 ) [2 - 3] 。组织块经酒精和氨水固定后 ,组织和细胞收缩较大 ,以致整个结构变形 ,自然形…     

免疫组化染色在体液细胞块中的作用

目的探讨体液标本的病理检查方法及免疫组化在其诊断中的应用。方法回顾性观察148例体液离心沉淀细胞块的常规HE染色结合免疫组化染色,分析体液离心沉淀细胞块的病理特点。结果148例体液离心沉淀物标本中,镜下形态结合免疫组化染色结果诊断为恶性的病例有65例,能明确组织来源的病例60例,其中肺癌45例,卵巢癌6例,胃肠道癌3例,其余11例;体液离心沉淀细胞块诊断与手术切除标本诊断符合率为95．5%。结论结合临床病史及HE形态选择恰当的免疫标记有助于肿瘤的诊断,确定组织来源,对无手术指征的肿瘤患者具有重要的价值。     

不同固定液对延迟处理标本的HE制片的影响

目的：观察比较10%甲醛、10%甲醛冰醋酸1：1的混合液及丙酮三种固定液对延迟固定标本的固定效果,为临床病理做出更好的延迟固定标本切片提供实验基础。方法：取术中送检标本80例,分别延迟24、48、72h后,相同延迟固定时间标本分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况。结果：同一延迟固定时间,甲醛固定的组织结构自溶现象最显著,染色黯淡;混合固定液自溶现象相对较轻,染色效果优于甲醛;丙酮固定的组织结构自溶现象最轻,染色效果最好。且延迟固定时间越久,变化越显著。结论：三种固定液都可用于固定延迟固定标本,但丙酮效果最好。     

不同固定方法制作细胞蜡块的效果比较

目的比较在脱落细胞学检查过程中采用不同固定方法制作细胞蜡块所获效果的差异，寻求最佳固定方法。方法收集2020年1至4月浙江省台州医院病理科送检的胸腹水标本60例。采用10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定、薄层液基细胞学检查指定保存液固定以及细胞蜡块制作试剂盒固定3种不同的固定方法对同一体腔积液进行处理，离心富集细胞后，制成细胞蜡块，行HE染色和免疫组化染色，观察切片HE染色结果和免疫抗体标志物表达情况。结果10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定的细胞富集蜡块HE染色鲜艳，细胞形态基本完好，核质分明，免疫标记定位良好；薄层液基细胞学检查指定保存液固定的细胞蜡块HE染色偏红，细胞核偏小有固缩现象，免疫标记欠佳；细胞蜡块制作试剂盒固定的细胞蜡块细胞量偏少，HE染色细胞轮廓较模糊，细胞核重叠现象严重，免疫标记欠佳。结论在病理细胞学检查过程中，采用10%中性缓冲甲醛和95%乙醇联合固定效果最佳，且操作简便，费用低廉，更适合于各级医疗单位。     

血性胸腹水细胞块的改进方法

细胞块技术系因细胞学技术“嫁接”于组织学技术而见长。其基本方法是利用琼脂做支架将离心沉淀的细胞嵌于着染均质状、无结构的琼脂中，将融有细胞成分的琼脂块象组织块一样包埋于石蜡块中，从而使细胞学标本具有组织石蜡块的诸多优点(可多次切片、永久保存、回顾性研究、各种特殊染色及免疫组化染色或原位杂交等)。     

用于免疫荧光染色的大鼠视网膜冰冻切片的制作体会

目的：探索适合免疫荧光染色的大鼠视网膜冰冻切片的制作方法与技巧.方法：将SD大鼠麻醉后灌注或不灌注取眼球,根据标本处理差异分别进行固定及脱水处理,制作不同厚度视网膜冰冻切片60例,进行免疫荧光抗体标记,利用荧光显微镜观察其细胞排列及标记状况.结果：完整眼球视网膜结构形态可保持相对规则,但偶尔发生组织牵拉;玻璃体去除的视杯标本免疫荧光染色结果相对理想.标本厚度介于10～12 μm冰冻切片视网膜血管免疫荧光染色结果优于其他厚度者.结论：用于免疫荧光的组织标本应尽量保持其完整的固有形态,通过对目标结构的定性、定位以及定量,再现视网膜各成分的状态.实验者可根据需要选择最适合的眼组织取材方法、切片厚度等以便得到满意的观察效果.     

4种固定液对快速冷冻切片的制片效果的影响

目的通过研究固定液对冷冻切片质量的影响,筛选出理想的固定液,为寻找新型固定液提供新思路,从而提高快速冷冻切片成片质量。方法收集新鲜鸭肝组织30例,冷冻切片取材后用不同的固定液进行固定,然后进行HE染色,显微镜观察。结果经乙醚酒精固定的鸭肝组织和细胞结构清晰,核浆颜色对比度适宜,染色鲜艳。结论乙醚酒精最适宜用于快速冷冻切片的固定,进行HE染色。     

试剂盒法制备细胞块的效果及其技术要点

目的:探讨应用细胞块制备试剂盒制备细胞块效果以及制块过程中的技术要点。方法:应用细胞块制备试剂盒法制备细胞块,常规包埋制片后进行HE染色及免疫组化染色,观察其效果。结果:细胞块制备试剂盒制成的细胞块不散,可对微量标本进行处理,具备组织学优点;满足标本连续切片,并可永久保存标本;能满足免疫组化检测需要。结论:细胞块制备试剂盒法操作简单,技术难点不多,质量容易控制,便于基层医院推广。     

双侧甲状腺次全切除术并发症的预防

目的探讨22例甲状腺次全切除并发症的预防。方法当甲状腺峡部与侧叶呈膜状连接时，可先行切断。若与宽基腺组织连接，可在游离上极后钳夹，剪断后缝扎。游离腺体顺序，先下，再侧，后上，紧靠腺体表面Ⅰ-Ⅱ级血管分支连同周围组织一并集束结扎，不解剖喉返神经和甲状旁腺，处理血管后，尽量采取钝性分离腺体。甲亢者基底部采取钳剪交替处理法。腺体游离完成后可将腺体提至切口外，直视下采取分别钳夹、剪断、切除腺体，基底部一律缝扎。有气管软化者，应用4号丝线将气管的两侧前侧壁缝合固定于两侧胸锁乳头肌上。切口引流用“T”管，在胸管上窝的上方另戳口引出。结果我院自1998—2004年共行甲状腺次全切除术120例病人，无一例发生喉上神经和甲状旁腺损伤，有2例出现声音嘶哑，1例3月后恢复，1例于术后4月恢复正常。术后48～72h后拨除引流管，术后5～7d切口折线。讨论血肿压迫或气管软化是呼吸困难和窒息的主要原因，血肿来源于术中止血不确切。我们处理重要血管时均采用2把血管钳钳夹，剪断后双重结扎。残端采用钳剪交替法操作，并一律缝扎。我们采用较粗的T管，防止引流管曲折或血块堵塞致引流不畅。气管软化的处理：术中注意气管弹性，如果弹性消失，立即将气管固定于胸锁乳突肌上，以达到气管外支撑，避免了因气管软化引起窒息。对于喉返神经损伤的预防，我们体会，不刻意解剖喉返神经，避免了因解剖神经过程中造成损伤，而且在处理甲状腺下极血管时，不处理甲状腺下动脉主干，而是紧靠腺体表面Ⅰ-Ⅱ级血管分支连同周围组织一并集束结扎，基底部采用钳剪交替法，保留腺体背侧气管食管沟部甲状腺组织，以避免损伤喉返神经。巨大甲状腺可向下颌部延伸，侧方可达颈后三角，下板则较少延伸至胸骨后。巨大的腺上极使甲状腺血管上移，使之更贴近喉上神经，特别是外支，此时，可先处理腺下极血管，充分显露上极，可在明视下处理甲状腺上血管。采用集束结扎法，充分游离上极周围组织后，紧贴上极一次性将包括少许血管旁组织在内的血管集束完整的结扎，同时在处理上极时不作过度牵拉或强行托出，这样可完全避免喉上神经的损伤。甲状旁腺损伤低钙抽搐，损伤常因误切，挫伤或血供障碍所致，改良后的手术方法是处理甲状腺血管均紧靠甲状腺，于甲状腺真假被膜间进行，对喉返神经及甲状旁腺不做任何解剖和显露，腺体组织的侧后面采用钝性分离。这样造成甲状旁腺损伤的因素完全可以避免。     

甲状旁腺术中不染色快速组织学鉴定的应用价值

目的:研究甲状腺手术过程中甲状旁腺不染色快速组织学鉴定的应用价值.方法:对1999年5月-2005年5月期间实施的446例甲状腺手术术中发现的303个疑似甲状旁腺的组织不用HE染色而直接在镜下进行组织学鉴定,以术后该组织的HE染色镜检结果为依据进行符合率的评定.结果:甲状旁腺术中不染色快速组织学鉴定的符合率为98.68%.结论:甲状旁腺术中不染色快速组织学鉴定是一种可靠的方法,有临床应用价值.     

人主动脉夹层血管平滑肌细胞的培养和鉴定

目的 建立人主动脉夹层(AD)血管平滑肌细胞(VSMC)体外培养的方法。 方法 以AD患者手术时切除的血管为原料,用组织块贴壁法进行VSMC的体外原代和传代培养,倒置显微镜观察细胞的生长情况,考马斯亮蓝染色、α-SMA及Ⅷ因子免疫荧光染色和透射电镜检测鉴定细胞。 结果 7～10 d原代细胞从组织块边缘迁移出来,3～4周细胞生长至融合,可进行传代。原代和传代的细胞生长良好,倒置显微镜下见细胞呈长梭形,有多个突起。细胞呈“峰谷状”生长,具有典型的VSMC特征。考马斯亮蓝染色和透射电镜下均可见细胞内有大量沿长轴生长的肌丝,α-SMA免疫荧光染色强阳性,Ⅷ因子免疫荧光染色阴性,证明所培养的细胞为VSMC。细胞传代至第6代以后开始出现老化现象。 结论 应用组织块贴壁培养的方法可成功地在体外培养人AD的VSMC,为今后研究AD的发病机制提供良好的实验基础。     

严重急性呼吸综合征患者甲状腺的病理学改变

目的通过研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者甲状腺的病理学改变及甲状腺细胞所含激素的变化,探讨SARS发病过程中内分泌与疾病的关系。方法对4例SARS患者的尸体解剖甲状腺组织进行石蜡切片,HE染色观察甲状腺的结构;免疫组织化学染色观察甲状腺球蛋白的变化以及降钙素阳性细胞和甲状旁腺素阳性细胞的变化。结果SARS患者甲状腺的组织结构有较明显改变,可见数量、程度不等的滤泡变形、增大或萎缩,滤泡间结缔组织增生或间质血管扩张充盈;甲状腺球蛋白阳性细胞染色明显减弱(P<0.01),未见明显降钙素阳性细胞,甲状旁腺素阳性细胞较之正常组织其平均吸光度值差异无统计学意义(P>0.05),积分吸光度值(前者为3.4±1.8,后者为1.5±0.7)差异有统计学意义(P<0.01)。结论SARS患者甲状腺组织的形态结构明显改变,滤泡上皮细胞和滤泡旁细胞都被累及,同时提示两者的激素合成功能可能受到影响。     

包埋前原位TUNEL标记凋亡淋巴细胞的电镜观察

目的用包埋前原位尾端标记技术在电子显微镜下发现小鼠淋巴结生发中心早期凋亡细胞。方法用GA,PA,PLP分别固定淋巴组织,将其分别切成50μm切片,TUNEL染色,制成1μm切片光镜确认,着色部位制成超薄切片,在电镜下,进行比较观察。结果GA固定的组织中细胞核的TUNEL染色,虽然表面清晰可见,但对组织渗透性较差;PA固定的组织清晰度稍差,但渗透性最好,在电子显微镜下观察效果满意,PLP固定染色效果差,在细胞凋亡的早期,用PA染色时凋亡的细胞核内,可见尚未出现凋亡的生发中心细胞核形态学改变以及核染色质浓缩的核。结论以PA固定的组织,用包埋前技术、TUNEL染色的方法具有简便,染色清晰,易分辨,特异性强的特点,且未见标本损坏现象。     

折射小體的電子顯微鏡結構及其意義

克山病及化学药品中毒病人的红血细胞中常有一种小粒及小体。它对苏木精不染色,故称之为折射小粒及折射小体。其结构和所在是否与Heinz氏小体相似,我们作以下的观察。材料及方法取克山病人及中毒患者的血液作血膜片,甲醇固定,伊红——苏木精染色,水洗干燥后加松脂及盖片,作光学显微镜及3D聚光器检查。电子显微镜检查分为悬浮标本及超薄切片,悬浮标本先将红血细胞溶血,将其分散,用1％锇酸(pH 7.2-7.4)固定。超     

甲状腺过氧化物酶在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达及意义?

目的:观察甲状腺过氧化物酶(TPO)在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达,评价TPO免疫化学染色对良、恶性甲状腺肿瘤的鉴别诊断价值.方法:应用免疫化学染色法观察TPO在71例手术切除的甲状腺肿瘤组织细针抽吸物(FNA)涂片及组织冰冻切片中的表达,阳性判定按照80%以上甲状腺细胞染色为阳性.结果:TPO在恶性组织的FNA细胞涂片与组织切片标本中的表达均低于良性甲状腺肿瘤,差异有统计学意义(P＜0.01);而FNA细胞涂片与组织切片TPO表达阳性率无显著差异.图像分析结果显示恶性甲状腺肿瘤细胞的TPO染色强度明显低于良性甲状腺组织细胞,两者平均密度值、相对光密度值和着色的颜色强度均有显著差异(P均＜0.05);而FNA细胞涂片和组织切片间无显著差异.甲状腺肿物囊液涂片中良、恶性细胞的TPO表达阳性比分别为20/22、0/4,两者有显著差异(P＜0.05).以H-E染色为参考,FNA细胞涂片阳性及阴性预告值分别为95.74%、91.67%,组织切片染色为100%、66.47%,囊液涂片染色为97.44%、88.46%.结论:TPO在良性甲状腺细胞中的表达明显高于恶性甲状腺肿瘤细胞;TPO免疫化学染色可用于甲状腺针吸细胞,作为诊断甲状腺良、恶性肿瘤的辅助手段.     

快速印片配合冰冻切片的诊断及应用价值

细胞病理学是诊断病理学的一个重要分支 ,其重要作用已为大家共识 ,而细胞快速印片在临床外科手术中配合病理组织学冰冻切片的快速诊断作用 ,还没有广泛推广和使用。现将二者密切配合 ,相辅相成 ,在临床工作中的诊断及应用价值介绍如下。1　材料与方法1.1　材料来源　手术中送检的快速标本 ,疑为肿瘤者。1.2　方法及步骤　将标本切开 ,取组织块进行冰冻切片 ,剩下的标本用载物片轻轻按压它的切面 ,使其表面的一层细胞印在玻片上 ,可连续印数张 ,立即固定、染色。HE快速染色步骤 :(1) 95 %酒精固定 1min ;(2 )水洗一过 ;(3 )苏木素液 1min ;…     

活性纳米碳对甲状旁腺的保护作用及其在甲状腺全切术中的价值分析

目的 探讨甲状腺全切手术中活性纳米碳对于患者甲状旁腺的保护及应用价值.方法 选取甲状腺肿瘤患者68例,将其随机分为对照组和观察组,各34例.对照组采用常规的方式实行甲状腺全切术,观察组在实行甲状腺全切术时应用活性纳米碳后再行手术,比较分析2组患者的甲状旁腺保护状况及血钙、血清水平.结果 观察组患者的甲状旁腺保护状况,明显优于对照组(P<0.05).观察组患者的血钙、血清水平,明显优于对照组(P<0.05).结论 活性纳米碳应用于实施甲状腺全切除手术时,能避免患者出现受损状况,全面、科学地保护患者的甲状旁腺.     

小标本的固定、脱水、包埋技巧

随着现代医学的发展，内镜活检及穿刺活检小标本越来越多，小标本的切片制作已成为外检病理工作的重要问题．我们抽查了本科20余年的小标本切片，对小标本的固定．取材、脱水、透明．浸蜡，包埋、切片．染色等过程进行了总结分析。认为固定不及时和采用95％的酒精固定可影响切片染色效果．采用95％酒精固定以及脱水，透明、浸蜡不当可使组织变脆，影响切片质量．包埋不当则组织不易切全，影响诊断．建议10％中性福尔马林克分固定，专用脱水机处理标本，按粘膜方向进行包埋．多块组织者要使各组织块保持在同一平面，每张切片要捞取不同层次的组织片10片以上．