SOD和NOS、NO在As2O3抗S180肉瘤细胞中的作用

目的 初步探讨超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(N0)在三氧化二砷(As2O3)抗S180肉瘤细胞中的作用。方法 对小鼠S180肉瘤细胞进行细胞培养，并建立S180移植瘤动物模型，体内外观察As2O3对S180肉瘤的抑制作用，同时检测细胞及肿瘤组织内的总超氧化物歧化酶(TSOD)、含锰超氧化物歧化酶(MnSOD)，含铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)以及NOS、NO的改变。结果 As2O3可以抑制小鼠S180肉瘤细胞生长并具有浓度依赖性，在一定浓度下其作用强于化疗药物阿霉素(ADM)；肿瘤细胞内及肿瘤组织内的TSOD、MnSOD以及NOS、NO均表现出下降的趋势，TSOD和NO呈正相关。结论 As2O3作用后引起肿瘤细胞和肿瘤组织SOD的改变进一步导致了NO生成的减少，这可能是As2O3抑制肿瘤生长的机制之一。     

三氧化二砷抑制小鼠S180肉瘤细胞生长的实验研究

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对S180肉瘤细胞生长的作用并探讨其作用机制。方法 对小鼠S180肉瘤细胞进行细胞培养，并建立S180移植瘤动物模型，体内体外观察As2O3对S180踟肉瘤的作用，同时检测细胞及肿瘤组织内超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的改变。结果 体内体外实验结果显示As2O3可以抑制小鼠S180肉瘤细胞生长并具有浓度依赖性，在一定浓度下其作用强于化疗药物阿霉素(ADM)；肿瘤细胞内及肿瘤组织内的SOD含量下降，IDH含量上升。结论 As2O3作用后引起的SOD下降在促进肿瘤细胞坏死和诱导肿瘤细胞凋亡过程中具有一定的作用。     

As2O3对小鼠S180肉瘤VEGF表达的影响

目的　研究As2 O3 对小鼠S180 肉瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,初步探讨As2 O3 抑制小鼠S180肉瘤生长的作用机制。方法　建立S180 移植瘤动物模型,检测As2 O3 作用后肿瘤组织内诱导型一氧化氮合酶(iN OS)、一氧化氮(NO)的改变,同时通过免疫组织化学检测肿瘤组织内iNOS、VEGF蛋白表达情况。结果　As2 O3 作用后肿瘤组织内的iNOS、NO含量下降,iNOS、VEGF蛋白表达逐渐下降,在3.5mg·kg-1·d-1组出现统计学意义(P<0 .0 5 )。结论　As2 O3 作用后导致NO的降低,从而抑制肿瘤细胞VEGF的表达,进而抑制肿瘤血管生成,有效降低肿瘤细胞株的增殖和转移能力。     

苦参总黄酮体内外抗肿瘤作用实验研究

目的：考察苦参总黄酮（kushenflavonoids，KS—Fs）的体内外抗肿瘤作用。方法：采用甲基噻唑基四唑（methylthiazolyltetrazolium，MTT）比色法检测KS—Fs对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用；构建S180肉瘤、H22肝癌和Lewis肺癌小鼠肿瘤模型和人非小细胞肺癌H460、食管癌Eca-109裸小鼠移植肿瘤模型，研究KS—Fs体内抗肿瘤作用；急性毒性试验考察KS—Fs的毒副作用。结果：KS—Fs和苦参酮（kurarinone，Kur）在体外有比苦参总碱（kushenalkaloids。KS—As）更强的细胞毒作用（半数抑制率：KSFs4．9～29．4〉g／ml，Kur2．0～13．1〉g／ml，KSAs〉200／lg／m1）。体内研究表明KSFs和Kur不仅能有效抑制小鼠H22肝癌、S180肉瘤、Lewis肺癌（瘤质量抑瘤率60％～80％），而且能显著抑制人非小细胞肺癌H460和人食管癌Eca109裸小鼠移植肿瘤的生长（瘤质量抑瘤率在41％～47％）。小鼠口服和静脉注射KS—Fs的最大耐受剂量分别大于2．8g／kg和750mg／kg，远远超过苦参碱（口服半数致死量为1．18g／kg），且无明显毒副作用。结论：研究表明KSFs或Kur是新颖的高效低毒的抗肿瘤候选药物。     

栀子抑制小鼠S180和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的 探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用.方法 分别采用荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)-1,qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的增重(P＜0.01),抑瘤率分别为44.8%和61.0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52.6%.结论 栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

化瘤灵抗肿瘤作用的研究

目的：了解化瘤灵(HLL)胶囊抗小鼠移植性肿瘤的作用。方法：以小鼠S180，肉瘤、小鼠肝癌(Hep A)为瘤株，观察化瘤灵胶囊对肿瘤的抑制作用。结果：化瘤灵对小鼠S180实体瘤和肝癌实体瘤均有明显的抑制作用，抑瘤率分别为49．3％、52.3％，并有延长Hep A腹水型荷瘤小鼠生命的作用，生命延长率为44．83％。小鼠急性毒性最大耐受量(MTD）为50g／kg。结论：化瘤灵在实验室条件下有一定抗肿瘤作用日．毒性低。     

As2O3对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B皮下移植瘤抗肿瘤作用

目的 检测不同浓度As2O3对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及对瘤细胞内磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)表达的影响,进一步探讨As2O3的抗肿瘤机制.方法 建立人子宫内膜癌HEC-1-B细胞皮下移植瘤模型,随机分为实验组,即As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)剂量组,生理盐水(NS)组及顺铂组(5 mg/kg),腹腔内注射给药,连续8 d.观察用药前后裸鼠体质量改变.剥取瘤组织,计算药物的抑瘤率.检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规.透射电镜观察细胞变化,流式细胞仪检测细胞凋亡周期和细胞凋亡率,免疫组化法检测p-ERK的表达.结果 不同浓度As2O3和顺铂均有不同程度抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡的作用,其中As2O3低剂量组的抑瘤率为34.3%,p-ERK的表达率为37.5%,该组在亚G1期出现典型的凋亡峰,且As2O3低剂量组与NS组比较,凋亡率、瘤质量差异均有显著意义(F=27.20、33.92,q=9.19、13.34,P<0.05).As2O3低剂量组与顺铂组相比,无明显血液及肝肾毒性.结论 低剂量As2O3组能明显抑制肿瘤细胞HEC-1-B生长,且毒副作用轻,可能与阻滞细胞周期,抑制p-ERK表达有关.     

甘草总黄酮体内抗肿瘤作用及其机制的初步研究

目的探讨甘草总黄酮体内抗肿瘤作用并阐明其可能的作用机制。方法建立S180小鼠肉瘤,观察甘草总黄酮对S180小鼠肉瘤抑瘤率,肿瘤组织切片HE染色观察其病理改变,从肿瘤组织提取的DNA并做琼脂糖凝胶电泳,用免疫组化法检测瘤组织内Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果甘草总黄酮各组能显著抑制S180小鼠肉瘤生长,肿瘤组织HE染色观察,部分肿瘤细胞体积较小,细胞核浓染。肿瘤组织的DNA电泳带呈明显的梯状条带;免疫组化显示小鼠肿瘤组织内的Bcl-2蛋白的表达下调,而Bax蛋白的表达上调。结论甘草总黄酮体内有明显的抑瘤作用,抑瘤机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡密切相关,影响肿瘤细胞内相关凋亡蛋白Bcl-2和Bax蛋白的表达实现的。     

石斛水溶性多糖的抗肿瘤作用及其机制的研究

目的观察石斛水溶性多糖（solub le polysaccharides fromDendrobium candidum,SPD）对在体肿瘤和离体培养肿瘤细胞的抑制作用,探讨其抑制作用的可能机制。方法观察SPD对小鼠接种肉瘤（S180）瘤体生长,离体培养人肝肿瘤细胞（SMMC27721）生长的抑制作用;分析小鼠外周血中超氧物歧化酶活性（superoxide d ismutase,SOD）和膜脂过氧化产物丙二醛（m alond ialdehyde,MDA）含量,小鼠胸腺指数和脾脏指数的变化;核染色（Hoechst染色）法观察SPD对人神经母瘤细胞（SH-SY5Y）细胞凋亡的影响。结果SPD处理能够有效抑制小鼠肉瘤（S180）瘤体生长和离体肝肿瘤细胞生长（P〈0.05）;有效提高荷瘤小鼠胸腺指数和脾脏指数,提高SOD活性和降低MDA含量（P〈0.05）;促进神经母瘤细胞凋亡。结论SPD具有显著的抗肿瘤效应,其抑瘤机制可能与SPD促进免疫器官功能和提高抗氧化能力有关。     

灵芝-912对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

目的：探讨灵芝-912(1z-912)对小鼠移植性肿瘤的抑制作用，及其对小鼠免疫功能的影响。方法：采用小鼠移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA)，肉瘤180(S180)，肝癌(HCA)，Lewis肺癌模型，5-Pu为阳性对照组，观察不同浓度1z-912的抗肿瘤作用，并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察1z-912对将瘤小鼠免疫功能的影响。结果：不同浓度1z-912对体外ECA肿瘤细胞的兰柒卑分别为100％，100％，85％，61％和37％(P＜0．01)；1z-912对S180，HCA和Lewis小鼠移植瘤的抑制率分别达45．1％～56．7％，33．3％～52．7％和48．1％～56．6％(P＜0．01)；对腹水型HCA和腹水型肉瘤180小鼠的生命延长率为110．0％～134．0％(P＜0．01)；与5-Pu组比较，1z-912对将瘤小鼠免疫功能无抑制作用。结论：1z-912具有显著抗肿瘤作用，并对将瘤小鼠免疫功能无影响。     

慢性应激致肠易激综合征大鼠模型的建立与评价

目的探讨重组表达的MnSOD或CuZnSOD对野生小家鼠精子冷冻损伤的保护作用。方法以R18S3为基础冷冻保护剂,分别添加不同浓度重组表达的MnSOD或CuZnSOD,通过对各组ICR小鼠冻融精子的活力、质膜完整性、DNA损伤的比较,筛选出两种SOD的合理浓度,并将其添加于野生小家鼠的精子冷冻保护液中,观察添加SOD后,冻融野生小家鼠精子活力、质膜完整性、DNA损伤以及体外受精率的变化。结果添加100UCuZnSOD和200UMnSOD后野生小家鼠冻融精子的活力以及质膜完整性都有显著性提高（P〈0．05）;添加200UMnSOD野生小家鼠冻融精子的体外受精率与对照组相比有显著提高（P〈0．05）,而添加100UCuZnSOD体外受精率则无显著变化。结论在小鼠精子冷冻培养液中添加200U重组表达的MnSOD浓度,对野生小鼠精子冷冻损伤具有一定的保护作用。     

腺病毒介导MnSOD转染对肺癌细胞生长及体内抗肿瘤作用的影响

目的研究腺病毒介导锰超氧化物歧化酶(Ad-MnSOD)对肺腺癌细胞生长影响及在体内抗肿瘤作用.方法应用细胞基因转染、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),观察Ad-Mn-SOD转染A549细胞后对肺癌A549细胞生长的影响,并将A549细胞接种到裸鼠皮下后,注射Ad-MnSOD及Ad-LacZ到瘤体内,观察对肿瘤生长的影响.结果50MOI Ad-Laze转染率达90%以上,Ad-MnSOD转染A549细胞后MnSOD mRNA表达增加,MTT法检测显示转染Ad-MnSOD A549细胞组生长率(78.7%)低于转染Ad-LacZ的对照组(92.2%);A549细胞接种裸鼠后,用Ad-MnSOD及Ad-LacZ分别注射于瘤体内,Ad-MnSOD组瘤体生长速度低于Ad-LacZ对照组.结论Ad-MnSOD转染A549细胞后MnSOD可明显抑制A549细胞生长及肿瘤在裸鼠体内的生长,MnSOD对肺癌细胞A549有明显抗肿瘤作用.     

三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移的抑制作用

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人结肠癌裸鼠肝转多的影响及其作用机制。方法 BALA/C-nu/nu裸鼠经脾脏接种人结肠腺癌LS-174T细胞建立人结肠癌裸鼠肝转移模型后，随机分为实验组和对照组，分别经尾静脉注射As2O3和生理盐水，观察各组生存期、肝转移结节的数目、大小，以及血清、腹水中癌胚抗原（CEA）的含量和转移癌细胞周期。结果 与对照组相比，As2O3可明显延长荷瘤鼠生存期，抑制肝转移，治疗组血清和腹水中CEA水平均低于对照组，转移癌细胞周期中G0/G1期比例上升，S期比例下降。结论 三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移有明显的抑制作用。     

Apoptosis susceptibility of tumor cells to arsenic trioxide and the inherent cellular level of reactive oxygen species

Objective To explore the association of in herent cellular reactive oxygen species (ROS) levels with susceptibility of the tumor cells to apoptosis induction by arsenic trioxide (As(2)O(3)).Methods Low concentration (2μmol/L) of As(2)O(3) was administered to two cultured leukemic cell lines, NB4 and U937, and two esophageal carcinoma cell lines, EC1 .71 (also named EC/CUHK1) and EC1867, to confirm the difference in apoptosis su sceptibility of NB4 versus U937 and of EC1.71 versus EC1867. Dihydro genrhodamine 123 (DHR123), used as a ROS capture agent, was incubated with cell s in the absence of As(2)O(3). Fluorescence intensity of rhodamine 123, the pro duct of cellular oxidation of DHR123, was detected by flow cytometry and ROS was measured. Results Low concentration of As(2)O(3) induced apoptosis was more likely to occur in NB 4 and EC1.71 cells than in U937 and EC1867 cells, or NB4 was more sensitive tha n U937, and EC1.71 more sensitive than EC1867 to As(2)O(3). The inherent cellu lar ROS level is higher in NB4 than in U937, and also higher in EC1.71 than in EC1867 . Conclusions The difference in cellular ROS level is positively associated with cellular susc eptibility to apoptotis induction by As(2)O(3). The inherent ROS level might be important in defining apoptotic susceptibility to As(2)O(3).     

肿瘤患者淋巴细胞和粒细胞超氧化物歧化酶活力分析

测定了５２例消化道肿瘤患者（２１例结肠癌，２１例胃癌，１０例食管癌）外周血淋巴细胞、粒细胞的铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎＳＯＤ）、锰超氧化物歧化酶（ＭｎＳＯＤ），并与４８例健康人进行了比较。肿瘤患者粒细胞总ＳＯＤ、ＭｎＳＯＤ、ＣｕＺｎＳＯＤ活性均显著高于对照组，淋巴细胞总ＳＯＤ活性亦较对照组显著升高。淋巴细胞ＳＯＤ活性以及ＭｎＳＯＤ含量远大于粒细胞。提示肿瘤患者淋巴细胞和粒细胞ＳＯＤ活性增高可能与免疫功能有关，值得进一步探讨。     

开口箭皂甙抑制小鼠S-180肉瘤细胞增殖及实体瘤生长的实验研究

目的 研究开口箭皂甙(STCB)体内外抗S-180肉瘤活性的强度及其作用机制.方法 MTT法检测S-180细胞的增殖程度;制备昆明种小鼠S-180移植实体瘤模型,观察STCB的抑瘤作用;光镜和电镜下观察药物作用后S-180细胞形态及超微结构变化;以不同浓度STCB处理S-180细胞,经碘化丙啶染色后应用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 STCB体外明显抑制S-180细胞增殖,IC50为34.64μg/ml.经灌胃给药,STCB对荷S-180实体瘤小鼠表现出良好的抑瘤作用,低剂量(0.5 g/kg体质量)时,抑瘤率已超过30%,高剂量(2 g/kg体质量)时,抑制率达到54.86%.电镜观察和FCM检测证明肿瘤细胞凋亡率随STCB浓度增加而增加.STCB的浓度为10和30μg/ml时,S期细胞百分率上升,G2/M期细胞百分率下降;当STCB的浓度达到60μg/ml,G0/G1期细胞百分率下降,G2/M期细胞百分率上升:提示低浓度STCB阻止S-180细胞从S期进入G2期;高浓度时,STCB还干扰S-180细胞的有丝分裂.结论 STCB在体内外对S-180肉瘤细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期有关.     

甘氨酸-钼锗酸盐体内抑瘤效应及机理研究

目的 :观察甘氨酸 -钼锗酸盐体内抑瘤效应及其抑瘤机理。方法 :建立荷 MGC- 80 3小鼠模型 ,灌药物 1 0 d,MTT法测定抑瘤率 ;MTT法测定 MGC- 80 3小鼠淋巴细胞转化功能及 NK细胞活性 ;通过荧光染色观察 BGC- 82 3细胞凋亡形态及慧星细胞形成。结果 :甘氨酸 -钼锗酸盐显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 ( P<0 .0 5 ) ;显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的转化功能及 NK细胞活性( P<0 .0 5 ) ;诱导肿瘤细胞发生凋亡及破坏肿瘤细胞 DNA。结论 :甘氨酸 -钼锗酸盐可通过提高机体免疫细胞活性、诱导肿瘤细胞凋亡及破坏肿瘤细胞 DNA来抑制肿瘤细胞生长     

桑黄多糖对S180的直接抑制作用

目的研究桑黄多糖对肿瘤S180细胞的直接抑制作用。方法用MTT比色法检测用有无桑黄多糖的培养基培养的肿瘤细胞S180的增殖活性,用流氏细胞仪检测其作用机制是否与凋亡有关及用药后细胞周期的变化。结果与对照组相比,桑黄多糖能直接抑制S180增殖,流式细胞计量术分析显示,桑黄多糖主要通过促进肿瘤细胞凋亡,使瘤细胞增殖周期停滞于G2/M期来抑制肿瘤细胞增殖。结论桑黄多糖能直接诱导肿瘤细胞S180凋亡发挥直接抑制肿瘤作用。     

三氧化二砷对黑素瘤B16细胞内活性氧自由基的影响

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对黑素瘤B16细胞增殖及细胞内活性氧自由基（ROS）水平的影响。方法：30μmol/LAs2O3与500μmol/L N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）分别单独或联合作用于B16细胞,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞生长抑制情况;流式细胞术检测ROS水平。结果：As2O3能明显抑制B16细胞的增殖,NAC可部分拮抗As2O3对黑素瘤细胞的杀伤效应及诱导凋亡效应。As2O3作用1 h后的B16细胞内ROS水平比对照组升高（P〈0.01）,4 h达到高峰,24 h有所下降,与对照组差异均有统计学意义（P〈0.01）。ROS升高的趋势可被抗氧化物NAC部分阻断（P〈0.05-P〈0.01）。结论：As2O3诱导B16细胞凋亡与ROS水平改变有关,As2O3可通过提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,这也可能是As2O3抗黑素瘤的途径之一。