地钱素M抗前列腺肿瘤活性的初步探讨

目的 检测苔藓植物联苄类化合物地钱素M的抗肿瘤活性,并初探其对前列腺癌细胞的作用机制.方法 MTT法检测地钱素M对人白血病细胞株(K562)、人肝癌细胞株(HepG2)、人乳腺癌细胞株(MCF-7)、人前列腺癌细胞株(LNCaP、DU145及PC-3)和人正常视网膜色素上皮细胞株(hTERT-RPE1)的增殖影响;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测地钱素M对PC-3细胞增殖的作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达;4',6-二脒基-2.苯基吲哚(DAPI)染色法检测PC-3细胞核的变化.结果 地钱素M可抑制K562、HepG2、MCF-7、LNCaP、DU145、PC-3细胞的增殖,其对PC-3细胞增殖的抑制作用尤为显著,而对hTERT-RPE1细胞增殖的抑制作用较弱.BrdU结果显示,地钱素M能够降低BrdU在PC-3细胞中的掺入;流式细胞术示,地钱素M将PC-3细胞阻滞在GO-G1期,且出现明显的subG1峰,并伴随周期相关蛋白的变化;DAPI示,细胞核发生凋亡的特征性变化.结论 地钱素M具有抑制肿瘤细胞增殖的活性,并引起PC-3细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡.     

月腺大戟素A抗乳腺癌活性

目的 从中药狼毒药材中分离、纯化化合物月腺大戟素A,探讨其抗乳腺癌活性。方法 采用回流提取、溶剂萃取和吸附色谱法从狼毒药材中分离、纯化月腺大戟素A,通过质谱和核磁共振谱解析其化学结构。以乳腺癌细胞SUM149（三阴型）、MCF-7（luminal A型）、ZR-75-1（luminal B型）、SK-BR-3（HER2阳性型）为测试细胞株,用MTT法测定月腺大戟素A的抗乳腺癌细胞增殖活性,用流式细胞术检测月腺大戟素A对SUM149细胞周期的影响,用裸鼠移植SUM149细胞建立肿瘤模型并评价月腺大戟素A对肿瘤的抑制效果。结果 月腺大戟素A结构为3,3’-二乙酰基-2,4’-二甲氧基-2’,4,6,6’-四羟基-5’-甲基二苯基甲烷;对SUM149、MCF-7、ZR-75-1和SK-BR-3细胞的半数抑制浓度分别为5.50、6.16、7.08、8.64 μmol/L。月腺大戟素A作用SUM149细胞12、24和48 h后,随着月腺大戟素A浓度（2.5、5、10 μmol/L）的升高,G₀/G₁期细胞比例下降（P<0.05,P<0.01）,S期细胞比例上升（P<0.05,P<0.01）。给予35 mg/kg腹腔注射月腺大戟素A后,裸鼠肿瘤体积和质量的抑制率分别为37.94%和41.38%。结论 月腺大戟素A对4种乳腺癌细胞增殖均有抑制作用,并可抑制裸鼠SUM149细胞移植肿瘤生长,其机制可能与抑制SUM149细胞周期从S期到G₂/M期的转换有关。     

生存素与细胞周期和凋亡

在细胞凋亡调控中，IAPs家族越来越受到人们的关注。IAPs家族蛋白既可抑制caspases的活化，又可抑制caspases酶的活性。Survivin(生存素)是新近发现的哺乳动物IAP。1997年由耶鲁大学的Altieri等利用杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列-1(EPR-1)基因cDNA作为探针筛选人基因组文库，得到一个与其编码区序列高度互补的基因，这就是Survivin。它独     

胡桃醌体外抗胰腺癌细胞机制的初步研究

目的:探讨胡桃醌体外抗胰腺癌细胞的机制.方法:采用MTT法检测胡桃醌对BXPC-3细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析胡桃醌对BXPC-3细胞周期的影响.结果:MTT法试验结果显示,胡桃醌对体外培养的人胰腺癌BXPC-3细胞具有明显的生长抑制作用,24、48 h的IC50值为1.64x10-5,5.8x10-5 mol/L.同时胡桃醌能随着浓度的增加,时间的延长,诱导BXPC-3细胞周期停滞于G2期和S期,呈G2期和S期阻滞作用.结论:胡桃醌对胰腺癌BXPC-3细胞有明显的生长抑制作用,并能阻止其周期,诱导BXPC-3细胞凋亡.     

生存素在肿瘤研究中的进展

survivin是一种新发现的凋亡抑制蛋白(inh ib iorapoptosisipro-te in,IAP),它主要通过抑制半胱天冬蛋白酶3(caspase 3)和半胱天冬蛋白酶7(caspase 7)的活性而抑制细胞凋亡。目前,对survivin的分子生物学,组织分布特点,凋亡抑制机制与细胞周期关系及其与肿瘤的发生发展、诊断、     

丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。 方法：前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量丁酸钠作用后,相差显微镜观察细胞形态变化,MTT测定丁酸钠对PC-3M细胞的增殖抑制率,吖啶橙/溴化乙锭染色检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡峰。 结果：丁酸钠对PC-3M细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性;并使PC-3M细胞产生凋亡形态学变化;细胞周期被阻滞于G₁/G₀期和G₂/M 期,S期细胞减少,有亚G₁峰出现。结论：丁酸钠对PC-3M细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。     

菝葜鞣质抗肺癌活性研究

目的探讨菝葜鞣质抗肺癌活性及其作用机制,为菝葜临床用于治疗肿瘤疾患提供科学实验依据。方法采用细胞计数仪测定给药后肺癌细胞的死亡率、流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率、Westrn Blot检测Bcl-2、Bax及CyclinD2蛋白的表达水平。结果菝葜鞣质可升高肺癌细胞死亡率、诱导细胞凋亡并使其细胞周期阻滞在G0/G1期;随着给药浓度的增加,Bcl-2、CyclinD2表达水平下降,Bax的表达水平无明显变化。结论菝葜鞣质具有抗肺癌活性,其作用机制可能是通过下调Bcl-2及CyclinD2的表达促进A549细胞凋亡并使其细胞周期阻滞在G0/G1期。     

食欲素与肿瘤关系的研究进展

食欲素是由下丘脑神经元合成和分泌的神经肽,具有调节摄食行为、能量代谢、神经内分泌、睡眠和觉醒、奖赏以及应激等生理功能。近年研究提示,食欲素参与多种肿瘤的发生,调节肿瘤细胞的增殖和凋亡。本文对食欲素与结直肠、肝脏、胃、前列腺及肾上腺肿瘤关系的研究进行综述,探讨食欲素参与肿瘤发生的机制,为肿瘤的治疗发现新的靶点。     

五味子丙素体外抗胃癌细胞系AGS的活性

目的：探讨中药五味子中五味子丙素的体外抗胃癌活性。方法：在胃癌细胞AGS中,采用MTT法和集落形成实验测定五味子丙素对细胞的生长抑制活性,采用流式细胞仪测定其诱导细胞凋亡的活性,采用Western blot法测定其对凋亡蛋白表达的影响。并用MTT法测定其对不良反应较大的传统胃癌一线化疗药物5-FU的增敏活性。结果：五味子丙素对胃癌细胞AGS生长抑制的IC50为（35.73±0.28）μmol/L,并能浓度剂量依赖性地抑制细胞集落形成,诱导细胞凋亡,上调凋亡蛋白Cleaved-PARP,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P＜0.05）。结论：五味子丙素对胃癌细胞具有较好的抑制生长和诱导凋亡的活性。     

氧化苏木素抑制ABCB1介导肿瘤多药耐药活性的研究

目的探讨氧化苏木素对ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性的影响抑制。方法MTT试验检测氧化苏木素对人白血病K562及其耐药K562／ADR（ABCBl高表达）细胞的细胞毒作用;AnnexinV／PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果氧化苏木素对耐药的K562／ADR细胞具有高效的细胞毒作用,氧化苏木素对K562和K562／ADR细胞的IC50值分别为（5．45±0．36）和（5．62±0．43）μmol／L,二者无显著性差异。流式细胞仪检测凋亡的结果显示：0、5、10、20Ixmol／L的氧化苏木素分别处理K62和K562／ADR细胞后。K562细胞的凋亡率从（3．41±0．55）％依次升高到（24．67±2．08）％、（40．33±3．51）％和（66．67±3．64）％,K562／ADR细胞的凋亡率从（2．82±0．57）％依次升高到（23．01±3．60）％、（38．23±4．06）％和（65．77±5．51）％。结论氢化苏木素克服了ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性．诱导耐药细胞凋亡是茸作用的机制．     

蝎毒组分Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用

目的：观察蝎毒组分Ⅰ(SV-Ⅰ)对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用。方法：卵巢癌细胞SKOV3分为空白对照组和SV-Ⅰ处理组(终浓度分别为200、400、800 mg•L^-1)，采用MTT法检测SV-Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长抑制率，集落形成法检测肿瘤细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果：200、400和800 mg•L^-1-1组, SKOV3细胞集落数分别为57.00±6.16和48.00±4.11，明显低于对照组（84.00±5.29）(P<0.01)；与空白对照组比较，400 mg•L^-1组SKOV3细胞S期细胞数明显减少（P<0.01），G₂+M期细胞明显增多 (P<0.01)， 800 mg•L^-1组SKOV3细胞G₂+M期细胞数明显减少（P<0.01），G₁期细胞数有增多趋势；与空白对照组比较，400 和800 mg•L^-1组SKOV3凋亡细胞数明显增加（P<0.01）。结论：在一定浓度范围内蝎SV-Ⅰ可明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长，其机制与SV-Ⅰ抑制SKOV3细胞DNA合成、诱导SKOV3细胞发生G₂+M和G₁期阻滞及诱导SKOV3细胞凋亡有关。     

PARP-1抑制剂对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨PARP-1抑制剂3-aminobenzamide（3-AB）对骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响。方法常规培养骨肉瘤U2OS细胞,采用CCK-8法检测U2OS细胞的增殖和流式细胞术检测细胞凋亡,并用caspase-3活性测定试剂盒检测caspase-3活性和Western-blot技术检测Bcl-2、Bax的表达。结果 3-AB能抑制骨肉瘤细胞的增殖,且与剂量和时间呈相关性,流式细胞术检测结果显示3-AB能促进骨肉瘤细胞的凋亡,且呈时间相关性,3-AB刺激早期caspase-3活性增高,Western-blot显示3-AB刺激后随时间延长Bax的表达量逐渐升高,而Bcl-2的表达量则轻度升高后降低。结论 PARP-1抑制剂3-AB能抑制骨肉瘤细胞的增殖,促进其凋亡,这为PARP-1作为骨肉瘤治疗的新靶点提供了初步实验依据。     

茶多酚对人前列腺癌PC-3M细胞中SurvivinmRNA和蛋白表达的影响

目的探讨茶多酚对人前列腺癌PC-3M细胞中调控细胞凋亡的生存素（Survivin）mRNA和蛋白表达的影响。方法在人前列腺癌PC-3M细胞培养器皿中分别加入用完全培养液稀释的0、40、60、80滋g/ml茶多酚溶液,24、48h后应用RT-PCR和Westernblot检测并比较SurvivinmRNA、蛋白表达水平。结果与0滋g/ml组相比,40滋g/ml组加入茶多酚48h后SurvivinmRNA、蛋白表达水平均明显下调（均P＜0.05）;60、80滋g/ml组加入茶多酚24、48h后SurvivinmRNA、蛋白表达水平均明显下调（均P＜0.05）,其中80滋g/ml组下调最为明显（均P＜0.05）;大致呈剂量、时间依赖性（均P＜0.05）。结论茶多酚可下调SurvivinmRNA和蛋白表达水平,促进人前列腺癌PC-3M细胞调亡,在一定范围内呈剂量、时间依赖性。     

Inhibitory effect of mycophenolate mofetil on human hepatocellular carcinoma cell line HepG-2

To investigate the inhibitory effect of mycophenolate mofetil on human hepatocellular carcinoma cell line HepG-2. Methods： HepG-2 cells were cultured in the presence of the different concentrations of mycophenolate mofetil in vitro. MTT assay was used to analyze the inhibition of cell viability conferred by mycophenolate mofetil. Cell apoptosis was observed using Hoechst33258 staining, and the percentage of HepG-2 cells at different cell cycles was determined through flow cytometry. The ability of cell adhesion was evaluated by in vitro adhesion assay. Gene expressions of factors （ICAM-1 and VCAM-1） were detected by RT-PCR. Results： Mycophenolate mofetil significantly inhibited the growth of HepG-2 cells by inducing the apoptosis of cells and this drug also inhibited the adhesion of HepG-2 cells in a dose-dependent manner. Marked morphological changes characterized in cell apoptosis were demonstrated through Hoechst33258 staining. In addition, mycophenolate mofetil decreased the proportion of S phase cells and increased that of G0/G1 phase cells. [^3H]-Thymidine uptake assay indicated that the application of mycophenolate mofetil at different concentrations significantly inhibited the cell proliferation. RT-PCR identified the expression levels of ICAM-1 and VCAM-1 genes in liver cancer cells after cultured for 72 h with different concentrations of drug. An inverse relationship was found between the expressions of ICAM-1 and VCAM-1 and drug concentrations. Conclusion： Mycophenolate mofetil has remarkable inhibitory effect on hepatocarcinoma HepG-2 cells.     

丝裂原活化蛋白激酶在雷洛昔芬抑制前列腺癌细胞系PC3增殖中的作用

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在雷洛昔芬(RAL)引起雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞凋亡和细胞周期阻滞中的作用.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度RAL作用48、72、96、120 h后对PC3细胞生长抑制率.不同处理因素作用后流式细胞仪分析细胞周期分布和亚二倍体峰,TUNEL染色检测细胞凋亡.Western印迹检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)、c-Jun N端应力激活的蛋白激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)活性以及Bel-2、磷酸化Bcl-2(p-Bel-2)、Bax和半胱氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)的表达.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测雌激素受体(ER)α、ERβ、细胞周期蛋白依赖激酶抑制蛋白(P21WAF1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)基因的表达.结果 RAL呈浓度依赖性抑制PC3细胞增殖.10-6mol/L RAL可以快速持续激活ERK1/2和p38,不激活JNK.处理因素作用48 h后,对照组、RAL、RAL+PD98059、RAL + SB203580组细胞凋亡率分别为0.9%±0.1%;22.9%±1.5%;15.2%±1.8%和9.7%±0.6%(P＜0.05).10-6 mol/L RAL使细胞阻滞在G1期,10 μm PD98059或SB203580预孵育1 h可减轻RAL此种作用.PC3细胞表达ERα和ERβ.RAL、RAL+PD98059、RAL+SB203580组中cyclinD1和P21WAF1基因表达分别为对照组的0.50±0.02、4.48±0.12倍;0.49±0.02、1.77±0.06倍;2.36±0.08、4.50±0.03倍(P＜0.05).Bcl-2、Bax和caspase-3(对照组、RAL、RAL+PD98059、RAL+SB203580)的表达分别是1、0.33±0.02、0.34±0.01、0.81±0.05;1、3.14±0.02、1.67±0.11、3.15±0.03;1、4.16±0.02、2.66±0.03、1.80±0.06.RAL作用1.5 h后p-Bcl-2增加,SB203580可以抑制RAL引起的p-Bcl-2增加.结论 RAL激活ERK1/2增加P21WAF1.基因表达,并激活p38抑制cyclinD1表达使细胞阻滞在G1期.RAL激活ERK1/2促进Bax表达,同时激活p38磷酸化Bcl-2使其表达减少,引起PC3细胞凋亡.     

三氧化二砷对前列腺癌PC-3细胞周期调节分子的影响

目的：本试验通过检测三氧化二砷（As2O3）对前列腺癌（PCA）PC-3细胞周期素依赖性激酶（CDK）、CDK抑制剂（CDKI）pRb相关蛋白、E2F的影响，探讨其抗PCA的机制，为临床应用提供依据。方法：应用Western blotting及免疫沉淀技术检测细胞周期调节分子CDK、CDKI、周期素、pRb相关蛋白和E2F的变化及细胞周期素-CDKI和pRb相关蛋白-E2F复合物的形成；激酶试验测定As2O3对CDK、周期素相关激酶活性的影响。结果：As2O3可诱导PC-3细胞Cip1／p21和Kip1／p27呈计量依赖性增加，而CDK2，6和周期素E，A下调；As2O3增强周期素-CDKI的结合，而降低CDK2，4，6和周期素D1和E相关激酶的活性；As2O3使次磷酸化pRb／p107和pRb2／p130以及与E2F4结合增加。结论：As2O3以CDKI或Rb相关蛋白为作用靶点来阻止细胞周期进程、抑制细胞生长，具有治疗PCA的作用。     

TNP-470对结肠癌Lovo细胞生长的抑制作用

目的　探讨 TNP- 4 70对体内外人结肠癌 L ovo细胞生长的影响 .方法　采用 MTT法检测 TNP- 4 70对体外培养的 L ovo细胞的生长抑制作用 .建立结肠癌皮下移植瘤模型 ,16只裸鼠平均分为治疗组 (TNP- 4 70 30 mg· kg- 1 )和对照组(相同体积的生理盐水 ) ,4 wk后处死裸鼠 ,测量肿瘤体积 .肿瘤组织行病理学检查 ,采用 HE染色和 TUNEL 原位末端标记术检测体内肿瘤细胞的凋亡情况 .结果　 TNP- 4 70作用 72h,明显抑制体外培养的 L ovo细胞的生长 ,IC5 0为 5 5 .8μg·L- 1 . TNP- 4 70显著抑制了体内肿瘤的生长 ,治疗组肿瘤体积为 (731± 4 0 ) mm3,对照组为 (1345± 38) mm3,(P<0 .0 1) .治疗组 L ovo细胞凋亡率为 (2 1.4± 2 .1) % ,对照组为 (7.5±1.5 ) % ,(P<0 .0 0 1) .结论　 TNP- 4 70能够抑制结肠癌 L ovo细胞的体内外生长 ,其机制可能与诱导细胞凋亡有关 .     

重组人生长激素对肾癌细胞株细胞周期动力学影响

目的　本实验试图阐明生长激素对于肾癌细胞有无促增殖和分化作用。方法　取对数生长期的人肾癌细胞株GRC -1,以氟尿嘧啶和 /或不同浓度的重组人生长激素 (rhGH)体外培养 ,2 4小时以后流式细胞仪测定细胞增殖周期和细胞凋亡等指标。结果　在空白对照组 ,G0 ～G1期的细胞数约占 5 3%,S期细胞数次之 ,G2 ～M期占不足 4%。在生长激素组 ,G0 ～G1期细胞数率降低 (P <0 .0 5 ) ,S期细胞百分率增高 (P <0 .0 1)。在单纯氟尿嘧啶组 ,G0 ～G1期细胞数增高 ,S期细胞数降低 ;同时加氟尿嘧啶和生长激素组与单纯氟尿嘧啶组相比 ,G0 ～G1期细胞数进一步增加 ,S期细胞数进一步降。结论　rhGH在体外作用于GRC -1细胞 ,能诱导细胞分化 ,促使静止细胞群进入增殖周期 ,并使处于DNA合成期的细胞增多 ,说明rhGH在体外有促进肾癌细胞生长增殖的作用 ,所以 ,我们推断肾癌细胞膜表面可能存在生长激素受体。氟尿嘧啶能使S期细胞数降低即抑制细胞的增殖 ,与氟尿嘧啶的作用机理相符。生长激素和氟尿嘧啶合用 ,S期细胞数进一步降低 ,说明生长激素能增强氟尿嘧啶抗肿瘤细胞生长增殖作用。     

阿霉素对不同乳腺癌细胞株的抑制及凋亡调控作用

目的 探讨阿霉素(ADM)对人乳腺癌细胞株Bcap37、MDA-MB-231的抑制作用效果及机制,评估细胞凋亡对乳腺癌治疗应用价值。方法 应用不同浓度阿霉素作用于Bcap37、MDA-MB-231,用MTT法检测抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡及凋亡相关分子Fas、Bcl-2与突变型p53蛋白表达的变化。结果 阿霉素对Bcap37的抑制率较高并呈剂量和时间依赖性,但对MDA-MB-231抑制率较低,且剂量和时间效应关系不明显。阿霉素作用于Bcap37后Fas表达升高,Bcl-2表达降低,可观察到细胞凋亡。阿霉素作用于MDA-MB-231后p53、Fas、Bcl-2表达变化不明显,未发现凋亡细胞。结论 不同的乳腺癌细胞株南于其分子生物学特性不同,对化疗敏感性、抗药性不同,与化疗药物对其诱导凋亡的能力差异有关,为乳腺癌的个体化治疗提供实验依据。