miR-196和HoxB8与结直肠癌Folfox4化疗敏感性的相关研究

目的探讨结直肠癌患者术前接受Folfox4方案化疗对miR-196和HoxB8表达的影响,并探讨miR-196和HoxB8在结直肠癌组织中的表达差异以及与Folfox4方案化疗敏感性的相关性及其意义。方法分别用荧光定量PCR技术和免疫组化技术检测新辅助化疗组（包括化疗敏感组与不敏感组）和未化疗组患者结直肠癌组织中miR-196和HoxB8的表达情况,分析二者在不同组间的表达差异及其相关性。结果结直肠癌组织中miR-196和HoxB8mRNA的相对表达量在新辅助化疗组分别为0．6468±0．6839和0．6076±0．4189,相比未化疗组的1．0000±0．0000和1．0000±0．0000均下降（P〈0．01）;miR-196在化疗敏感组的表达相对量为0．9489±0．6910,高于不敏感组的0．3447±0．5361（P〈0．01）;HoxB8mRNA在化疗敏感组的表达相对量为0．4899±0．3715,低于不敏感组的0．7253±0．4375（P〈0．05）;免疫组化结果提示化疗敏感组中HoxB8蛋白表达阳性率低于不敏感组（Z=-2．396,P=0．017）。在新辅助化疗组和未化疗组中,miR-196和HoxB8mRNA的表达均存在负相关关系驴-0．595,P〈0．01;r=-0．435,P〈0．01）。结论术前Folfox4方案化疗可以降低miR-196和HoxB8在结直肠癌组织中的表达水平;miR-196和HoxB8的表达差异可能与结直肠癌患者对Folfox4方案的化疗敏感性相关,高表达的miR-196可能通过抑制HoxB8的表达水平从而增强Folfox4化疗的敏感性。     

EZH2mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨zeste基因增强子同源物2（EZH2）mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用PCR方法检测了27例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织和正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达情况,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织、癌旁组织及正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达水平分别为3.01±1.29、1.20±0.69及0.87±0.37,其在结直肠癌组织的表达水平最高（P〈0.01）,而在癌旁组织和正常黏膜上皮组织中的表达差异无统计学意义（P=0.403）。结直肠癌组织中EZH2 mRNA的表达与其TNM分期（P=0.002）和组织分化程度（P=0.005）均有关,与年龄（P=0.388）、性别（P=0.963）、肿瘤直径（P=0.579）、组织学类型（P=0.945）、肿瘤位置（P=0.611）及淋巴结转移（P=0.449）均无关。结论 EZH2 mRNA在结直肠癌组织中呈高表达,可能在结直肠癌的发生和发展过程中起关键作用,可作为判断结直肠癌恶性程度及进程的参考指标之一。     

多效生长因子在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨多效生长因子（pleiotrophin,PTN）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法采用原位杂交和免疫组化染色方法,检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中PTN mRNA及其蛋白的表达,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果结直肠癌组PTN mRNA及其蛋白的表达阳性率分别为63.9%（53/83）和60.2%（50/83）,均高于（P=0.008,P=0.002）正常对照组的40.7%（22/54）和33.3%（18/54）。结直肠癌组织中PTN mRNA及其蛋白的表达与肿瘤分化程度和TNM分期均有关（P〈0.05）,Ⅲ～Ⅳ期者和低分化者的表达阳性率均较高;而与年龄、性别及肿瘤类型均无关（P〉0.05）。结论 PTN mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中高表达,其可能参与了结直肠癌的浸润和转移。PTN可作为预测结直肠癌转移和预后的指标之一。     

去整合素蛋白酶23在结直肠癌肝转移中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因去整合素蛋白酶23（ADAM23）的表达与结直肠癌肝转移发生发展的关系.方法 应用免疫组织化学和荧光实时定量PCR方法 分析31例结直肠癌患者的癌组织、肝转移灶组织和正常结直肠黏膜组织中的ADAM23蛋白和mRNA表达情况.结果 ADAM23蛋白和mRNA在结直肠癌组织和肝转移癌组织中的表达明显低于正常结直肠癌黏膜组织（P〈0.05）;肝转移癌组织中ADAM23蛋白和mRNA的表达明显低于结直肠癌组织（P〈0.05）.结论 ADAM23的异常表达可能在结直肠癌及其肝转移的发生发展中起重要作用.     

载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨载脂蛋白M（apoM）在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达：采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达．前者相对表达量显著低于后者（0．05±0．01比0．19±0．05,P〈0．05）。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者（P〈0．01）。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5．50．显著低于癌旁组织（10．5,P〈0．05）、肠炎组织（9．75,P〈0．05）、肠息肉组织（11．0,P〈0．01）及正常黏膜组织（10．5,P〈0．05）。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关（P〉0．05）。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。     

microRNA-451在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨microRNA-451（miR-451）在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time qPCR）的方法在40例结直肠癌患者癌组织与切缘正常黏膜标本,以及8种结肠癌细胞株中检测miR-451的表达水平,并分析其与临床病理资料之间的关系。结果：与结直肠正常黏膜组织比较,miR-451在结直肠癌组织及各种结直肠癌细胞株中均呈明显的低表达（均P<0.05）;按结直肠癌患者的不同临床病理特征分组比较发现,miR-451的表达差异与组织学类型和分化程度有关,在黏液性腺癌与低分化腺癌中表达水平最低（均P<0.05）。结论：miR-451在结直肠癌组织中呈低表达,且降低程度与结直肠癌分化程度及组织学类型相关。

     

结直肠癌组织中Ezrin蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨结直肠腺癌组织中Ezrin蛋白表达情况及临床意义。方法：采用微波-EliVisionTM免疫组化染色方法检测100例结直肠癌、30例腺瘤及30例正常黏膜组织中Ezrin的表达分析其与结直肠癌浸润转移等的关系。结果：Ezrin蛋白在结直肠黏膜、腺瘤及结直肠癌中表达阳性率分别为23.3%（7/30）、50.0%（15/30）、72.0%（72/100）,两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;而Ezrin蛋白高表达与结直肠癌浆膜浸润、淋巴结转移和肝转移关系密切（P〈0.05）,与其年龄、分化程度及TNM分期等无关（P〉0.05）。结论：Ezrin蛋白的高表达与结直肠癌发生、发展及转移等有一定相关性,可作为潜在预测结直肠癌浸润转移的敏感指标。     

抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 研究抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用RT-PCR和免疫组织化学法对32例结直肠癌组织和正常黏膜组织中KLF-6和APC基因mRNA及蛋白的表达进行检测和分析。结果 KLF-6与APC的mRNA阳性表达率在结直肠癌组织中分别为37、5％和34，3％，明显低于正常结直肠黏膜组织的96．9％和93．8％（P〈0．05）。KLF-6与APC的免疫组化染色阳性表达率在结直肠癌组织中分别为28．1％和25．0％，明显低于正常结直肠黏膜组织的81．3％和84．4％（P〈0．05）。KLF-6与APC在结直肠癌中的表达存在相关性（P〈0．05），并与肿瘤组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有明显相关性（P〈0．05）。结论 抑癌基因KLF-6和APC的低表达可能与结直肠癌的发生、发展、转移及预后有关，且两者存在相关性。     

miR-150 和miR-134 在结直肠癌及腺瘤中的表达

目的：探讨miR-150和miR-134在结直肠癌与结直肠腺瘤中的表达及意义。 方法：采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）检测40例结直肠癌组织及其癌旁正常组织与29例结直肠腺瘤组织中miR-150和miR-134表达,并分析两者与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果：与癌旁正常组织比较,miR-150在腺瘤组织中表达明显升高,而在癌组织中表达明显降低（均P<0.05）;miR-134在腺瘤组织中表达明显降低（P<0.05）,但在癌组织中表达差异无统计学意义（P>0.05）;miR-150表达水平与结直肠癌的组织学类型及分化程度有关（P=0.033,P=0.041）;miR-134表达水平与结直肠癌的各项临床病理因素均无明显关系（均P>0.05）。 结论：miR-150在结直肠癌中表达下调,提示其可能有潜在的抑癌作用,miR-150和miR-134在结直肠腺瘤中的表达均发生异常,提示两者均可能与结直肠腺瘤的发生密切相关。     

趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的观察趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义,探讨基质衍生因子SDF-1（CXCL12）-CXCR4生物学轴在结直肠癌侵袭转移中的作用。方法免疫组织化学法检测53例结直肠癌组织及27例正常黏膜组织中CXCR4的表达及分布,并分析高表达CXCR4与结直肠癌患者临床病理特征的关系。反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western印迹方法检测27例结直肠癌肿瘤组织、正常黏膜及5例肝转移灶内CXCR4 mRNA表达及CXCR4蛋白表达水平。结果53例结直肠癌组织中CXCR4表达阳性率为73．6％,高表达率（表达超过50％细胞）为45．3％;有淋巴结转移组CXCR4高表达率（65．4％）明显高于无淋巴结转移组（25．9％）（P〈0．01）。并与肿瘤血管淋巴管浸润有关。随着临床分期的增加,肿瘤组织中CXCR4高表达率有升高趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。CXCR4的表达与患者肿瘤部位、大小、浸润深度无关（P〉0．05）。27例新鲜结直肠癌组织中CXCR4mRNA及蛋白表达水平明显高于相应的正常黏膜组织（P〈0．01）;5例肝转移灶组织中CXCR4表达显著高于对应的原发灶（P〈0．01）。结论趋化因子受体CXCR4是一类参与结直肠癌病程进展的重要分子,CXCL12-CXCR4信号通路有望成为结直肠癌治疗的新靶点。     

胃癌组织中E-钙黏蛋白、MMP-2蛋白和MMP-9蛋白的表达及意义

目的探索胃癌组织及癌旁组织中E-钙黏蛋白、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系。方法采用ABC免疫组化染色方法检测40例胃癌组织和癌旁组织中E-钙黏蛋白、MMP-2蛋白及MMP-9蛋白的表达情况,比较2种组织中3种蛋白的表达情况;并分析该3种蛋白与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织与癌旁组织比较,其E-钙黏蛋白的表达下调（P〈0．05）,而MMP．2蛋白和MMP．9蛋白表达均上调（P〈0．05）。T3＋T4期、N1～N3期及Ⅲ＋Ⅳ期胃癌组织中E-钙黏蛋白的表达阳性率分别低于T1＋T2期、NO期及Ⅰ＋Ⅱ期胃癌组织（P〈0．05）;MI期和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌组织中MMP-2蛋白的表达阳性率分别高于M0期和I＋Ⅱ期胃癌组织（P〈0．05）;T3＋T4期、Ⅲ＋Ⅳ期及低-未分化的胃癌组织其MMP．9蛋白的表达阳性率分别高于T1＋T2期、I＋Ⅱ期及高-中分化胃癌组织（P〈O．05）。结论E-钙黏蛋白可能参与胃癌的浸润及淋巴结转移,MMP-2蛋白可能参与胃癌的远处转移,而MMP-9蛋白可能参与胃癌的分化及肿瘤浸润。该3种蛋白可作为判断胃癌分期和预后的指标。     

miR-338-5p在结直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞增殖的影响

目的探讨miR-338-5p在结直肠癌组织中的表达状况,以及miR-338-5p过表达对结肠癌细胞系HCT116和SW620增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法使用实时定量PCR方法检测miR-338-5p在40例临床诊断为结直肠癌患者配对癌组织及癌旁组织中的表达情况。随后使用miR-338-5p-mimics转染结肠癌细胞系HCT116和SW620,确认过表达成功后,分别使用CCK-8法、FITC-AnnexinV．PI法及Propidiumiodide法检测肿瘤细胞的增殖、凋亡和细胞周期的改变。结果①miR-338-5p在结直肠癌组织中的表达明显低于其在相应的癌旁组织中的表达（P〈0．01）。②与转染阴性对照比较,转染miR-338．5p．mimics后,HCT116和SW620细胞增殖能力明显减弱（P〈0．01）,凋亡率明显增加[HCT116细胞：（11．43±0．67）％比（7．98±0．36）％,P〈0．01;SW620细胞：（10．5±0．2）％比（7．93±0．5）％,P〈0．01],诱导HCT116和SW620细胞G1期阻滞[HCT116细胞：（80．41±1.34）％比（64．87±1．83）％,P〈0．01;SW620细胞：（68．76±0．41）％比（54．89±0．78）％,P〈0．01]。结论miR-338-5p可能作为抑癌基因在结直肠癌中发挥作用,并对细胞增殖、凋亡和周期有显著影响。     

Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法对58例结直肠癌组织、30例患者癌旁5cm的正常黏膜组织中Stathmin蛋白的表达进行了检测,两组采用卡方检验连续性校正,以P〈0．05有统计学意义。结果Stathmin蛋白在结直肠癌组织中阳性率为69．0％（40／58）,在正常黏膜中的阳性率为33．3％（10／30）,Stathmin在癌组织表达明显高于正常黏膜（r=6．87,P〈0．05）;Stathmin蛋白表达与患者年龄、性别以及肿瘤组织的分化程度、浸润深度、是否有淋巴结转移关系不明显（χ^2=0．26,P〉0．05）,与肿瘤的远处转移有关（χ^2=9．83,P〈0．05）。结论Stathmin蛋白在结直肠癌组织中呈阳性的表达,除了与远处转移有一定关系,尚不能作为判断其余结直肠癌临床病理特性的依据。     

乳腺癌肿块表面皮肤浸润情况的临床研究

目的检测乳腺癌肿块表面皮肤浸润情况,从分子水平上探讨乳腺癌肿块表面皮肤乳腺癌细胞浸润的特点,为乳腺癌手术方式、防治复发、乳腺重建等方面提供重要的临床指导。方法应用巢式-逆转录-聚合酶链反应技术检测人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA在15例乳腺增生组织及15例乳腺纤维腺瘤组织及相应表面皮肤中的表达情况,同时检测60例乳腺癌组织及乳腺癌患者肿瘤表面皮肤hMAM mRNA表达,并且分析其表达与年龄、肿瘤直径、腋窝淋巴结转移、肿瘤距乳头中央距离、肿瘤分期的关系。结果乳腺纤维腺瘤组织中hMAM mRNA表达阳性率为40.00%（6/15）,乳腺增生组织中为53.33%（8/15）,乳腺纤维腺瘤组织及乳腺增生组织表面皮肤均未检出hMAM mRNA表达;60例乳腺癌组织中hMAM mRNA表达阳性率为83.33%（50/60）,乳腺癌肿块表面皮肤中检查出3例（5.00%）hMAM mRNA表达阳性。乳腺癌组织中hMAM mRNA表达阳性率较乳腺纤维腺瘤组织及乳腺增生组织明显增高（P〈0.05）。乳腺癌肿块表面皮肤中hMAM mRNA表达与患者年龄、肿瘤直径及肿瘤分期无关,但在腋窝淋巴结有转移及肿瘤距乳头中央距离〈4 cm患者的乳腺癌肿块表面皮肤中hMAM mRNA表达阳性率明显高于无腋窝淋巴结转移及肿瘤距乳头中央距离≥4 cm者。结论从本组有限的数据结果初步得出,在乳腺癌组织中hMAM mRNA高表达,hMAM mRNA在乳腺癌的皮肤浸润诊断中可能具有一定的价值,在腋窝有淋巴结转移及肿瘤距乳头中央距离〈4 cm乳腺癌患者中容易发生肿瘤皮肤浸润。     

Bmi-1及Mel-18反向调节结直肠癌的形成和发展

目的探讨Bmi-1和Mel-18在结直肠癌组织中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学染色法和RT—PER检测Bmi一1和Mel一18基因与蛋白在50例结直肠癌组织、20例结直肠腺瘤组织及20例正常结直肠组织中的表达。分析两者在结直肠癌组织中的表达情况和相关性,以及两者表达与临床病理因素的关系。结果Bmi-1mRNA和蛋白的表达在正常结直肠组织、结直肠腺瘤组织、结直肠癌组织均呈明显依次递增（均P〈0．05）,而Mel-18则呈反向趋势;结直肠癌组织中Bmi．1与Mel-18mRNA及蛋白表达之间均明显呈负相关（r=-0．551,P=0．000;r=-0．579,P：0．000）;Bmi-1基因表达和蛋白阳性率水平与远处转移及临床分期呈正相关（P〈0．05）。Mel-18基因表达水平与远处转移及临床分期呈负相关（P〈0．05）。结论Bmi-1高表达与Mel-18低表达可能是结直肠组织恶性转变以及结直肠癌发生浸润转移的重要生物学诊断指标。     

MTSS1蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制因子1（MTSS1）基因的表达与结直肠癌生物学行为及预后之间的关系。方法应用免疫组织化学的方法分析MTSS1蛋白在60例结直肠癌患者组织,以及60例同一患者癌旁10cm正常黏膜组织标本中的表达情况,并应用SPSS13．0软件对实验数据进行统计学分析,MTSS1在癌旁正常黏膜和结直肠癌组织中的表达采用卡方检验四格表,MTSS1蛋白的表达与结直肠癌患者临床病理参数的数据采用RxC表的x2检验,校正使用Fisher确切概率法,以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果MTSS1在癌旁10cm正常黏膜和结直肠癌组织中的表达率分别为：100％（60／60）和28．3％（17／60）,在结直肠癌组织中的表达显著低于癌旁10em正常黏膜,其差异有显著统计学意义x2=67．013,P〈O．01）;MTSS1的表达与性别、年龄、病灶位置、癌组织大体分型和远处转移等因素均无明显关系钟=0．134、0．019、0．002、0．334、1．433、P〉0．05）;MTSS1表达下调与结直肠癌浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及Dukes分期等因素相关（x2=9．520、13．849、7．171、8．026、P〈0．05）。结论MTSS1蛋白异常表达可能在结直肠癌的发生发展及其浸润转移中起着重要作用。     

X线辐射剂量对结直肠癌细胞microRNA-221和PTEN表达的影响

目的探讨不同剂量X线照射对人结直肠癌Cac02细胞系中microRNA-221（miR-221）和张力蛋白在10号染色体上同源缺失的磷酸酶（PTEN）表达的影响。方法常规培养Cac02细胞系并分为5组,分别给予不同剂量（0、2、4、6及8Gy）的x射线照射,24h后提取细胞总RNA和蛋白质,应用real-timeRT-PCR方法检测Cac02细胞中miR-221和PTENmRNA的表达水平,用Western-blot法检测PTEN蛋白的表达水平。结果Cac02细胞系在不同剂量的X线照射下,其miR-221表达水平随着照射剂量的增加而增高,呈剂量依赖性（P〈0.01）;PTEN mRNA的表达水平无明显变化（P〉0.05）,但PTEN蛋白表达水平则随X线照射剂量的增加而逐渐降低,亦呈剂量依赖效应（P〈0.01）。结论X线照射剂量可影响结直肠癌Cac02细胞中miR-221和PTEN蛋白的表达。     

联合检测乳腺癌组织中CK5／6、Ki一67表达的临床意义

目的检测细胞角蛋白5／6（CK5／6）和Ki-67在乳腺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测162例乳腺癌患者中CK5／6与Ki．67的表达情况,分析CK5／6与Ki．67表达的相关性以及其与乳腺癌患者的临床病理资料的关系。结果162例乳腺癌患者中三阴性乳腺癌（ER、PR及Her阴性）共12例。CK5／6和Ki．67在162例乳腺癌患者中的表达阳性率分别为30．9％（50／162）及65．4％（106／162）,其在三阴性乳腺癌患者中的表达阳性率均明显高于其在非三阴性乳腺癌患者中的表达[CK5／6：75．0％（9／12）比27．3％（41／150）,X=11．837,P=0．001;Ki-67：100％（12／12）比62．7％（94／150）,X=6．847,P=0．009]。CK5／6与Ki．67在乳腺癌中的表达均与患者年龄无关（P〉0．05）,均与组织学分级有关（P〈0．05）。CK5／6在乳腺癌组织中的表达与乳腺肿瘤大小和淋巴结转移无关（P〉O．05）,而Ki．67在乳腺癌组织中的表达却与其有关P〈0．05）。CK5／6与Ki．67在乳腺癌组织中的表达呈显著正相关（rs=0．271,P=-0．000）。Ki．67在乳腺癌组织中的表达为（＋＋）和（＋＋＋）的病例共64例,其中CK5／6阳性率为43．8％（28／64）,明显高于飚．67在乳腺癌组织中表达为（-）和（＋）时的22．4％（22／98）,差异有统计学意义（z2=8．233,P=0．004）。CK5／6和Ki．67在乳腺癌组织中的阳性表达均与ER、PR表达呈显著负相关（CK5／6与ER：rs=-0．446,P=0．000;CK5／6与PR：rs=-0．370,P=0．000;Ki-67与ER：rs=-0．518,P=0．000;Ki．67与PR：rs=-0．515,P=0．000）,二者均与Her-2的阴性表达无明显相关性（CK5／6与Her-2：rs=-0．105,P=0．183;Ki．67与Her-2：rs=-0．068,P=0．393）。结论CK5／6与Ki．67联合检测可以从来源及发展上评估乳腺癌疾病的基本规律,为乳腺癌术后化疗提供指导。