Pleiotrophin的表达及其在血清水平与结肠癌的关系

目的：探讨pleiotrophin（PTN）的表达及其血清水平与结肠癌的关系。 方法：应用real time-PCR、Western blot方法检测46例结直肠癌组织及其对应癌旁组织中PTN mRNA及蛋白表达水平;ELISA方法检测76例结直肠癌患者和58例健康体检者血液样本中的PTN表达水平。 结果：PTN mRNA在结直肠癌组织中表达量以及PTN蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义（均P<0.05）;无论是PTN mRNA表达水平还是蛋白阳性率均与患者年龄、肿瘤组织类型无关（均P>0.05）,而与肿瘤的分化程度呈负向关系、与TNM分期呈正向关系（均P<0.05）。结直肠癌患者血清PTN水平明显高于正常人群（P<0.05）。 结论：PTN在结直肠癌组织中表达增高;血清PTN水平检测可作为诊断结直肠癌参考指标之一。

     

miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的研究miR-196b和HoxB8在结直肠癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系,并探讨在结直肠癌组织中miR-196b与靶基因HoxB8表达的关系。方法用实时荧光定量PCR技术检测30例结直肠癌组织及对应的正常黏膜组织中miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA的表达量,用Western blot法检测HoxB8蛋白的表达。结果 miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达量均高于其在对应的正常黏膜组织中的表达量（P〈0.05）。miR-196b mRNA的表达与结直肠癌的淋巴结转移、肿瘤分期（Ⅰ＋Ⅱ与Ⅲ＋Ⅳ）及远处转移均有关（P〈0.05）,而与肿瘤部位、大小、大体类型、浸润深度、组织分化程度、患者的年龄及性别均无关（P〉0.05）;HoxB8mRNA的表达与结直肠癌的上述临床病理特征均无关（P〉0.05）。miR-196b mRNA与HoxB8 mRNA的表达存在负相关（r=-0.458,P〈0.05）,而与HoxB8蛋白的表达无明显相关性（r=-0.236,P〉0.05）。结论 miR-196bmRNA及HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中均呈高表达,miR-196b mRNA的高表达与结直肠癌的发生、发展及预后有关。miR-196b可能通过与靶基因HoxB8 mRNA的3′非编码区结合抑制HoxB8 mRNA的表达。     

Twist与E-cadherin在结直肠癌中的表达及其意义

目的探讨Twist和E-cadherin蛋白在结直肠癌组织中的表达及其可能的机理、相互作用以及与结直肠癌预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测63例结直肠癌组织以及21例正常结肠黏膜组织中Twist和E-cadherin蛋白的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征和患者预后的关系。结果 Twist蛋白在结直肠癌组织中的表达阳性率为66.7%(42/63),而在正常结直肠黏膜组织中的表达阳性率为14.2%(3/21),前者高于后者(P0.01);E-c adherin蛋白在结直肠癌组织中的表达阳性率为20.6%(13/63),而在正常结直肠黏膜组织中的表达阳性率为81.0%(17/21),前者低于后者(P0.01)。两者的表达与肿瘤的分化程度及T、N和M分期均相关(P0.05)。相关性分析显示,Twist和E-cadherin蛋白的表达呈负相关关系(r=-0.215,P=0.039)。结论 Twist和E-cadherin蛋白的表达可能与结直肠癌的发生发展和侵袭转移相关,并可作为评价结直肠癌生物学行为和预后的重要指标。Twist和E-cadherin蛋白表达呈负相关关系提示,在上皮-间质转化过程中可能是通过抑制E-cadherin蛋白的表达来实现的。     

EZH2mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨zeste基因增强子同源物2（EZH2）mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用PCR方法检测了27例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织和正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达情况,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织、癌旁组织及正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达水平分别为3.01±1.29、1.20±0.69及0.87±0.37,其在结直肠癌组织的表达水平最高（P〈0.01）,而在癌旁组织和正常黏膜上皮组织中的表达差异无统计学意义（P=0.403）。结直肠癌组织中EZH2 mRNA的表达与其TNM分期（P=0.002）和组织分化程度（P=0.005）均有关,与年龄（P=0.388）、性别（P=0.963）、肿瘤直径（P=0.579）、组织学类型（P=0.945）、肿瘤位置（P=0.611）及淋巴结转移（P=0.449）均无关。结论 EZH2 mRNA在结直肠癌组织中呈高表达,可能在结直肠癌的发生和发展过程中起关键作用,可作为判断结直肠癌恶性程度及进程的参考指标之一。     

结直肠癌组织中EGFR、BRAF和K-RasK-Ras基因的表达及其临床意义

目的检测血管内皮生长因子受体(EGFR)、BRAF及K-Ras在结直肠癌组织中的表达情况并探讨其在结直肠癌发病机制中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测136例结直肠癌及其相应癌旁正常结直肠组织中EGFR、BRAF和K-Ras基因的蛋白表达情况,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系。结果 136例结直肠癌组织中EGFR、BRAF及K-Ras蛋白均有表达,阳性率分别为70.59%(96/136)、50.74%(69/136)及47.48%(66/136),均高于其相应在癌旁正常结直肠组织中的表达阳性率〔分别为35.29%(48/136)、16.18%(22/136)及19.52%(27/136)〕,虽然K-Ras的蛋白表达阳性率在二者之间的差异无统计学意义(P0.05),但EGFR和BRAF在结直肠癌组织中的蛋白表达阳性率均明显高于其在癌旁正常结直肠组织中的表达,差异有统计学意义(P0.05)。EGFR表达与肿瘤的TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关(P0.05),BRAF表达与肿瘤的TNM分期有关(P0.05),而K-Ras在结直肠癌组织中的蛋白表达与肿瘤的TNM分期、分化程度及淋巴结转移均无关(P0.05)。相关性分析结果显示EGFR、BRAF及K-Ras基因的蛋白表达之间均无相关性(P0.05)。结论 EGFR、BRAF过表达可能与结直肠癌的发生、发展有关,但K-Ras作用尚不明确,抗EGFR、BRAF靶向治疗对结直肠癌患者可能有益。     

CD10蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 研究CD10蛋白在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法检测50例正常结肠黏膜组织和152例结直肠癌组织中的CD10蛋白.结果 CD10蛋白在结直肠癌组织中的阳性率与正常结肠黏膜组织相比,其差异有统计学意义（P＜0.01）.在结直肠癌中,CD10蛋白的表达与肿瘤的临床分期、肿瘤的脉管侵犯、组织的分化程度有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,CD10蛋白表达越高,有脉管侵犯及淋巴结转移组的表达率高于无脉管侵犯及无淋巴结转移组,其差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 CD10蛋白在结直肠癌的发生发展中起着重要作用.     

Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究Galectin-3蛋白在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用快捷免疫组化MaxVi-sionTM法对50例正常结肠黏膜组织、60例结肠腺瘤性息肉组织、152例结直肠癌中Galectin-3蛋白进行检测。结果 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌中的阳性率与正常结肠黏膜组织、结肠腺瘤性息肉组织相比,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。在结直肠癌中,Galectin-3蛋白的表达与肿瘤的临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关,临床分期越晚、组织分化越差,Galectin-3蛋白表达越高,有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组,其差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Galec-tin-3蛋白在结直肠癌的发生发展中起着重要作用。     

表皮生长因子受体在525例消化系统肿瘤中的表达及其临床意义

目的研究表皮生长因子受体（EGFR）在525例消化系统肿瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测525例消化系统肿瘤组织中EGFR的表达,分析EGFR表达与患者的性别、年龄、肿瘤的原发部位、肿瘤大小、组织学类型、分化程度、临床TNM分期和淋巴结转移的关系。结果 525例消化系统肿瘤组织中,EGFR阳性率为17.1%,其中男性EGFR阳性率明显高于女性的（P=0.014）;EGFR表达与分化程度呈负相关（P=0.033）,其中低分化的EGFR阳性率明显高于高分化的（P=0.035）;EGFR表达与淋巴结转移呈负相关（P=0.015）;EGFR表达与消化系统肿瘤患者的年龄、肿瘤的原发部位、肿瘤大小、组织学类型和临床TNM分期均无关（P〉0.05）。结论 EGFR表达和消化系统肿瘤的恶性程度有关。     

结直肠癌组织中Ezrin蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨结直肠腺癌组织中Ezrin蛋白表达情况及临床意义。方法：采用微波-EliVisionTM免疫组化染色方法检测100例结直肠癌、30例腺瘤及30例正常黏膜组织中Ezrin的表达分析其与结直肠癌浸润转移等的关系。结果：Ezrin蛋白在结直肠黏膜、腺瘤及结直肠癌中表达阳性率分别为23.3%（7/30）、50.0%（15/30）、72.0%（72/100）,两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;而Ezrin蛋白高表达与结直肠癌浆膜浸润、淋巴结转移和肝转移关系密切（P〈0.05）,与其年龄、分化程度及TNM分期等无关（P〉0.05）。结论：Ezrin蛋白的高表达与结直肠癌发生、发展及转移等有一定相关性,可作为潜在预测结直肠癌浸润转移的敏感指标。     

Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Stathmin蛋白在结直肠癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法对58例结直肠癌组织、30例患者癌旁5cm的正常黏膜组织中Stathmin蛋白的表达进行了检测,两组采用卡方检验连续性校正,以P〈0．05有统计学意义。结果Stathmin蛋白在结直肠癌组织中阳性率为69．0％（40／58）,在正常黏膜中的阳性率为33．3％（10／30）,Stathmin在癌组织表达明显高于正常黏膜（r=6．87,P〈0．05）;Stathmin蛋白表达与患者年龄、性别以及肿瘤组织的分化程度、浸润深度、是否有淋巴结转移关系不明显（χ^2=0．26,P〉0．05）,与肿瘤的远处转移有关（χ^2=9．83,P〈0．05）。结论Stathmin蛋白在结直肠癌组织中呈阳性的表达,除了与远处转移有一定关系,尚不能作为判断其余结直肠癌临床病理特性的依据。     

载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨载脂蛋白M（apoM）在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达：采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达．前者相对表达量显著低于后者（0．05±0．01比0．19±0．05,P〈0．05）。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者（P〈0．01）。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5．50．显著低于癌旁组织（10．5,P〈0．05）、肠炎组织（9．75,P〈0．05）、肠息肉组织（11．0,P〈0．01）及正常黏膜组织（10．5,P〈0．05）。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关（P〉0．05）。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。     

低氧诱导因子-1α和轴突导向因子4D在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的比较低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和轴突导向因子4D（Sema4D）在结直肠癌组织和正常组织中的表达,探讨两者之间的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测86例结直肠癌组织和52例正常组织中HIF-1α和Sema4D的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中HIF-1α和Sema4D蛋白阳性表达率显著高于正常组织[分别为58．1％（50／86）比7．7％（4／52）,X2=34．624,P〈0．01;60．5％（52／86）比11．5％（6／52）,x2=31．839,P〈0．01]。HIF-1α和Sema4D蛋白与结直肠癌组织分化程度（P／0．003,P=0．010）、TNM分期（P=0．003,P=0．017）和淋巴结转移（P=0．003,P=0．020）明显有关;且两者表达呈正相关（r=0．567,P〈0．01）。全组患者5年生存率为37％。其中HIF-1α蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为24％和56％（P=0．003）;Sema4D蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为23％和59％（P=0．001）。Cox多因素分析显示,Sema4D表达是结直肠癌患者的独立预后因素（P=0．026）,而HIF-1α表达不是其独立预后因素（P=0．501）。结论HIF-1α和Sema4D具有协同关系,两者蛋白的联合检测,可为预测结直肠癌的预后判断提供参考。     

STAT3及其磷酸化STAT3和E钙黏蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨结直肠癌组织中STAT3及其磷酸化STAT3（P-STAT3）和E钙黏蛋白（E—cadherin）表达的相关性及其与肿瘤浸润转移的关系。方法用免疫组织化学Elivision^TM plus法检测江西赣南医学院第一附属医院病理科存档的50例结直肠癌组织及相应癌旁组织中STAT3、P-STAT3及上皮细胞间质化（EMT）相关蛋白E—cadherin的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果50例结直肠癌组织中STAT3和p-STAT3及E—cadherin的阳性表达率分别为72％（36／50）、76％（38／50）和26％（13／50）,相应癌旁组织中的表达则分别为24％（12／50）和26％（13／50）及68％（34／50）,结直肠癌组织STAT3和p-STAT3的表达明显高于相应癌旁组织,而E—cadherin的表达则明显低于癌旁组织（均P〈0．05）。STAT3、P-STAT3及E．cadherin表达与肿瘤浸润深度、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关（均P〈0．05）。STAT3和P—STAT3蛋白在结直肠癌中的表达与E-cadherin呈显著负相关（均P〈0．05）。结论STAT3和p-STAT3可能通过对E—cadherin的抑制作用进而引起EMT现象,从而导致结直肠肿瘤的发生和进展。     

小野寺预后营养指数在老年结直肠癌患者预后评估中的应用

目的探讨小野寺预后营养指数（简称小野寺指数）在老年结直肠癌患者预后评估中的应用价值。方法回顾性分析2004年11月至2006年12月间广州市第一人民医院收治的163例老年（65岁以上）结直肠癌患者的临床和随访资料。根据患者入院后首次血常规和生化检查结果,计算小野寺指数[小野寺指数=白蛋白值（g／L）＋5×淋巴细胞总数（10^9L）]。分析小野寺指数与临床病理特征、手术方式、术后并发症及胃肠道功能恢复的相关性,并通过Cox回归模型筛选影响老年结直肠癌患者的预后因素。结果163例结直肠癌患者小野寺指数为24．3～60．3（44．0±6．9）,根据小野寺指数分为营养较好组（小野寺指数大于或等于45,77例）和营养较差组（小野寺指数小于45,86例）。两组根治性切除的患者比例分别为90．9％（70／77）和62．8％（54／86）,差异有统计学意义（P〈0．01）。两组根治性切除术后总并发症发生率分别为17．1％（12／70）和53．7％（29／54）,差异有统计学意义（P〈0．01）。相关分析显示,小野寺指数与患者年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、手术方式、术后总并发症及术后肛门排粪时间具有相关性（均P〈0．05）。营养较好组和营养较差组术后5年生存率分别为64％和24％,差异有统计学意义（P〈0．01）;多因素Cox回归分析证实,小野寺指数是影响术后总体生存的独立预后因素（RR=0．888,95％CI：0．800～0．985,P=0．025）。结论小野寺指数能较好地反映老年结直肠癌患者的营养状态、手术风险及预后,是一个较有价值的结直肠癌术前评估及预后分析指标。     

miR-196和HoxB8与结直肠癌Folfox4化疗敏感性的相关研究

目的探讨结直肠癌患者术前接受Folfox4方案化疗对miR-196和HoxB8表达的影响,并探讨miR-196和HoxB8在结直肠癌组织中的表达差异以及与Folfox4方案化疗敏感性的相关性及其意义。方法分别用荧光定量PCR技术和免疫组化技术检测新辅助化疗组（包括化疗敏感组与不敏感组）和未化疗组患者结直肠癌组织中miR-196和HoxB8的表达情况,分析二者在不同组间的表达差异及其相关性。结果结直肠癌组织中miR-196和HoxB8mRNA的相对表达量在新辅助化疗组分别为0．6468±0．6839和0．6076±0．4189,相比未化疗组的1．0000±0．0000和1．0000±0．0000均下降（P〈0．01）;miR-196在化疗敏感组的表达相对量为0．9489±0．6910,高于不敏感组的0．3447±0．5361（P〈0．01）;HoxB8mRNA在化疗敏感组的表达相对量为0．4899±0．3715,低于不敏感组的0．7253±0．4375（P〈0．05）;免疫组化结果提示化疗敏感组中HoxB8蛋白表达阳性率低于不敏感组（Z=-2．396,P=0．017）。在新辅助化疗组和未化疗组中,miR-196和HoxB8mRNA的表达均存在负相关关系驴-0．595,P〈0．01;r=-0．435,P〈0．01）。结论术前Folfox4方案化疗可以降低miR-196和HoxB8在结直肠癌组织中的表达水平;miR-196和HoxB8的表达差异可能与结直肠癌患者对Folfox4方案的化疗敏感性相关,高表达的miR-196可能通过抑制HoxB8的表达水平从而增强Folfox4化疗的敏感性。     

结缔组织生长因子在结直肠癌组织中的表达及其与患者预后的关系

目的探讨结直肠癌组织中结缔组织生长因子（CTGF）mRNA和蛋白的表达及其与患者临床病理因素及5年生存率的关系。方法采用实时定量PCR技术检测92例结直肠癌及其相应远端正常结肠组织中CTGFmRNA的表达情况,再从中随机选取30对组织进行免疫组织化学检测CTGF蛋白表达．并对该组患者进行生存分析。结果CTGFmRNA在结直肠癌组织中高表达,其CTGF蛋白阳性率73．3％（22／30）高于正常结肠组织的23．3％（7／30）（P〈0．01）。合并淋巴结转移和肿瘤分期为Ⅲ、Ⅳ期者。CTGFmRNA表达水平和蛋白阳性率降低（均P〈0．05）;CTGF蛋白阳性表达率低者浸润深度越深（P〈0．05）。癌组织CTGFmRNA高表达组患者的5年生存率高于低表达组（68.3％比29．3％．P〈0．01）。癌组织CTGFmRNA相对表达水平是患者生存期的独立影响因素（RR=2．960,95％CI：1．49-5．877,P〈0．01）,其预测患者预后的敏感性为64．9％,特异性为74．5％。结论CTGF的异常表达与结直肠癌恶性生物学行为有关,CTGF低表达的结直肠癌患者预后不良。     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

死亡相关蛋白激酶在结肠癌耐药中的作用

目的 探讨死亡相关蛋白激酶（DAPK）在结肠癌耐药中的作用.方法 应用免疫组织化学（免疫组化）SP法检测61例结肠癌组织及32例癌旁组织中DAPK的表达.以氟尿嘧啶（5-FU）诱导建立的结肠癌耐药细胞系HCT116/5-FU为模型.通过转染DAPK-siRNA下调DAPK的表达（DAPK-siRNA组）,转染FAM-siRNA（FAM-siRNA组）作为对照;通过过表达载体上调DAPK的表达（DAPK过表达组）.采用实时定量荧光PCR及蛋白质印迹法检测3组的DAPK、多药耐药蛋白（MRP）和P-糖蛋白（P-gp）的mRNA及蛋白表达水平;MTT法及流式细胞法分别测定3组细胞在未经5-FU处理及浓度为8 μg/ml的5-FU处理下的细胞增殖和凋亡情况.结果 DAPK在结肠癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织[18.0％（11/61）比90.6％（29/32）,P＜0.05].与FAM-siRNA组比较,DAPK-siRNA组细胞中DAPK mRNA水平及蛋白表达水平均明显降低,DAPK过表达组则均显著升高（均P＜0.05）.在5-FU处理下,相比FAM-siRNA组,DAPK过表达组细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高（均P＜0.05）;DAPK-siRNA组细胞增殖和细胞凋亡率均无明显变化（均P＞0.05）.与FAM-siRNA组比较,DAPK过表达组两种耐药蛋白的mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P＜0.05）,而DAPK-siRNA组与FAM-siRNA组间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 DAPK能够抑制结肠癌耐药细胞的增殖,促进其凋亡,并可能通过抑制MRP和P-gp的mRNA和蛋白表达,来增强结肠癌细胞对药物的敏感性。