小鼠宫颈癌不同转移倾向瘤株的超微结构观察——兼论肿瘤转移的形态学因素

本文利用透射及扫描电镜研究了小鼠宫颈癌(U_(14))及肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))、淋巴结转移倾向亚株(U_(14)AL_(10))的超微结构特征。发现两个亚株均比亲代 U_(14)有更高的核异型性,并有粗大胞突出现。作者还复习了小鼠肝癌(Hn)小鼠乳癌 Ca(761)不同转移能力瘤细胞超微结构特点,并探讨实验肿瘤转移中相关形态学因素。     

不同转移倾向小鼠肝癌瘤株与冰切组织体外作用的实验研究

本实验利用小鼠腹水型肝癌(H_(22))的肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))与淋巴结转移倾向亚株(H_(22)SL_(10))和小鼠的心、肺、肝、肾、淋巴结冰切组织于体外混合培养,观察了不同转移能力的肿瘤细胞与正常组织间的相互作用。于混合培养24、48h后,计数冰切组织上粘附的肿瘤细胞,肝、肾、淋巴结上粘附的H_(22)细胞多于其它脏器。H_(22)SP_(10)主要粘附于肝、肾、肺,而H_(22)SL_(10)则主要粘附于淋巴结,几乎不粘附于肺组织。混合培养后的生长曲线表明加入的正常组织对三种瘤细胞生长具有不同作用,加入的五种组织对H_(22)生长均有促进作用,加入心、肝、肾组织使H_(22)SP_(10)细胞于培养48h之前呈递增趋势,而加入肺、淋巴结组织使H_(22)SP_(10)细胞生长数低于对照组,加入心脏组织96h后H_(22)SL_(10)细胞数开始高于对照组,而加入其它组织均使H_(22)SL_(10)细胞数低于对照组。该结果表明在活体中呈器官倾向性转移的瘤细胞在体外具有与相应组织特异性粘附的能力,而且这些细胞与不同宿主组织间存在不同相互作用。     

人胎脑提取液对器官倾向转移模型影响的实验研究

利用自制的人胎脑提取液观察其对小鼠宫项癌肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))、淋巴结转移倾向亚株(U_(14)AL_(10))动物模型的影响。发现该提取液能够改善荷瘤动物的一般状态;提高腹腔巨噬细胞的功能活动;提高血中辅助性T细胞、单核细胞的比例;减少荷瘤中期死亡数;将肺转移由100%降至44.4%,淋巴结转移由93%降至46.67%。提示人胎脑提取液有极佳的临床应用前景。     

小鼠腹水型肝癌不同转移倾向瘤细胞亚株的筛选

本实验用Balb/c小鼠、腹水型肝癌(Hca-F_(25))尾静脉接种所产生的肺转移瘤和淋巴结转移瘤分别重复循环筛选10次(即肺瘤结→尾静脉→肺瘤结……;和淋巴结瘤结→尾静脉→淋巴结瘤结……)得到同一肿瘤内具有不同转移倾向的两个瘤细胞亚群P_(10)(肺转移瘤第10代)和L_(10)(淋巴结转移瘤第10代)。随着循环筛选代数增加,肺转移亚群的肺转移率显著升高,淋巴结转移亚群也有相似变化。经尾静脉,腋皮下和脚掌三途径接种,在前两途径接种中,P_(10)的肺转移率均显著高于L_(10);L_(10)的淋巴结转移率显著高于P_(10)。脚掌接种,P_(10)和L_(10)的转移率无显著差别。两亚群的肺转移灶大多形成于小血管或小支气管周围。细胞侵袭性试验表明P_(10)和L_(10)各自对肺和淋巴结粘附,侵袭增强,可很快侵入深部组织生长。本实验结果提示肿瘤转移的器官亲和性不仅与瘤细胞本身生物学性状有关,也与肿瘤移植部位有关。     

小鼠腹水型子宫颈癌U_(14)经比重梯度离心分离细胞群转移能力的比较

本文将在615小鼠腹腔保种传代的一株具有淋巴道和血道高转移能力的小鼠子宫颈癌U_(14)腹水瘤应用Ficoll和泛影葡胺配制之分层液2层比重梯度离心法分离出A、B两群癌细胞。A、B两群细胞及未经分离的细胞群均分别接种于BaLB/C近交系小鼠右腋部皮下。肺与淋巴结转移率:在12天处死之荷瘤鼠A、B两群细胞肺转移率分别为50％(4/8)和10％(1/10),17天处死鼠分别为90％(8/9)和40％(4/10)。12天处死鼠A、B两群细胞各组淋巴结转移阳性小鼠数和转移阳性淋巴结数全部为0。17天处死鼠A、B两群细胞各组淋巴结转移阳性小鼠数分别为22％和0％;转移阳性淋巴结数分别为3％和0％。认为A、B两群细胞转移率等方面的差别,是反映了亲代U_(14)腹水瘤在转移能力的异质性。     

小鼠宫颈癌腹水瘤U_(14)及其亚株侵袭特性的初步研究

本文将小鼠宫颈癌腹水瘤u_(14)和经本教研室活体筛选出的倾向于肺转移的u_(14)A-P_(11)和倾向于淋巴转移的u_(14)-AL_(10)两亚株,用鸡胚绒毛尿囊膜接种的体内方法和与经胰酶不同处理的BALB/C小鼠腹膜组织共同培养的体外方法,对三种瘤细胞的侵袭特性进行研究。结果证明,三种瘤细胞体内转移倾向的差异与其对鸡胚绒毛尿囊膜基质和小鼠腹膜基质的侵袭能力成正相关,表明瘤细胞转移的器官倾向性与瘤细胞的侵袭力有一定的关系。     

小鼠腹水型子宫颈癌U_(14)的染色体的研究

小鼠腹水型子宫颈癌U_(14)(以下简称U_(14))是中国医学科学院实验医学研究所病理系于1968年用甲基胆蒽熏线穿进幼鼠宫颈获得的子宫颈癌,最初是经过皮下移植传代的,后转化为腹水型。由于这株细胞的生长速度较慢,已被广泛地用作实验材料,它对抗癌中草药的筛选特别敏感,如掌叶半夏对U_(14)的抑瘤率达61.7～84.5％。U_(14)已在我国     

对小鼠腹水型肝癌细胞(H_(22))的形态学及转移能力的进一步观察

本实验利用以淋巴道转移为主的小鼠腹水型肝癌(H_(22))模型,深入研究了H_(22)瘤细胞的病理形态学及其在转移能力上的差异。根据病理形态学的观察,H_(22)瘤细胞仍保持了来源于上皮组织的特点,这与用肝脏特异性酶检测的结果是一致的,证明H_(22)瘤细胞属于分化较低的肝细胞癌,而不是多形细胞肉瘤。采用体内经淋巴系统筛选后出现的高转移力的H_(22)-F10细胞,将之与其原代细胞(H_(22)-F0)进行比较,无论从侵袭力和转移程度上,二者确实存在着较明显的差异。这种筛选方法,为只经过淋巴道转移的瘤株,找到了一个初步检测肿瘤有无异质性的简便方法。H_(22)瘤株虽然是肝细胞癌,但它却与淋巴系统这个微环境有特殊的亲和性,这是该模型的一个突出特点。     

汉族人肾透明细胞癌肺转移小鼠模型的建立及肺转移细胞亚株的筛选

目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础。方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-SCID小鼠颈背部皮下,成瘤后取出瘤组织接种于另外NOD-SCID小鼠的肾包膜下,待有肉眼可见瘤块后,处死小鼠并取出肿瘤组织接种于新NOD-SCID小鼠的肾包膜下,反复数轮,直至出现稳定的鼠肺转移模型。此时取模型鼠肺转移组织,一部分继续接种于新鼠肾包膜下,反复数轮,尝试以转移组织诱导肺转移;另一部分进行原代培养,细胞经体外扩增纯化后制成悬液接种于新鼠肾包膜,数轮循环至产生肺转移,筛选能产生稳定鼠肺转移的细胞亚株。整个筛选过程均观察记录原位成瘤、淋巴及肺转移形成情况,并对肿瘤组织进行病理组织学观察及CA9（肾癌标志）、CD133（干细胞标志）表达检测。结果:以RCC05-TXJ细胞株接种所致NOD-SCID小鼠颈背部皮下肿瘤组织作为移植瘤材接种鼠肾包膜在第2轮即出现鼠肺转移,此后3~6轮以鼠肺转移组织移植肾包膜下,均能成功诱导转移。以鼠肺转移组织原代培养RCC细胞均获成功,第6轮原代培养细胞扩增纯化后制成的细胞悬液（RCC05-TXJ-L）接种于鼠肾包膜下,出现特异性肺转移,重复2轮实验结果稳定。RCC05-TXJ-L细胞具有生长速度快（传代时间约为2 d）、原位成瘤时间短（1周左右）、接种后转移性较强、CA9及CD133表达升高等特点。结论:RCC05-TXJ在NOD-SCID小鼠体内多轮反复筛选可建立稳定的肾细胞癌鼠肺转移动物模型;在此基础上筛选出的肺转移性细胞亚株RCC05-TXJ-L可稳定诱导NOD-SCID鼠产生肺部转移。     

亚硒酸钠对小鼠骨髓细胞染色体畸变率及微核率的影响

本文报告亚硒酸钠对小鼠骨髓细胞染色体畸变率和微核率的影响。试验剂量为1/2LD_(50)(5mg/kg)、1/10LD_(50)(1mg/kg)、1/20LD_(50)(0.5mg/kg)。结果表明亚硒酸钠剂量为5mg/kg、1mg/kg 引起小鼠骨髓细胞染色体畸变;微核试验各试验剂量与阴性对照比较均有显著性差异。表明亚硒酸钠对小鼠骨髓细胞染色体有损伤作用。     

龙葵碱对H22荷瘤小鼠细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响

目的观察龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响。方法采用荧光探针DPH标记法测定肿瘤细胞膜流动性，考马斯亮蓝法测定肿瘤细胞膜蛋白水平。结果龙葵碱可显著降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性，降低H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白水平。结论龙葵碱是通过影响肿瘤细胞膜的流动性和肿瘤细胞膜上的蛋白水平恢复细胞的正常生理活性而达到抗肿瘤作用。     

瘤苗主动免疫对小鼠腹水型肝癌(H_(22))免疫预防和治疗效应的实验研究

本文应用小鼠腹水型肝癌淋巴道转移模型(H_(22)/F23),初步探讨了瘤苗主动免疫对H_(22)/F23的免疫预防效应以及对肿瘤生长和淋巴道转移的治疗作用。CFW系小鼠经β-榄香烯和丝裂霉素C处理的H_(22)/F23瘤细胞腹腔免疫三次,末次免疫后两周分别用H_(22)/F23和H_(22)交叉进行攻击。结果表明:β-榄香烯及MMC瘤苗均能诱导不同程度的免疫保护效应,后者效果更为显著。两种方法处理的H_(22)/F23瘤苗免疫对H_(22)/F23攻击的保护效应显著低于对H_(22)的保护效应,提示高淋巴道转移株H_(22)/F23细胞的免疫原性较低,推测这可能与其转移能力的增高有一定关系。用MMC处理的瘤苗细胞和非特异性免疫制剂(CP)对带瘤小鼠进行免疫治疗的结果证示:免疫治疗不仅明显抑制肿瘤生长,并可显著降低肿瘤淋巴道转移的发生率。     

Morphological Observation and DNA Quantitative Analysis of Murine H_(22) Hepatoma after Injection of Hematoporphyrin Derivatives in Different Pathways and Light Irradiation

By means of light and electron microscopy and texture analysissystem, the morphologic changes and the content of DNA after injection ofhematoporphyrin derivatives (HPD) in different pathways and the lightirradiation on mice H_(22) hepatoma were observed. This study showed thatintravenous injection of HPD and local administration in the tumor andred-light irradiation could result in obvious injury of tumor cells, especiallythe tumor local injection and light irradiation. In order to reduce variousside-effects, tumor local injection and light irradiation may be used inclinical treatment. This article provides morphological basis for reference.     

正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤LD_5的纯化及其性质研究

以正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤,经一系列离子交换层析及亲和层析,获得了高纯度的LD_5。对三种组织的LD_5的部分酶动力学参数、亚基分子量及等电点的比较研究表明:H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤的LD_5对丙酮酸的K_m值较正常C_(57)鼠肝LD_5显著降低,而LD_5含量(mg/g组织)、LD_5占LDH总活性的百分率均较正常高;三种组织的兔抗鼠LD_5间呈现交叉免疫反应。本研究所获的三种兔抗鼠LD_5抗体为进一步研究癌变时LD_5活性升高的分子机理奠定了基础。     

两株转移能力不同的小鼠腹水型肝癌(H_(22))某些生物学特性的比较研究

本实验从肿瘤移植成活率、淋巴道转移率、细胞形态学、染色体组成、细胞电泳率等方面在两种不同品系的小鼠之间观察并比较了小鼠腹水型肝癌H_(22)和H_(22)/F_(20)的上述生物学特性及差别。光镜和透射电镜的观察结果提示,H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞是来源于上皮组织、分化较低的恶性肿瘤。肿瘤移植成活率和淋巴道转移率的比较观察表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的移植成活率和淋巴道转移率均高于H_(22)瘤细胞。染色体的分析显示H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞不仅干系细胞的众数不同(H_(22)为44,H_(22)/F_(20)为43),而且二者的标记染色体的数目及形态也有差别。细胞电泳率的测定结果表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的电泳率显著低于H_(22)细胞。本文讨论了H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞的上述表型差别与淋巴道转移率增高之间的可能关系,以及宿主和环境的选择作用对H_(22)瘤细胞的影响。     

小鼠H_(22)肿瘤的酶组织化学和超微结构观察

光镜下H_(22)肿瘤细胞弥漫索样排列,网状纤维包绕瘤细胞团形成巢状,胶原纤维极少。碱性磷酸酶反应产物主要附着于细胞膜部位;酸性磷酸酶细胞内散在分布;细胞色素氧化酶及乳酸脱氢酶弥散位于细胞浆内。各种酶反应产物均较匀细。扫描和透射电镜示瘤细胞表面微绒毛发达,细胞间可见桥粒连接,线粒体、粗面内质网和多聚核糖体丰富,胞浆内细胞器有极性分布倾向。以上结果不仅为该瘤株的进一步应用提供了有益的参考资料,同时提示关于H_(22)肿瘤已转变为多形细胞肉瘤的结论是值得商榷的,其应是一株低分化肝癌腹水瘤模型。     

榄香烯合并加温对H_（22）－F_（25）／L肝癌细胞体外抑癌的实验研究

利用我国中药温莪术提取的抗癌有效部位榄香烯（ｅｌｅｍｅｎｅ）合并加温，对Ｈ２２－Ｆ２５／Ｌ小鼠肝癌细胞进行体外抑癌实验。结果显示：Ｅｌｅｍｅｎｅ（５０ｕｇ／ｍｌ）或加温（≥３９０℃）均对肝癌细胞有抑癌作用，并且随着加温温度的上升或时间的延长抑癌作用愈益明显。其中以Ｅｌｅｍｅｎｅ（５０ｕｇ／ｍｌ）合并加温（４３０℃）持续１小时抑癌效果显著。其３Ｈ－ＴｄＲ癌细胞掺入率仅为０．２４％，核分裂明显抑制（Ｐ＜０．０１），作用后的癌细胞不能再传代。这结果说明Ｅｌｅｍｅｎｅ合并加温对Ｈ２２－Ｆ２５／Ｌ小鼠肝癌细胞在体外有显著的抑癌作用，说明该药具有临床热化疗前景。     

副流感病毒治疗小鼠腹水型肝癌,小鼠肉瘤S180腹水瘤的实验研究

副流感病毒－Ⅱ型治疗小鼠腹水型肝癌Ｈ２２，小鼠肉瘤Ｓ１８０腹水型荷瘤小鼠，经体内实验观察，将小鼠接种腹水瘤次日，采用腹腔注射副流感病毒－Ⅱ型，连续６天，存活率达１００％。     

激光—血卟啉衍生物与癌地龙合用对癌细胞的杀伤效应

用~3H脱氧胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入DNA合成的生化学方法和癌细胞形态学方法观察到,不同方法处理腹水型(H_(22))肝癌细胞,其杀伤率,A组(912-HpD-laser)为74.4％;B组(HpD-912)为59.7％;C组(laser)为20.4％;D组(912)为27.0％;E组为0％作为对照。A组与其它组相比,杀伤作用显著增强(P均<0.01)。又通过测定脂质过氧化代谢产物Schiff碱的量观察各组对癌细胞的杀伤作用。Schiff碱有荧光特性,荧光强度越大,Schiff碱含量越高,癌细胞死亡数越多,上述5组的荧光强度测定结果分别是84.6,41.6,45.1,61.1和35.2mm。A组显著高于其它各组(P均<0.01)。进一步用化学发光法证明,912-激光-血卟啉衍生物杀伤癌细胞过程中有过氧化氢产生。上述结果提示,912-激光-血卟啉衍生物杀伤癌细胞的作用与活性氧的生成及其介导的脂质过氧化有密切关系。