骨髓间充质干细胞移植治疗视网膜病变

目前,对视网膜病变的治疗仍缺乏有效的药物.为解决视网膜损伤的修复问题,有研究者用胚胎干细胞、胚胎视网膜祖细胞、成体哺乳动物眼干细胞等进行了实验,但这些方法都存在着伦理学和移植学上的不足.骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)是骨髓中一类具有多向分化潜能的细胞群,在体外可诱导分化为神经元样细胞,进行BMSC移植,为视网膜病变的治疗提供了一条新的途径.现就BMSC生物学特征、体外的分离和纯化、向神经元样细胞的诱导分化及在视网膜病变治疗中的研究进展作一综述.     

骨髓间充质干细胞治疗眼科疾病的临床前研究进展

骨髓间充质干细胞是一类具有自我更新能力、高度增殖及多向分化潜能的特殊细胞.其"可塑性"的特性在组织和器官损伤修复的临床应用中发挥了重要作用.随着不断深入的研究进展,骨髓间充质干细胞的取材方便、增殖迅速及多向分化潜能等特点,使其在损伤修复和组织再生的领域中备受关注.眼科学者对骨髓间充质干细胞的深入研究将会拓展其在眼科应用的前景,为临床治疗眼科疾病提供新的方法.     

骨髓间充质干细胞与角膜损伤修复的研究现状

骨髓间充质干细胞是一种主要存在于骨髓中具有自我更新和多向分化潜能的干细胞.目前大量国内外研究证实,骨髓间充质干细胞可以分化为角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、角膜缘干细胞,并对眼表损害的修复有重要作用.本文旨在总结骨髓间充质干细胞在角膜损伤修复的基础研究和临床治疗等方面的研究进展.     

骨髓间充质干细胞及其在眼科应用的研究进展

骨髓间充质干细胞作为一类成体干细胞,由于具有易被分离、易被外源基因转染且稳定表达,分裂增殖能力强、以及体外操作简便等特点,成为组织工程、细胞移植及基因治疗理想的靶细胞。我们就骨髓间充质干细胞的概念、各项生理特征、向各组织的分化潜能及在眼科的应用等方面进行综述,并展望骨髓间充质干细胞的应用前景。     

骨髓间充质干细胞的视网膜保护研究进展

骨髓间充质干细胞( bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)富集于骨髓,可跨胚层分化,是一种具有多向分化潜能的成体干细胞。 BMSC易于分离培养,可高效扩增和表达,具有组织修复能力。由于其具有免疫调节能力,能分泌神经营养因子,使BMSC可以作为移植治疗视网膜疾病的种子细胞。本文将对BMSCs的视网膜保护研究进展作一综述。     

骨髓间充质干细胞在眼科应用的研究进展

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是骨髓组织中造血干细胞以外的一类成体干细胞,具有很强的自我更新能力、多向分化潜能及低免疫原性,可在特定的条件下诱导分化为不同的细胞,研究较为成熟的有成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、血管内皮细胞等,在组织工程学及细胞替代移植疗法中有广阔的应用前景.近年来,BMSCs因其自身的应用优势而成为眼科研究的热点.就BMSCs在眼科的应用研究进行综述.     

干细胞治疗视网膜血管损伤相关疾病的研究进展

视网膜血管损伤涉及许多眼部疾病,目前缺乏有效的治疗办法.有研究表明,胚胎干细胞和多种成体干细胞具有修复视网膜血管损伤的作用.胚胎干细胞可在体外诱导分化为成血管细胞,将后者应用于视网膜血管损伤动物模型,可有效修复损伤的血管;骨髓造血干细胞、骨髓间充质干细胞及脐血干细胞均具有内皮前体细胞活性,可在体外分化为血管内皮细胞,应用于一些血管损伤动物模型中,均具有修复损伤血管的作用.视网膜血管与视网膜神经组织联系紧密,视网膜损伤血管的修复,很有可能促进视网膜神经组织的保护和修复.     

乳鼠视网膜细胞诱导骨髓间充质干细胞分化为视网膜神经节样细胞

目的 探讨乳鼠视网膜细胞对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的诱导分化作用.方法 从出生8 d的大鼠骨髓中分离培养BMSCs,同时培养乳鼠视网膜神经细胞.在Transwell双层培养体系下,利用乳鼠视网膜细胞诱导BMSCs,诱导后细胞经RT-PCR及免疫荧光鉴定.结果 加入乳鼠视网膜细胞共培养第7 d有神经元样细胞形成,经nestin、NF、β-III Tubulin、Thy1.1行免疫组织化学、RT-PCR、免疫荧光鉴定,细胞呈阳性反应.结论 BMSCs在体外培养条件下,经过新生乳鼠视网膜细胞诱导,可以分化为视网膜神经节样细胞.     

骨髓间充质干细胞在角膜、视网膜及视神经疾病中的研究进展

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一种主要存在于骨髓中具有自我更新和多向分化潜能的干细胞.由于其具有体外无限增生、自我更新和能够分化成体内各种细胞的潜能,已经成为组织工程、细胞移植及基因治疗理想的靶细胞.在眼科相关研究中,BMSCs移植的研究主要集中于角膜病及视网膜疾病的治疗,视网膜疾病的治疗方式又可分为玻璃体腔注射和视网膜下移植,两者均有一定的治疗效果,而关于视神经疾病的治疗方面,国内外的研究较少.BMSCs的研究为解决当前眼科疾病治疗提供了新的思路和前景,但研究仍处于动物实验阶段,要进一步进行临床试验还有许多问题需要解决.就BMSCs的研究发展概况及其在眼科的研究进展进行综述.     

骨髓间充质干细胞在视网膜移植领域的研究进展

临床上对于视网膜退行性疾病的治疗仍然只停留在改善循环、营养神经等支持治疗阶段,缺少特效的治疗方法,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是具有较强自我复制功能和多向分化潜能的一类细胞,人们开始通过尝试不同的分离、诱导、移植等手段,以实现其向视网膜细胞的转化,并最终实现体内的替代治疗。我们就BMSCs在视网膜移植领域的研究进展进行综述,以期为进一步的研究提供参考。     

Cells, cells, and more cells

A 64-year-old woman presented with bilateral optic nerve swelling, vitreous cells, and cerebrospinal fluid monocytic pleocytosis. A chest radiograph and computed tomography demonstrated a lesion in the left lung, which histologically was confirmed to be a small-cell lung carcinoma. The serum was positive for the anti-CV2 (anti-CRMP-5) antibody. Following treatment with chemoradiation the optic nerve swelling and vitritis resolved. The differential diagnosis of uveal-meningeal diseases is discussed and the pathophysiology and clinical manifestations of paraneoplastic syndromes reviewed.     

Mesenchymal stem cells derived from human limbal niche cells

Purpose. We investigated whether human limbal niche cells generate mesenchymal stem cells. Methods. Limbal niche cells were isolated from the limbal stroma by collagenase alone or following dispase removal of the limbal epithelium (D/C), and cultured on plastic in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) with 10% fetal bovine serum (FBS), or coated or three-dimensional Matrigel in embryonic stem cell medium with leukemia inhibitory factor and basic fibroblast growth factor. Expression of cell markers, colony-forming units-fibroblast, tri-lineage differentiation, and ability of supporting limbal epithelial stem/progenitor cells were compared to limbal residual stromal cells. Results. Stromal cells expressing angiogenesis markers were found perivascularly, subjacent to limbal basal epithelial cells, and in D/C and limbal residual stromal cells. When seeded in three-dimensional Matrigel, D/C but not limbal residual stromal cells yielded spheres of angiogenesis progenitors that stabilized vascular networks. Similar to collagenase-isolated cells, D/C cells could be expanded on coated Matrigel for more than 12 passages, yielding spindle cells expressing angiogenesis and mesenchymal stem cells markers, and possessing significantly higher colony-forming units-fibroblast and more efficient tri-lineage differentiation than D/C and limbal residual stromal cells expanded on plastic in DMEM with 10% FBS, of which both lost the pericyte phenotype while limbal residual stromal cells turned into myofibroblasts. Upon reunion with limbal epithelial stem/progenitor cells to form spheres, D/C cells expanded on coated Matrigel maintained higher expression of p63α and lower expression of cytokeratin 12 than those expanded on plastic in DMEM with 10% FBS, while spheres formed with human corneal fibroblasts expressed cytokeratin 12 without p63α. Conclusions. In the limbal stroma, cells subjacent to limbal basal epithelial cells serve as niche cells, and generate progenitors with angiogenesis and mesenchymal stem cells potentials. They might partake in angiogenesis and regeneration during corneal wound healing.     

Amacrine cells,bipolar cells and ganglion cells of the cat retina: A Golgi study

Neuronal types contributing to the inner plexiform layer of the cat retina are described based primarily on light microscopy of Golgi-impregnated retinal whole-mounts. Cells have been characterized on morphological criteria that include dendritic branching patterns, dendritic tree sizes, cell body sizes and stratification of processes in the inner plexiform layer. Nine different types of bipolar cell, 22 different types of amacrine cell and 23 different types of ganglion cell can be distinguished using one or more of these morphological criteria. The significance of the different morphological types of cells is discussed, particularly in relationship to the functional bisublamination of the cat inner plexiform layer.     

兔羊膜成体干细胞培养及体外定向诱导神经细胞分化

目的 观察体外分离、培养的兔羊膜成体干细胞(ADSC)定向诱导神经细胞的分化结果.方法 新西兰雌兔羊膜分离、培养ADSC.实时定量聚合酶链反应(PCR)检测羊膜ADSC的纤连蛋白(Fibronectin)、巢蛋白(Nestin)、波形蛋白(Vimentin) mRNA的表达水平.单克隆形成实验证实羊膜ADSC是否具有自我复制能力.培养成功的ADSC中加入神经分化诱导培养基诱导神经细胞分化.诱导分化5d后,免疫荧光染色检测β-微管蛋白(tubulin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 培养的ADSC在24 h后逐渐从羊膜组织中移行出;72 h可见明显的多角形细胞富集在羊膜组织周边;120 h后多角形细胞致密地分布于羊膜四周.分裂后的子代细胞形态同父代细胞.单克隆形成实验结果证实羊膜ADSC具有自我复制能力.实时定量PCR检测结果显示,羊膜ADSC的Nestin、Vimentin、Fibronectin mRNA分别是脾脏细胞同种分子表达量的15.79、1.91、7.65倍,两者差异有统计学意义(Z=-5.243、-3.972、-2.524,P＜0.05).免疫荧光染色结果显示,β-tubulin在大部分细胞的胞质中表达;GFAP在部分细胞的细胞质中表达.结论 羊膜ADSC具有自我复制能力,在合适条件下能够分化成神经元和神经胶质细胞.     

RDS／peripherin表达载体的构建和在COS—1细胞的表达

目的 构建大鼠ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,并观察在ＣＯＳ－１细胞中的表达,方法 将全长度的ＲＤＳ／ｐｅｒｉｐｈｅｒｉｎｃＤＮＡ（１．５ｋｂ）插入到真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＭＡＸ中,构建了ＲＤＳ真核表达载体ｐＡＬＴＥＲ－ＲＤＳ,采用电穿孔技术将其转染ＣＯＳ－１细胞,转染４８ｈ后,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＲＤＳ／ｐｅｒｉｈｐｅｒｉｎｃＤＮＡ的表达,结果 采用ＲＴ－ＰＣＲ