LC-MS/MS测定人血浆中盐酸舍曲林的浓度

目的 建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸舍曲林浓度的方法.方法 以盐酸帕罗西汀为内标,采用乙腈-0.1%甲酸溶液(50∶50)为流动相,以Discovery C18色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源(ESI),以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测.用于定量分析的离子反应分别为m/z 306.0→274.9(盐酸舍曲林)和m/z 330.1→191.9(盐酸帕罗西汀).结果 盐酸舍曲林线性范围0.332～66.400 μg·L-1,定量下限为(0.334±0.002)μg·L-1(n=5).日内、日间精密度(RSD)小于9%,平均回收率大于95%.结论 本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于盐酸舍曲林临床药动学研究.     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中阿立哌唑的浓度

目的 建立测定人血浆中阿立哌唑的HPLC-MS,并用于研究阿立哌唑在精神分裂症患者体内的药动学.方法 血浆样品中加入内标艾司唑仑,用叔丁基甲醚萃取.色谱柱为Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液-甲酸(42∶58∶0.1),流速0.35 mL·min-1.采用电喷雾电离源正源(ESI+),选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z 448,450(阿立哌唑)和m/z 295(内标).结果 阿立哌唑在19.90～1 119.60 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低定量质量浓度为1.00 μg·L-1(S/N=10),方法回收率在97.2%～103.5%之间,日内与日间RSD均小于8.0%(n=5).结论 该方法灵敏度高,结果准确,适用于治疗剂量阿立哌唑体内药动学的研究.     

FLU-HPLC测定复方吴茱萸巴布膏中阿魏酸血药浓度及药动学研究

目的 建立大鼠血浆中阿魏酸的FLU-HPLC测定方法,研究大鼠透皮给药复方吴茱萸巴布膏的药物动力学.方法 色谱柱Venusil ASB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(35:65:0.6),流速0.8 mL·min-1,激发波长352nm,发散波长467 nm.采用固相萃取法去除血浆中杂质,荧光检测-高效液相色谱法测定了血样中阿魏酸的浓度,并用3P97软件进行了药动学参数的计算.结果 方法的最低检测浓度为1.5 μg·L-1(S/N=3),绝对回收率范围为87.82%～96.51%.透皮给药后,药-时曲线符合一室模型,主要药动学参数A 457.569 μg·L-1,Ka 0.146 h-1,Ke 0.090 h-1,ρmax 81.581μg·L-1,tmax8.639 h,Lag time 0.290 h.结论 与传统方法比较,本方法灵敏度高、准确,更适用于阿魏酸血药浓度的测定及药动学研究.     

高效液相-串联质谱测定血浆中依西美坦的浓度

目的 建立高效液相色谱-串联质谱的方法测定人血浆内的依西美坦浓度,对两种制剂进行人体生物等效性研究.方法 采用Lichrospher C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱;柱温25℃;流动相为甲醇-水(含0.05%甲酸)(80∶20);流速为1.0mL·min-1;通过液相串联质谱,大气压化学电离(APCI),以选择反应监测(SRM)方式进行检测;检测离子为依西美坦m/z296.8[M+H]+→121[M+H]+,非那雄胺(内标)m/z373.2[M+H]+→305.2[M+H]+.结果 依西美坦的线性范围为0.099 4～39.76 μg·L-1,依西美坦受试制剂和参比制剂的t1/2分别为(13.37±4.62)和(15.65±5.89)h,ρmax分别为(19.97±8.51)和(20.04±9.16)μg·L-1,tmax分别为(0.95±0.39)和(0.90±0.29)h,AUC0-72分别为(95.64±26.87)和(96.73±25.97)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(100.47±28.76)和(114.59±62.32)μg·h·L.结论 该方法简便、灵敏度高,两制剂生物等效.     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

目的 建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究.方法 22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度.分析柱:Capcell C18柱(2 mm×50 mm,5μm),内标(IS)13 C6-依折麦布.流动相:5mmol·L-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱.采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z 408.5→m/z 270.8,内标为m/z 414.5→m/z 276.8.结果 依折麦布在0.020～20μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 4(n=9).总的依折麦布在0.25～250μg·L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 8(n=9).最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内.志愿者口服10 mg依折麦布后采血72 h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg·h·L-1;AUC0-t(102.1±31.4)和(478.8 4±170.0)μg·h·L-1;ρmax (4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg·L-1;tmax(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h.结论 该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近.     

HPLC测定健康人体内齐多夫定的浓度及药动学研究

目的 建立HPLC-紫外检测方法测定健康人体中齐多夫定含量的方法,并用该法研究齐多夫定在健康人体内的药动学.方法 色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为水-乙腈(75∶25),检测波长265 nm.以替硝唑为内标,血样以固相萃取法进行预处理.结果 血浆样品线性范围20～4 000 μg·L-1(r=0.999 9),血浆样品萃取回收率均在90%以上,日内、日间的RSD皆小于3%.应用该法研究12名健康受试者po 400 mg齐多夫定胶囊后的药动学,其体内过程符合二室模型,其药动学参数为:tmax为(0.73±0.13)h,ρmax为(2 234.50±853.87)μg·L-1,用梯形法计算所得的AUC0-t为(3 358.75±572.97)μg·h·L-1,t1/2β为(1.43±0.49)h.结论 此方法准确,灵敏,适于药物分析,其药动学参数为临床合理用药提供理论依据.     

Beagle犬血浆中齐墩果酸浓度的测定

目的 建立测定Beagle犬血浆中齐墩果酸的HPLC-MS测定法,以进行齐墩果酸滴丸的生物利用度和药动学研究.方法 采用HPLC-MS,以Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为20 mmoL·L-1醋酸铵-乙腈(24∶76),流速0.3 mL·min-1,检测波长为210 nm.结果 Beagle犬血浆内源性物质不干扰样品的测定,血浆中齐墩果酸浓度在3.88～240.00 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测浓度为3.88 μg·L-1;方法平均回收率大于85%;平均提取回收率大于80%;日内和日间RSD均小于10%.结论 所建立的测定方法准确可靠,符合生物样品分析要求.     

HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

目的 建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究.方法 以氟康唑为内标.血浆样品经预处理后,选用HypersilODS2色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),甲醇-水(49:51)为流动相,流速1.0 mL·min-1,室温260 nm处测定.结果 黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L-1,最低定量浓度为5μg·L-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均＜12%.黄豆苷元药动学参数t1/2为(3.863±0.983)h,ρmax (192.261±115.077)μg·L-1,tmax(0.900±0.409)h,AUC0～12(490.839±162.855)μg·h·L-1,AUC0～∞(535.279±163.190)μg·h·L-1.结论 本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究.     

HPLC-MS/ESI同时测定人血浆中氯唑沙宗及其代谢物的浓度

目的 建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中氯唑沙宗及其代谢物6-羟基氯唑沙宗的方法.方法 采用Thermo C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),Phenomenex C18保护柱,柱温40℃,流动相:乙腈-30 mmol·L-1醋酸铵溶液(34∶66),流速:1mL·min-1,进入MS检测器的分流比3∶1.质谱采用电喷雾电离源负离子模式(ESI-),选择性监测质荷比(m/z)168.3,170.2(氯唑沙宗),444.7(内标),184.4,186.2(6-羟基氯唑沙宗)的准分子离子峰.血浆样品孵化后,经叔丁基甲醚提取,内标法定量.结果 氯唑沙宗及6-羟基氯唑沙宗分别在25～10 000,10～3 000 μg·L-1内线性关系良好(r≥0.999 8);最低检测质量浓度分别为2.5和2 μg·L-1;两个化合物的方法回收率在90%～110%之间;日间和日内RSD均小于15%.结论 该方法灵敏度高,快速,简便,可用于氯唑沙宗药动学及药物相互作用的研究.     

反相高效液相色谱法同时测定人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量

目的 建立可同时检测人血浆中替米沙坦、氢氯噻嗪含量的反相高效液相色谱方法.方法 色谱条件:色谱柱为Zorbax80(A) Extend-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-四丁基氢氧化铵磷酸盐缓冲液(24:76);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:230 nm(替米沙坦),272 nm(氢氯噻嗪);柱温:20℃.结果 本法替米沙坦的线性范围为31.8～1 591.2μg·L-1,r=0.999 4,方法回收率为98.68%,RSD=3.09%,最低检测质量浓度为20 μg·L-1.氢氯噻嗪的线性范围为30～240 μg·L-1,r=0.9991,方法回收率为100.32%,RSD=5.11%,最低检测质量浓度为20μg·L-1.结论 本法可以同时测定血浆中替米沙坦和氢氯噻嗪的浓度,具有样品处理简单、方法稳定、有较好的实用性,易于开展药动学及药效学研究.     

高效液相色谱-库仑电化学检测法定量测定小鼠血浆中CTN986

目的 建立血浆中CTN986的定量测定方法,为药物代谢研究提供技术手段.方法 采用HPLC-库仑电化学色谱方法,DiamonsilTM(钻石)C18(,4.6 mm×200mm,5μm)色谱柱,0.2 mol·L-1磷酸二氢钠-甲醇(60∶40)为流动相,CoulochemⅢ电化学检测器,Model 5010 Analytical cell为检测手段,以峰面积定量.结果 检测下限为150μg·L-1,定量下限为390μg·L-1,方法线性范围为0.390～12.5,12.5～50 mg·L-1;在1.563,6.25,12.5,25 mg·L-1 4种质量浓度平均回收率为53.43%;日内、日间平均RSD为1.03%,2.28%.结论 该方法灵敏度高,方法操作简便,可满足药动学研究的要求.     

高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中拉呋替丁药物浓度

目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中拉呋替丁药物浓度.方法 以SupelcosilTMLC-18-DB(4.6 mm×250 mm,5 μm)为色谱柱,[甲醇-(醋酸-醋酸钠缓冲液)](pH 4.5)=1:2为流动相,荧光检测波长:EX=285 nm,EM=313 nm.结果 测定血清中拉呋替丁方法的线性范围为2.5～300 μg·L-1,r=0.999 7(n=5),定量下限为2.5 μg·L-1.日内、日间精密度(RSD)均小于12%.结论 本方法操作简便、灵敏度高,可满足拉呋替丁药动学研究需要.     

西嗪伪麻缓释片中伪麻黄碱在人体内的立体选择性研究

目的 研究西嗪伪麻缓释片中伪麻黄碱在人体内的立体选择性.方法 建立高效液相色谱紫外检测法测定人血浆中伪麻黄碱和麻黄碱的浓度.血浆样品加入内标对乙酰氨基酚,采用氨水作为碱化试剂,以乙醚液-液萃取后进行分析.色谱柱:Phenomenex苯基柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(含50 mmol·L-1磷酸二氢钾)(磷酸调pH至4.0)-三乙胺(10∶90∶0.01);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:210 nm.结果 伪麻黄碱和麻黄碱达到良好分离,理论塔板数为8 000左右,两者的最低定量限均约为50 μg·L-1,线性范围均为50～1 600 μg·L-1,绝对回收率大于70%,日内和日间精密度良好.结论 该法简便、灵敏、准确,适合于伪麻黄碱和麻黄碱血药浓度的测定,人血浆中伪麻黄碱未发生代谢转化.     

人血浆中溴吡斯的明浓度的RP-HPLC测定法

目的 建立RP-HPLC测定血浆中溴吡斯的明浓度的方法.方法 采用Sep-Pak柱固相萃取法提取溴吡斯的明;Waters2690系列高效液相色谱仪测定.色谱柱Nucleosil 100-5 CN柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);柱温:室温;检测波长:269 nm;流动相为乙腈-水(0.1%三乙胺水溶液加1 mol·L-1 Hac调节pH 3.2)梯度洗脱;外标法定量.结果 溴吡斯的明血药浓度的线性范围为2.0～50.0 μg·L-1;最低检测浓度2.0 μg·L-1;方法回收率为96.89%～111.51%;日内及日间精密度分别为2.79%～7.00%和2.33%～5.51%.结论 本法灵敏、准确,可用于溴吡斯的明人体药动学研究.     

阿莫西林对大鼠体内黄芩苷血药浓度的影响

目的 研究口服阿莫西林对中药有效成分黄芩苷血药浓度的影响.方法 用HPLC-ECD方法测定阿莫西林和黄芩苷合并给药组与黄芩苷单独给药组大鼠的血药浓度,比较两者的药动学参数.结果 阿莫西林和黄芩苷合并给药组大鼠ρmax(964.94±301.18)μg·L-1,AUC0～24 h(8 989.35±2 610.28)μg·h·L-1;黄芩苷单独给药组大鼠ρmax(2 645.62±601.42)μg·L-1,AUC0～24 h(28 952.90±5 731.42)μg·L-1.结论 两组药动学参数存在显著性差异(P＜0.05),口服阿莫西林严重影响黄芩苷的血药浓度,应提醒临床医生和患者注意.     

人血浆中吡柔比星HPLC测定方法及其在药动学研究中的应用

目的 建立人血浆中吡柔比星的HPLC测定方法,并用于吡柔比星化疗病人的药动学研究.方法 取血浆300 μL,以柔红霉素为内标,采用甲醇-氯仿(1:3)作为提取溶剂提取,有机相氮气吹干,残渣溶于60 μL流动相进样分析.色谱柱:Shimpack CLC-ODS柱(6 mm×15 cm,5 μm);流动相:乙腈-磷酸盐-冰醋酸(35:65:0.5);流速1 mL·min-1;荧光检测,激发波长480nm,发射波长560nm.乳腺癌化疗病人15 min内静注吡柔比星60 mg·m-2,在注射开始0,5,10 min、注射结束时、结束后5,10,30 min,1,2,4,8,12,24,48 h取血测定浓度,使用WinNonlin软件拟合,计算药动学参数.结果 本方法在5～500 μg·L-1内线性良好,相关系数r=0.999 4(n=6).高、中、低3个质量浓度质控样品批内误差的RSD为3.01%一4.87%,批间RSD为1.49%～4.39%,最低定量限为5 μg·L-1;药物代谢为三室模型,半衰期分别为(0.034±0.01),(0.858±0.416)和(18.81±4.47)h.结论 本方法采样量小,操作简便,为药动学和生物等效性研究提供了方法学基础.     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中山茛菪碱

目的建立大鼠血浆中山莨菪碱的测定方法,并研究山莨菪碱的大鼠药动学。方法采用液相色谱串联电喷雾离子阱质谱法测定大鼠血浆中山莨菪碱。大鼠血浆样品经甲醇2次沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-2mmol/L醋酸铵缓冲液(用甲酸调pH3.5)(70:30)为流动相,用AgilentZorbaxEclipseXDB-C_(18)色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z306→140(山莨菪碱)和m/z290→124(内标,阿托品)。结果山莨菪碱线性范围为10-5000μg/L,r=0.9990,最低检测限为2μg/L,日内、日间测定值RSD小于4.2%。结论该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内山莨菪碱的药动学研究。     

HPLC-MS研究盐酸恩丹西酮缓释胶囊人体药动学及生物等效性

目的 首次建立人血浆中盐酸恩丹西酮浓度的HPLC-MS分析方法,用以测定健康受试者口服盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度.方法 血浆中加入内标米氮平后,乙酸乙酯提取,HPLC-MS分离、分析.色谱系统:ODS柱(4.6 mm×150 mm,5μm),甲醇-乙腈-醋酸铵溶液(0.01 mol·L-1)(35:30:35)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温35 ℃.质谱检测方式:SIM.结果 盐酸恩丹西酮的线性范围为0.1～80 μg·L-1(r=0.999 9),最低检测质量浓度达0.1 μg·L-1,提取回收率≥85%.口服单剂量和多剂量的盐酸恩丹西酮缓释胶囊后的相对生物利用度分别为(94.1±15.8)%和(94.8±14.3)%.结论 本法简便,准确,灵敏度高.统计学结果表明,口服单剂量和多剂量的缓释胶囊与普通参比胶囊相比,达峰浓度低,达峰时间延长,稳态的波动度小,缓释特征明显.经方差分析和双单侧t检验表明,缓释胶囊和普通参比胶囊生物等效.     

马来酸依那普利片的人体生物等效性研究

目的 用HPLC-MS测定健康受试者口服马来酸依那普利制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度.方法 采用随机二交叉设计试验,20例男性健康志愿受试者,单剂量口服受试制剂和参比制剂的马来酸依那普利片.以高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中依那普利和依那普利拉的浓度.采用SPSS及BAPP2.2软件处理计算主要药动学参数.结果 受试制剂和参比制剂血浆中马来酸依那普利的t1/2分别为(1.33±0.22)和(1.25±0.37)h;ρmax分别为(238.59±55.40)和(230.61±78.29) μg·L-1,tmax分别为(0.70±0.20)和(0.80±0.20)h,AUC0-8h分别为(339.03±70.66)和(373.23±108.83) μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(343.51±71.15)和(378.36±107.35)μg·h·L-1.依那普利拉的t1/2分别为(6.26±0.63)和(5.72±0.54)h;ρmax分别为(83.75±25.91)和(99.13±29.61)μg·L-1,tmax分别为(3.80±0.60)和(3.40±0.70)h,AUC0-36h分别为(812.02±181.88)和(803.35±199.50)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(832.99±180.85)和(817.36±201.78)μg·h·L-1,以依那普利和依那普利拉计算的人体相对生物利用度分别为(90.84±39.6)%和(102.8±31.3)%.结论 两种制剂在健康人体内具有生物等效性.     

小鼠血浆中姜黄素的含量测定及药动学研究

目的 建立血浆中姜黄素含量测定的HPLC,并研究姜黄素静注后在小鼠体内的药动学行为.方法 血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,采用Lichrospher-C18分析柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温:30 ℃;流动相:甲醇-5%醋酸溶液(85:15);流速:0.5 mL·min-1;检测波长:420 nm.结果 本法可将姜黄素与其他内源性干扰成分成功分离.在0.25～10.0 mg·L-1内,测定方法具有良好的线性关系;萃取回收率为64.91%,加样回收率为93.10%;日内、日间精密度RSD均小于10%.小鼠静注姜黄素后药动学行为符合三室模型,主要药动学参数为:t1/2pi 0.42 min,t1/2α 16.2 min,t1/2β 73.82 h,CL 1.22 L·h-1.结论 所建立的姜黄素体内血药浓度测定方法可行,姜黄素静注后在小鼠体内分布消除迅速.