心肌样细胞和内皮祖细胞联合移植对兔心肌梗死面积的影响

目的:评价心肌样细胞和内皮祖细胞联合移植对心肌梗死面积影响是否优于单项细胞移植。方法:骨髓穿刺提取、分离、培养骨髓间充质干细胞(mensenchymal stemcell,MSC),向心肌样细胞和内皮祖细胞定向诱导分化。心肌梗死模型制作成功2周后沿梗死周边区域注射100μl培养基或心肌样细胞、内皮祖细胞及二者混合悬液各3×108/100μl。实验前、后4周行心脏超声检查心功能,TTC染色评价梗死面积。结果:①诱导后MSC呈现心肌样细胞超微结构特征,PCR检查表达心肌收缩、舒张特异性蛋白肌球蛋白重链、受磷蛋白以及心房颗粒;内皮祖细胞呈"铺路石"外观,高表达CD133并随时间推移表达逐步下降。②与对照组[(35.17±1.76)%]相比,细胞移植能降低梗死面积(均P<0.05);心肌样细胞组[(28.61±1.24)%]、内皮祖细胞组[(29.73±2.11)%]与联合细胞移植组[(22.82±3.12)%]比较,均P<0.05。结论:MSC可定向分化心肌样细胞和内皮祖细胞,两者联合细胞移植在改善心肌缺血及心肌细胞坏死,降低梗死面积方面效果优于单项细胞移植。     

兔骨髓间充质干细胞自体移植及血管新生修复梗死心肌的实验研究

目的　了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法　结扎兔左前降支 (LAD)制作急性心肌梗死(AMI)模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增骨髓间充质干细胞。术后 2周进行心肌梗死瘢痕内移植 5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的骨髓间充质干细胞 ,对照组注射培养基。AMI术前、AMI术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物模型 ,取左室标本做冰冻切片 ,采用免疫荧光方法检测BrdU鉴定植入细胞并检测Ⅷ因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果　细胞移植组左室切片中可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。Ⅷ因子阳性内皮细胞计数表明细胞移植组毛细血管密度大于对照组 (P <0 0 5 )。超声心动图检查证实MSCs移植后 4周左室收缩末期直径 (LVESD)、舒张末期直径 (LVEDD)均小于对照组 (分别为P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,小轴缩短率 (ΔD % )、射血分数 (EF)均大于对照组 (均P <0 0 1)。结论　兔缺血心肌内注射骨髓间充质干细胞可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,可能伴有移植区域新生血管形成 ,能显著改善心功能 ,可用于心肌梗死的治疗。     

成年犬自体骨髓基质干细胞经冠状动脉移植在心梗后心肌组织内分化

目的　探讨经冠状动脉移植成年犬自体骨髓基质干细胞在心梗后心肌组织内的存活、分化情况。方法　结扎犬冠状动脉前降支制备心肌梗死模型 ;细胞移植组将体外培养、诱导的自体骨髓基质干细胞标记后在心肌梗死后 4周经冠状动脉植入心脏 ;对照组植入等量培养基 ;细胞移植 4周后取犬心脏 ,行组织学检查、免疫组织化学检查及电镜检查。结果　细胞移植组植入骨髓基质干细胞在心肌组织内存活 ;免疫组织化学检查结蛋白、肌钙蛋白I染色阳性 ;电镜示心肌疤痕组织中可见胞浆丰富的异源性细胞 ,圆形或椭圆形 ,细胞体积较大 ,核糖体丰富 ,线粒体较丰富 ,有肌丝样结构 ,单核。对照组心脏标本中可见疤痕组织 ;心肌细胞结蛋白染色阴性 ,肌钙蛋白I染色阳性 ;电镜未发现异源性细胞。结论　成年犬骨髓基质干细胞经冠状动脉移植后在心肌组织内存活并分化为肌源性细胞。     

骨髓单核细胞与心肌样细胞移植对兔心肌梗死面积影响的对比研究

目的评价骨髓单核细胞与心肌样细胞移植对心肌梗死面积影响是否具有差异。方法提取、分离、培养骨髓单个核细胞,向心肌样细胞定向诱导分化。心肌梗死模型制作2周后沿梗死周边区域注射100!l培养基或骨髓单个核细胞、心肌样细胞各3×108/100!l。移植前、后4周心脏超声检查,TTC染色评价梗死面积。结果①诱导后骨髓基质细胞(MSC)呈现心肌样细胞超微结构特征,PCR检查表达心肌收缩、舒张特异性蛋白肌球蛋白重链(β-MHC)、受磷蛋白(PHO)、心房颗粒(ANP)。②与对照组相比,细胞移植能降低梗死面积,心肌样细胞移植组效果更好[(35.17±1.76)%、(28.61±1.24)%和(22.82±3.12)%,P<0.05]。结论MSC可定向分化心肌样细胞,心肌样细胞移植在改善心肌细胞坏死,降低梗死面积方面效果优于骨髓单个核细胞移植。     

人脐带间充质干细胞移植对小型猪急性心肌梗死模型心肌细胞再生的影响

目的观察人脐带间充质干细胞移植治疗心肌梗死的可行性及机制,探讨经心外膜多点注射对小型猪急性心肌梗死模型心肌细胞再生的影响。方法无菌条件下采集足月儿的脐带,体外分离、培养、扩增人脐带间充质干细胞至第5代并以CM-Dil标记。取小型猪18例制作急性心肌梗死模型,并随机分为对照组、PBS组和移植组,每组6只。PBS组和移植组分别在梗死区注射PBS和脐带间充质干细胞。干预6周后行核素心肌灌注显像,观察梗死区灌注情况;通过免疫荧光法、Masson和TUNEL染色法观察梗死心肌中干细胞存活、增殖、分化情况和心肌纤维化、心肌细胞凋亡情况。结果与对照组及PBS组相比,移植组心肌灌注情况明显改善(P<0.01);移植后6周梗死区域可见移植的干细胞存活,其中部分向心肌和血管内皮细胞分化,亦可见固有心肌干细胞的募集与分化。TUNEL染色结果显示,移植组细胞凋亡明显减少(P<0.01)。Masson染色证实移植组的存活心肌明显增多而纤维组织明显减少(P<0.01)。结论人脐带间充质干细胞移植于心肌梗死区域后可部分存活并分化为心肌和血管组织,可促进固有心肌干细胞的募集和分化,减少细胞凋亡和组织纤维化,改善梗死区域的心肌存活情况,抑制心室重构,促进梗死心肌再生。     

脂肪间充质干细胞移植治疗兔急性心肌梗死的实验研究

目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)移植治疗兔急性心肌梗死后心力衰竭的作用及其可能机制。方法 30只健康日本大耳白兔随机分为注射磷酸盐缓冲液的假手术组(n=10)、心肌梗死对照组(n=10)以及注射ADMSCs移植组(n=10)。结扎兔前室间支,建立急性心肌梗死动物模型,急性心肌梗死1h内将4',6-二脒-2-苯基吲哚(4',6-diamidio-2-phenylindole,DAPI)标记的第三代ADMSCs(5×106个,1mL)植入ADMSCs移植组梗死心肌,对照组及假手术组注射等量磷酸盐缓冲液液。术前及术后4周分别做超声心动图检查其心功能变化。取心肌梗死区组织作冰冻切片,荧光显微镜下验证移植后的ADMSCs是否向心肌细胞分化,苏木素-伊红染色和CD34免疫组化观察梗死区毛细血管新生情况。结果超声心动图检测证实移植后4周ADMSCs组左心室收缩末期直径、舒张末期直径与左心室重量指数均小于心肌梗死对照组[(0.72±0.04)cm vs.(0.88±0.07)cm,P0.05;(1.07±0.12)cm vs.(1.21±0.09)cm,P0.05;(1.176±0.057)g/kg vs.(1.361±0.095)g/kg,P0.05],而短轴缩短率、射血分数均大于心肌梗死对照组[31.87%±2.03%vs.28.00%±3.38%,P0.05;51.75%±3.37%vs.43.13%±3.72%,P0.05];ADMSCs移植组荧光显微镜下可以观察到DAPI标记细胞存在,并分化为心肌样细胞;CD34免疫组化染色显示ADMSCs组梗死局部毛细血管密度明显高于心肌梗死对照组[(20.00±2.65)个vs.(7.75±2.12)个,P0.05]。结论同种异体移植的ADMSCs能够在梗死心肌内存活并分化为心肌样细胞,增加梗死区血管新生,抑制心室重构、改善心肌梗死后心功能。     

内皮细胞特异性分子-1预处理干细胞用于心肌梗死治疗的实验研究

目的:探讨内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule 1,ESM-1)预处理的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)植入心肌梗死(MI)大鼠后,是否能增加干细胞的存活,改善MI大鼠的心功能。方法:将用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记的BM-MSCs与ESM-1孵育预处理后,以注射器自心外膜注入SD大鼠梗死心肌周围组织。将30只SD大鼠随机分为3组,即空白组、对照组及预处理组,每组10只大鼠(n=10)。于MI后4周、干细胞移植后4周分别检测各组的超声参数:左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、室间隔厚度(IVST)和左室后壁厚度(LVPWT);用ELISA法定量检测血清脑钠尿肽(BNP)的分泌以及移植细胞的存活情况。结果:干细胞移植后4周,预处理组大鼠心脏超声检测提示LVESD、LVEDD缩小、LVEF提高,BNP含量降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.01)。干细胞移植后4周,预处理组梗死周围心肌组织Brd U+的细胞数明显增多,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.01)。结论:将ESM-1与BM-MSCs共孵育可活化BM-MSCs,促进其增殖、分化,改善心功能。     

兔骨髓间充质干细胞自体移植对缺血心肌心功能的影响

目的 :了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死 (MI)的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法 :结扎兔左前降支制作急性MI模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增MSCs ,其中一组于培养基中加入 5 氮胞苷 (5 aza) 10 μmol/L。术后 2周进行MI瘢痕内移植 5 溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)标记的MSCs,对照组注射培养基。MI术前、术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物取左室标本作冰冻切片 ,采用免疫荧光方法鉴定植入细胞。结果 :细胞移植组左室切片中均可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。超声心动图检测证实移植后 4周细胞移植组左室收缩末期直径、舒张末期直径均小于对照组 (分别为P <0 .0 1及P <0 .0 5 ) ,小轴缩短率、射血分数均大于对照组 (均P <0 .0 1)。导管测压显示细胞移植组的左室舒张末期压低于对照组、左室压上升及下降最大速率高于对照组 (均P <0 .0 1)。加 5 aza细胞移植组与不加 5 aza组上述各指标差异无统计学意义。结论 :缺血心肌内注射MSCs可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,显著改善心功能 ,可用于MI的治疗。     

自体成肌细胞和骨髓间充质干细胞移植对缺血坏死心肌的修复作用

目的 观察自体骨骼肌成肌细胞(SMs)和骨髓间充质干细胞(BMSCs)经冠脉移植至缺血坏死心肌后的分化情况及对缺血坏死心肌的修复作用.方法 取日本大耳白兔45只,随机分为SMs、BMSCs移植组和对照组,每组15只.移植组分别取臀肌和骨髓体外培养SMs和BMSCs.各组均结扎左前降支建立缺血坏死心肌模型.分别于再灌注后1 h经左前降支注射5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记的SMs、BMSCs悬液1 ml(5×1012个/L)或等量DMEM培养液.移植后24 h和4周用超声心动仪检查心脏功能变化.移植后4周以病理组织学检查HE染色及BrdU抗体、结蛋白(Desmin)抗体和骨骼肌特异性慢肌球蛋白重链(Slow-MHC)单克隆抗体,免疫组化染色评价移植细胞的分化情况.结果 移植后4周,SMs和BMSCs组在左室射血分数[(61.9±3.6)%、(62.4±2.6)%]和左室短轴收缩率[(31.6±2.3)%、(30.8±1.9)%]较对照组[(53.2 ±2.3)%、(23.8±0.9)%]均有明显改善(P＜0.05);SMs与BMSCs组比较差异无统计学意义(P＞0.05);HE染色显示移植组心肌纤维排列有序,其中SMs组可见新生的多核肌样细胞.移植SMs和BMSCs BrdU抗体免疫组化染色阳性.SMs组SMsDesmin抗体和Slow-MHC单克隆抗体免疫组化染色阳性.结论 经冠脉自体移植的SMs和BMSCs可在缺血坏死心肌内存活.对心肌损伤具有修复作用,并同等程度地提高了心脏功能.     

心肌梗死区存活心肌对糖尿病急性心肌梗死患者PCI术后心功能的影响(英文)

目的:探讨糖尿病急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者心肌梗死区存活心肌对左室重构及左心功能的影响。方法:208例2型糖尿病并急性心肌梗死PCI术后的患者接受静息状态下18-氟脱氧葡萄糖正电子发射断层扫描术(18F-FDG PET)心肌代谢显像与99m锝-甲氧基异丁基异腈单光子发射型计算机断层成像术(99Tcm-MIBI SPECT)心肌灌注显像,根据心肌梗死区有无存活心肌,分为有心肌存活组(115例,灌注-代谢不匹配)和无心肌存活组(93例,灌注一代谢匹配)。检测两组PCI术前、术后超声心动图各指标,观察心肌梗死区心肌存活状态对于左室重构以及心功能的影响。结果:心肌梗死12个月后有存活心肌组左室射血分数(LVEF)显著高于无存活心肌组[(46.7±6.98)%比(44.1±7.12)%],左室舒张末期内径(LVEDd)[(53.17±4.77)mm比(55.46±4.75)mm],左房内径[(35.89±12.08)mm比(39.25±11.31)mm]显著小于无存活心肌组,P均<0.05。舒张期二尖瓣血流速度峰值的比值12个月后两组无显著差异(P>0.05)。结论:于2型糖尿病合并急性心肌梗死的患者,心肌梗死区有存活心肌患者较无心肌存活患者,LVEF明显改善,左室舒张末期内径显著缩小。     

葡聚糖对大鼠急性心肌梗死后心功能及梗死面积的影响

将16只Wistar大鼠随机分对照组和治疗组,结扎左前降支制备急性心肌梗死模型,治疗组在手术前1 d、手术当天及术后1 d腹腔内注射葡聚糖20 mg/(kg·d),术后2 d及3周二维超声心动图检查心功能,包括左室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、左室射血分数(LVEF);术后3周处死大鼠,三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积.结果 与对照组比较,术后3周治疗组LVEF显著升高,LVDd、LVDs明显减小(P均《0.05);治疗组梗死面积亦明显减少(P＜0.05).提示葡聚糖可减少Wistar大鼠心肌梗死面积,改善心功能.     

缺血预处理间充质干细胞移植治疗心肌梗死实验研究

目的探讨静脉移植缺血预处理的间充质干细胞（MSCs）对梗死心肌的修复作用。方法选择纯种大白兔46只制作心肌梗死模型,分为缺氧预处理MSCs移植组（A组）、非缺氧预处理MSCs移植组（B组）和对照组,于心肌梗死后30d分别检测心功能、梗死心肌的形态学变化以及新生毛细血管密度。结果与对照组比较,A、B组左心室收缩末期内径、舒张末期内径降低,心功能提高,室壁厚度增加,心肌梗死面积缩小,梗死区和梗死边缘区新生毛细血管密度增加（P〈0．05）。结论MSCs移植治疗兔心肌梗死可改善心功能、缩小梗死面积、增加梗死心肌新生毛细血管密度,经缺氧预处理的MSCs移植治疗更有优势。     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMMSCs)移植对急性心肌梗死(AMI)大鼠心脏结构和功能的影响及其作用机制。方法采用Wistar大鼠30只,随机分成BMMSCs移植组、培养液注射组(开胸后在梗死区周围注射等量细胞培养液);体外分离纯化、扩增BMMSCs,4,6二脒基-2-苯吲哚(DAPI)标记。BMMSCs移植组于造模后1周经心肌直接注射MSCs,培养液注射组注射同等剂量的细胞培养液。造模后4周测定心功能并行免疫组织化学检测。结果造模后4周,与培养液注射组比较,BMMSCs移植组左室射血分数明显增加,左室收缩末期内径和舒张末期内径显著降低(P均<0.05);心肌梗死区毛细血管密度明显增高(P<0.05);BMMSCs移植组大鼠梗死心肌中可见DAPI标记阳性细胞;与培养液注射组比较,BMMSCs移植组可以显著减少非梗死区心肌细胞的凋亡(P<0.05)。结论 BMMSCs移植能够提高AMI梗死区毛细血管密度,改善大鼠的心功能。     

骨髓干细胞移植对AMI后左室重构及心功能影响的实验研究

将雄性Wistar大鼠50只随机分为移植组及对照1、2、3组。用结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死（AMI）模型。对照1组单纯开胸但不结扎冠状动脉；对照2组仅建立AMI模型；对照3组将培养基经心外膜下植入梗死心肌周围；移植组将制备好的同种异体骨髓单个核细胞（BM-MNCs）悬液经心外膜下植入梗死心肌周围。移植术后4周末，超声心动图及心导管检查评价左室形态及功能，并观察梗死区及其周边区心肌内移植BM-MNCs组织形态学特点。结果与对照1组相比，对照2、3组及移植组左室收缩末期内径（LVEDs）、左室舒张末期内径（LVEDd）和左室舒张末压（LVEDP）均显著升高（P〈均0．05），左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、左室收缩压（LVSP）、左室压最大上升速率（＋dp／dtmax）和左室压最大下降速率（-dp／dtmax）均显著降低（P均〈0．05）；移植组LVEDs、LVEDd和LVEDP显著低于对照2、3组（P均〈0．05），LVEF、LVFS、＋dp／dmax。和-dp／dtmax显著高于对照2、3组（P均〈0．05）；免疫组织化学检查发现移植组AMI区内有存活的BrdU标记阳性的BM-MNCs。证实同种异体大鼠BM-MNCs移植可减轻急性AMI后的左心室扩大，抑制左室重构，改善AMI后的心脏功能。     

微泡破坏促进骨髓间充质干细胞归巢治疗犬心肌梗死

目的通过诊断超声介导微泡破坏联合冠状动脉内移植促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)归巢梗死心肌,为临床治疗心肌梗死探索新的方法。方法急性心肌梗死(AMI)造模成功犬随机分为4组,每组6只,造模7 d后,分别给予磷酸盐缓冲液(PBS)、超声+微泡+PBS、BMSCs、超声+微泡+BMSCs。28 d后,评估心功能和灌注缺损区域占左心室灌注区的百分比(DA%),评估心肌梗死面积占左心室心肌横断面面积的百分比,BMSCs分化的心肌细胞数量及是否出现α-肌动蛋白。结果超声+微泡+冠状动脉移植BMSCs和单纯冠状动脉移植BMSCs均可缩小心肌梗死面积和灌注缺损面积、改善心功能和室壁运动异常指数(WMSI)、促进BMSCs在心肌内存活,但前者效果更显著;两者均可表达α-肌动蛋白,但前者α-肌动蛋白染色阳性的细胞数多于后者。结论诊断超声介导微泡破坏联合冠状动脉内移植可以促进BMSCs归巢梗死心肌,使更多的BMSCs抵达梗死区域分化为有功能的心肌细胞,从而降低心肌梗死面积并改善心脏功能。     

HMGB1预处理骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死大鼠的实验研究

目的:研究高迁移率族蛋白-1(1HMGB1)预处理的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗大鼠心肌梗死的有效性及其机制。方法:建立急性心肌梗死(AMI)大鼠模型,体外传代培养大鼠BMSCs,以25.0μg/L HMGB1预处理细胞后48h移植到大鼠心脏梗死区域。实验分为假手术组、模型对照组、BMSCs组、HMGB1+BMSCs组。心电图检测确定心肌梗死模型的建立。细胞移植28d后进行以下检测:HE、Masson染色检测梗死心脏形态学变化;TTC染色测定心肌梗死面积;超声心动图测定心脏功能;免疫组织化学染色检测心肌梗死交界区血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)的表达;Western-blot检测梗死心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:心电图结果表明大鼠心肌梗死模型成功建立。与模型对照组相比,细胞移植组能有效减轻大鼠心肌纤维化程度及梗死面积,以HMGB1+BMSCs组更为明显(P0.05)。单纯BMSCs以及HMGB1预处理BMSCs移植均能增加心肌梗死区CD31、VEGF的表达,有效改善梗死心脏功能,HMGB1预处理作用更显著(P0.05)。结论:HMGB1预处理BMSCs较单纯的BMSCs移植更能有效减轻心肌梗死程度,改善心脏功能,并且该效应可能与HMGB1促进BMSCs的旁分泌有关。     

经静脉途径移植骨髓间充质干细胞修复梗死心肌的可行性与安全性研究

目的探讨经静脉注射移植同种异体骨髓来源间充质干细胞(MSC)修复损伤心肌是否可行和安全,观察移植MSC在宿主的归巢与组织学分布。方法雄性Wistar大鼠30只,分为正常大鼠MSC移植组,急性心肌梗死MSC移植组,假手术组,每组10只。结扎冠状动脉左前降支,建立大鼠急性心肌梗死模型。体外分离纯化、扩增同种大鼠骨髓MSC,于建立心肌梗死模型24h给各组大鼠经静脉输注4’6’二乙酰基2苯基吲哚(DAPI)标记的MSC,4周后处死、摘取心脏等脏器,行组织病理切片和免疫组织化学染色。结果(1)在急性心肌梗死MSC移植组,梗死区及其周边部位可见到DAPI标记的MSC;(2)在梗死心肌周边区,移植的MSC胞浆心肌特异性蛋白肌钙蛋白I和转录因子4免疫组织化学染色阳性;(3)在各组大鼠其他脏器,移植的MSC主要分布在肺脏、脾脏和肝脏;(4)细胞移植大鼠心肌组织切片未见淋巴细胞增殖,各脏器没有肿瘤形成。结论经静脉移植的MSC可归巢至大鼠梗死心肌部位,并分化为心肌细胞表型,该方法治疗缺血性心脏病安全、可行。     

成熟心耳肌细胞自体移植的实验研究

目的将急性分离的成年兔自体左心耳心肌细胞移植到自体梗死区心肌后,研究其存活情况,以及对心律的影响。方法结扎成年兔的冠状动脉前降支,建立心肌梗死模型,4周后获取自体左心耳组织,急性消化分离为单细胞,经DAPI标记后,分别将细胞悬液和培养基注射到移植组和对照组梗死区内。4周后行心电图检查并取移植区组织进行组织学观察。结果4周后移植组与对照组兔全部存活。心电图检查,移植组心率略高于对照组（P<0.05）,未见异位心律。心肌组织切片见对照组梗死区内为典型心肌梗死后改变,移植组梗死区内有“细胞岛”形成,荧光检测证明移植的心耳肌细胞在移植区存活。结论急性分离的自体左心耳心肌细胞移植到梗死区心肌内可以存活,并不产生异位心律。     

人受体活性修饰蛋白1基因修饰间充质干细胞对兔心肌梗死后心室重构的作用

目的探讨腺病毒介导人受体活性修饰蛋白1(hRAMP1)基因转染间充质干细胞(MSC)移植对心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能机制。方法建立心肌梗死再灌注兔模型,随机分为hRAMP1组(高表达hRAMP1基因的MSC移植,n=10)、MSC组(无基因修饰的单纯MSC移植,n=10)和对照组(生理盐水注射,n=10)。Western blot检测心肌梗死后1、3、7和28d心肌梗死局部基质金属蛋白酶9(MMP-9)和hRAMP1蛋白表达水平;同时行2,3,5三苯基氯化四氮唑染色检测心肌梗死面积,心肌组织Masson染色评价心肌梗死后胶原沉积和纤维化程度;超声心动图评价28d时左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(FS)。结果细胞移植后,与对照和MSC组相比,hRAMP1组的LVEF[(57.2±6.3)%比(36.2±2.2)%、(45.3±5.4)%]和FS[(29.2±2.4)%比(13.5±1.4)%、(19.4±2.4)%]均升高(均P<0.05),而LVESD[(7.9±0.8)比(12.7±0.9)、(10.4±0.9)mm]和LVEDD[(12.7±1.2)比(17.3±2.4)、(16.3±1.1)mm]、心肌梗死面积、胶原容积分数均明显降低,胶原沉积减少。免疫印迹结果显示,hRAMP1组MMP-9蛋白表达较对照、MSC组明显增高。结论 hRAMP1移植通过促进梗死区心肌组织MMP-9表达,降低梗死区胶原沉积,抑制心肌纤维化,进而改善心室重构,提高心功能。     

CM-DiI标记在小鼠骨骼肌卫星细胞移植治疗心肌梗死中的示踪研究

目的探讨 CM-DiI 标记小鼠骨骼肌卫星细胞后移植治疗心肌梗死的体外体内示踪作用。方法 CM-DiI 标记提纯后小鼠骨骼肌卫星细胞,检测标记率及荧光情况,观察 CM-DiI 对细胞增殖分化的影响。小鼠心梗模型心肌内注射标记后的卫星细胞,于移植后 1、3、7、14、21、28 天取出心脏行冰冻切片,观察移植细胞在体存活分化情况。结果 CM-DiI 标记骨骼肌卫星细胞效率达 (93.3±0.95)%,3 代后仍保持红色荧光,对细胞增殖及分化无明显影响。标记细胞移植 1 天后即可见细胞团聚,3 天后细胞排列整齐,4 周后仍可见移植细胞。结论 CM-DiI 细胞标记液标记骨骼肌卫星细胞,安全简单,并可示踪移植后细胞的存活分化情况。