肥大细胞在大鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用

目的观察肥大细胞及大鼠肥大细胞蛋白酶1(RMCP1)在大鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用。方法结扎大鼠冠状动脉制成急性心肌梗死模型,随机分成心肌梗死组和曲尼司特组(400mg·kg-1·d-1),共28d。另设假手术组为对照组。于第4周末,用甲苯胺蓝染色检测心肌组织中肥大细胞数量,用RTPCR检测RMCP1基因的表达,用氯胺T法测定心肌羟脯氨酸含量。结果心肌梗死组心肌组织中肥大细胞数量〔(71±26)个/mm2〕、RMCP1基因表达〔RMCP1/甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)079±019〕和心肌羟脯氨酸含量〔(5687±1356)μg/g心肌〕均较假手术组〔(29±21)个/mm2,043±012,(3385±883)μg/g心肌〕明显升高(均为P<001)。在曲尼司特组RMCP1基因的表达(058±014)和心肌羟脯氨酸含量〔(4429±873)μg/g心肌〕均较心肌梗死组明显降低(均为P<005),肥大细胞数量〔(51±24)个/mm2〕虽较心肌梗死组降低,但差异无显著性(P>005)。与假手术组比较各项指标明显升高(均为P<005)。结论肥大细胞及RMCP1在大鼠心肌梗死后心肌纤维化过程中起一定作用。     

微小RNA-370在心肌梗死后纤维化中的作用

目的:本实验研究了心肌梗死后梗死交界部位微核糖核酸-370(miR-370)的表达情况以及其在梗死后纤维化过程中的作用。方法:建立SD大鼠心肌梗死模型,2w后RT-PCR法、Western blotting法检测心肌梗死交界区TGFβ1、TGFβRⅡ、ColⅠα1、ColⅢα1 mRNA和miR-370的表达情况以及TGFβ1、TGFβRⅡ、α-SMA蛋白的表达。分离、培养SD大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,AngⅡ、miR-370干预细胞后检测上述指标的变化。荧光素酶报告实验验证TGFβRⅡ是否为miR-370的靶基因。结果:心肌梗死后梗死交界区miR-370的表达下降而TGFβ1、TGFβRⅡ、ColⅠα1、ColⅢα1 mRNA表达以及TGFβ1、TGFβRⅡ、α-SMA蛋白的表达均增加。荧光素酶报告实验证实TGFβRⅡ是miR-370的靶基因。miR-370能够通过降低TGFβRⅡ的表达,抑制AngⅡ导致的TGFβRⅡ以及胶原蛋白表达升高以及肌成纤维细胞的分化效应但是并不能抑制TGFβ1表达。结论:miR-370能够通过与TGFβRⅡmRNA结合,抑制TGFβRⅡ蛋白的表达部分阻断了TGFβ1-TGFβRⅡ及下游信号转导通路发挥抗纤维化效应。     

血浆microRNA-590水平与急性心肌梗死后室性心律失常的关系

目的 探讨血浆microRNA-590(miR-590)水平与急性心肌梗死(AMI)患者发生室性心律失常的关系.方法 连续选取2018年8月至2019年12月在安徽省第二人民医院心内科住院治疗的AMI患者240例,根据是否发生室性心律失常分为室性心律失常组(146例)和无室性心律失常组(94例),收集患者临床资料,运用...     

microRNA-133a在心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞中的表达及抗凋亡作用

目的　观察microRNA-133a（miR-133a）在心肌梗死后心衰大鼠心肌细胞中的表达及对细胞凋亡的影响。方法　SD大鼠随机分为四组：①假手术组：仅开胸不结扎冠状动脉;②心肌梗死组：结扎冠状动脉前降支;③rAAV9组：先冠状动脉转染空白病毒rAAV9后再结扎冠状动脉前降支;④miR-133a组：先冠状动脉转染rAAV9-ZsGreen-pre-miR-133a后再结扎冠状动脉前降支。饲养8周后,real-time　PCR检测大鼠心肌miR-133a、Transgelin-2（TAGLN2）、Caspase-9、Bcl-2　mRNA水平,免疫组织化学和Western　blot检测TAGLN2、Caspase-9、Bcl-2蛋白水平。结果　心肌梗死后心衰大鼠心肌组织中miR-133a的表达较假手术组相比显著下降（2.963±0.461比12.518±2.21）,TAGLN2和Caspase-9的mRNA及蛋白表达升高,Bcl-2　mRNA和蛋白表达水平降低。冠状动脉注射rAAV9-ZsGreen-pre-miR-133a使大鼠心肌miR-133a表达明显上调,TAGLN2和Caspase-9的mRNA及蛋白表达减少,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平增加。结论　心肌梗死后心衰大鼠心肌miR-133a表达下调,可能使其对促凋亡基因TAGLN2和Caspase-9的降解和抑制作用减弱,从而促进心肌凋亡的发生;过表达miR-133a可能减少心肌梗死后的心肌凋亡。     

microRNA-503在糖尿病大鼠心肌梗死后血管新生过程中的变化

目的通过比较自发糖尿病GK大鼠与Wistar大鼠急性心肌梗死后,梗死边缘区心肌组织内血管新生水平、microRNA-503(miR-503)及其靶基因水平的变化,探讨miR-503在糖尿病心肌缺血后血管新生中的调控作用。方法选取GK大鼠、Wistar大鼠各30只,结扎左前降支近段建立急性心肌梗死模型,分别于术前及术后3天、7天、14天、28天处死动物,留取血浆及心脏组织。免疫组织化学染色法检测梗死边缘区心肌Ⅷ因子表达计数微血管数;qRT-PCR检测组织中miR-503水平;Western blot检测梗死边缘区细胞周期素E1和细胞分裂周期蛋白25A表达水平。结果在缺血后各时间点,GK大鼠组心肌梗死边缘区微血管数量均少于Wistar大鼠组(P0.05),而心肌组织内的miR-503水平均高于Wistar大鼠组(P0.05),细胞分裂周期蛋白25A表达水平均低于Wistar大鼠组(P0.05)。GK大鼠组心肌组织细胞周期素E1蛋白表达水平仅在术后14天及28天时低于Wistar大鼠组(P0.05)。结论糖尿病可引起心肌缺血组织边缘区miR-503异常升高;升高的miR-503可能通过抑制细胞分裂周期蛋白25A的表达,参与调控糖尿病心肌梗死边缘区组织内血管新生能力的下降。     

microRNA-21在肝脏中的作用

microRNAs(miRNAs)是一类新发现的小RNAs,因其能调控细胞活动的每个方面,包括分化、生长、代谢、增殖、凋亡和病毒感染、肿瘤生成,已经成为目前研究的热点.最近已有明确的证据表明,miRNAs在肝脏含量丰富并且参与肝脏生理和病理的各个过程.microRNA-21是目前研究最多的miRNAs之一,参与多种肿瘤的发生和一些病理生理改变,但其在肝脏中的研究比较少.本文就mi-croRNA-21在肝再生、肝细胞代谢、肝脏免疫反应及其在肝癌、丙型肝炎等肝病中的作用作一综述.     

microRNA-375在肝纤维化中的作用及其调控信号通路的研究

目的通过提高肝星状细胞(HSC)中微小核糖核酸(microRNA-375,miR-375)的表达水平,探讨miR-375在肝纤维化进程中的作用及其靶向信号通路。方法通过瞬时转染将miR-375mimic或者miR-375 mimic negative control(NC)转染到大鼠肝星状细胞(HSC-T6),将细胞分为mimic组、NC组和空白对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中蛋白激酶B(Akt)基因、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)基因表达水平的变化。分别用细胞流式技术、细胞计数实验(CCK-8)试剂盒和细胞迁移实验检测过表达的miR-375对HSC-T6的细胞周期、增殖和迁移能力的影响。结果与其他两组相比,mimic组细胞中Akt、PDK1含量明显下降(P0.05),细胞停滞在G0/G1期的比例升高(P0.05)、增殖受到抑制(P0.05),细胞迁移的差异无统计学意义(P0.05)。结论miR-375可抑制HSC的增殖,负性调控肝纤维化进程。     

microRNA-335在慢性肝病中的作用

近年来,microRNA(miRNA)在肝脏病理过程中的调控作用备受关注。在病毒性及脂肪性肝炎中,miRNA-335通过Y盒上的性别决定区(SOX)4转录因子调控肝炎进展;在进展性肝纤维化及肝癌发生发展过程中,miRNA-335通过缺氧诱导因子1α、磷酸酶和紧张素同系物、靶向Rho蛋白激酶1、纤溶酶原激活物抑制剂1、碱性螺旋-环-螺旋转录因子家族1及间质-上皮细胞转化因子等靶基因调控肝脏中胶原的产生、沉积和降解,从而调控肝星状细胞或肝癌细胞的迁移和侵袭等生物学行为。主要归纳了近几年报道的miRNA-335在肝炎、肝纤维化和肝癌中作用的研究进展,同时,结合现有研究,提出miRNA-335/巯基氧化酶1调控轴可能通过抑制肝星状细胞活化介导青蒿琥酯抗血吸虫性肝纤维化的猜想,以期为抗肝纤维化及其他肝病治疗提供新思路。     

MiR-21-3p在心肌梗死后心肌纤维化中的作用与机制研究

目的 研究miR-21-3p在心肌梗死后心肌纤维化重塑中的作用与机制。方法 选取40只C57雄性小鼠,随机分为正常组、假手术组、心肌梗死+病毒对照组、心肌梗死+miR-21-3p抑制组各10只。利用miR-21-3p mimics转染心肌成纤维细胞,转染48 h以后,利用实时定量PCR及免疫荧光的方法检测mi R-21-3p对心肌成纤维细胞分化以及胶原合成的影响;手术完成4周后行小动物心脏超声、Masson染色以及定量PCR检测各组实验小鼠心功能状态及心肌纤维化程度。利用双荧光素酶实验以及蛋白电泳实验,明确miR-21-3p与磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）的调控关系。结果 miR-21-3p在心梗组织中显著上调,miR-21-3p表达上调可以显著促进心肌成纤维细胞的增殖、迁移以及分化功能;相较于心肌梗死+病毒对照组,心肌梗死+miR-21-3p抑制组小鼠的左心室射血分数显著改善[（36.12±6.54）%比（18.72±4.23）%,P<0.05],左心室舒张末容积内径显著减少[（3.54±2.13）mm比（5.67±1.42）mm,P<0.05],同时伴有心肌纤维化面...     

高表达microRNA-22改善小鼠心肌梗死后心功能

目的观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用及机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,用携带microRNA-22的腺病毒载体转染至心肌梗死周围区域,观察高表达microRNA-22对小鼠心肌梗死后心功能的保护作用。采用超声心动图检测心功能,力竭游泳检测运动能力,HE及Masson染色检测心肌微结构及纤维化,Western blot检测PTEN蛋白表达情况。结果高表达microRNA-22组小鼠左心室射血分数(LVEF)(49.38%±2.51%比42.29%±2.74%,P0.05)及短轴缩短率(FS)(24.24%±0.64%比22.59%±0.73%,P0.05)较空载腺病毒组升高,心脏收缩功能维持较好;高表达microRNA-22组力竭运动时间较空载腺病毒组延长(8.13±1.01min比7.02±1.32 min,P0.05),小鼠整体运动能力改善;高表达microRNA-22组小鼠HE染色示心肌结构维持较好,Masson染色示心肌纤维化程度较轻;高表达microRNA-22组心肌梗死周围区域内microRNA-22表达增加(6.66±2.01比1.22±0.07,P0.05),PTEN蛋白表达下降(0.63±0.19比2.23±0.44,P0.05)。结论小鼠心肌梗死后在体高表达microRNA-22改善心脏收缩功能及运动能力,改善心肌微结构,减轻心肌纤维化。     

microRNA-15a在阿尔茨海默病中的作用及机制

目的探讨microRNA(miR)-15a在阿尔茨海默病(AD)中的作用及机制。方法 Realtime PCR法检测miR-15a在AD组及正常健康(对照组)血液中的表达。将PC12细胞随机分为正常对照组、模型组[20μmol/L淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))],阴性对照组(miR-15a NC+20μmol/L Aβ_(25-35))及促进组(miR-15a mimics+20μmol/L Aβ_(25-35))。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,紫外分光光度法检测天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、Caspase9活性,Western印迹检测B淋巴细胞瘤(Bcl)-2及c-myc蛋白表达。结果与对照组比较,AD组miR-15a表达量显著下调;与正常对照组比较,模型组及阴性对照组中细胞活力降低,细胞凋亡率、Caspase3及Caspase9活性提高,Bcl-2及c-myc表达量下调(均P0.01);与模型组及阴性对照组比较,促进组细胞活力提高,细胞凋亡率、Caspase3及Caspase9活性降低,Bcl-2及c-myc表达量上调(均P0.01)。结论 miR-15a在AD患者中低表达,上调miR-15a表达能抵抗Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡。     

细胞因子在肝纤维化中的作用

细胞因子在肝纤维化中的作用刘海林，杨少平，李定国，陆汉明近年来，细胞因子在肝纤维化中的作用引起了广泛重视。大量的深入研究，特别是分子生物学技术的应用，使人们对细胞因子在胶原和基质代谢中的调控作用达到了分子水平，并为临床治疗肝纤维化提供了新的可能途径。...     

microRNA在肝纤维化中的作用

肝纤维化是肝脏慢性损伤的结果。大多数慢性肝病共有的特征是细胞外基质蛋白的沉积和纤维形成,这些共同特征由复杂的信号通路网络控制。肝星形细胞和Kupffer细胞等炎症细胞参与了慢性肝脏疾病的发展。严重的肝纤维化导致肝硬化、肝功能丧失以及门静脉高压,最终必须进行肝移植才能治疗。microRNAs（miRNAs,miR）作为一类细胞内分子,被证实在肝脏纤维化发生发展过程中起着重要的调控作用,本文就miRNAs与肝脏纤维化发生发展的关系以及几种常见慢性肝脏疾病潜在的治疗新策略进行综述。     

细胞死亡在肝纤维化中的作用

肝纤维化发展可变性的原因以及寻求将肝纤维化程度最小化的策略在全球引起了广泛关注,并直接导致了一个问题的产生:肝纤维化的起始和调节事件是什么?现就细胞死亡在肝纤维化中的作用作一综述.     

PTEN在纤维化疾病中的作用

第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）作为肿瘤抑制基因，可以负性调节肿瘤细胞的生长。目前发现PTEN在纤维化疾病中也有重要的作用和意义，但其与肝纤维化的关系尚不明确，对PTEN在各器官纤维化中的作用这一问题的深入研究可能为纤维化疾病的治疗提供新的思路。本文就近年来PTEN在纤维化疾病中的作用和意义作一综述。     

炎症在肝纤维化中的作用

慢性肝损伤引起的炎症反应是肝纤维化发生发展的主要病理因素。在肝纤维化发展的过程中,大量炎症信号被激活,促使肝星状细胞向肌成纤维细胞转化,最终导致肝脏中细胞外基质的大量分泌和沉积,形成瘢痕组织。本文综述了肝星状细胞、Kupffer细胞、炎症小体、炎症信号通路等在肝纤维化过程中的作用,以对临床诊断和治疗提供参考。     

阿托伐他汀对大鼠心肌梗死后心肌纤维化的干预作用

目的通过研究阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后periostin蛋白及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达水平的影响,探讨阿托伐他汀对于AMI后心肌纤维化的干预作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为正常组(Sham)、单纯心肌梗死组(MI)和心肌梗死联合阿托伐他汀组(Ato);注射异丙肾上腺素造心肌梗死模型,Ato组于心肌梗死造模成功后给予阿托伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,MI组及Sham组以同等剂量生理盐水灌胃;各组分别于术后8周取材,病理技术:Masson染色观察并计算心肌纤维化中胶原纤维的容积分数(CVF);利用RT-PCR技术检测心肌periostin蛋白及TGF-β1 mRNA的表达水平。结果 Masson染色提示MI组及Ato组CVF均显著高于Sham组(P0.01);而Ato组CVF明显低于MI组(P0.05);RT-PCR结果MI组和Ato组较Sham组的TGF-β1 mRNA及periostin蛋白表达量均显著增加(P0.01);Ato组比MI组TGF-β1 mRNA及periostin蛋白的表达量显著下降(P0.05)。结论阿托伐他汀能够抑制periostin蛋白和TGF-β1 mRNA的表达,其机制可能为抑制TGF-β1/periostin信号传导通路,进而抑制心肌纤维化,并保护心脏功能。     

miR-148b参与心肌梗死后心脏纤维化的作用及机制

目的 探讨miR-148b参与大鼠心肌梗死后心脏纤维化的作用及可能机制。方法 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支方法制作大鼠心肌梗死模型,RT-PCR法评价大鼠心脏miR-148b表达水平;应用生物信息学方法预测miR-148b靶基因;采用Western blot方法评价大鼠心脏同源性磷酸酶-张力蛋白（phosphatase and tensin homologue,PTEN）及α-平滑肌蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法检测心脏成纤维细胞增殖能力;应用天狼猩红染色评价心脏纤维化病理改变。结果 大鼠心肌梗死组,梗死周边区纤维化程度显著增加,miR-148b表达显著上调（P<0.01）;miR-148b与预测靶基因PTEN mRNA有结合位点;大鼠心肌梗死组,梗死周边区PTEN表达显著下调（P<0.01）;在心脏成纤维细胞中过表达miR-148b,PTEN的蛋白表达水平显著下调（P<0.01）,α-SMA蛋白表达水平显著上调（P<0.01）,细胞增殖能力显著增强（P<0.05）;在AngII诱导心肌纤维化细胞模型中,抑制miR-148b,PTEN蛋白表达水平显著上调（P<0.05）,α-SMA蛋白表达水平显著下调（P<0.01）,心脏成纤维细胞增殖显著减少（P<0.01）。结论 miR-148b通过PTEN参与心肌梗死后心脏纤维化作用。