骨髓增殖性肿瘤:从JAK2V617F突变到JAK抑制剂

<正>2005年在BCR-ABL(-)骨髓增殖性肿瘤(MPN)中发现JAK2V617F突变,使其从过去的近半个世纪几乎是一个被血液学界遗忘的角落重新回归研究视野〔1-3〕。2011年11月FDA批准第1个JAK抑制剂芦可替尼(ruxolitinib)用于IPSS中危-2和高危组原发性骨髓纤维化(PMF)患者的治疗。2013年12月2个研究组同时报道在无JAK2和MPL突变[JAK2/MPL(-)]的原发性血小板增多症(ET)和PMF患者中发现CALR基因     

JAK2V617F基因突变与骨髓增殖性肿瘤关系

长期以来,除慢性髓系白血病的发病与BCR-ABL融合基因有关外,其他骨髓增殖性肿瘤(MPNs)的发病机制仍不清楚,近年来大量研究证实,在多种MPNs中存在较高的JAK2基因突变率,并认为该突变可能是BCR-ABL阴性MPNs所特有的分子标志.该文就近年来对JAK2基因突变、MPNs的最新诊断和靶向治疗等方面的研究进展进行综述.     

JAK2V617F突变背景下骨髓增殖性肿瘤临床表型异质性的研究进展

［摘要］　费城染色体阴性骨髓增殖性肿瘤(MPNs)是一组以造血干细胞克隆性增殖为主要特征的慢性血液肿瘤。JAK2V617F突变常见于MPNs,是诊断标准之一,其通过突变频率影响MPNs表型异质性。此外,信号通路、表观遗传学修饰、免疫异常、生活方式和其他一些因素也参与JAK2V617F相关的MPNs的异质性。该文对JAK2V617F影响MPNs表型的研究进展作一综述。     

骨髓增殖性肿瘤128例JAK2V617F基因突变与血栓栓塞关系研究

目的研究骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者JAK2V617F突变与发生血栓栓塞的关系。方法回顾性分析2008年2月至2011年7月新疆地区128例不同民族MPN患者临床特征、实验室检查、JAK2V617F基因突变及血栓栓塞事件发生情况等资料。结果 MPN患者中93例(72.6%)存在JAK2V617F突变,66例(51.6%)发生血栓事件,其中突变阳性93例患者中58例有血栓形成,35例突变阴性患者中8例有血栓形成,突变阳性组与阴性组血栓发生率比较差异有统计学意义(χ2=15.893,P<0.05)。76例汉族MPN中58例为突变阳性,42例发生血栓,52例少数民族中35例突变阳性,24例发生血栓,汉族与少数民族患者JAK2基因突变总阳性率及血栓发生率比较均无统计学意义(χ2=1.261,1.026,P>0.05)。结论真性红细胞增多症、原发性血小板增多症及特发性骨髓纤维化等经典MPN患者中均有较高的JAK2V617F基因突变率,并突变阳性者血栓发生率明显高于阴性者;新疆地区汉族与维、哈、回等少数民族MPN患者JAK2V617F基因突变阳性率及血栓形成率之间差异无统计学意义。该突变阳性、年龄≥60岁、WBC≥15×109/L、合并有血管危险因素的患者血栓发生风险可能会高,应尽早予以干预治疗。     

JAK2V617F基因突变阳性骨髓增殖性肿瘤相关门静脉海绵样变性1例

<正>骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN)导致血细胞增加、血液高凝,是非肝硬化门静脉海绵样变性的重要病因。JAK2V617F基因突变可以帮助诊断MPN。我们报道1例JAK2V617F基因突变阳性的MPN患者发生门静脉海绵样变性(cavernous transformation of the portal vein,CTPV)。该例患者脾脏显著肿大,一方面是由于骨髓增殖性疾病本身的原因,另一方面是由于PVCT、门脉高压和脾脏淤血造成,表现为外周血血细胞计数基本在正常范围,亦是血细胞增殖和脾脏对血细胞的处理增加的共同作用的结果。抗凝治疗效果差,而应以预防食管曲张静脉破裂出血(EVB)为主。     

慢性骨髓增殖性疾病131例JAK2V617F突变的定量分析及临床意义

目的 研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)中的发生率、突变类型、转录本水平及其临床意义.方法 采用突变特异性扩增系统(ARMS)-PCR方法 检测JAK2V617F的发生率及其突变类型;毛细管电泳方法 定量分析JAK2V617突变转录本水平.结果 纯合型JAK2V617F突变特发性血小板增多症(ET)患者和杂合型JAK2v617F突变ET患者其发病年龄均较野生型患者为高(P<0.05);CMPD患者发病年龄与JAK2V617F突变的发生问存在相关性(P<0.05),≥60岁患者的JAK2V617F突变转录本水平高于<60岁患者(P<0.05);JAK2V617F突变型CMPD患者中真性红细胞增多症(PV)和ET患者白细胞和血红蛋白水平均高于野生型患者(P<0.05),ET患者中纯合型突变者白细胞水平高于杂合型突变者(P<0.05);JAK2V617F突变在PV中的发生率和JAK2V617F纯合型突变在PV中的发生率均高于ET患者(P<0.05);JAK2V617F转录本水平均值在PV、ET和慢性特发性骨髓纤维化患者中无差别.结论 ARMS-PCR结合毛细管电泳定性和定量分析JAK2V617F突变可用于CMPD的诊断和预后判定.     

吉林地区深静脉血栓患者JAK2V617F突变

目的 探讨吉林地区深静脉血栓患者JAK2V617F突变情况.方法 应用等位基因特异性PCR检测50例深静脉血栓患者外周血基因组DNA中是否存在JAK2V617F突变.结果 50例深静脉血栓患者中均未检出JAK2V617F突变.结论 JAK2V617F突变在吉林地区深静脉血栓患者中不存在或发生率很低,可能不是引起吉林地区深静脉血栓疾病的原因.     

JAK2V617F点突变在BCR-ABL阴性骨髓增殖性疾病中的意义

目的研究JAK2V617F点突变在诊断BCR—ABL融合基因阴性的骨髓增殖性疾病（MPD）患者中的意义。方法选择51例BCR—ABL阴性MPD患者,采用等位基因特异PCR法检测各组患者JAK2V617F的突变情况。结果51例BCR—ABL融合基因阴性的MPD患者中,34例JAK2V617F突变阳性,其中原发性血小板增多症（ET）18例（69．23％）,真性红细胞增多症（PV）16例（66．67％）,特发性骨髓纤维化（IMF）1例为阴性;PV与ET患者相比更容易发生肝脾肿大、脑梗死、静脉血栓形成、高尿酸血症等并发症（P〈0．05）。ET患者中,JAK2V617F突变阳性组白细胞计数较阴性组高（P〈0．05）。ET患者中,JAK2V617F突变阳性组白细胞计数较阴性组高（P〈0．05）,ET和PV患者中JAK2V617F突变阳性组都比阴性组更容易发生上述并发症等（P均〈0．05）。结论JAK2V617F点突变在BCR—ABL融合基因阴性MPD中有较高的发生率,具有明确的诊断学意义;ET及PV患者中此突变阳性者更易发生血栓形成等并发症。     

特发性骨髓纤维化患者JAK2V617F和MPLW515L点突变及JAK2外显子12突变的研究

特发性骨髓纤维化(IMF)为慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)的一种,缺乏特异性诊治.现在研究表明近一半的IMF患者存在JAK2V617F点突变,另外,MPLW515突变及JAK2外显子12突变的发现提示MPD除了JAK2V617F点突变以外存在其他的发病机制[1].本研究应用等位基因特异性-聚合酶链反应(AS-PCR)及基因测序检测30例IMF患者的JAK2V617F、MPLW515L点突变及JAK2外显子12突变,了解其在IMF患者中的发生情况.     

原发性血小板增多症JAK2V617F点突变研究

2005年3月起多个研究组报道在原发性血小板增多症（ET）等bcr／abl阴性慢性骨髓增殖性疾病（CMPD）中存在JAK2基因点突变即JAK2V617F，为该病的发病机制、诊治带来了革命性进展。由于检测方法不同，检测到ET中该突变发生率为23％～57％。我们收集了45例ET患者的外周或骨髓血DNA，来探讨JAK2V617F阳性率及临床意义。     

MPN患者JAK2基因V617F点突变的检测及意义

目的探讨JAK2基因V617F点突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生情况及其意义。方法本组受检者共100例。MPN患者82例,其中真性红细胞增多症（PV）20例,有红细胞增多但未能诊断为PV者10例,原发性血小板增多症（ET）14例,有血小板增多但未能诊断为ET者13例,原发性骨髓纤维化（PMF）9例,慢性髓性白血病（CML）2例,其他MPN 6例,其他不明原因白细胞升高患者8例;另有急性白血病（AML）1例,骨髓增生异常综合征（MDS）10例、腔隙性梗死3例,慢性肾炎1例,大B细胞性淋巴瘤1例,异体胎肝移植患者1例,正常体检者1例。提取100例受检者外周血液及骨髓样本中有核细胞DNA,采用直接测序法进行JAK2第12、14外显子突变热点的检测。结果 100例样本中,有52例检测了第12、14两个外显子,48例仅检测第14外显子。未发现第12外显子突变。V617F及其他突变总检出率为38%（38/100）。PV、ET、PMF、CML、其他MPN、其他不明原因白细胞升高患者中均检测到不同比例的JAK2基因V617F点突变;而18例非MPN患者样本中均未发现V617F点突变,两组相比,P〈0.01。结论 JAK2基因突变在MPN的发生率高于其他血液疾病,可作为诊断MPN的一项重要参考指标。     

慢性骨髓增殖性疾病JAK2 V617F点突变与ETS2mRNA表达的关系

目的探讨慢性骨髓增殖性疾病（cMPDS）中JAK2V617F点突变的发生率、ETS2mRNA表达情况及其相关性。方法选择BCR／ABL阴性的cMPDs患者62例、慢性粒细胞性白血病（CML）20例、急性白血病（AL）10例和健康志愿者15例为研究对象;用RT—PCR技术检测其ETS2mRNA的表达水平,用AS-PCR筛选各组JAK2V617F点突变,以基因测序验证突变结果,分析ETS2mRNA表达水平在cMPDsJAK2V617F点突变阳性组与阴性组之间的差异。结果62例cMPDs患者中,44例患者检测到JAK2V617F点突变,其余18例及CML、AL、健康志愿者中未检测到该突变。ETS2mRNA表达水平在cMPDs组、CML组和AL组均显著高于健康志愿者。cMPDs组JAK2V617F点突变阳性病例ETS2mRNA表达水平明显高于突变阴性病例,差别有统计学意义（P=0．022）。结论大部分cMPDs患者存在JAK2V617F点突变;JAK2V617F点突变阳性cMPDs患者ETS2mRNA的表达水平高于阴性者。     

真性红细胞增多症患者JAK2V617F突变的临床意义

目的 探讨真性红细胞增多症(PV)患者JAK2V617F突变的临床意义.方法 用等位基因特异性PCR法检测26例PV、10例继发性红细胞增多症(SE)、5例Ph+慢性粒细胞白血病(CML)患者,以及5例健康志愿者的JAK2V617F突变,并经DNA测序验证.用PCR-限制性片段长度多态性分析检测JAK2V617F突变状态,分析突变状态与PV临床及实验室特征的关系.结果 PV患者92.3%(24例)出现JAK2V617F 突变,其中纯合子突变7例,杂合子突变17例;纯合子突变者初诊时Hb及乳酸脱氢酶高于杂合子者(P＜0.05).SE、Ph+CML患者及健康志愿者均未检出JAK2V617F突变.结论 JAK2V617F 突变可能成为PV的分子学诊断标准.     

141例慢性骨髓增生性疾病中JAK2基因V617F点突变的研究

目的：研究分子遗传学标记JAK2V617F突变在141例慢性骨髓增殖性疾病（cMPD）患者中发生率、突变类型及其与血液学特征的相关性。方法：应用等位基因特异性PCR（AS-PCR）技术进行JAK2V617F点突变的检测,采用PCR-限制性片断长度多态性（RFLP）方法检测JAK2V617F（＋）者的突变类型,然后DNA测序验证。结合临床资料进一步分析。结果：经AS-PCR发现141例cMPD中有73例为JAK2V617F突变阳性样本,其中21例BCR-ABL阳性的CML中未发现突变样本。JAK2V617F（＋）的病例中19例为纯和型突变,54例为杂和型突变。经酶切及测序验证结果相符。结合临床资料进行分析,JAK2V617F突变阳性患者外周血细胞分析中白细胞数和血红蛋白的量较野生型高,而血小板计数较野生型差异无统计学意义。JAK2V617F纯和型突变患者外周血细胞计数中血红蛋白的量较杂合型高,而血小板计数较杂合型低,白细胞计数差异无统计学意义。结论：JAK2V617F点突变可以作为BCR—ABL阴性的MPD诊断的一个参考依据。在突变类型中纯和型突变较为少见。突变类型对血液学特征有一定的影响。     

JAK2 V617F阴性真性红细胞增多症患者JAK2 exon 12的突变研究

真性红细胞增多症(PV)是源于造血干细胞的克隆性骨髓增殖性疾病.2008年WHO正式将JAK2 V617F突变纳入了PV的诊断标准[1].但是临床上仍然有部分PV患者JAK2 V617F呈阴性,2007年Scott等[2]首次报道在这些病例中存在JAK2 exon 12突变,而目前国内尚无此方面的报道.为此我们对在山西医科大学第二医院就诊的JAK2 V617F阴性的PV患者进行JAK2 exon 12突变检测.     

JAK2 V617F基因突变与脑梗死的相关性

<正>脑梗死占急性脑梗死的20%~30%〔1,2〕。JAK2 V617F基因突变为体细胞获得性单核苷酸突变,是由JAK2基因1 849位鸟嘌呤(G)突变为胸腺嘧啶(T),使JAK2蛋白617位缬氨酸错义编码为苯丙氨酸,导致JH2区的空间结构发生变化,使其对JH1区的抑制作用消失、JAK2激酶的活性增加〔3〕。JAK2V617F基因突变可出现在非典型慢性粒细胞性白血病、慢性粒     

dFARMS检测原发性血小板增多症JAK2基因V617F突变的研究

目的:对bcr/abl融合基因阴性的原发性血小板增多症(ET)患者进行JAK2V617F突变检测和相对定量,探讨敏感性高的检测方法,为临床诊断和预后判断提供依据.方法:用RT-PCR对28例ET患者进行bcr/abl融合基因检测;用双荧光扩增受阻突变系统(double fluorescent amplification refractory mutation system ,dFARMS)检测JAK2基因V617F突变,并对突变拷贝数行相对定量.结果:28例患者bcr/abl融合基因均阴性.dFARMS-PCR后,产物经普通琼脂糖凝胶电泳示JAK2V617F突变检出率为57.1%;产物经毛细管电泳示JAK2V617F突变检出率为67.9%.dFARMS检测的敏感性为0.01%.19例突变阳性患者,10例出现并发症,突变相对定量示高拷贝数,9例阴性患者无并发症出现.结论:dFARMS检测JAK2V617F突变敏感性高,特异性强,可用于临床检测,尤其对突变细胞数少的ET患者;携带有JAK2V617F突变及高突变拷贝数的ET患者,可能易出现并发症.     

JAK2 V617F 突变相关多发性腹腔静脉血栓合并门静脉炎1例

<正> 病例:患者男,68岁,因"门静脉高压2年余,脾切除术后2周余,发热1周"入院。患者40年前曾诊断为慢性乙型肝炎,ALT1000 U/L,中药保肝治疗3年余后肝功能恢复正常,之后未再复查肝炎指标。患者既往有铅接触史1年余,无饮酒史。1年半前,患者体检行B超检查示肝弥漫性病变、脾大,门静脉高压。盆腹部增强CT+血管重建示肝左静脉显示清晰,肝中、肝右静脉显示欠清;门静脉形态变异,左支于近段分为两支,右支近段瘤样扩张,远端纤细。血常规和肝肾功能均正常,HBsAg、HBV-DNA定量和HCV抗体均(-)。因患者无临床症状,故未行进一步诊治。2009年5月16日,患者无明显诱因下出现不完全性肠梗阻,予禁食、禁水、胃肠减压和抗感染治疗后症状缓解。查血常规和肝肾功能均正常,HBsAg、HCV抗体均(-);凝血功能检查示凝血酶原时     

JAK2V617F: better diagnostic tool than marrow?

In patients with Budd-Chiari syndrome and with portal vein thrombosis, Kiladjian et al observed that JAK2V617F positivity is indicative of the diagnosis of an underlying Ph1-negative myeloproliferative disorder, that is, polycythemia vera or essential thrombocytosis.     

JAK2V617F突变分型和相对定量研究——附123例慢性骨髓增殖性疾病检测结果分析

目的 研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)中的发生率和突变类型,并对突变转录本水平进行定量分析.方法 对2003年1月至2008年5月苏州大学附属第一医院就诊的CMPD患者采用突变特异性扩增系统(ARMS)PCR方法检测JAK2V617F的发生率及其突变类型;采用毛细管电泳方法定量分析JAK2V617F突变转录本水平.结果 123例CMPD患者共检出90例JAK2V617F阳性,其中35例真性红细胞增多症(PV)患者中JAK2V617F阳性率100%,85例原发性血小板增多症(ET)患者中JAK2V617F阳性率62.4%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05);3例慢性骨髓纤维化(IMF)患者中JAK2V617F阳性率66.7%.90例JAK2V617F突变患者中共检出纯合突变35例,其中PV患者17例(17/35),占48.6%,ET患者17例(17/85),占20.0%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05),IMF患者1例;毛细管电泳定量分析显示,纯合型突变患者JAK2V617F突变转录本水平较杂合型突变患者低,差异有统计学意义(P<0.05);杂合型PV患者JAK2V617F突变转录本水平高于杂和型ET患者,差异有统计学意义(P<0.05).93例患者进行了染色体检查,6例有核型异常,但未发现特异性染色体改变.结论 ARMS-PCR可作为JAK2V617F突变较准确的检测方法,结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床CMPD的诊断.