骨保护素与糖尿病及其血管并发症

骨保护素（OPG）是肿瘤坏死因子受体超家族成员,是骨代谢的一个重要调节因子。近来研究发现,OPG亦是重要的血管调节因子,能够保护血管内皮细胞,抑制血管钙化。糖尿病微血管及大血管并发症患者血清OPG水平明显升高,血清OPG水平与糖尿病并发症密切相关,OPG在糖尿病并发症的发生、发展中可能起重要的调节作用。确切的机制尚不清楚,可能是一种自我代偿机制,以对抗促动脉硬化、血管钙化及血管损伤的其他因子。     

护骨素信号介导Ghrelin调控A7r5主动脉平滑肌细胞钙化

目的探讨胃促生长素(Ghrelin)与护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)在钙化发生过程中的调控机制。方法首先观察高脂高糖培养基中A7r5(主动脉平滑肌细胞)钙化过程中Ghrelin的变化情况,继之观察外源性Ghrelin干预后高脂高糖钙化培养基中A7r5中OPG、RANKL的表达变化。最后观察Ghrelin与OPG/RANKL在钙化发生过程中的调控机制。各组细胞均于培养14天后进行相关检测(Von Kossa染色、茜素红染色、细胞外钙沉积量测定、免疫组织化学染色、Western blot检测)。结果 Von Kossa染色、茜素红染色及细胞外钙沉积量检测显示,高脂高糖及β-甘油磷酸盐模拟的糖尿病代谢紊乱环境下,A7r5钙沉积量显著增加了5.21倍。Ghrelin免疫组织化学染色及IPP6定量分析显示,随着钙化的形成与发展,Ghrelin表达明显下调。外源性Ghrelin可上调OPG相对表达量6.25倍。相对于高脂高糖钙化组,anti-OPG组钙沉积量增加了1.33倍(P0.05),RANKL组钙沉积量增加了1.59倍(P0.05);相对于antiOPG组,anti-OPG+Ghrelin组钙沉积量下调了41.9%(P0.05);相对于RANKL组,RANKL+Ghrelin组钙沉积量下调了57.8%(P0.05)。结论 OPG/RANKL可介导Ghrelin调控A7r5主动脉平滑肌细胞钙化。     

骨保护素与动脉粥样硬化和血管钙化

骨保护素(OPG)作为肿瘤坏死因子受体超家族成员,不仅是骨代谢的一个重要调节因子,还是重要的血管调节因子,能够保护血管内皮细胞,抑制血管钙化和动脉粥样硬化。冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)及外周动脉硬化疾病血清OPG水平及动脉壁中OPG含量明显升高,OPG在动脉粥样硬化的发生发展中可能起着重要的调节作用。但其确切的机制尚不清楚,可能是一种自我防御代偿机制,以对抗促动脉粥样硬化、血管钙化及血管损伤的其它因子。     

大鼠主动脉钙化过程中骨保护素/NF-κB配体的受体变化及意义

目的:研究大鼠主动脉钙化过程中骨保护素(OPG)/NF-κB配体的受体(RANKL)变化及意义。方法:60只SD大鼠随机分为钙化组、他汀组和对照组,每组再分早、晚期两个亚组。钙化组给予华法林灌胃,他汀组给予华法林和阿托伐他汀灌胃。早期亚组在第17天、晚期亚组在第34天取大鼠主动脉,用Von Kossa染色,以碱性磷酸酶(ALP)活性检测与骨钙素Western Blot检测来判定钙化情况,用实时定量PCR检测OPG和RANKL的表达情况。结果:对照组无论早晚期都有大量的OPG表达,但没有RANKL表达。钙化组和他汀组早期OPG表达上升,晚期下降,而RANKL表达在钙化过程中一直呈升高趋势;对照组、他汀组、钙化组随着钙化程度的加重,OPG/RANKL比值呈逐步下降趋势(均P<0.05);同一组中,晚期亚组随着钙化的加重,OPG/RANKL比值也较早期明显下降(均P<0.05)。结论:OPG/RANKL的比值与主动脉钙化程度呈负相关,且阿托伐他汀具有抑制钙化的作用。     

慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化

目的探讨氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化及它们之间的关系。方法通过低钙与含氟饮食建立氟中毒大鼠模型,采用Elisa法测定氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα表达。结果氟摄入可以提高血清OPG、IL-1β和TNFα水平;低钙饮食提高血清OPG水平,不影响IL-1β和TNFα水平;低钙与氟摄入协同能提高血清RANKL水平。结论慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα发生了变化;OPG升高是主要的,可以反应机体内破骨或协同破骨因素总的变化程度。     

他汀的抑动脉钙化作用及对骨保护素/NF-κB配体受体的影响

目的:探讨他汀类药物对动脉中膜钙化的抑制作用及其对骨保护素(OPG)/NF-κB配体的受体(RANKL)的影响。方法:构建大鼠的主动脉中膜平滑肌细胞(SMC)的钙化模型,随机分为钙化组、他汀组和对照组。钙化组使用β-磷酸甘油、维生素C对SMC来进行钙化诱导;他汀组在上述基础上加入阿托伐他汀。用Von Kossa染色,钙离子含量测定,碱性磷酸酶(ALP)活性检测,骨钙素的Western Blot检测来判定细胞钙化的程度,用实时定量PCR检测细胞钙化过程中伴随的OPG和RANKL的表达情况。结果:加入他汀类药物后使得细胞钙化的程度得到减轻,同时细胞表达的OPG/RANKL比值也得到明显上升(均P0.05)。结论:他汀类药物具有抑制动脉钙化的作用,其机制可能与提高OPG/RANKL的比值有关。     

Ghrelin在糖尿病血管钙化中的作用

目的观察生长激素促分泌素(Ghrelin)在糖尿病血管钙化中的作用。方法选取江苏大学附属医院30例糖尿病足截肢患者。根据超声对下肢动脉狭窄程度的检测将患者分为轻度狭窄组(狭窄50%)(n=10)、中度狭窄组(50%≤狭窄70%)(n=10)及重度狭窄/闭塞组(70%≤狭窄≤100%)(n=10)。通过患者血清学、临床相关指标的检测以及截肢胫动脉组织连续石蜡切片HE染色、Von kossa钙染色、血管钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性检测及Western blot检测观察钙化。结果糖尿病截肢患者胫动脉超声、HE染色及Von Kossa染色一致显示:三组患者胫动脉中膜均有弥散的黑色钙盐;但相对于轻度狭窄和中度狭窄组,重度狭窄/闭塞组胫动脉粥样硬化斑块内可见大量点灶状的黑色钙盐沉积(超声为强回声的硬斑块)。定量检测显示重度狭窄组/闭塞胫动脉ALP活性及钙含量增加显著,分别是轻度狭窄组的2.44倍和2.39倍,但中度狭窄组与轻度狭窄组相比,无统计学差异。Western blot检测显示随着血管狭窄程度加重,病变组织Ghrelin、骨保护素(OPG)表达下调,细胞核因子受体活化因子配体(RANKL)表达上调。Pearson相关性分析显示糖尿病截肢患者血清Ghrelin可能与胫动脉钙含量呈负相关(r=-0.64,P0.001)、与OPG呈正相关(r=0.85,P0.001),与sRANKL呈负相关(r=-0.85,P0.001)。结论随着糖尿病患者血管钙化程度的加重,Ghrelin与OPG表达下调,而RANKL的表达上调,提示血清Ghrelin、OPG/RANKL水平对糖尿病患者不同级别血管钙化可能有一定预警价值。     

肾功能不全血管钙化的机制

既往认为血管钙化是钙磷在血管壁的被动的沉积过程,近年细胞生物学和血管影像学的研究表明血管钙化是与骨生成相似的高度可调控的过程。多种机制参与了血管钙化的发生发展。其中磷,甲状旁腺素相关肽,维生素D,骨调节蛋白,脂质紊乱和炎症等在血管钙化中的发生发展中具有重要的调节作用。     

血清骨保护素水平与冠脉钙化的关系

目的探讨血清骨保护素（OPG）水平与冠脉钙化的关系。方法用ELISA法检测88例行双源CT冠脉血管造影检查的患者血清OPG水平,用冠脉钙化积分（CACS）评价冠脉钙化严重程度,分析血清OPG水平与冠脉钙化的关系。结果血清OPG水平在不同的CACS等级分组中分布有统计学差异（P〈0.01）。血清OPG与CACS呈正相关（r=0.53,P〈0.01）。结论血清OPG水平与冠脉钙化有关,OPG越高冠脉钙化越严重。     

血清可溶性RANKL/OPG在预测胸腺瘤术后复发中的价值

目的探讨术前血清中可溶性RANKL/OPG水平与胸腺瘤术后复发的相关性,从而评价其在预测胸腺瘤术后复发中的价值。方法采用酶联免疫吸附试验检测行正中切口手术的115例胸腺瘤患者术前血清OPG、RANKL水平,随访28(12-72)个月后25例出现了复发。结果 (1)复发组的血清RANKL、RANKL/OPG水平显著高于未复发组;(2)最佳截断点上血清RANKL/OPG诊断胸腺瘤术后复发的敏感性、特异性和正确率分别为90.1%、85.4%、87.7%。结论术前血清可溶性RANKL/OPG水平与胸腺瘤术后复发相关,它可作为术前评价胸腺瘤远期复发的辅助临床指标,指导手术方式的选择和术后辅助治疗。     

巴戟天多糖对去卵巢大鼠核因子-κB受体激活因子配体和骨保护素表达的影响

目的观察巴戟天多糖对去卵巢大鼠骨组织核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)mRNA表达的影响。方法成年雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、巴戟天多糖组,采用摘取双侧卵巢法建立骨质疏松模型,造模2 w后开始给药,给药3个月后观察各组大鼠骨密度(BMD),骨钙、骨磷含量,RANKL、OPG mRNA的表达水平。结果给药3个月后巴戟天多糖组能显著提高去卵巢大鼠的BMD和骨钙、磷的含量,上调OPG mRNA表达,下调RANKL mRNA表达,使RANKL/OPG值下降。结论巴戟天多糖对去卵巢所致的大鼠骨质疏松具有良好的防治作用,其机制可能与调控RANKL和OPG mRNA的表达,降低RANKL/OPG值有关。     

人工髋关节置换术后无菌性松动患者血清和假体界膜组织中IL-34 RANKL和OPG的表达水平及其临床意义

目的研究人工髋关节置换术后无菌性松动患者血清和假体界膜组织中白细胞介素-34(IL-34)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)的表达水平及其临床意义。方法选择2018-10～2020-06该院因髋关节置换术后髋关节假体发生无菌性松动而需进行翻修的患者10例为研究组,另纳入同期于该院因股骨头坏死或股骨颈骨折行初次全髋关节置换术的患者10例为对照组。术前,两组均取静脉血5 ml;术中,研究组取髋臼杯周围的界膜组织,对照组取髋臼周围筋膜和关节囊组织,备用检测。比较两组组织样本和血清中IL-34、RANKL和OPG的表达情况。结果酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果显示,研究组血清IL-34、RANKL及OPG水平显著高于对照组(P 0.05)。实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测结果显示,研究组组织样本IL-34、RANKL及OPG的mRNA的相对表达水平显著高于对照组,且研究组RANKL/OPG值为(1.21±0.36),对照组为(0.59±0.24),差异有统计学意义(P 0.05)。结论人工髋关节置换术后无菌性松动患者血清和假体界膜组织中IL-34表现为高表达,其可能与RANKL、OPG共同参与了无菌性松动的发病过程。     

骨保护素与骨质疏松和动脉钙化

<正>心脑血管疾病是导致中老年人死亡的主要原因,动脉钙化是严重心脑血管疾病发生的重要病理基础~([1])。在动脉钙化发生的众多相关潜在生物标志物中,骨保护素(osteoprotegerin,OPG)引起了人们的广泛注意~([2])。OPG是TNF受体超家族成员,NF-κB受体活化因子配体(RANKL)是它的配体。OPG参与调节破骨细胞的分化和活化,维持骨形成与骨吸收的动态平衡,与骨质疏松的发生有关~([3])。血管钙化的     

降钙素基因相关肽对维甲酸致老年骨质疏松大鼠OPG/RANKL信号通路的影响及疗效

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对维甲酸致老年骨质疏松大鼠骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路的影响及疗效。方法 72只15月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、维甲酸组、CGRP组和CGRP8-37(CGRP拮抗剂)组,每组18只;后3组用维甲酸80 mg·kg-1·d-1灌胃,1次/d,连续灌胃2 w。维甲酸组腹腔注射生理盐水1 ml,1次/d,6次/w;CGRP组腹腔注射1 ml CGRP(30μg/kg),1次/d,6次/w;CGRP8-37组先腹腔内注射1 ml CGRP8-37(30μg/kg),再向腹腔内注射1 ml CGRP(30μg/kg),1次,6次/w;以上各组均干预2 w。采用双能X射线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度(BMD);比较各组血清白细胞介素(IL)-6、IL-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、OPG和RANKL水平;RTPCR法检测各组大鼠骨组织OPG mRNA和RANKL mRNA表达。结果与对照组比较,维甲酸组大鼠左、右股骨BMD明显降低(P0.05);与维甲酸组比较,CGRP组大鼠左、右股骨BMD均显著升高(P0.05);而CGRP8-37组大鼠左、右股骨BMD均明显低于CGRP组(P0.05)。与对照组比较,维甲酸组大鼠血清OPG水平和骨组织OPG mRNA表达明显下降,而血清RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA表达明显升高(P0.01);与维甲酸组比较,CGRP组大鼠血清OPG和骨组织OPG mRNA明显升高,而血清RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA表达显著降低(P0.01);CGRP8-37组大鼠血清OPG水平和骨组织OPG mRNA明显低于CGRP组,而血清RANKL、IL1、IL-6、TNF-α水平和骨组织RANKL mRNA显著高于CGRP组(P0.01)。结论降钙素基因相关肽可明显提高维甲酸老年骨质疏松大鼠股骨BMD,其作用可能与抑制机体IL-1、IL-6、TNF-α水平从而调节OPG/RANKL平衡有关。     

OPG/RANK/RANKL系统与骨折和类风湿性关节炎

骨保护素(OPG)、细胞核因子-κB受体活化因子(RANK)和RANK配体(RANKL)是偶联成骨细胞、基质细胞和破骨细胞分化、活化及生物活性的3种主要细胞因子,其形成的局部调节体系在骨代谢中起十分重要的作用。本文简要介绍了OPG/RANK/RANKL系统及该系统在骨质疏松性骨折发生中的作用,RANKL/OPG比值与骨折的关系,OPG和RANKL对骨折愈合的作用,血清OPG或RAN-KL水平与骨折的联系,OPG基因多态性与骨折关系的研究结果。另外还介绍其在类风湿性关节炎发病机制中的作用,OPG/RANK/RANKL与滑膜组织的联系,OPG治疗的相关实验进展。     

瑞舒伐他汀对动脉钙化的疗效及对骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对动脉钙化的疗效与其对骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。方法冠状动脉钙化患者92例随机分为观察组和对照组,两组均接受冠状动脉造影及经皮冠脉介入(PCI)治疗。观察组在此基础上口服瑞舒伐他汀,连续服用12个月。治疗前、术后即刻和术后12个月,评价罪犯血管心肌梗死溶栓治疗(TIMI)血流分级和冠状动脉钙化(CAC)积分;采集患者清晨空腹静脉血,检测OPG和RANKL。结果治疗前和术后即刻,观察组和对照组TIMI血流分级比较差异无统计学意义(P0. 05);术后12个月,观察组TIMI血流分级显著优于对照组(P0. 05)。治疗前两组CAC积分比较差异无统计学意义(P0. 05);术后12个月,观察组CAC积分显著低于对照组(P0. 05)。随访期间,观察组CAC率显著低于对照组(P0. 05),两组心血管事件病死率和1年生存率比较差异无统计学意义(P0. 05)。治疗前和术后即刻,两组血清OPG和RANKL水平比较差异均无统计学意义(P0. 05);术后12个月观察组血清OPG水平显著低于对照组(P0. 05),血清RANKL水平显著高于对照组(P0. 05)。结论瑞舒伐他汀可能通过OPG/RANKL途径,改善CAC疾病进展,提高CAC的临床治疗效果。     

关注血管钙化和骨质疏松共同发病机制

老年血管钙化、动脉粥样硬化病人,慢性肾功能衰竭进行肾透析以及接受维生素D和华法林治疗的患者常并存骨质疏松症.近年流行病学、血管和细胞生物学、影像学及治疗学的发展证实血管钙化和骨质疏松具有共同的发病机制.除传统引起血管钙化和骨质疏松的因素外,基质Gla蛋白、骨桥蛋白、Klotho蛋白、胎球蛋白A以及RANKL/RANK/OPG系统均参与了血管钙化和骨质疏松的发生发展.     

强直性脊柱炎继发骨质疏松及相关因素分析

目的 测定强直性脊柱炎(AS)患者骨密度(BMD)、血清骨保护素(OPG)、可溶性核因子κB受体活化因子配体(sRANKL)等骨代谢指标及外周血T细胞表面RANKL表达情况,研究RANKI/RANK/OPG系统在AS骨代谢中的作用.方法 双能X线吸收法(DEXA)测定AS患者BMD;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清OPG、sRANKL、抗酒石酸酸性磷酸酶异构体5b(TRACP-5b)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平;分析BMD、上述骨代谢指标及临床指标间相关性;流式细胞术(FC)检测外周血CD4+/RANKL+及CD8+/RANKL+细胞表达率;分析它们与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)相关性.计量资料采用成组设计的t检验,计数资料采用x2检验,相关性采用直线相关分析.结果 ①AS患者骨量减少、骨质疏松(OP)发生率分别为47%、37%.②AS组血清sRANKL、TRACP-5b水平及sRANKL/OPG比值均高于对照组(P<0.05);2组血清OPG、BALP水平差异无统计学意义.③AS组血清sRANKL水平与OPG呈正相关,两者均与TRACP-5b呈正相关(P<0.01.④AS组外周血CD4+/RANKL+细胞表达率高于对照组(P<0.05).结论 AS存在较高的骨量丢失率,其骨代谢特点以骨吸收增强为主,RANKL/RANK/OPG系统在其中起着重要作用,该系统失衡可能是AS骨量丢失机制之一;CD4+T细胞可能通过上调RANKL表达参与AS破骨细胞分化成熟及骨吸收机制.     

脂联素调控人成骨细胞OPG/RANKL表达的信号转导机制

目的 研究脂联素调控人成骨细胞护骨素(OPG)和NF-кB受体活化凶子配体(RANKL)表达的作用机制.方法 人成骨细胞OPG和RANKL mRNA的表达以实时PCR检测,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、c-Jun氨基端激酶(JNK)的磷酸化水平用Western印迹法检测.廊用小分子RNA干扰技术(siRNA)阻断脂联素受体(AdR)表达,并以p38 MAPK抑制剂(SB203580)和JNK抑制剂(SP600125)干预,以观察脂联素对人成骨细胞OPG/RANKL作用的调节机制.结果 用siRNA沉默AdRl的表达可消除脂联素促进人成骨细胞RANKL表达和抑制OPG表达的作用;脂联素干预前予SB203580阻断p38 MAPK后,也可消除脂联素对成骨细胞RANKL和OPG的作用,而SP600125并无作用.结论 在人成骨细胞中,脂联素通过AdR1/p38 MARK途径促进RANKL表达和抑制OPG的表达.     

老年心脏瓣膜钙化与血清骨保护蛋白、非活性基质Gla蛋白水平的关系研究

目的:探讨老年心脏瓣膜钙化与血清骨保护蛋白(Osteoprotegerin,OPG)、非活性基质Gla蛋白(inactive Matrix Gla Protein,ucMGP)水平的关系。方法:选取我院心内科老年患者121例,根据超声心动图检查结果将患者分为A组(主动脉瓣钙化AVC,38例)、B组(二尖瓣钙化MVC,26例)、C组(AVC联合MVC,32例)和对照组(无瓣膜钙化,25例),采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清OPG、ucMGP水平并进行比较,分析血清OPG、ucMGP水平与AVC或MVC形成的关系。结果:A、B、C组血清OPG、ucMGP水平及临床不良事件发生率均明显高于对照组,组间比较差异具有统计学意义(P0.05),但A、B、C组上述指标之间的比较差异无统计学意义(P0.05)。AVC阳性组血清OPG、ucMGP水平明显高于AVC阴性组,两组比较差异具有显著性(P0.05),MVC阳性组血清OPG、ucMGP水平明显高于MVC阴性组,两组比较具有明显差异(P0.05)。结论:血清OPG、ucMGP水平在老年心脏瓣膜钙化患者中显著增高,两者具有促进主动脉瓣和二尖瓣钙化形成过程,可作为AVC、MVC的重要诊断指标。