杂色曲霉素对体外小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素12表达与分泌的影响

目的　探讨杂色曲霉素(ST)对巨噬细胞免疫功能的影响。方法　分别采用半定量逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附法,研究0 .12 5 ,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0和2 .0mg·L- 1ST预处理对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素(IL) 12mRNA表达及其蛋白分泌的影响。结果　在0 .12 5～1.0mg·L- 1范围内,ST处理对小鼠腹腔巨噬细胞IL 12p4 0和IL 12p35mRNA的表达均有一定的抑制作用。但在蛋白水平,对IL 12分泌的影响不明显。当ST浓度达到2 .0mg·L- 1时,可明显抑制IL 12p4 0mRNA的表达及IL 12的分泌。结论　ST可抑制巨噬细胞IL 12的表达或分泌,提示ST可能在一定程度上对机体的细胞免疫功能产生不利影响。     

杂色曲霉素对小鼠穹隆下器官TNFα和TGFβ_2的mRNA表达的影响

目的观察杂色曲霉素(ST)损伤脑组织时有无肿瘤坏死因子(TNF)α和转化生长因子(TGF)β2的mRNA表达的改变。方法用BALB/c小鼠,ST3mg.kg-1灌胃,分别于灌胃后0.5,1,2,4,8和16h处死动物,用原位杂交方法观察穹隆下器官(SFO)细胞TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA的表达。结果TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞广泛分布在SFO。ST处理组从0.5h开始TNFα mRNA阳性表达细胞数缓慢上升,4h达到顶点,之后缓慢下降;TGFβ2 mRNA阳性表达细胞数从0.5h缓慢持续上升,16h达到顶点。ST组各时间点TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞数均明显高于对照组。结论TNFα和TGFβ2在ST对SFO细胞损伤和修复中可能起着重要的作用。     

杂色曲霉素对小鼠胸腺和脾脏转录因子Foxp3~+调节性T淋巴细胞的影响

目的探讨杂色曲霉素(ST)对机体免疫调节功能的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、ST3,30,300和3000μg·kg-1组。小鼠ip给药24h后,处死取胸腺和脾脏,采用流式细胞术测定胸腺和脾脏细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞及转录因子Foxp3阳性(Foxp3+)调节性T淋巴细胞的百分率,免疫组织化学法检测胸腺和脾脏组织中Foxp3+调节性T淋巴细胞数量,Western蛋白印迹法和RT-PCR分别测定胸腺和脾脏组织中Foxp3蛋白和mRNA的表达。结果溶剂对照组与正常对照组比较,小鼠胸腺和脾脏CD4+,CD8+和Foxp3+T淋巴细胞百分率均无明显差异。与溶剂对照组比较,ST3μg·kg-1组胸腺CD8+T淋巴细胞百分率降低,ST3和30μg·kg-1组脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率明显升高,ST300和3000μg·kg-1组胸腺和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率无明显变化。在ST3～3000μg·kg-1内,胸腺和脾脏细胞中Foxp3+调节性T淋巴细胞百分率、胸腺和脾脏组织内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量、Foxp3蛋白和mRNA表达均随ST浓度的增高而增加。结论ST可诱导小鼠淋巴器官内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量增加,从而影响机体免疫耐受功能。     

海洋来源真菌杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究一株海洋来源真菌Aspergullus versicolor NM-021杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备HPLC等色谱技术对其化学成分进行分离、纯化;通过NMR、MS方法,结合与文献报道的数据比对,对化合物的结构进行鉴定。运用细胞毒活性筛选模型对其抗肿瘤活性进行初步评价。结果从该菌株中分离得到了2个蒽醌类化合物2H-6-O-Methylaverufin（1）和6-O-Methylaverufin（2）。生物活性测试结果表明,化合物1对人结肠癌和食管癌具有一定的抑制活性。结论从该菌株中分离得到1个新的具有细胞增殖抑制活性的蒽醌类化合物（1）。     

1株黄河三角洲来源杂色曲霉A.versicolor BHT-72的次级代谢产物研究

目的 研究1株黄河三角洲盐碱地曲霉属真菌A. versicolor BHT-72的次级代谢产物及其生物活性。方法 采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析、ODS柱层析、高效液相（HPLC）等色谱方法对该菌株的次级代谢产物分离纯化,并通过核磁共振（NMR）、质谱（MS）等方法,结合相关文献对比鉴定化合物结构;分别采用CCK8法和改良的Ellman法对化合物进行抗肿瘤和抗乙酰胆碱酯酶抑制活性的测试。结果 从A. versicolor BHT-72的大米发酵产物中共分离得到10个单体化合物,分别为diorcinol(1)、12-O-acetyl-sydowinin A(2)、sydowinin A(3)、13-O-acetylsydowinin B(4)、sydoxanthone(5)、3-formylindole(6)、尿苷（7）、zarzissine(8)、6-氨基嘌呤核苷（9）、6-氨基嘌呤脱氧核苷（10）。细胞毒活性测定结果显示,化合物1在质量浓度为30μg/mL时,对鼻咽癌细胞CNE-2的抑制率为65.0%,对非小细胞肺癌H1299和H520的抑制率分别为81...     

D-半乳糖对小鼠肝脏ROS及细胞凋亡的流式细胞术分析

目的 以流式细胞术探讨D-半乳糖给予剂量、给予时间对实验动物肝脏活性氧（ROS）水平及细胞凋亡的影响。     

D-半乳糖对小鼠肝脏影响的流式细胞术分析

目的以流式细胞术探讨D-半乳糖不同剂量、不同时间对小鼠肝脏活性氧(ROS)水平及细胞凋亡的影响。方法SPF级25~30 g KM种雄性小鼠按体重随机分组(n=6)。剂量-反应关系设阴性对照组、80、150和450 mg/kg D-半乳糖剂量组;时间-反应关系研究设阴性对照组、腹腔注射80 mg/kg半乳糖4、8和16周。实验结束后,取肝组织制备单细胞悬液,流式细胞术分析肝细胞ROS水平及细胞凋亡率。结果肝细胞ROS水平和细胞凋亡率的流式细胞术分析显示,随着D-半乳糖给予剂量的增加,各剂量组指标明显升高(P<0.01);80 mg/kg D-半乳糖连续给予8、16周后,指标亦明显增高(P<0.01)。结论在一定给予剂量及给予时间范围内,D-半乳糖可明显增加实验动物肝细胞ROS水平,诱导肝细胞凋亡,ROS水平的高低与细胞凋亡的发生具有一致性的变化趋势。     

UPLC-MS/MS法检测苍耳子中的赭曲霉素A

目的建立中药苍耳子中赭曲霉素A的UPLC-MS/MS测定方法。方法样品用乙腈-水提取,提取液依次通过无水硫酸镁-无水醋酸钠(4∶1)混合粉末进行分散固相萃取和Myco6in1毒素免疫亲和柱净化去除杂质后,用超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱进行分析测定。结果赭曲霉素A在2～50 ng·mL~(-1)内线性关系良好,回收率在84.67%～95.40%,RSD≤3.0%。结论本法灵敏、快速、准确、专属性强,可用于中药苍耳子中赭曲霉素A的测定。     

脂联素对肾性高血压小鼠心脏的影响

目的研究脂联素对肾性高血压小鼠心肌炎症、纤维化与心脏功能的影响,并探讨其作用机制。方法选择脂联素基因敲除纯合子小鼠60只(A组),野生型小鼠120只(平均分为2组,B组60例,C组60例),分别制作肾血管性高血压模型(A1、B1、C1)与假手术模型(对照组,A2、B2、C2),其中C组接受外源性脂联素干预。免疫组织化学染色方法(SP法)检测心肌组织切片中性粒细胞浸润数量,天狼星红(VG)染色法检测心肌胶原沉积纤维化程度,Western blot法检测心肌组织中炎症与致纤维化因子AngⅡ、IL-6、TNF-α、TGF-β水平,ELISA方法检测各组小鼠BNP,观察体外培养心肌细胞在脂联素、AngⅡ干预下的凋亡指数。结果肾性高血压模型组的BNP、心肌中性粒细胞数、心肌胶原及AngⅡ、IL-6、TNF-α、TGF-β水平高于假手术对照组,且A1组高于B1组,B1组高于B2组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。AngⅡ干预组心肌细胞凋亡指数高于空白对照组、脂联素干预组及共同干预组(P<0.01)。结论脂联素可以通过抗炎症、抗纤维化、抗细胞凋亡的途径保护肾性高血压小鼠的心肌结构与心功能。     

甲状旁腺素对大鼠心肌细胞内游离钙和细胞凋亡的影响

目的　研究甲状旁腺素 (PTH)对心肌细胞内游离钙以及细胞肥大和凋亡的影响。方法　利用培养的新生大鼠心肌细胞 ,以Fluo 3/AM负载 ,通过激光共聚焦显微镜(LSCM)测定细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ] i) ;以细胞面积和细胞蛋白含量作为心肌细胞肥大指标 ;采用电镜和流式细胞术观察细胞凋亡的变化。结果　PTH1～ 34 0 0 1和 0 1 μmol·L- 1 刺激 7d后 ,心肌细胞内钙荧光强度以及心肌细胞面积和蛋白含量、细胞凋亡率较对照组显著增加。而 0 1 μmol·L- 1 PTH1～ 34 刺激的同时分别加入 1、1 0 μmol·L- 1 硝苯地平 ,上述指标改善 ,但未能达正常。结论　PTH1～ 34 可显著增加心肌细胞 [Ca2 + ] i,诱导细胞肥大和凋亡 ,并呈浓度依赖性 ,电压依赖性钙通道开放引起的细胞外钙内流增加为其机制之一     

BALB/c小鼠单次经口灌胃瑞格列汀的安全药理学研究

目的 评价ig瑞格列汀对小鼠自主活动及协同睡眠的影响,以发现潜在非期望药理作用。方法 将小鼠随机分为4组,包括对照组和瑞格列汀10、20、40 mg/kg组,单次ig给予溶媒或供试品,进行小鼠自主活动次数测定和协同睡眠影响分析。结果 ig给药后,各组动物均未见异常,未出现行动迟缓、活动不协调等反应。不同剂量组之间动物自主活动次数无明显差异。在接受戊巴比妥钠注射后,与对照组动物相比较,供试品给药组动物的入睡率无显著性差异。结论 ig瑞格列汀在40 mg/kg及其剂量以下对小鼠自主活动无显著性影响,与阈下催眠剂量的戊巴比妥钠合用无明显协同催眠作用。研究结果为临床进一步评价其安全性奠定了基础。     

Safety of the intravenous administration of neurotensin-polyplex nanoparticles in BALB/c mice

Neurotensin (NTS)-polyplex is a gene nanocarrier that has potential nanomedicine-based applications for the treatment of Parkinson's disease and cancers of cells expressing NTS receptor type 1. We assessed the acute inflammatory response to NTS-polyplex carrying a reporter gene in BALB/c mice. The intravenous injection of NTS-polyplex caused the specific expression of the reporter gene in gastrointestinal cells. Six hours after an intravenous injection of propidium iodide labeled-NTS-polyplex, fluorescent spots were located in the cells of the organs with a mononuclear phagocyte system, suggesting NTS-polyplex clearance. In contrast to lipopolysaccharide and carbon tetrachloride, NTS-polyplex did not increase the serum levels of tumor necrosis factor alpha, interleukin (IL)-1β, IL-6, bilirubin, aspartate transaminase, and alanine transaminase. NTS-polyplex increased the levels of serum amyloid A and alkaline phosphatase, but these levels normalized after 24 h. Compared to carrageenan, the local injection of NTS-polyplex did not produce inflammation. Our results support the safety of NTS-polyplex.From the Clinical EditorThis study focuses on the safety of neurotensin (NTS)-polyplex, a gene nanocarrier that has potential in the treatment of Parkinson's disease and cancers of cells expressing NTS receptor type 1. NTS polyplex demonstrates a better safety profile compared with carrageenan, lipopolysaccharide, and carbon tetrachloride in a murine model.     

韭子对小鼠T细胞亚群的影响

目的:研究中药韭子对小鼠的免疫调节作用.方法:环磷酰胺腹腔注射建立小鼠免疫功能低下模型,应用流式细胞仪对小鼠T细胞亚群进行检测.结果:韭子可改善环磷酰胺引起的CD4 亚群比例的降低、CD4 /CD8 比值的降低,说明它对模型小鼠T细胞功能有增强作用,并通过增强CD4 细胞调整CD4 /CD8 的比例失调.结论:韭子不仅对细胞免疫功能低下具有免疫增强作用,还具有较好的免疫调节作用.     

Effects of hop extracts on nasal rubbing and sneezing in BALB/c mice

The effects of hop extracts (Humulus lupulus L.) on histamine release from rat peritoneal mast cells and human basophilic KU812 cells were studied. Hop water extract (HWE) and XAD-4 50% methanol fraction of HWE (MFH) inhibited histamine release from rat mast cells induced by compound 48/80 at concentrations of 100 and 10 mug/ml, respectively. Almost the same findings were observed with A23187-induced histamine release from KU812 cells. Next, we studied the effects of hop extracts on antigen-induced nasal rubbing and sneezing in sensitized BALB/c mice. HWE caused a significant inhibition of nasal rubbing and sneezing at a dose of 500 mg/kg. MFH also inhibited nasal rubbing and sneezing dose-dependently. A significant difference was observed from 100 mg/kg in nasal rubbing and 200 mg/kg in sneezing. The effects of both extracts became clear after repeated administration. HWE and MFH significantly inhibited both nasal rubbing and sneezing, respectively, after consecutive treatment for 15 d at smaller doses compared with single administration. This finding indicates that the active component of hop is included in MFH, which was absorbed to Amberlite XAD-4 and eluted with 50% methanol. These results clearly demonstrated that hop extracts may be effective in the relief of symptoms of allergic rhinitis.     

Effects of oxymatrine in immune liver injury model of BALB/c mice

目的 观察氧化苦参碱对BCG+ LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤后肝、脾脏指数的影响以及对肝组织匀浆谷胱甘肽过氧化氢酶( GSH - Px)、总机氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)活性的影响.方法 取♂ BALB/c小鼠60只,随机均分为正常对照组、模型组、联苯双酯治疗组及氧化苦参碱高、中、低剂量组.除正常对照组外,其余各组BCG+ LPS诱导建立免疫性肝损伤小鼠模型,氧化苦参碱高、中、低剂量ig 10 d后,称取肝、脾脏重量,取肝组织匀浆测各组GSH - Px、T-AOC及MDA的含量.结果 氧化苦参碱可明显降低肝、脾脏指数,增加肝匀浆中降低的GSH - Px、T-AOC的含量(P＜0.05),并降低MDA的含量.结论 氧化苦参碱对BALB/c小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,可能与其增强抗氧化活性等有关.     

Curcumin inhibits WEHI-3 leukemia cells in BALB/c mice in vivo

Curcumin (1, 7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,6-heptadiene-3,5- dione), a natural polyphenol product of the plant Curcuma longa, exhibited potent inhibitory activities against proliferation, induced cell cycle arrest and exhibited the induction of apoptosis in several tumor cell lines. In our previous studies, we have shown that curcumin induced cell cycle arrest and apoptosis on human leukemia HL-60 and mouse leukemia WEHI-3 cells; there are no reports regarding whether or not it affects leukemia cells in vivo. In the present study, we investigated the effects of curcumin on WEHI-3 in BALB/c mice and the results indicated that curcumin reduces the percentage of Mac-3 marker, which is the precursor of macrophage. Curcumin induced significant effects on the population of B cells from murine leukemia in vivo. We also investigated the weights of spleen and liver from murine leukemia and the results showed that curcumin reduced the weight of the liver and spleen. From the pathological examinations, the effects of curcumin on the liver and spleen from mice after being injected with WEHI-3 cells were apparent. Both organs were enlarged. In conclusion, curcumin affect WEHI-3 cells in vivo.     

氧化苦参碱对BALB/c小鼠免疫性肝损伤保护作用的机理研究

目的观察氧化苦参碱对BCG+LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤后肝、脾脏指数的影响以及对肝组织匀浆谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)活性的影响。方法取♂BALB/c小鼠60只,随机均分为正常对照组、模型组、联苯双酯治疗组及氧化苦参碱高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组BCG+LPS诱导建立免疫性肝损伤小鼠模型,氧化苦参碱高、中、低剂量ig 10 d后,称取肝、脾脏重量,取肝组织匀浆测各组GSH-Px、T-AOC及MDA的含量。结果氧化苦参碱可明显降低肝、脾脏指数,增加肝匀浆中降低的GSH-Px、T-AOC的含量(P<0.05),并降低MDA的含量。结论氧化苦参碱对BALB/c小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,可能与其增强抗氧化活性等有关。