硝酸镧生物膜超微标记示踪在肾缺血再灌流损伤研究中的应用

在兔肾缺血再灌流动物模型中采用硝酸镧生物膜超微标记示踪法对肾小管细胞膜和线粒体膜的通透性进行了观察，并结合肾组织中ＬＰＯ和Ｈ２Ｏ含量的变化，对肾缺血再灌流损伤的发病机理进行了讨论。     

电镜技术中硝酸镧示踪法探讨

本文仅对心脏手术中缺血,重获氧和血灌注所造成的再灌注损伤的现象进行了研究。用硝酸镧作示踪剂,检查了心肌细胞膜通透性的改变。对正常细胞,只能存在于细胞膜外,而在膜受损后则可以进入细胞内,置换结合钙,故可作为缺血心肌细胞膜受损和通透性增加的标记。电镜图像显示出:正常组镧颗粒沉积在闰盘处,细胞内细胞器上则没有;缺氧组由于细胞膜损坏,通透性增强,闰盘处沉积物减少,形成一条稀疏带,而线粒体膜上却出现了镧的沉积物。表明用硝酸镧示踪法研究心肌缺氧等损伤条件下细胞膜通透性的改变是较好的方法。     

缺血再灌注兔心肌细胞质膜渗透性的改变及其钙通道阻滞剂对它的影响

应用镧离子示踪法于透射电镜下观察了缺血再灌注兔心肌细胞质膜渗透性的改变及其钙通道阻滞剂对它的影响。正常心肌中镧离子存在于细胞外间隙;缺血30min时超微结构改变呈可逆性,镧进入细胞并粘附于线粒体膜外面;再灌注后超微结构损伤呈不可逆性,镧进入线粒体内;再灌注前给以异搏停,再灌注损伤明显改善,线粒体内镧颗粒消失;缺血前给以异搏停,细胞膜和超微结构保存较好,细胞内镧基本消失。实验提示缺血再灌注心肌细胞中,细胞膜渗透性改变先于细胞的不可逆性损伤,而细胞膜渗透性改变又早于细胞器膜,无论是在缺血前还是于再灌注前给以导搏停,对质膜结构和功能均有一定的保护作用。     

缺血预适应对体外循环中心肌细胞膜通透性变化的影响

目的 :观察缺血预适应 (IPC)对体外循环 (CPB)中缺血再灌注损伤所致心肌细胞膜通透性变化的影响。 方法 :建立猫体外循环模型并随机分为 4组 :对照组 (n=30 )仅做单纯并行 CPB转流 ,不阻断升主动脉 (ACC) ;缺血再灌注组 (IR组 ,n=30 )于 CPB开始 4 5 min后 ACC6 0 m in,开放主动脉使心脏恢复再灌注 ;单次 IPC组 (IPC组 ,n=30 )于 ACC前进行 1次 IPC(ACC5 min后开放 1 0 m in) ,余同 IR组 ;多次 IPC组 (IPCs组 ,n=30 )于 ACC前进行 3次 IPC,余同 IR组。应用细胞化学 -镧示踪法观察心肌细胞膜通透性的变化情况 ,同时测定心肌组织中 Ca2 +含量。 结果 :IR组在 ACC早期镧颗粒即出现于心肌细胞内 ,且随主动脉阻断时间的延长而逐渐增多并进入心肌细胞线粒体中 ;再灌注早期 ,胞质和线粒体内镧颗粒流入加快 ;同时心肌 Ca2 +含量在 ACC30 min开始逐渐升高 ,心脏再灌注期间 ,Ca2 +含量进一步增加 (P<0 .0 1 )。而 IPC组与 IR组相比无明显差别。IPCs组各时间点细胞内镧颗粒沉积明显少于 IR组 ,且线粒体中较晚出现镧颗粒 ;IPCs组心肌组织 Ca2 +含量在 ACC6 0 m in以及再灌注期间虽较对照组有所升高 (P<0 .0 5 ) ,但升高幅度明显低于 IR组。结论 :多次 IPC有助于减轻或延迟 CPB期间缺血再灌注所导致的心肌细胞膜通透     

家兔阿霉素心肌病时心肌细胞膜通透性改变——以镧盐为标记物的电镜观察

本实验利用阿霉素心肌病的家免模型,以镧盐为标记物电镜下观察了心肌细胞膜通透性改变。实验表明,尽管早期超微结构的损伤还不明显,但在受损心肌细胞内(特别是线粒体内)就可见到镧盐的沉积。我们认为阿霉素所致心肌细胞膜通透性改变,是心肌不可逆损伤的形态指征之一,阿霉素心肌病的本质为生物膜性损伤;镧盐示踪技术适应于监测超微结构损伤不明显时的细胞膜通透性变化。     

体外震波对家兔肝组织影响的硝酸镧示踪和电镜酶细胞化学研究

采用体外震波碎石机对家兔肝脏实施震波冲击实验,并用硝酸镧示踪和碱性磷酸酶细胞化学亚显微定位技术对兔肝组织进行电镜研究。观察显示:实验组肝见镧颗粒穿过细胞膜进入胞质,并围绕线粒体呈颗粒状沉积或选择性地进入线粒体;毛细胆管腔及紧密联接区和肝细胞间隙均有镧颗粒沉积,紧密联接区及肝细胞间隙亦见异常的碱性磷酸酶反应物。超微结构示线粒体肿胀、膜破坏及内质网扩张。结果表明,震波作用的靶细胞单位是膜结构和线粒体,其早期损伤效应是细胞膜性结构的通透性增高及完整性的丧失,进而导致亚细胞结构改变和生化的异常。     

镧示踪技术在高能震波对细胞膜通透性影响的应用研究

动用硝酸镧示踪技术探讨高能震波对细胞膜通透性影响的研究，电镜观察显示了镧微粒在细胞内及细胞连接中的沉积变化和定位。对镧示踪的意义及方法学进行了讨论。     

衰竭心肌细胞膜及线粒体膜镧通透性改变的初步电镜观察

５例心功能处于不同状态心脏病人活检心肌标本硝酸镧示电镜观察结果显示：５例均有镧颗粒进入心肌细胞内，分布于肌原纤维及线粒体，并部分进入线粒体内，使线粒体显像，进入细胞内，线粒体内镧颗粒的多少与心功能状态一致，反映了衰竭心肌细胞膜及线粒体膜通透性增加，提示生物膜通透性损伤参与心肌细胞衰竭发生发展过程。     

喂饲克山病病区粮大白鼠心肌细胞膜通透性的变化——用硝酸镧作示踪物的电子显微镜观察

以硝酸镧作示踪物用电子显微镜观察喂饲克山病病区粮3个月的大白鼠心肌细胞膜通透性的变化。结果发现喂饲克山病病区粮的动物心肌细胞肌丝间和部分线粒体内均有镧盐沉着,而非病区粮饲养的动物镧盐颗粒只见于心肌细胞外间隙。表明喂饲克山病病区粮的大白鼠心肌肌膜和部分线粒体膜通透性增大。     

硝酸镧示踪犬晕厥心肌膜性结构的完整性

作者用硝酸镧作为超微结构探针，对犬晕厥心肌和梗塞心肌的细胞膜性结构通透性进行对比研究。结果表明：晕厥心肌可见线粒体肿胀和空泡形成，细胞内仅有少量镧颗粒沉着，细胞膜、线粒体膜、溶酶体膜等膜性结构完整。梗塞心肌可见大量镧颗粒通过破损的胞膜沉积于胞浆和线粒体内，说明晕厥心肌发生过程中膜性仍保持其完整性。     

肌苷、川芎对肾近端小管上皮细胞缺血损伤的影响——细胞化学观察

本实验采用钙离子细胞化学定位法、膜通透性细胞化学示踪法结合普通超微结构及EDX电镜分析,从细胞水平观察了肾近端小管上皮细胞缺血损伤情况以及药物对它的影响。实验结果表明:肌苷、川芎对细胞缺血损伤有保护作用。缺血期,细胞中及线粒体内钙离子增多。此时,质膜的损伤并不严重。缺血后复流,随着复流时间的延长,细胞中及线粒体内钙离子进行性增多,质膜的损伤也越来越重。线粒体内钙离子含量与胞质中钙离子含量有密切关系。     

The effects of inosine and Ligusticum wallichii on ischemic injury of renal proximal tubule epithelial cells:cytochemical study

Cytochemical methods were used to evaluate the changes of intracellularcalcium,plasma membrane permeability and their relationship during ischemia andreflow in rat renal proximal tubule epithelial cells.In addition,the preventive ef-fects of inosine and Ligusticum wallichii on ischemia and reperfusion cell injurywere studied.The results showed that the preventive effects of inosine andLigusticum wallichii were obvious.Redistribution and slight increase of calciumoccurred during the ischemic period in the proximal tubule cells.In this periodthe changes of plasma membrane permeability were gentle.Following the exten-sion of reflow time,a large amount of calcium deposited in the cells andmitochondria.The plasma membrane became broken.There was a positivecorrelation between the calcium level in mitochondria and that in cytoplasm.     

磷酸肌酸的心肌保护机制及其在心脏疾病中的应用

磷酸肌酸作为细胞内的一种高能磷酸化合物,不仅可以在心肌细胞遭受缺血缺氧时为其提供能量,还可以保护心肌细胞膜免受氧自由基等有害物质的侵袭。新的研究发现,磷酸肌酸还可以透过细胞膜抑制膜通透改变孔道的开放保护线粒体,减少细胞凋亡。此外,磷酸肌酸还可以提高左室射血分数,改善心功能,增加冠状动脉流量,改善冠状动脉循环。目前,磷酸肌酸不但应用于体外循环手术中,还应用于治疗心力衰竭、心肌梗死、心律失常、冠状动脉粥样硬化性心脏病。     

异丙酚对缺血再灌注损伤心肌线粒体的保护作用

目的：观察异丙酚对减轻心肌缺血再灌注损伤、维持心肌线粒体膜通道性的作用。方法：24只中国大耳菜兔随机等分为对照组、异丙酚组，结扎冠状动脉左前降支，制作急性心肌缺血再灌注模型。测定结扎前即刻、灌注前即刻、灌注2h三个时间点的血浆眺浓度，测定灌注2h时血浆肾上腺素浓度，测定缺血再灌注区心肌线粒体的Tc^99m-MIBI摄取率。结果：血浆CPK浓度呈动态变化；血浆CPK浓度、肾上腺素浓度、心肌线粒体的Tc^99m-MIBI摄取率的T—test说明两纪差异有显著性；血浆肾上腺素浓度和心肌线粒体的Tc^99m-MIBI摄取率具有负相关性。结论：异丙酚能维持心肌线拉体膜通道性，降低血浆肾上腺素浓度，从而减少心肌缺血再灌注损伤。     

缺血再灌注损伤对新生鼠肾小管上皮细胞F-actin的影响

目的 研究缺血再灌注不同时段纤维型肌动蛋白（F-actin）在肾小管上皮细胞中分布变化情况，探讨F-actin在肾脏缺血再灌注禹伤中所起的作用。方法 建立新生大鼠不同时段的肾脏缺血灌注模型，通过免疫荧光法检测F-actin在肾小管上皮细胞上的分布，并计算各组F-actin的表达量。结果 正常时F-actin主要聚集在上皮细胞基底膜处；缺血0.5h后，细胞浆内的F-actin开始增加，再灌注0.5h后，大量F-actin开始向胞浆内转移，基底部的表达减少；再灌注2h后，F-actin在胞浆中仍很多，但在基底部的表达开始增加。结论 缺血再灌注损伤时F-actin的分布从基底部移行到胞装内，可能由引导致整合素和Na^ -K^ -ATP酶分布的去极化，引起上皮细胞的脱落和对钠离子重吸收的障碍。     

中药抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层神经元的保护作用

目的观察中药抗呆Ⅰ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层神经元的保护作用.方法体外培养的大鼠大脑皮层神经元,模拟脑缺血再灌注损伤中缺血4 h及再灌3、18、24、48、72 h,观察其活性、存活率、死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率和一氧化氮合成酶(NOS)的活性变化以及中药抗呆Ⅰ号的影响.结果体外培养的大鼠大脑皮层神经元随缺血和再灌注时间的延长,细胞存活率逐渐下降、死亡率逐渐升高、培养液中LDH的漏出率逐渐升高,细胞NOS的活性在缺血4 h和再灌3 h时显著增高.抗呆Ⅰ号可影响其上述指标的变化.结论抗呆Ⅰ号可能通过防止氧化磷酸化脱偶联而保护线粒体,防止脂质过氧化及通透性增加而保护细胞膜,抑制NOS活性的反应性增强而防止NO及其衍生的毒性自由基的损伤等,而发挥对神经元的保护作用.     

腹膜表面层和腹膜通透性的关系

近年来,终末期肾脏病(ESRD)的病人数以每年 10%以上的速度增长.由于受肾源的限制,透析疗法是目前治疗ESRD的主要方法,这包括血液透析(血透)和腹膜透析(腹透)二种.腹透, 特别是持续性不卧床腹膜透析(CAPD),是一种有效治疗ESRD患者的方法.CAPD治疗价廉、操作简便、病人可在家自行透析,适合几乎所有的ESRD病人.在我国香港,80%以上的透析患者选择腹透治疗.     

急性脑损伤患者检测神经元特异性烯醇化酶的临床意义

神经元特异性烯醇化酶(NSE)是糖酵解途径中的关键酶,特异地存在于神经细胞和神经内分泌细胞,当缺血、缺氧、中毒或损伤时,细胞膜的完整性受到破坏,NSE便从细胞内释放出来。在神经元损害的标志酶中,NSE与醛缩酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶不同,它不与细胞内的肌动蛋白结合,因而从缺血或坏死的细胞中最易释放,首先进入脑脊液中,由于血脑脊液屏障的破坏,因而进入血液循环,这为脑组织损伤后检测血清中NSE的变化提供了依据。所以目前,NSE不仅作为肿瘤标志物广泛用于临床肿瘤患者病情的监测,而且它在急性脑损伤患者的病情监测中的作用倍受人们重视。     

肺水通道蛋白的研究进展

调节细胞膜的水渗透性是维持生命的基本要求,水通道蛋白是细胞膜上一组与水通透性有关的转运蛋白。目前研究表明,水通道蛋白表达或功能的改变,可以改变细胞膜转运水的速度。水通道蛋白的异常表达可能与临床上各种形式的水肿形成相关,通过改变体内水的平衡可达到治疗疾病的目的。水通道蛋白在维持肺脏的液体平衡中同样起重要的作用。