应用酶联免疫吸附试验检测流行性出血热患者尿中抗原方法改进及影响因素探讨

我们应用辣根过氧化物酶标记流行性出血热(EHF)IgG,用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法,检测 EHF 患者尿中抗原,取得满意结果。在实验技术建立的同时,对方法改进及影响因素作了初步探讨。     

SPA斑点酶联免疫吸附试验诊断流行性出血热

以硝酸纤维素膜为固相载体、酶标SPA为第二抗体,建立了检测EHF患者血清特异性IgG抗体的SPA斑点酶联免疫吸附试验。用此法检测87份EHF患者血清,与免疫荧光法的检出符合率为97.6％,抗体几何平均滴度为免疫荧光法的1.8倍。本法特异、敏感、快速、简便,可作为EHF特异性诊断的方法之一。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎e抗原和e抗体

应用酶联免疫试验(ELISA)检测e抗原、e抗体,是一种特异性强、敏感度高、重复性好的方法。较ID法大大提高了检出率。     

ELISA法在检测流行性出血热病毒抗原中的应用

采用ELISA和IFA法检测细胞培养中EHFV抗原,检出时间分别在病毒感染细胞后第4d 和第6d,对 EHFV 抗原的定量检测提示病毒释放的高峰期在其感染细胞后10～12d,患者血浆标本 EHFV 抗原的检出率为26.6%。以上结果指出 ELISA 法用于 EHFV 抗原的检测比 IFA 法优越,适用于实验室对 EHFV 繁殖的监测,而检测 EHFV 抗原用于临床诊断则敏感性太低。     

逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附试验在诊断肾病综合征出血热中的价值

寻找一种快速、敏感、特异的诊断肾病综合征出血热 (HFRS)方法。方法　采用碘化钠 -异硫氰酸胍 -氯仿法抽提病毒核酸 ,逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测不同病程中 HFRS患者血清中的汉坦病毒感染情况 ,并采用间接酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测特异性 Ig M抗体。结果　 84.7%患者血清中汉坦病毒核酸检测为阳性 ,其中病程为 1周内者检出率为 10 0 % ,1～ 2周者为 6 0 % ,超过 2周者为 33.3% ,而特异性 Ig M的总检出率为 70 .0 5 % ,病程在 1周、1～ 2周、超过 2周者检出率分别为 6 4%、90 %、6 6 .6 %。结论　RT-PCR和 ELISA都是 HFRS的特异性诊断方法 ,两者可相互补充 ,提高诊断率     

应用酶联免疫吸附试验对猪囊尾蚴漂洗液抗原特性的初步测定分析

本文报道了以猪囊尾蚴漂洗和囊液粗制品作为抗原,用常规ELISA对经临床确诊的36例囊虫病人血清进行了检测,其阳性检出率分别为61.11％和69.44％(P>0.05)两者无显著性差异。对其中有疗程记录的28例病人ELISA结果分析发现,0～2疗程的19例病人,两种抗原的阳性率均为57.89％;而3疗程以上患者血清,漂洗液抗原阳性检出率为33.33％;囊液粗抗原则为88.89％,前者明显低于后者(P<0.05)据此,我们推测漂洗液抗原可能系活虫体分泌代谢产物,该抗原的ELISA结果可作为疗效考核的指标之一。     

快速MacELISA法检测流行性出血热特异性IgM抗体

作者在IgM抗体捕获酶联免疫吸附试验(IgM antibody—capture ELISA,MacELISA)检测流行性出血热(EHF)IgM抗体方法的基础上,通过提高反应温度,应用新的、稳定、无致癌性的底物—四甲基联苯胺(TMB),建立了快速MacELISA法。用快速法测原法阳性血清61例,阳性符合率100％,测原法阴性的肝炎病人血清20例及正常人血清10例,无1例阳性。改进后的方法与原法相比,具有快速、使用安全、结果稳定等优点。     

酶联免疫吸附测定检测儿童粪便幽门螺杆菌抗原

目的:探讨酶联免疫法检测粪便标本幽门螺杆菌抗原(HpSA)诊断儿童Hp感染的应用价值.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)检测2005年1月至2006年1月门诊、住院的86例患儿怀疑Hp感染的粪便标本,同时与临床试验(快速尿素酶试验、13C-呼气试验)进行比较评价.结果:以快速尿素酶试验、13C-尿素呼气试验联合检测阳性为Hp感染的临床诊断标准,HpSA试验诊断准确率90.7%.粪便抗原试验的敏感度为87.9%,特异度为95.2%,阳性预测值为96.7%,阴性预测值为83.3%.经配对资料x2检验,HpSA检测与联合检测结果差异无统计学意义(x2=0.8,P＞0.05,x0.052=3.84).HpSA试验与13C-尿素呼气试验检测结果差异无统计学意义(x2=0.36,P＞0.05),HpSA试验与快速尿素酶试验检测结果差异有统计学意义(x2=4.92,P＜0.05).结论:粪便标本HpSA试验诊断儿童幽门螺杆菌感染有较高的准确率、敏感度和特异度,为新的简便易行的非侵入性方法.     

酶联免疫吸附试验在梅毒患者检测中的应用价值

①目的　评价酶联免疫吸附试验 (ELISA)在梅毒患者血清学检测中的应用价值。②方法　对 78例梅毒患者和 2 0例系统性红斑狼疮患者血清分别进行苍白螺旋体血球凝集试验 (TPHA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验 (TP -ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST) ,对TRUST结果进行OD值分布分析 ,并对 2 0例梅毒患者进行治疗前后变化进行比较分析。③结果　 78例梅毒患者阳性率分别是 1 0 0 %、1 0 0 %、84.6 % ,TRUST阳性标本的TP -ELISAOD值 90 %以上 >1 .0 ,而TRUST阴性的标本其TP -ELISAOD值 90 %以上 <1 .0 ,治疗后TPUST滴度下降 1 7例 ,无变化 2例 ,升高 1例 ,其中有 5例经治疗后完全转为阴性 ,而ELISA测定结果治疗前后均为阳性。④结论　TP -ELISA的敏感性、特异性均优于TRUST ,与TPHA符合率高 ,是梅毒检测和筛查的一种良好方法。     

标本因素对酶联免疫吸附试验测定的影响

<正>酶联免疫吸附试验即ELISA,是一种常用的固相酶免疫测定方法。其广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素。     

酶联免疫吸附试验检测狂犬病病毒抗原研究及其应用

采用两株亲和力强、特异性高的狂犬病病毒抗体建立狂犬病病毒抗原酶联免疫吸附试验（EnzymelinkedimmunosorbentassayELISA）双抗体夹心法，经方阵试验选择出最佳包被抗体浓度为3mg／ml．酶标抗体为1：300.用本法测定432份送检犬唾液标本，检出阳性率为21％，该检测结果与用法国巴斯德试剂盒检测结果一致．表明用ELISA双抗夹心法除了同样具有高特异性和高重复性外，而且还不需要昂贵的荧光显微镜，甚至在无酶标议的情况下也可肉眼判断结果。方便、快速，适用于狂犬病的常规诊断和现场大样本的流行病学调查，有较高的推广、普及价值。     

流行性出血热IgM抗体实验室检测结果分析

目的 探讨IgM 抗体实验室检测结果对流行性出血热患者诊治和防治的意义。方法 选取我院2017年7月～2019年6月出血热患者180 例,对血清标本进行流行性出血热IgM 抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）,并对此试验的特异性、灵敏度、阴阳性预测值及有效率分析。结果 流行性出血热抗体阳性患者56 例,阳性率31.11%。此次研究ELISA 试验检测流行性出血热IGM 抗体的特异性、灵敏度、诊断有效率分别是99.17%、91.67%和96.67%。结论 酶联免疫吸附试验（ELISA）检测流行性出血热IgM 抗体,实验简单快速,灵敏度高,特异性较强,可为临床早期流行性出血热的诊断提供依据。     

流行性出血热103例临床分析

流行性出血热１０３例临床分析李艾云（惠民县城滨州地区中心医院，２５１７００）关键词流行性出血热；酶联ＳＰＡ试验；传染病１９８６年７月，我科收治流行性出血热病人３００余例，对其中１０３例进行了临床观察。根据临床体征，结合实验室检查，诊断符合率为９９．５...     

尿溶菌酶测定对流行性出血热临床意义的探讨

1　材料一般分光光度计 ( 72 1型即可 ) ;普通水浴箱 ;普通离心机 ;1%的染色小球菌 (一般细菌室均可制备 ) ;溶菌酶标准品 (上海禽蛋二厂生产 ) ;酸乳化剂 ,称取 10ｇ非离子表面活性剂溶于 50 0ｍｌ蒸馏水中 ,取此液 10ｍｌ加 0 .6ＮＨＣｌ至 2 0 0ｍｌ即可。2　方法研究对象 ,临床确诊的 2 0 0例ＥＨＦ患者 ,50例重感、上呼吸道感染等发热病人 ,ＥＨＦ之诊断标准按西安会议制订有关内容。原理 ,溶菌酶是一种低分子蛋白 ,分子量约 1450 0 ,由 12 9个氨基酸组成 ,其等电点为ｐＨ11,这种碱性等电点能与细菌牢固结合 ,并通过水解细菌细胞壁中的…     

酶联免疫吸附试验法测定抗结核菌抗原的IgG抗体在诊断肺结核中的意义

本以酶联免疫吸附试验法对痰菌阳性肺结核、痰阴性肺结核、矽肺合并活动性肺结核患和正常健康组血中抗结核菌抗原的IgG抗体进行测定。阳性率分别为94．4％、90．8％、89．5％和6％。结果表明，该抗体的测定对肺结核的诊断具有一定的临床意义。对矽肺和合并结核具有鉴别和诊断性的意义。     

流行性出血热患者尿膜胶体金免疫电镜研究

应用示踪顶扣包埋的肢体金免疫电镜技术对2例流行性出血热(EHF)患者屎膜病毒抗原进行了检测．结果2例均为阳性．尿膜中有核细胞胞浆内有特异性金颗粒存在，说明尿膜中存在流行性出血热病毒(EHFV)攻击的靶细胞。本文首次用肢体金免疫电镜对尿膜进行病毒抗原检测．为EHF的研究提供一个新的依据。     

应用酶联免疫吸附试验对青霉素过敏病人血中特异抗体的测定

本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对41例青霉素过敏病人进行血清抗青霉噻唑蛋白抗体的测定。同时,进行皮内试验和青霉素离子透入法的比较。41例病人中测出抗青霉噻唑蛋白特异IgE者26例。结果表明青霉噻唑蛋白与青霉素过敏休克之间有密切关系。因而,去除商品青霉素中青霉噻唑蛋白类杂质,对减少青霉素过敏反应是个重要环节。IgE是人血清中含量最少的一种免疫球蛋白。应用ELISA技术测定结果表明该方法是一种特异性高、敏感、简便易于掌握的较新技术。     

酶联免疫吸附试验异常结果分析及对策

酶联免疫吸附试验是免疫学中最常见的试验方法,操作简单,如在操作中不注意,会引起许多异常结果,如白板、显色弱和灵敏度低、灵敏度过高、板底高、高背景、假阳性等,针对存在的问题进行分析并提出解决的办法,那就是实验前检查试剂和室温平衡试剂、选择合适的防腐剂、质控品或标本按要求储存、检查滤光片、严格操作、注意洗板事项,只有按操作说明书严格操作,才能得到正确的结果。