P16基因家族在血液系统恶性肿瘤中的研究新进展

P16基因家族包括P16基因,P15基因和P18基因,是新近发现的新型抑癌基因,其缺失和突变与多种肿瘤的发生有密切的关系。在血液系统恶性肿瘤中,P16基因家族的失活主要发生在淋巴细胞来源的肿瘤,如急性淋巴细胞白血病(ALL)、非霍奇金恶性淋巴瘤(NHL)以及慢性粒细胞白血病(CML)急淋变等,失活的主要方式是基因纯合缺失。P16基因的失活在肿瘤的发生及发展中起有关键性作用,而P15及P18基因则协同P16发生作用。     

P16和P15蛋白、基因与肿瘤

P16／P15基因是近年来发现的重要抑癌基因，编码产物P16／P15能直接并特异地抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4／6的活性，阻止细胞异常增殖，防止癌变。多数肿瘤中已检测到P16／P15基因改变，对其深入研究将为肿瘤诊治提供新途径。     

聚合酶链反应检测肿瘤细胞P16基因缺失及其临床意义

目的：探讨P16基因缺失与肿瘤的关系。方法：用聚合酶链反应（PCR）技术，检测56例肝癌、25例白血病患的P16基因缺失情况。结果：56例肝癌患中有13例P16基因缺失，25例白血病患中有8例P16基因缺失，缺失率分别为23.2%、32.0%。结论：P16基因缺失与肿瘤的发生密切相关，检测P16基因缺失有助于肿瘤的辅助诊断。     

p16基因与细胞周期调节

p16基因是近年来被认识的抑癌基因，在细胞增殖调控途径中发挥重要作用。本文对P16基因蛋白构造及功能、p16基因参与的细胞周期调节途径以及P16基因变异与肿瘤的关系进行了综述。     

P16基因甲基化与淋巴细胞-浆细胞肿瘤的发生发展

基因启动子区CpG岛甲基化常导致基因沉默。P16基因是一定位于9p21的多种肿瘤抑制基因,通过pl6INK4A-cyclinD1-PRb通路维持机体细胞的有序增殖。P16基因甲基化在淋巴瘤、急性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤等多种淋巴细胞-浆细胞肿瘤中被检测到,并与疾病的发生、发展存在一定关系,应用甲基化抑制因子或砷剂去甲基化治疗,恢复基因功能可望成为血液恶性肿瘤治疗的一种新手段。本文就P16基因甲基化机制及P16基因甲基化与淋巴细胞-浆细胞肿瘤(淋巴瘤、急性和慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓病)的关系作一综述。     

p16基因与肾脏肿瘤

p16基因作为一种抑癌基因,其产物P16蛋白通过特异性抑制细胞周期依赖激酶（CDK4）阻止恶性肿瘤的发生。临床研究表明,p16基因与肾脏肿瘤的关系密切,对肾脏肿瘤的诊断及预后有着积极的意义。本文对p16基因与肾癌的关系进行综述如下。     

P16基因与人类血液系统肿瘤

P16基因是新近发现的一种肿瘤抑制基因,位于人类染色体9P21上,其表达产物P16蛋白系细胞周期依赖激酶4抑制剂(CDK4I)。现已表明,在人类多种组织类型的肿瘤中存在P16基因的缺失和突变,在人类血液系统恶性肿瘤中,尤以急性淋巴细胞白血病中P16基因的纯合子缺失常见。     

抑癌基因P16和Rb在肾癌中的表达和意义

为了探讨肾癌抑癌基因P16、Rb与临床病理及预后的关系,采用免疫组织化学S—P法对53例肾癌中P16、Rb进行检测。结果显示:53例肾癌P16表达的阳性率为37.73%,其阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期及预后均密切相关,差异有显著性(P<0.05),提示P16在抑制肾肿瘤的发生、发展中起重要作用,可以作为判定肾肿瘤恶性程度、自然病程及预后的客观指标。应用Rb基因蛋白抗体检测肾癌(S—P法),其阳性率为67.92%,说明肾癌与Rb基因活化有关。同时还发现RB蛋白表达与肾癌分级、分期及预后均无相关性(P>0.05),提示Rb蛋白表达在肾癌发生中并不起主导作用或只是多种因素之一。两种抑癌基因在肾癌中同时表达的阳性率为15.09%,说明癌基因之间有协同关系(P<0.025)。     

P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌发病机制中的研究

目的探讨P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法选取肺癌切除术NSCLC患者65例,收集NSCLC肿瘤组织标本、正常肺组织标本。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA,采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色法检测基因杂合性缺失,采用限制性内切酶法检测DNA甲基化,采用免疫组化法检测蛋白表达。结果NSCLC组织P16及FHIT基因杂合性缺失发生率为58.46%和70.77%,甲基化发生率为49.23%和66.15%,蛋白表达缺失率为67.69%和72.31%;正常肺组织未见P16及FHIT基因杂合性缺失、甲基化、蛋白表达缺失,差异有统计学意义(P0.05)。P16基因杂合性缺失及甲基化与P16蛋白表达缺失具有关联; FHIT基因杂合性缺失及甲基化与FHIT蛋白表达缺失具有关联(P0.05)。临床分期是P16蛋白表达缺失的独立影响因素;性别、吸烟史是FHIT蛋白表达缺失的独立影响因素(P0.05)。结论 P16及FHIT基因异常表达在NSCLC的发生发展中起重要作用,发病机制可能与P16及FHIT基因的杂合性缺失和甲基化导致的P16及FHIT蛋白表达缺失有关。     

大肠癌患者P16和Bcl-2基因蛋白对预后的评估价值

目的:探讨P16,Bcl-2基因在大肠癌发生、发展中的作用以及早期诊断、干预、减少大肠癌给患者带来的功能障碍及对患者预后的评估价值。方法:收集1999-01/2004-08锦州医学院附属第一医院肠镜活检组织归档蜡块100块,经病理证实为大肠癌78块及腺瘤22块,运用免疫组化技术检测大肠癌及腺瘤中P16和Bcl-2基因蛋白的表达。结果:P16基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为36%,77%;Bcl-2基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为62%,73%。P16基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异有显著性意义(P<0.001);Bcl-2基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异无显著性意义(P>0.05)。P16与Bcl-2基因蛋白表达在大肠癌中呈显著负相关,并与肿瘤分化程度、浆膜侵润、淋巴结转移有明显相关性,与年龄、性别、Dukes分期无相关性。结论:P16基因的失活与Bcl-2基因的过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用;对大肠癌及腺瘤患者早期进行P16,Bcl-2基因检测有助于大肠癌的诊断及预后评估。     

大肠癌患者P16和Bc-2基因蛋白对预后的评估价值

目的探讨P16,Bcl-2基因在大肠癌发生、发展中的作用以及早期诊断、干预、减少大肠癌给患者带来的功能障碍及对患者预后的评估价值.方法收集1999-01/2004-08锦州医学院附属第一医院肠镜活检组织归档蜡块100块,经病理证实为大肠癌78块及腺瘤22块,运用免疫组化技术检测大肠癌及腺瘤中P16和Bcl-2基因蛋白的表达.结果P16基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为36%,77%;Bcl-2基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为62%,73%.P16基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异有显著性意义(P＜0.001);Bcl-2基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异无显著性意义(P＞0.05).P16与Bcl-2基因蛋白表达在大肠癌中呈显著负相关,并与肿瘤分化程度、浆膜侵润、淋巴结转移有明显相关性,与年龄、性别、Dukes分期无相关性.结论P16基因的失活与Bcl-2基因的过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用;对大肠癌及腺瘤患者早期进行P16,Bcl-2基因检测有助于大肠癌的诊断及预后评估.     

胃间质瘤bcl-2、p16、p53及c-myc基因蛋白表达及其临床意义

目的：探讨胃间质瘤（gastric stromal tumor,GST)bcl-2、p16、p53、c-myc基因蛋白及其生物学行为之间的关系。方法：结合临床病理特征采用免疫组化S－P法对71例GST组织bcl-2、p16、p53及c-myc基因蛋白进行观测。结果：bcl-2、p16、p53、c-myc基因蛋白表达与GST良恶性和患者预后有关（P＜0．05），而与性别、年龄、肿瘤的出血、坏死无关（P＞0．05）。随着肿瘤恶性程度的增加，bcl－2基因蛋白阳性表达率及其强度增大增强，bcl-2基因蛋白表达与p53、c-myc基因呈正相关，而与p16基因呈负相关（P＜0．01）。结论：bcl-2、p16、p53、c-myc基因蛋白参与GST的发生发展，有助于判断GST恶性程度和预测其预后。     

食管癌组织中Neu基因蛋白和p16蛋白的表达及相互关系

目的 :研究Neu基因蛋白及p16蛋白在食管癌表达的相互关系及临床病理意义。方法 :应用免疫组化S P法检测 68例食管浸润性鳞癌中Neu基因蛋白及p16蛋白的表达。结果 :Neu基因蛋白过表达率均为 5 8 8( 40 /68) ,其过表达与肿瘤长度无关 ,而与肿瘤浸润深、分化差、淋巴结有转移呈正相关性 ,而与p16蛋白表达呈负相关。结论 :Neu基因蛋白过表达是食管癌分化差及易浸润、转移的重要指标 ,p16蛋白的失表达与Neu基因蛋白过表达在食管癌发生及转移过程中可能有协同作用     

P16，P21，P27基因在甲状腺乳头状腺癌中的表达

目的为了解P16，P21，P27基因在甲状腺乳头状癌中的表达状况及与淋巴结转移的关系。方法用多重PCR技术，免疫组化技术(SP)法对36例甲状腺乳头状腺癌细胞中的P16，P21，P27基因及其蛋白表达进行探测。结果36例甲状腺乳头状腺癌的P16基因纯合子缺失率33.3％(12／36)，未检出P21基因纯合子缺失，P16蛋白表达阴性占34.3％P21蛋白表达阴性占20．0％，P27蛋白表达阴性占51．2％．提示P16基因缺失与该瘤的病理分型，分级，淋巴结转移相关；P16，P27蛋白表达阴性与病理分级，淋巴结转移相关；P21蛋白阴性无特别相关，可能是其在不同肿瘤中的表达特点不同。结论P16，P21，P27基因在肿瘤发生，发展中有重要地位．     

APC、P16基因甲基化与肝细胞癌关系的Meta分析

目的应用Meta分析的方法评价APC基因和P16基因甲基化与肝细胞癌(HCC)的关系。方法检索1978～2011年在Medline、Pubmed等数据库及1994～2011年在中国知网和万方数据库收录的所有有关P16、APC基因甲基化与HCC病例对照研究文献,按纳入与排除标准筛选文献,并用RevMan 5.0软件进行统计分析。结果纳入国内外标准的16篇数据合并结果显示,APC基因甲基化病例组488例,对照组HCC患者肿瘤组织434例,其中HCC癌旁组织390例,非肿瘤肝病患者组织21例,健康人组织23例;HCC组与癌旁组织组合并的有效率的比值比(OR)=5.91,95%CI为4.20%～8.31%;HCC肿瘤组与正常组织组OR=35.19,95%CI:6.00%～206.33%。P16甲基化病例组HCC患者肿瘤组织400例,对照组共437例,其中HCC癌旁组织398例,非肿瘤肝病患者组织21例,健康人组织18例。HCC组与癌旁组织组的OR=5.69,95%CI:3.96%～8.19%,HCC肿瘤组与正常组织组OR=12.18,95%CI:2.56%～58.03%。结论 APC、P16基因的高甲基化导致了该基因的失活,与HCC的发生和发展有密切关系。     

WWOX抑癌基因与肿瘤

WWOX基因位于染色体16q23．3—24．1区域，并跨越了整个常见染色体脆性位点FRA16D。在普通型脆性位点FRA16D上的新基因WWOX已被认为是与多种肿瘤相关的抑癌基因，其DNA序列，mRNA、蛋白结构已基本清楚，其促凋亡的作用已经肯定，然而具体的作用机制存在着争议。WWOX基因的外显子丢失，杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）及蛋白表达异常在多种肿瘤中频发出现。     

大肠癌患者P16和Bcl-2基因蛋白对预后的评估价值

目的：探讨P16，Bcl-2基因在大肠癌发生、发展中的作用以及早期诊断、干预、减少大肠癌给患者带来的功能障碍及对患者预后的评估价值。方法：收集1999—01／2004—08锦州医学院附属第一医院肠镜活检组织归档蜡块100块，经病理证实为大肠癌78块及腺瘤22块，运用免疫组化技术检测大肠癌及腺瘤中P16和Bcl-2基因蛋白的表达。结果：P16基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为36％，77％；Bcl-2基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为62％，73％。P16基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异有显著性意义(P&;lt;0．001)；Bcl-2基因蛋白的表达在大肠癌及腺瘤中差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。P16与Bcl-2基因蛋白表达在大肠癌中呈显著负相关，并与肿瘤分化程度、浆膜侵润、淋巴结转移有明显相关性，与年龄、性别、Dukes分期无相关性。结论：P16基因的失活与Bcf-2基因的过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用；对大肠癌及腺瘤患者早期进行P16，Bcl-2基因检测有助于大肠癌的诊断及预后评估。     

肿瘤DNA含量与p53,p21,p16,Rb基因异常表达的肿瘤生物学特性

背景p53,Rb,p16和p21蛋白是肿瘤相关基因产物,其异常表达在细胞周期的不同阶段直接或间接影响着肿瘤的形成和发展,DNA倍体异常也是肿瘤细胞周期频发事件,而肿瘤细胞DNA倍体与P53,Rb,P16和P21蛋白异常表达关系间的研究鲜见报道.目的研究流式细胞仪(FCM)检测肿瘤组织DNA倍体与多种癌相关基因蛋白p53,Rb,p16和p21异常表达的意义.设计以诊断为依据设立对照的前瞻性研究.地点和对象实验地点江苏省肿瘤防治研究所,实验对象30例女性癌症患者,其中卵巢癌10例,乳腺癌20例,平均年龄55岁.干预对30例卵巢癌和乳腺癌瘤体中心灶进行3点取样,应用FCM检测DNA倍体及p53,Rb,p16和p21异常表达.主要观察指标肿瘤组织DNA倍体及p53,Rb,p16和p21蛋白阳性细胞百分率.结果瘤灶多点取样法可检测出90%(27/30)的异倍体;不同倍性的肿瘤普遍存在程度不同地p53,Rb,p21和p16基因蛋白异常表达.96.7%(29/30)的肿瘤存在至少一种以上癌相关基因(p53,Rb,p16,p21)异常表达.结论DNA异倍体与多种癌相关基因蛋白异常表达均是肿瘤恶性指标,FCM同步检测这些指标,为快速了解肿瘤细胞生物学特性、把握患者l临床治疗及预后提供了良好途径.     

细胞周期调控基因细胞周期素D1和P16与肺癌的生物学特性

背景:细胞周期素D1和P16通过调节周期素依赖性激酶4的活性而实现促进细胞增殖和抑制细胞分裂的作用。人类多种肿瘤中都存在不等的细胞周期素D1基因扩增或过表达,并伴随P16基因的高频率失活。目的:探讨细胞周期素D1基因的扩增和P16基因的缺失与肺癌的关系。设计:病理标本对照实验。单位:解放军第八一医院生化科。对象:肺癌标本40例均来源于1998-06/1999-06解放军第八一医院手术的肺癌患者,患者均知情同意,分别在肿瘤区及正常肺组织区取材。方法:采用多重聚合酶链反应方法,以提取的基因组DNA为模板,在同一反应管中同时扩增细胞周期素D1基因和P16基因。取10μL聚合酶链反应产物,在15g/L琼脂糖凝胶上电泳分析。主要观察指标:①肺癌患者病理组织中细胞周期素D1和P16的基因扩增结果。②细胞周期素D1和P16与肺癌生物学特性的关系。结果:①细胞周期素D1和P16扩增结果:肺癌细胞周期素D1扩增的阳性率为55%(22/40),P16阳性率为65%(26/40)。②细胞周期素D1和P16与肺癌生物学特性的关系:两者扩增的阳性率与淋巴结转移和临床病理分期密切相关,随转移的发生和病程的发展,细胞周期素D1扩增阳性率升高而P16阳性率下降。结论:细胞周期素D1的扩增和P16的缺失与肺癌细胞的高增殖活性密切相关。检测两种基因的变化,可有助于判断肺癌的转移、恶性度及评估预后。     

高危人乳头瘤病毒联合P16基因异常甲基化检测在早期宫颈癌及宫颈病变诊断中的临床价值

目的探讨和分析人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)联合P16基因异常甲基化检测在早期宫颈癌及宫颈病变的诊断中的临床价值。方法选取2017年2月至2019年2月在河南科技大学第一附属医院因宫颈病变进行宫颈脱落细胞检查或组织活检、子宫切除术的96例患者作为研究对象,根据宫颈脱落细胞学检查、活检标本及切除肿瘤病理学检查结果分为宫颈癌亚组(26例)、高度病变亚组(CINⅡ21例,CINⅢ17例)和低度病变亚组(CINⅠ32例),并按照随机数表法选取同期在本院门诊就诊的42例宫颈正常患者作为对照组。对各组进行高危HPV和P16基因异常甲基化检测,比较各组高危HPV及P16基因异常甲基化阳性率,比较和分析各组高危HPV病毒载量、P16蛋白表达量与宫颈病变程度的关系,并采用接受者操作特性曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)判定高危HPV、P16基因异常甲基化、高危HPV+P16基因异常甲基化对宫颈癌的临床诊断价值。结果宫颈癌亚组、高度病变亚组和低度病变组高危HPV和P16基因异常甲基化、高危HPV病毒载量、P16蛋白表达量的阳性率均明显高于对照组(P<0.01),且宫颈癌亚组上述指标明显高于高度病变亚组和低度病变组(P<0.05);高危HPV+P16基因异常甲基化检测的ROC曲线面积和约登指数明显高于单独高危HPV和P16基因异常甲基化检测指标。结论高危HPV联合P16基因异常甲基化检测能提高早期宫颈癌的诊断率。