α—粒子诱发BEP2D2细胞癌变系的DNA断裂重接修复缺陷与XRCCs修复基因mRNA表达研究

目的 研究α粒子诱发人支气管上皮细胞（BEP2D）癌变细胞系BERP35T－1和BERP35T－4的DNA断裂损伤修复能力，分析其DNA断裂修复基因XRCCs系列的mRNA表达。方法 脉冲电场凝胶电泳法检测DNA双链断裂，RT－PCR分析DNA修复基因的mRNA表达。结果 恶笥转化细胞系BERP35T－1和BERP35T－4受0－150Gy γ射线照射后修复4h的DNA断裂残留损伤显著高于亲本BEP2D细胞，mRNA表达分析显示修复基因XRCC2，XRCC3和Ku80(XRCC5)表达下调2.5-6.5倍，而BERP355－R细胞中DNA－PKcs(XRCC7)表达上调2．4倍。结论 α粒子诱发恶性转化细胞系的DNA链断裂修复机理缺陷，其中部分原因是DNA修复基因的表达抑制。DNA修复缺陷将导致细胞基因组不稳定性，α粒子诱发细胞恶性转化机理可能与此相关。     

α粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D癌变克隆的细胞遗传学分析

目的 :分析α_粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化细胞克隆的核型 ,探讨辐射致癌的细胞遗传学变化规律。方法 :1.5Gyα粒子照射BEP2D细胞恶性转化后进行亚克隆 ,用G带显示法分析亚克隆细胞核型。结果 :分析了 5个恶性转化亚克隆细胞 (BERP35T_1,_2 ,_4 ,_5 ,_6 ) ,基本核型与亲本细胞BEP2D相近 ,但有着明显的染色体缺失差异。BERP35T癌变细胞系缺失 1条 13号染色体和Y染色体 ;1条 2号染色体的长臂增加 ;缺失正常的12号染色体 ,出现 1条长臂增加的 12号染色体。此外 ,2株癌变细胞 (BERP35T_2和BERP35T_4 )多倍体高达 4 0 % ,明显高于BEP2D细胞。结论 :染色体缺失 (尤其是 13号染色体缺失 )是辐射致癌的一个显著遗传学特点 ,2号和 12号染色体长臂增加可能导致某些肿瘤相关基因的扩增或激活 ,促进细胞的恶性转化。     

α粒子诱发癌变细胞的纺锤体损伤凋亡机理研究

目的　从纺锤体损伤诱导的凋亡反应 ,探讨α粒子诱发癌变细胞的遗传不稳定性机理。方法　用噻氨酯哒唑破坏纺锤体微管蛋白诱发细胞凋亡 ,Giemsa染色以及 3种荧光染料 (FDA、Hoechster 332 5 8和PI )复合染色检测凋亡 ;松胞素B阻止细胞分裂 ,分析凋亡与细胞周期时相的关系。结果　 0 3μg ml噻氨酯哒唑作用 6～ 4 8h ,癌变细胞BERP35T1和BERP35T4的凋亡发生率要显著低于正常BEP2D细胞 2～ 2 5倍 (P <0 0 1) ,而且正常细胞的凋亡主要是发生在细胞有丝分裂前 ,癌变细胞特别是BERP35T4细胞 ,有近 5 0 %的凋亡是发生在有丝分裂之后。结论　纺锤体损伤后凋亡机理异常 ,将导致非整倍体或多倍体的子代细胞增多 ,加剧α粒子照射细胞的遗传不稳定性。     

α-粒子诱发BEP2D细胞癌变系的DNA断裂重接修复缺陷与XRCCs修复基因mRNA表达研究

目的 研究α粒子诱发人支气管上皮细胞(BEP2D)癌变细胞系BERP35T-1和BERP35T-4的DNA断裂损伤修复能力,分析其DNA断裂修复基因XRCCs系列的mRNA表达。方法 脉冲电场凝胶电泳法检测DNA双链断裂,RT-PCR分析DNA修复基因的mRNA表达。结果 恶性转化细胞系BERP35T-1和BERP35T-4受0～150Gyγ射线照射后修复4h的DNA断裂残留损伤显着高于亲本BEP2D细胞,mRNA表达分析显示修复基因XRCC2、XRCC3和Ku80(XRCC5)表达下调2.5～6.5倍,而BERP35T4细胞中DNAPKcs(XRCC7)表达上调2.4倍。结论 α粒子诱发恶性转化细胞系的DNA链断裂修复机理缺陷,其中部分原因是DNA修复基因的表达抑制。DNA修复缺陷将导致细胞基因组不稳定性,α粒子诱发细胞恶性转化机理可能与此相关。     

α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化中脂质和DNA氧化损伤的研究

目的 探讨α粒子诱发永生化人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化的机制.方法 运用DCFH-DA荧光探针标记活性氧(ROS),观察分析BEP2D细胞、α粒子作用BEP2D后第22代细胞RH22,以及α粒子作用BEP2D后恶性转化细胞株BERP35T-１内基础活性氧水平.丙二醛(MDA)测定试剂盒检测BEP2D、RH22和BERP35T-1细胞内脂质过氧化产物丙二醛的含量.采用免疫细胞化学法和免疫荧光染色法,检测BEP2D、α粒子作用BEP2D后第23代细胞RH23及BERP35T-1细胞内DNA氧化损伤产物8-OH-dG和DNA双链断裂产物γ-H2AX的表达水平.结果 与BEP2D细胞相比,RH22和BERP35T-1细胞中基础活性氧水平显著升高(t=4.30和3.94,P＜0.05),丙二醛的含量显著升高(t=4.89和15.10,P＜0.05);RH23和BERP35T-1细胞中8-OH-dG表达上调(t=3.80和2.92,P＜0.05),γ-H2AX表达上调(t=7.61和12.67,P＜0.05).结论 氧化还原环境紊乱形成氧化压力,导致细胞内脂质和DNA氧化损伤增强,由此促进基因组不稳定性,可能是α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化的机制之一.     

荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建及其特征

目的 探讨荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建方法及其特征.方法 10只裸鼠随机分为2组,实验组(n=5)腹腔注射人外周血T淋巴细胞(HuPBTL)并皮下接种人胃癌细胞,对照组(n=5)仅皮下接种人胃癌细胞.观察肿瘤潜伏期、成瘤率和肿瘤体积,流式细胞仪检测裸鼠外周血中人T细胞,MTT法检测实验组鼠脾T细胞体外杀伤作用.皮下瘤行病理组织学检查.结果 两组肿瘤潜伏期无统计学差异(P＞0.05),成瘤率均为100%.第3周末,两组肿瘤体积相比无统计学差异(P＞0.05);实验组鼠外周血中人CD3 、CD4 和CD8 T细胞分别为46.86%±9.14%、31.68%±10.17%和17.91%±1.38%,而对照组鼠外周血中则无人T细胞;当效靶比为20∶1和40∶1时,实验组鼠脾T细胞的特异性杀伤率分别为15.37%±1.58%和19.86%±2.86%,且随着效靶比增高而增强(P＜0.05).两组荷瘤鼠均无肝、肺转移;胃癌细胞保持亲代细胞的形态学特征.结论 采用腹腔注射HuPBTL和皮下接种人胃癌细胞的方法成功构建了人胃癌-HuPBTL-裸鼠模型,能模拟具有一定细胞免疫功能的胃癌患者的荷瘤状态.     

^125I粒子植入治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 探讨^125I粒子植入对荷人肝癌裸鼠移植瘤生长和细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响。方法 建立12只荷人肝癌BEL-7402裸鼠模型，治疗组和对照组各6只。治疗组每只裸鼠移植瘤内植入1枚活度为33．3MBq的^125I粒子，对照组不进行干预。治疗后每3～4d测量1次肿瘤直径，并计算治疗组肿瘤的体积抑制率。21d后处死裸鼠，制作肿瘤组织标本，进行常规病理学检查和免疫组织化学检测增殖细胞核抗原（PCNA）、bcl-2和bax的表达。结果 ^125I粒子治疗组肿瘤体积最大抑制率为49．2％，病理检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死，远离粒子处可见存活肿瘤细胞。免疫组织化学显示治疗组PCNA表达强度和bcl-2／bax比值均低于对照组。结论 ^125I粒子植入低剂量持续照射可直接杀死荷瘤鼠肝癌细胞或抑制肿瘤生长。     

125Ⅰ粒子植入治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的探讨125Ⅰ粒子植入对荷人肝癌裸鼠移植瘤生长和细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响.方法建立12只荷人肝癌BEL-7402裸鼠模型,治疗组和对照组各6只.治疗组每只裸鼠移植瘤内植入1枚活度为33.3 MBq的125Ⅰ粒子,对照组不进行干预.治疗后每3～4 d测量1次肿瘤直径,并计算治疗组肿瘤的体积抑制率.21 d后处死裸鼠,制作肿瘤组织标本,进行常规病理学检查和免疫组织化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2和bax的表达.结果125Ⅰ粒子治疗组肿瘤体积最大抑制率为49.2%,病理检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死,远离粒子处可见存活肿瘤细胞.免疫组织化学显示治疗组PCNA表达强度和bcl-2/bax比值均低于对照组.结论125Ⅰ粒子植入低剂量持续照射可直接杀死荷瘤鼠肝癌细胞或抑制肿瘤生长.     

α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化中抗氧化能力和辐射敏感性研究

目的 研究α粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化中细胞的抗氧化能力和辐射敏感性变化.方法 运用谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)试剂盒分别检测永生化人支气管上皮细胞BEP2D、α粒子作用BEP2D后第21代细胞RH21和α粒子作用BEP2D细胞后形成的恶性转化细胞BERP35T-1内抗氧化酶GPX和CAT的活性以及抗氧化剂GSH的含量;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测0、30、60、90、120和150 μmol/L H2O2作用BEP2D、RH21和BERP35T-1细胞96 h后,细胞增殖率的差异;0、2、4和8 Gy γ射线照射BEP2D、RH21和BERP35T-1细胞7～9 d后,用细胞克隆计数和MTT法检测细胞增殖率和存活分数的变化.结果 RH21和BERP35T-1细胞中GPX酶活力均低于BEP2D细胞(t=5.75和7.65,P＜0.05).BEP2D细胞中CAT酶活力是RH21细胞的2.64倍,是BERP35T-1细胞的5.76倍.RH21细胞中GSH含量与BEP2D细胞比较,差异无统计学意义;恶性转化细胞BERP35T-1内GSH含量则明显低于BEP2D细胞(t=7.76,P＜0.05).与BEP2D细胞相比,60、90、120和150 μmol/L H2O2作用后RH21细胞的增殖率降低(t=29.90～84.68,P＜0.01),30、60、90、120和150 μmol/L H2O2作用后BERP35T-1细胞的增殖率降低(t=10.37～58.36,P＜0.01).4和8 Gy γ射线照射后,RH21细胞的增殖率和存活分数均显著低于BEP2D细胞(t=6.33～45.00,P＜0.05);2、4和8 Gy γ射线照射后,BERP35T-1细胞的增殖率和存活分数较BEP2D细胞明显降低(t=5.87～34.17,P＜0.05).结论 α粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化过程中,细胞的抗氧化能力降低、辐射敏感性增强.抗氧化系统功能减弱可能是α粒子诱发BEP2D细胞恶性转化和辐射敏感性增强的机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the antioxidant ability and radiosensitivity in the malignant transformed human bronchial epithelial cell line BEP2D induced by α-particle exposure.Methods Glutathione Peroxidase (GPX),Catalase (CAT) and Glutathione (GSH) assay kits were employed to detect GPX and CAT enzyme abilities and the levels of GSH in BEP2D,RH21 ( passage 21 of α-particle-irradiated BEP2D cells),and BERP35T-1 cells (derived from nude mice bearing malignant transformed cells generated from cells of passage 35 of α-particle-irradiated BEP2D cells).MTT assay were used to test the growth rate of BEP2D,RH21 and BERP35T-1 cells treated with 0,30,60,90,120,and 150 μmoL/L H2O2.Colony-forming test and MTT assay were used to examine the cell survival fraction and the growth rate of BEP2D,RH21 and BERP35T-1 cells exposed to 0,2,4,and 8 Gy of γ-rays,respectively.Results GPX and CAT enzyme activities in RH21 and BERP35T-1 cells were obviously lower than in BEP2D( t = 5.75-67.92 ,P ＜ 0.05 ).CAT enzyme activity in BERP35T-1 was lower than that in RH21 cells (t =22.25 ,P ＜0.01 ).Compared to BEP2D cells,decreased level of GSH was detected in BERP35T-1 cells(t = 7.76,P ＜ 0.05 ),but there was no change in RH21.After treatment with 30,60,90,120,and 150 μmol/L H2O2,the growth rates of BEP2D were all higher than those of BERP35T-1 cells(t = 10.37-58.36,P ＜0.01 ).Meanwhile,the growth rates of BEP2D were all higher than those of RH21 cells after treatment with 60,90,120,and 150 μ mol/L H2O2 (t = 29.90-84.68,P ＜ 0.01 ).In addition,compared to BEP2D cells,decreased cell survival fraction and growth rate of BERP35T-1 cells were observed after irradiation with 2,4,and 8 Gy of y-rays ( t = 5.87-34.17,P ＜ 0.05 ).The cell survival fraction and growth rate of RH21 were all lower than those of BEP2D cells at 4 and 8 Gy post-irradition( t =6.33- 45.00,P ＜ 0.05 ).Conclusion The function of antioxidant system decreased in the α-particleinduced transformed cells,which could contribute to the acceleration of cellular malignant transforming process and radiosensitivity.     

125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的有效性研究

目的 探讨125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其作用机制.方法 人胰腺癌SW1990细胞株接种于BABL/c裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,成瘤后取瘤块接种,6周后成瘤8～10 mm.共16只成瘤大小合适的裸鼠用于实验,分别植入125I粒子(8只)和空载粒子(8只).粒子植入后,每4天测量肿瘤的长径和短径并称裸鼠体重,裸鼠处死后称量瘤体重.瘤体标本行组织病理学检查、末端脱氧核苷酸转移酶-生物素dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞及免疫组化染色检测增殖细胞核抗原.结果 125I 粒子治疗组肿瘤体积增长缓慢,而对照组肿瘤体积增长迅速.实验组和对照组瘤体重分别约(2.68±0.70)g和(4.68±1.45)g,两者的差异有统计学意义(P=0.021);抑瘤率约42.66%.粒子植入前、后实验组和对照组问裸鼠体重对比差异无统计学意义(P>0.05).治疗组肿瘤细胞坏死明显,而对照组肿瘤细胞无明显或仅有少许坏死.TUENL法检查发现实验组和对照组的凋亡指数分别为(23.2±1.9)%和(8.1±1.5)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01).免疫组化染色发现:实验组及对照组增殖细胞核抗原(PCNA)阳性染色指数分别为(49.8±1.8)%和(82.2±2.4)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01).裸鼠心、肝、肺、肾及脾脏等组织无明显放射性炎症表现.结论 125I 粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤是有效的,其作用机制包括:直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡及降低细胞增殖,并且 125I 粒子植入瘤体内对周围脏器是安全的.     

TGF-β1在人支气管上皮细胞恶性转化中的作用

目的　研究人支气管上皮细胞恶性转化过程中 ,TGF β1表达水平的变化及其对细胞生长、增殖的影响 ,为进一步研究辐射诱发肿瘤发生的机理奠定基础。方法　在 2 4孔板中按 5× 10 4细胞 /孔分别接种对数生长期的BEP2D及BERP35T 2细胞 ,用一定浓度的TGF β1处理 ,计数 ,绘制细胞生长曲线 ,同时于光镜下观察细胞形态及生长状况。用westernblot方法检测胞浆内及分泌到培养液中的TGF - β1的丰度。 结果　两种细胞胞浆内的TGF β1表达水平无明显差异 ,但BERP35T 2细胞分泌到培养液中的TGF β1丰度约为BEP2D细胞的 5倍。TGF β1对两种细胞的生长均有抑制作用。在相同的浓度下 ,TGF β1对BERP35T 2细胞的生长抑制作用较BEP2D细胞弱。 结论　在辐射诱发人支气管上皮细胞恶性转化过程中TGF β1对其生长抑制作用减弱。     

HIF-1α基因沉默对A549肺癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰技术致HIF-1α基因沉默对裸鼠肺癌种植瘤放射敏感性的影响。方法 采用以慢病毒为载体的RNA干扰技术获得HIF-1α基因沉默的A549肺癌细胞株,用Western blot方法检测HIF-1α蛋白的表达。将A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞接种于4～6周BALB/C雄性裸小鼠,观察肿瘤生长情况。肿瘤体积达200～350 mm³时分别给予局部单次5、10、15和20 Gy X射线照射,观察对照组和照射组肿瘤体积和肿瘤生长延缓时间。结果 在常氧和乏氧状态下,A549/HIF-1α(-)细胞HIF-1α蛋白表达水平均显著下降,A549/HIF-1α(-)组裸鼠成瘤潜伏期较长,肿瘤生长慢于A549组(P<0.05),X射线照射对两种裸鼠种植瘤的生长均有抑制作用,但A549/HIF-1α(-)组肿瘤生长延缓显著。结论 RNA干扰技术能稳定阻断人肺腺癌A549细胞HIF-1α表达,HIF-1α基因沉默的肿瘤细胞对X射线照射更敏感。     

57kD蛋白在肺癌的表达与临床病理特征的关系

５７ｋＤ蛋白在肺癌的表达与临床病理特征的关系１００７００北京北京军区总医院姚建民杨晓玲成杞润贾清仁郭山春王向东何丽娟关键词肺肿瘤；抗原，肿瘤；免疫组织化学中国图书资料分类号Ｒ７３４．２５７ｋＤ蛋白是用酶解法从人肺鳞癌细胞分离纯化出来的不含糖的膜蛋白〔...     

HIF-1α基因沉默对人肺癌放射敏感性及移植瘤生长的影响

目的 探讨HIF-1α基因沉默对A549肺癌细胞放射敏感性及裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用克隆形成实验,评价A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞对X射线的敏感性。将A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞接种于BALB/C雄性裸小鼠,观察肿瘤生长情况。免疫组织化学法检测肿瘤内HIF-1α蛋白的表达及瘤内微血管密度。结果 HIF-1α基因沉默在常氧条件下放射增敏比 (SER) 为1.06,乏氧条件下为1.65。A549/HIF-1α(-)组移植瘤体积明显小于A549组,A549/HIF-1α(-)组肿瘤细胞HIF-1α蛋白表达显著下降, A549组肿瘤微血管密度为19.83±4.09,而A549/HIF-1α(-)组为11.61±3.04(F=15.57,P<0.05)。结论 HIF-1α基因沉默可以逆转乏氧诱导的A549肺癌细胞对X射线敏感性的降低,并延缓裸鼠移植瘤的生长,使HIF-1α蛋白表达下降和血管生成减少。     

体内连续筛选法建立人原发性小肠恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型

目的 采用人原发性小肠恶性淋巴瘤肝转移灶建立人小肠恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型,为探讨小肠恶性淋巴瘤肝转移机制提供动物模型.方法 将人小肠恶性淋巴瘤肝转移灶的新鲜组织块植入裸鼠小肠黏膜层内,成瘤后的肝转移灶移植至另一裸鼠小肠黏膜层内,在裸鼠体内重复进行4次肝转移筛选,取肝转移灶再进行裸鼠小肠移植.观察原位移植成瘤率,移植瘤的侵袭和肝转移率,进行形态学(光镜、电镜、免疫组织化学)、染色体核型和流式细胞分析.结果 由小肠恶性淋巴瘤肝转移灶成功建成人原发性小肠恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型(命名为HSIL-0402).该移植瘤组织病理学分型为非霍奇金淋巴瘤(弥漫型大细胞淋巴瘤,B细胞性).免疫组织化学显示CD19、CD20、CD45、CD79a阳性,CD3、CD7阴性.染色体众数56～69条,流式细胞DNA指数(DI)值1.61±0.37,均为异倍体.HSIL-0402已经传至27代,共移植裸鼠156只,肿瘤的移植生长率、肝转移率和液氮冻存复苏成活率均为100%.淋巴结转移率为67.4%,腹腔种植转移率为61.7%.人小肠恶性淋巴瘤在裸鼠小肠内自主侵袭性生长,并发生血液转移、淋巴转移和腹腔内种植性转移.结论 首次成功地建立了人小肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植自发性肝转移模型HSIL-0402,为研究小肠恶性淋巴瘤肝转移生物学机制和抗转移治疗提供动物模型.     

裸鼠肺癌原位模型的建立及螺旋CT、近红外荧光成像评价

目的利用A549细胞系建立原位肺癌的动物模型,并采用螺旋CT扫描和近红外荧光成像评价胸内肿物生长情况。方法将A549细胞悬液(5×106 ml-1)接种于20只裸鼠胸腔内,分别于接种后第7天、14天、21天,连续3周对荷瘤裸鼠行螺旋CT检查,动态观察胸内肿瘤生长情况,主要观察裸鼠的生存时间、体重变化及胸腔内肿瘤浸润和转移情况,并对裸鼠进行解剖后行近红外荧光成像和病理切片检查。结果本次A549细胞的造模成功率为90%,中位生存期为30.7(20~41)天。荷瘤裸鼠胸内肿瘤转移发生率100%。经螺旋CT扫描肿瘤显示率100%,CT上测得平均肿瘤直径随时间逐步递增,而近红外荧光成像对胸腔内肿瘤显示率为零。结论 A549细胞接种于裸鼠肺部所建立的肺癌原位模型简单,成功率高;采用螺旋CT扫描能动态直观评价裸鼠胸内肿物生长情况,近红外荧光成像对胸腔内肿瘤显示能力有限。     

喉和鼻咽鳞状细胞癌整合素αvβ3放射性核素显像实验研究

目的 研究99Tcm标记的聚乙二醇(PEG)4修饰的环状RGD二聚体(99Tcm-3P-RGD2)显像用于检测人喉和鼻咽鳞状细胞癌(简称鳞癌)整合素αvβ3表达的可靠性.方法 对荷人HEP-2喉鳞癌、荷人CNE-1鼻咽鳞癌裸鼠各6只进行99Tcm-3P-RGD2平面显像,采用勾画ROI技术计算T/NT.显像结束后,测量99Tcm-3P-RGD2在荷瘤鼠体内的放射性分布,计算肿瘤与各组织器官的％ID/g.取肿瘤组织,行整合素αvβ3免疫组织化学染色,并参照Fromowitz法进行半定量分析.两组间比较采用独立样本t检验,相关性分析采用线性相关法.结果 荷HEP-2、CNE-1裸鼠2h显像时T/NT 分别为2.08±0.04与1.54±0.10.体内放射性分布示:HEP-2肿瘤2h放射性摄取值为(4.56±0.67)％ID/g,肿瘤与血液、肌肉的T/NT分别为6.37±0.68与4.44±0.42;CNE-1肿瘤2h放射性摄取值为(1.69 ±0.18) ％ID/g,肿瘤与血液、肌肉的T/NT分别为2.49±0.09与1.86±0.07.HEP-2、CNE-1肿瘤αvβ3免疫组织化学染色Fromowitz评分分别为4.97±0.37与2.60±0.36.荷HEP-2裸鼠2h显像时T/NT、％ID/g及免疫组织化学染色Fromowitz评分均显著高于荷CNE-1裸鼠(t值分别为11.83、7.17和11.31,P均＜0.05).2种荷瘤鼠2h显像时T/NT与免疫组织化学染色Fromowitz评分的相关性均较好(HEP-2:r2h =0.97,P＜0.05;CNE-1:r'2h =0.97,P＜0.05).结论 99Tcm-3P-RGD2显像有望成为检测喉和鼻咽鳞癌αvβ3表达的无创和有效方法.     

人原发性结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植高转移模型的建立

目的建立人结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植高转移模型,并探讨其生物学特性.方法将人原发性结直肠恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶术中新鲜瘤组织块植入裸小鼠结直肠黏膜层内,观察原位移植成瘤率、移植瘤的侵袭和转移率,并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、染色体核型和流式细胞术分析.结果依据WHO新的恶性淋巴瘤分类法,从4例结直肠淋巴瘤标本中筛选出1株人结肠（非霍奇金B细胞）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HCBL-0301）和1株人直肠（非霍奇金B细胞）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型（HRBL-0302）.移植瘤组织病理学均为非霍奇金（大B细胞性）高度恶性淋巴瘤,免疫组织化学示CD19、CD20、CD22、CD45阳性,CD3、CD7阴性.染色体众数范围55～69条.流式细胞术示DI值1.59～1.71,均为异倍体.HCBL-0301和HRBL-0302分别传至31代和27代,共移植裸鼠326只;自第3代起肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.HCBL-0301多转移肝右叶,转移率为100%,淋巴结转移率和腹腔种植转移率为67.4%;HRBL-0302多转移左右肝叶,转移率为63.7%,淋巴结转移率及腹腔种植转移率为56.4%.人结直肠恶性淋巴瘤在裸鼠结直肠内自主侵袭性生长,并发生血液转移、淋巴转移和腹腔内种植性转移.结论首次成功地建立人结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植瘤模型HCBL-0301和HRBL-0302,并具有自发性高转移特点,可用于结直肠恶性淋巴瘤的基础及实验治疗研究.     

脂氧素A4对缺氧状态下人肝癌细胞增殖的影响

目的探讨缺氧环境下脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对肝癌细胞增殖的影响。方法采用小鼠肝癌细胞H22接种构建小鼠肝癌皮下移植瘤模型,观察LXA4对肿瘤生长的影响。采用免疫组织化学法检测细胞增殖核抗原Ki67和缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF1α)表达。四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖水平。结果在接种肝癌细胞H22的7～15 d,小鼠皮下可见清晰肿瘤包块生长;在各相应时间点,给予LXA4的小鼠肿瘤体积均明显缩小(P<0.05),同时明显降低了肿瘤组织内部Ki-67和HIF-1α表达。体外培养发现200 nmol/L LXA4可明显抑制缺氧条件下人肝癌细胞HepG2的增殖。结论LXA4能抑制缺氧条件下肝癌细胞的增殖。     

α粒子辐射诱发人支气管上皮BEP2D细胞癌变的snoRNA鉴定及靶标预测

目的 识别鉴定α粒子辐射致人支气管上皮BEP2D细胞癌变中的差异表达核仁小分子RNA（snoRNA）,预测其靶标基因及RNA共表达网络。方法 通过全基因组转录组微阵列芯片对人支气管上皮细胞BEP2D及由其衍生的α粒子诱发癌变的BERP35T-4细胞的RNA差异表达谱分析,从中筛选出差异表达的snoRNA,qRT-PCR验证包括其衍生sdRNA在内的表达变化,通过生物信息学分析snoRNA的功能区,预测靶标和共表达网络。结果 qRT-PCR验证结果与芯片结果一致,sno116家族在BERP35T-4中表达下降,是BEP2D的0.105%,差异有统计学意义（t=26.60,P<0.01）;筛选的sno116-14等在癌变细胞BERP35T-4及人肺癌细胞A549和H1299等中表达量普遍下调,并且还发现sno116-14衍生的sdRNA的表达量在同一细胞中差异显著,建立了sno116家族的mRNA-lncRNA共表达网络,预测靶标有ZNF280D、TFDP1、CCDC28B、RPS6KA3、CANX、RUNX1、KALRN等,功能上与细胞增殖、细胞骨架结构等相关。结论 识别鉴定了α粒子辐射致细胞癌变相关差异表达snoRNA,预测sno116-14的靶标基因参与细胞增殖、细胞骨架结构等生物学过程和功能调控信号通路,为C/D box snoRNA发挥功能的作用方式及电离辐射致癌机制提供了新的信息。