全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究

目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性分析

目的研究我院住院患儿分离产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的基因型及其相关耐药性分析。方法收集2004年10月-2005年10月我院住院患儿呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌75株，肺炎克雷伯菌45株，PCR限制性片段长度多态性（RFLP）分析及PCR产物克隆测序等方法明确ESBLs基因型，并结合体外抗生素敏感试验研究基因分型与细菌对不同头孢菌素及氨曲南的敏感性的关系。结果上述120株细菌中112株（93．3％）产CTX—M型p内酰胺酶；未能扩增出SHV型、TEM型ESBL基因。CTX—M型基因亚型主要为CTX—M9簇中的CTX—M-14型（78、6％），其次为CTX—M-1簇中的CTX—M-3型（19．6％），仅有1．8％为CTX—M-8型；携带CTX-M-1簇的菌株对头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦、阿莫西林-克拉维酸、头孢吡肟及氨曲南的耐药率均明显高于CTX—M-9型。结论CTX—M基因型为武汉地区儿童分离大肠埃希菌以及肺炎克雷伯菌中最常见的ESBLs，CTX—M-14为最常见基因型，其次为CTX—M-3型；CTX—M-9簇及CTX-M-1簇对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦和氨曲南的水解能力差异明显。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因型及流行病学分析

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产质粒型AmpC酶株的比率、酶的基因型及其流行病学状况。方法收集本院、福建省立医院两家医院2004年9月至2005年3月的67株耐头孢西丁不重复大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，用酶提取物三维试验检测高产AmpC酶；抽提高产AmpC酶株质粒，用PCR及产物序列分析确定质粒AmpC酶和13内酰胺酶的基因型；质粒转化试验定位耐药基因；ERIC-PCR指纹图确定产酶株间的同源关系。结果福州两家医院耐头孢西丁菌中产质粒型AmpC酶的发生率，大肠埃希菌分别为16．7％和10．5％，肺炎克雷伯菌则分别为8．0％和0。2株肺炎克雷伯菌产DHA-1型、4株大肠埃希菌产CMY-2型、1株大肠埃希菌产CMY-22型质粒AmpC酶；5株产CMY型AmpC酶的大肠埃希菌还分别同时产CTX—M-14、CTX—M-27、TEM-144和TEM-1型13内酰胺酶。7株菌中，1株肺炎克雷伯菌和3株大肠埃希菌可将头孢西丁耐药性转移给受体菌。7株产酶菌ERIC—PCR指纹图显示，2株肺炎克雷伯菌来自相同克隆，其余菌株来自不同克隆。结论福州地区发现产DHA-1型AmpC酶肺炎克雷伯菌和产CMY-2型及CMY-22型AmpC酶大肠埃希菌。CMY-22型AmpC酶和TEM-144型13内酰胺酶是国内外首次报道，GenBank登录号为DQ256079和DQ2560S0。     

运用变性高效液相色谱快速检测CTX-M超广谱β内酰胺酶基因型

目的应用变性高效液相色谱（DHPLC）技术对确认产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株CTX-M型质粒酶进行基因分型，探讨其灵敏度和特异度，以建立快速检测CTX-M型ESBLs的新方法。方法采用PCR技术从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出CTX—M型质粒的编码序列，用DHPLC技术对扩增产物进行分析和DNA测序，确定其基因突变的类型，通过比对两者结果后确定其基因型。结果从34株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出35份CTX-M型ESBLs编码序列（其中1株同时扩增到2份CTX—M型编码序列）。11份与标准菌株CTX—M-3一致；4份与标准菌株CTX—M-9一致；测序确定分别为CTX—M-3型和CTX—M-9型；20份表现为3种形态各异的异常洗脱峰，测序结果表明20份样本与其标准株对比均存在着基因突变，DHPLC中异常峰一致的样本均为同-基因亚型。结论DH—PLC可用于ESBLs基因分型的检测，能快速检测CTX—M的基因型，具有准确性高、简便快捷、经济等特点，有很大的临床应用价值。     

肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶及AmpC酶分析研究

目的：研究目前我国肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)及质粒介导AmpC酶产生情况。方法：以美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐纸片扩散法确证试验检测肺炎克雷伯菌产ESBLs情况。以三维试验检测其产质粒介导AmpC酶情况。等电聚焦电泳测定所产粗酶的等电点。聚合酶链反应(PCR)检测β内酰胺酶亚型。DNA序列测定判断质粒介导AmpC酶的种类。结果：检出产ESBLs肺炎克雷伯菌37株，检出率17．5％(37／212)。三维试验检测出产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌2株，检出率0．9％(2／212)，此2株菌均同时产ESBLs。在所产ESBLs中，CTX—M型占83．8％(31／37)，其中CTX-M-1组占54．1％(20／37)，Toho-2组占29．7％(11／37)，CTX-M-1组：Toho-2组为1．8：1；SHV型占24．3％(9／37)。DNA测序结果，1株肺炎克雷伯菌所产质粒介导AmpC酶为DHA-1。结论：①肺炎克雷伯菌中ESBLs以CTX-M型为主。②在肺炎克雷伯菌中发现1株质粒介导AmpC酶为DHA-1。     

产超广谱β内酰胺酶49株细菌耐药基因调查

目的 了解49株产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）细菌的耐药基因。方法 采用纸片扩散法检测产ESBLs细菌，通过基因扩增、序列分析、脉冲场凝胶电泳技术研究ESBLs基因型以及产ESBLs细菌同源性。结果 产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌流行率自2000年的20％，增长至2003年的40％。49株产ESBLs细菌中，以CTX-M-14（n=33）亚型最常见，其他亚型包括CTX-M-3、CTX-M-9、CTX-M-12、CTX-M-15、CTX-M-24、SHV-5a，1株细菌同时产CTX—M-3、CTX—M-14两种CTX-M型ESBLs；4株表型确证试验阳性细菌未能分型。除2株大肠埃希菌、2株肺炎克雷伯菌有亲缘性外，其他菌株间无同源性。结论 产ESBLs细菌分离率逐年增高，以CTX—M型酶为主。PFGE试验证明非流行所致。     

下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的了解引起下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLS和AmpC基因型，指导临床合理用药。方法收集产ESBLs肺炎克雷伯菌36株，用纸片扩散法进行药敏性试验，表型筛选法检测出同时产AmpC酶的菌株，PCR法检测ESBLs和AmpC酶的基因型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南全部敏感，对所测试的其他药物最小同程度耐约。36株产ESBLs肺炎克雷伯菌中，20株扩增出CTX—M—Ⅲ群基因，15株扩增出TEM基因，SHV和OXA基因各1株，ACT-1（MIR-1）和DHA-1（DHA-2）各4株，12株细菌同时携带2种以上的基因型。结论本院下呼吸道感染患营中分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌主要携带CTXM和TEM基因型，少数携带ACT、DHA、SHV和OXA基因型，可介导对口内酰胺类药物的耐药。本研究未对TEM和SHV基因型作进一步分析。     

肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性

目的了解浙江省金华市中心医院临床分离肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率及其耐药性。方法采用纸片扩散法（K-B）检测肺炎克雷伯菌对18种常用抗菌药物的敏感性。按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的ESBLs表型确证试验检测;聚合酶链反应（PCR）检测菌株中的质粒AmpC酶基因和CTX-M型ESBLs基因。并对阳性扩增产物进行测序明确其基因亚型;接合试验了解质粒AmpC酶基因和ESBLs基因的可转移性;肠杆菌科细菌基因间重复一致序列（ERIC-PCR）分析菌株的同源性。结果 101株肺炎克雷伯菌中35.6%（36/101）的菌株ESBLs表型确证试验阳性,其中77.8%（28/36）的菌株含CTX-M型ESBL基因,以CTX-M-15和CTX-M-14基因型为主。11.9%（12/101）的菌株产质粒AmpC酶基因,DNA测序证实为DHA-1型质粒AmpC酶。5.9%（6/101）的菌株同时产质粒AmpC酶和ESBLs。结论我院存在同时产质粒AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的流行,质粒AmpC基因型别主要为DHA-1型,ESBLs基因型别主要为CTX-M-14或CTX-M-15型。耐药基因可通过接合的方式从供体菌转移至敏感细菌,临床上应加强对此类菌株的监测。     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

合肥市54株产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的 了解合肥市产CTX—M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性。方法将我省细菌耐药性监控中心保留的54株产CTX-M型ESBLs的临床分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌与受体菌E．coli C600进行转移接合试验后，按照2004年NCCLS推荐标准，用琼脂稀释法分别测定野生株和转移接合子对14种不同抗菌药物的MIC，比较并分析两者的不同。结果24株大肠埃希菌和30株肺炎克雷伯菌分别有22株和30株接合成功，野生株的MIC结果显示对哌拉西林、头孢呋辛、头孢曲松钠的耐药率最高，达到100％，对亚胺培南全部敏感；转移接合子的耐药性较野生株有所下降，对氟喹诺酮类的敏感性明显增加。结论合肥市这些菌株所产生的CTX—M型ESBLs对头孢曲松钠和头孢噻肟钠具有超强水解能力，经转移接合试验后，接合子的水解能力有所下降，提示本地区产CTX—M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中存在着多种耐药机制。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测

目的 研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系.方法 收集我院2007年1-3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型.结果 我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%.92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶, CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出.结论 我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同.CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

乌鲁木齐地区儿童肺炎患者中肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌ESBLs与AmpC酶耐药基因型研究

目的 研究分离自儿童肺炎患者中肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌产ESBLs及AmpC酶的耐药表型、基因型及分子流行病学特征.方法 用表型筛出产ESBLs及AmpC酶的耐药株;再用基因芯片技术检测ESBLs与AmpC酶的基因型;并用ERIC-1R PCR进行分子流行病学分型;耐药质粒进行接合与转化;最后用WHONET5.4对试验数据进行分析.结果 16株肺炎克雷伯菌SBLs基因型除一株外其余均同时检出TEM与SHV型,部分产CTX-M-9或CTX-M-3型;28株大肠埃希菌ESBLs基因型有25株均产CTX-M-9型,半数产TEM型,少数产SHV或CTX-M-3型;肺炎克雷伯菌AmpC酶基因型仅见DHA型,大肠埃希菌仅检出一株CIT型AmpC酶;ERIC-1R PCR分型可见各型散在分布;质粒接合ESBLs成功17株,AmpC成功4株,ESBLs+AmpC成功2株,带有头孢西丁与四环素同时耐药的质粒4株转化成功.结论 ES-BLs基因型多样而AmpC酶基因型单一;两种酶的耐药基因均可通过质粒传播.加强耐药菌的流行监测,预防控制耐药传播与扩散具有非常重要的作用.     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性及基因型研究

目的了解我院临床分离的大肠埃希菌中产ESBLs菌株的阳性率、耐药性及ESBLs基因型。方法采用纸片扩散法（K—B法）测定2004年1月2005年12月我院临床分离221株大肠埃希菌对23种抗菌药物的敏感度，用酶抑制剂增强试验（纸片法）进行产ESBLs菌株的检测；用PCR和DNA序列分析检测ESBLs基因型，并用WHONET5．3软件进行统计分析。结果221株大肠埃希菌中共检出89株产ESBLs菌株（40．3％）；产ESBLs菌株对青霉素类、第一、第二代头孢菌素100％耐药，第三代头孢菌素中，除细菌对头孢他啶耐药率为41．6％外，对头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率均在95％以上，对哌拉西林-三唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦的耐药率分别为9．0％、18．0%；对亚胺培南的耐药率为0％；89株产ESBLs菌株中，88株（98．9％）PCR检测ESBLs基因型阳性，且均为CTX—M型，其中CTX—M-14为86．5％（77／89）、CTX—M-3为19．1％（17／89），6株细菌（6．7％）同时产CTX—M-14和CTX—M-3。结论我院大肠埃希菌中产ESBLs菌株阳性率较高；产ESBLs菌株耐药显著，ESBLs基因型以CTX—M-14型为主。未检出其他型ESBLs。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs株的耐药性与基因检测

目的研究深圳市人民医院2002年1月-2003年12月临床下呼吸道分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因型以及基因型和耐药表型的相关性。方法共收集临床下呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌61株，采用酶抑制剂增强法作表型确证试验，琼脂稀释法作药敏试验，应用PCR、序列分析，确定ESBLs基因型。结果61株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率是100％，MIC50 0．5mg／L，两种细菌表现出不尽相同的耐药表型。共检出10种0内酰胺酶基因型，CTX-M型、SHV型和TEM型的检出率依次为83．6％、44．3％和37．7％，其中以CTXM14最多，共38株；SHV型仅见于肺炎克雷伯菌，SHV-12最常见，有20株；TEM型均为TEM-1。结论本院临床下呼吸道产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重，为多重耐药菌。ESBLs有7种基因型，CTX—M型是主要的基因型，其次是SHV型；两种菌中各基因型的分布不同，其耐药表型也不同。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌AmpC β内酰胺酶的表型检测

目的 比较研究临床实验室对AmpCβ内酰胺酶（AmpC酶）的表型检测方法,了解对头孢西丁不敏感的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产生hmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的分布情况。方法 利用加与不加3-氨基苯酚硼酸（APB）的头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁纸片进行APB纸片增强试验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的AmpC酶,并与Tris-EDTA纸片试验检测AmpC酶的结果进行比较。用CLSI纸片确认实验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生的ESBLs。结果 APB纸片增强试验与Tris-EDTA纸片法检测结果完全一致。对头孢西丁不敏感的62株肺炎克雷伯菌和74株大肠埃希菌中,分别检测到产AmpC酶41株（66．1％）和33株（45．0％）。AmpC酶和ESBLs同时存在的肺炎克雷伯菌占51．6％,单产AmpC酶和单产ESBLs的肺炎克雷伯菌分别为14．5％和21．0％;而大肠埃希菌则以单产ESBLs为主,占40．5％,单产AmpC酶及同时产生AmpC酶与ESBLs的分别占20．3％和24．3％。结论 APB纸片增强试验和Tris-EDTA纸片试验操作简单,应用方便,成本低廉,均可用于临床实验室检测产AmpC酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

与ISEcp1—like插入序列相关的CTX—M型ESBLs基因传播机制研究

目的研究CTX—M—ESBLs在天津地区肺炎克雷伯菌中的传播与ISEcp1—like插入序列及1类整合子的关系。方法采用PCR-mapping、Southern印迹杂交及DNA序列分析等方法检测CTX-M-ESBLs基因，及其与ISEcp1—like插入序列和1类整合子的关系。结果46株产ESBLs肺炎克雷伯菌中44株（95．7％）携带CTX—M-1组和（或）CTX—M-9组基因，未发现CTX—M-2组基因。60％的CTX—M-1组β内酰胺酶基因和73．7％的CTX-M-9组β内酰胺酶基因上游存在ISEcp1—like插入序列。ISEcp1—like插入序列与CTX—M-3及CTX-M-14基因间隔区序列不同。46株中25株（54．3％）携带1类整合子基因，PCR—mapping及Southern印迹杂交未发现CTX—MB内酰胺酶基因在整合子上的证据。结论天津地区肺炎克雷伯菌临床株中存在CTX—M-ESBLs的流行，许多CTX—M—ESBLs基因上游存在ISEcp1—like插入序列。ISEcp1—like插入序列可能与CTX—M型超广谱酶基因在天津市肺炎克雷伯菌临床株中的播散有关。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

中国部分地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶基因型研究

目的了解中国产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布。方法收集北京、浙江、新疆及郑州等共400株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，采用接合试验，聚合酶链反应，克隆测序等方法明确ESBLs基因型。结果400株细菌中356株细菌ESBLs的基因型明确。其中328株细菌产1种ESBLs，主要为CTX-M型，包括CTX-M-14型ESBLs占52．25％，CTX-M-3型占14、25％，CTX-M-24型占7．25％，CTX-M-22型占2％，CTX-M-28和CTX-M-9型分别占0．75％，CTX-M-13、CTX-M-27和CTX-M-29型各占0．25％；其次为SHV型，其中SHV-12占2．5％(10／400)，SHV-5占1．00％，SHV-2占0．5％。28株细菌同时携带2种或3种ESBLs，占7．00％(28／400)，其中以同时产CTX-M-14和CTX-M-3最常见。结论中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX-M-14型为主；其次为CTX-M-3型，部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs。     

DHA-1型质粒AmpC酶调控因子AmpR基因检测

目的检测DHA-1型质粒AmpC酶诱导性耐药调控因子AmpR基因。方法以我院临床分离产DHA-1型质粒AmpC酶的4株大肠埃希菌和10株肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR),用特异性引物扩增Am-pR调节因子全编码基因,并将一株肺炎克雷伯菌AmpR基因克隆到pET-22b( )载体质粒中测序。结果所有实验菌株AmpR基因检测阳性,重组子AmpR基因测序表明与摩根摩根菌染色体上AmpR基因同源性达99.8%。结论产DHA-1型质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的质粒上存在调控因子AmpR基因。     

大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌AmpC酶的检测

目的了解我院大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌产AmpC酶情况。方法按NCCLS推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验,对369株大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌进行ESBLs酶的检测,并用改良三维试验、三维试验抑制试验及AmpC酶诱导试验对表型可疑产AmpC酶的菌株进行检测。结果73株表型可疑产AmpC酶的菌株中检出34株产AmpC酶,大肠埃希氏菌24株,肺炎克雷伯氏菌10株,其中有5株大肠埃希氏菌2、株肺炎克雷伯氏菌同时产ESBLs酶。2株肺炎克雷伯氏菌诱导产AmpC酶。结论产生AmpC酶是大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌对头孢类抗生素耐药的又一重要机制,实验室应对其检测和监测给予足够重视,以指导临床合理选用抗生素、减缓对细菌耐药的选择性压力、避免医院感染的发生和流行。