含HBV包膜蛋白基因的DNA免疫:前S抗原分泌能增强体液免疫应答[英]

为了设计最佳DNA载体作为抗乙型肝炎病毒（HBV）感染的基因疫苗,作者对HBV抗原的分泌与否对体液免疫应答的影响进行了研究。表达载体pRK含人巨细胞病毒的立即早期启动子及猴病毒40终止/加工信号。除了构建编码L蛋白和S蛋白的质粒pL和pS外,还将前S1区的前42个氨基酸分别与S蛋白和M蛋白的羧基端结合,构建质粒pS.Lc42和pM.Lc42,以获得可分泌的含前S1的蛋白。另外在M.Lc42的氨基端连接β半乳糖苷酶的信号序列,构建了pβM.Lc42。     

表达泛素-结核杆菌蛋白的DNA疫苗能增强抗分枝杆菌免疫

作者分别构建了 3种共表达分枝杆菌抗原 MPT6 4-泛素 (Ub G、Ub A和 Ub GR)的结核病 DNA疫苗 ,并通过小鼠模型评估了这 3种嵌合蛋白的免疫学活性和产生保护性免疫的能力。　　将表达不同泛素 - MPT6 4嵌合蛋白的DNA疫苗转染横纹肌肉瘤 (RD)细胞。对照疫苗为表达组织纤溶酶原激活物 MPT6 4(tp A6 4)融合蛋白的 DNA疫苗。 48小时后取 RD细胞裂解物 ,用 MPT6 4特异性多克隆抗体进行免疫印迹试验以评估表达的抗原数量。结果显示 ,各 DNA疫苗表达的蛋白量差异较大 ,经光密度法分析定量 ,胞内MPT6 4的浓度高低依次为 tp A6 4>Ub …     

DNA免疫诱导抗HCV核心抗原的体液与细胞免疫应答的鉴定

丙型肝炎病毒 (HCV)是引起急、慢性非甲非乙型肝炎的主要原因。目前尚无有效的预防制剂。序列分析表明 ,HCV的核心基因是高度保守的区段 ,故近年来人们的研究集中在以含有核心及包膜基因的质粒进行的DNA免疫上。本文报告了以插入 HCV核心基因片段的重组质粒 p CI- HCV- C免疫小鼠所诱导的免疫应答情况。　　将编码 1～ 1 91氨基酸的 HCV核心基因插入 p CI质粒的 Mlu 及 Xba 酶切位点之间 ,构建携带 HCV核心基因的重组质粒p CI- HCV- C。将纯化的 p CI- HCV- C质粒1 0 0μg注入 6～ 8周龄雌性 BAL B/c小鼠胫骨肌肉内 ,以 p…     

抗核抗体对不同抗原的免疫应答

目的　探讨体内产生抗核抗体的抗原。方法　分别以羊红细胞、伤寒沙门菌及鸡血清免疫小鼠 ,同时设立生理盐水对照组 ,每组 10只 ,采用商品化酶联免疫法检测抗核抗体试剂盒 ,将酶结合物 (酶标抗人IgG)换成酶标金黄色葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,建立检测抗核抗体的SPA ELISA法 ,并使其性能保持不变 ,用其检测小鼠的抗核抗体。结果　新建立的检测抗核抗体的SPA ELISA法与原法检测同一批标本 ,相关系数为 0 931,P <0 0 1。小鼠血清抗核抗体检测结果 (阳性率 ) :羊红细胞组为 90 % (9 10 ) ,伤寒沙门菌为 70 % (7 10 ) ,鸡血清组为 10 0 % (10 10 ) ,生理盐水对照组未检出抗核抗体。各实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　体内抗核抗体可能是一类由不同抗原刺激非特异产生的抗体。     

IGN402结合疫苗免疫猕猴诱生的抗糖抗原及癌细胞的lgG免疫应答

肿瘤相关抗原（如SialylTn糖抗原）是由异常糖基化所形成的抗原，能在癌细胞上过度表达，并为癌症疫苗提供潜在目标。由于SialylTn糖抗原是一种胸腺非依赖性抗原，因此免疫原性很低，而且不能诱导免疫记忆。为了增强这种抗原的免疫原性，奥地利维也纳Igeneon AG公司的Kircheis等先将SialylTn糖抗原与具有高度免疫原性的载体分子鼠单克隆抗体mAb17—1A偶联，然后再将结合物吸附于铝凝胶上制成IGN402。     

IGN402结合疫苗免疫猕猴诱生的抗糖抗原及癌细胞的IgG免疫应答

肿瘤相关抗原(如SialylTn糖抗原)是由异常糖基化所形成的抗原,能在癌细胞上过度表达,并为癌症疫苗提供潜在目标。由于SialylTn糖抗原是一种胸腺非依赖性抗原,因此免疫原性很低,而且不能诱导免疫记忆。为了增强这种抗原的免疫原性,奥地     

口服重组卡介苗诱发对外源抗原的细胞和体液免疫应答

作者将基因重组卡介苗(BCG)1173 P2和lacZ-BCG株在含0.05％Triton Wl339的培养基中分别培养并将其悬浮液冻存备用。将105只豚鼠分为3组,第1组45只经口服、呼吸道和皮内途径用重组BCG免疫,每种途径使用15只。     

粘膜免疫DNA疫苗可在粘膜部位诱导抗HIV-1免疫应答

粘膜免疫是机体抵抗病原体以防全身感染,尤其是性传播疾病的第一道防线。本文报告了经阴道接种DNA质粒pCMN160的小鼠产生抗人类免疫缺陷症病毒(HIV)分泌性IgA和中和抗体的结果。     

被动免疫:增强对混合抗原免疫应答的方法

众所周知,用粗提的抗原诱发免疫应答时,抗原竞争是一种普遍的现象.所谓抗原竞争是指一种抗原或抗原决定簇的免疫应答受到另一种抗原或抗原决定簇的抑制.作者认为,这种非特异性免疫抑制作用可以部分地通过被动免疫来消除,即在注射混合抗原前,先给予抗优势抗原的抗体.通过被动输入的抗体封闭优势抗原或抗原决定簇,消除其抗原竞争作用,从而使原先受到抑制的免疫原性微弱或无免疫原性的分子能诱导出抗     

DNA疫苗接种诱导抗丙型肝炎病毒蛋白的免疫应答

最近对丙型肝炎病毒(HCV)感染的临床和实验病例的分析提示,病毒核壳(C)、非结构蛋白3(NS3)和包膜糖蛋白E1和/或E2在控制该病毒感染的免疫应答中可能有作用。作者运用DNA免疫接种研究了注射编码C区和E2区的DNA诱导的免疫应答。采用pCMVβ(Clontech)或pCI(Promega)载体构建的非嵌合体载体分别带有C区和E2区     

用确定的多聚体结构抗原免疫接种增强免疫应答

亚单位疫苗至少有三大优点,(1)可避免遗传物质;(2)避免有毒成分,特别是当用含毒素的细菌作菌苗时;(3)使隐藏在全菌体或病毒中的保护性抗原或抗原决定簇得到显露。但通常亚单位疫苗免疫原性不佳,需添加佐剂或结构型。把所需抗原掺合到确定的多聚体结构内或与佐剂组合,将成为理想的疫苗。应用免疫刺激复合物(IoCom)可使疫苗更加理想化。ISCom是由称为QuilA的糖苷基质构成,通过疏水作用吸附抗原。ISCom有类似球形结构的支架。目前ISCom可由约20种不同病毒的膜蛋白(如包膜蛋白)、细胞和寄生虫的膜蛋白及小分子肽制备。对病毒     

能增强抗原特异性免疫应答的新局部接种法

DNA疫苗局部接种于皮肤是一种有用的接种方法 ,但其诱导的免疫应答水平较低。为了克服这一难题 ,作者采用了一种新的局部接种技术 ,即先用快速作用粘合剂去除小鼠皮肤角质细胞 ,然后再将表达细胞因子〔白细胞介素 1 2 ( IL- 1 2 )和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ( GM- CSF)〕的质粒 ( p IL- 1 2和p GM- CSF)和 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV-1 ) DNA质粒 ( p CMV1 6 0 B/pc REV)涂于皮肤进行局部接种。　　作者分别在 0、7和 1 4天将 1 0～ 1 0 0 μgDNA表达质粒涂于去除角质层的雌性BALB/c小鼠皮肤 ,于末次加强后 7天和 3个月…     

流感血凝素DNA疫苗诱导体液免疫应答的检定

作者向小鼠股四头肌注射流感病毒A/PR/8/34株的血凝素(HA)DNA10ng～100μg,共1～3次,每次间隔3周.用血凝抑制(HI)试验和ELISA检测免疫后小鼠体内抗HA抗体水平.两项试验结果都显示HA DNA注射剂量和注射次数与产生的抗体水平直接相关.注射lμg HA DNA三次或一次注射10～100μg HA DNA的小鼠体内均可测到抗体,而100μg HA DNA诱导的抗体水平至少与感染活流感病毒(A/PR/8/34)后产生的抗体水平相仿.免疫后抗体水平至少可维持18个月.注射次数对抗体水平影响不大.     

编码配体-抗原融合体的DNA疫苗的定点免疫应答

作者以结合了淋巴结内皮小静脉 CD34的 L -选择蛋白 (Lsel)和结合了抗原提呈细胞 (APC) CD80和 CD86的 CTL A4作为配体 ,并以 CD5信号肽 (分泌必需 )为非定向对照 ,分别构建表达配体 -人免疫球蛋白 (h Ig)融合体的 Lsel- h Ig、CTL A4- h Ig和 CD5 L-h Ig质粒。分别将 1 0 0μg上述质粒于 0和 1 4天注射 6～ 8周龄雌性小鼠的股四头肌 ,用ELISA检测抗体 ,用51 Cr释放法检测细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL)应答。研究显示 ,抗体和 CD4T细胞的应答均增强 ,且抗体产生速度加快。免后 2周 ,免疫 CTL A4- h Ig质粒的3种不同品系 H- …     

使用溶于可代谢油的抗原和胞壁酰二肽衍生物可持续增强细胞介导和抗体免疫应答

本文介绍并比较了MDP、MDP-α-n-丁酯(MDPBUT)、1,O-(MDP-L-丙氨酰)甘油-3-霉菌酸酯(MDPAGM)和海藻糖二霉菌酸酯(TDM)四种佐剂的活性。 MDP能代替弗氏佐剂中的分枝杆菌,最近证明亲脂性MDP衍生物MDPAGM是     

肌肉免疫DC-EBV-LMP2诱导免疫应答的研究

目的探讨肌肉免疫DC-EBV-LMP2诱导的免疫效果。方法从BALB/C小鼠分离骨髓细胞,诱导培养获得小鼠DC,以100 MOI的rAd-LMP2感染获得DC-EBV-LMP2,继续培养48h,诱导DC-EBV-LMP2成熟。用免疫酶法确定LMP2在DC中表达。0,2,4周,以2×105个DC-EBV-LMP2/只免疫BALB/C小鼠,于第5,8周分别LMP2特异性水平和T细胞亚群的变化。结果结果显示,肌肉免疫DC-EBV-LMP2可诱导BALB/C鼠LMP2特异性免疫应答,且第5周强于第8周。CD8+T/CD3+T细胞亚群的比值在第5周高于对照组,而第8周低于对照组。结论 DC-EBV-LMP2肌肉免疫BALB/C鼠可诱导LMP2特异性CTL。     

扩大BCG的抗原组分可提高抗结核杆菌气溶胶感染的效力

当前使用的抗结核病疫苗卡介苗（BCG）是一种减毒活疫苗，其预防肺结核的效果变化不定，为此，澳大利亚癌症医学和细胞生物学世纪研究所Palendira等研制了分别分泌结核杆菌Ag85B、ESTA-6和Ag85B—ESTA-6融合蛋白的重组BCG株BCG85B、BCGGES和BCG85B-ES，并检测了新疫苗预防结核杆菌气溶胶感染的能力。