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流式细胞术测定T淋巴细胞亚群不同商家试剂的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
T淋巴细胞亚群的测定在临床医学中越来越受到重视。应用流式细胞分析技术来检测人外周血T淋巴细胞亚群 ,具有简便、快速 ,计数细胞量大 ,相对精度好等优点。但是 ,由于流式细胞技术进入临床应用时间短 ,在操作技术规范、试剂质量指标等诸多方面还无严格标准可循 ,因而造成测定结果差异较大 ,可比性差。本文用国外的 3个商家试剂在流式细胞仪上测定T淋巴细胞亚群进行比较 ,现将结果报告如下。1 材料与方法1 1 仪器 美国B D公司FASCCalibur流式细胞仪。1 2 试剂 试剂① :B D公司三色标记T亚群试剂CD4FITC/CD8PE/CD3Percp、阴… 相似文献
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目的建立健康成年人外周血T淋巴细胞亚群绝对计数正常参考值.方法使用三标荧光抗体及TriCOUNT计数管,分别对298例健康成年人外周血T淋巴细胞亚群进行标记,采用FACSCaliburTM型流式细胞仪进行检测并分析结果,SPSS 10.0 软件进行统计学处理.结果 18~57岁健康成年人外周血中CD3 细胞绝对计数值为(1 242±404)个/μl ;CD3 CD4 细胞的绝对计数值为(651±209)个/μl ;CD3 CD8 细胞的绝对计数值为(524±283)个/μl ;CD3 CD4 CD8 细胞的绝对计数值为(17±10)个/μl .男性CD3 、CD3 CD8 细胞数比女性显著升高(P<0.01).结论在相同地域、相同种族,可以建立健康成年人外周血的T淋巴细胞亚群绝对计数正常参考值. 相似文献
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目的研究40例系统性红斑狼疮(SLE)患者不同状态的外周血总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+),T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),B淋巴细胞(CD3-/CD19+),NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)的差异并初步探讨其在SLE发病中的意义。方法根据SLE疾病活动积分(SLEDAI)将SLE患者分为活动组(24例)和非活动组(16例),流式细胞仪检测外周血CD3+/CD4+,CD3+/CD8+,CD3-/CD19+,CD3-/CD16+CD56-表达百分率,对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和抗dsDNA抗体水平的相关性进行研究。结果活动组和非活动组SLE患者外周血总T细胞(CD3+)与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);活动组和非活动组SLE患者外周血T细胞(CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56-)表达百分率与健康对照组相比,T、B淋巴细胞表达的分率差异均有统计学意义(P=0.043,P=0.027);NK淋巴细胞(P=0.612)差异无统计学意义;活动组与非活动组的总T细胞,差异无统计学意义,而T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)差异具有统计学意义,提示T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),与SLE活动度相关。T、B、NK细胞与SLE临床表现相关性分析显示,T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)与SLEDAI,抗dsDNA抗体呈正相关(P=0.096);B细胞与C3呈负相关(P=0.048);NK细胞与SLEDAI和抗dsDNA抗体呈负相关(P=0.096)。结果显示T、B、NK细胞异常与SLE临床表现明显相关。结论 SLE患者的外周血总T细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)可作为SLE诊断及评价活动性的指标。 相似文献
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目的:本文比较了采用双色、三色和四色荧光标记分析淋巴细胞亚群的结果,调查了正常儿童淋巴细胞亚群分布。方法:采用双色、三色和四色荧光标记流式细胞术,测定89例儿童淋巴细胞亚群(T+B+NK)。结果:双色、四色法结果除T细胞值p〉0.0.5外,均有差异(p〈0.05).两者spearman相关系数除NK细胞(相对数为0.83,绝对数为0.80)较低外,其他均有0.85以上,大多数在0.90以上。双色、三色和四色荧光标记测定CD4/CD8比值有差异(ANOVAP〈0.01)。结论:三种方法相关,但有差异(除T细胞外),需建立各自的参考范围。 相似文献
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目的通过对上海地区333名健康成年人外周血T淋巴细胞亚群计数,调查正常人群T淋巴细胞亚群的参考区间,建立95%可信区间的参考区间,并分析和探讨其变化特点,为机体免疫状态的分析和临床诊疗提供参考。方法采用多参数三色免疫荧光标记外周血T淋巴细胞,使用BD FACSCalibur流式细胞仪检测并分析,获得T淋巴细胞亚群的百分比和绝对值。结果女性的CD3+百分比、CD4+/CD8+比值、CD3+CD4+百分比和CD4+CD45RA+百分比分别为(72.6%±8.1%)、1.57(0.74~4.70)、(44.8%±8.0%)和(1.71%±6.3%),均高于男性分别为(70.9%±8.5%)、1.43(0.51~4.12)、(40.6%±9.3%)和(15.1%±6.8%)。男性的淋巴细胞绝对值计数、CD8+CD28+的绝对值计数分别为(2 069.8±474.1)个/μL、(237.5±95.7)个/μL,均高于女性(1 932.8±469.7)个/μL、(218.1±111.1)个/μL。T淋巴细胞亚群的百分比在不同年龄组之间随年龄增大而发生变化,年龄相差越大,差异越大,其中50岁组与其他组别比较差异有统计学意义。333名健康成年人外周血淋巴细胞绝对值计数为(1 069.1~2 935.6)个/μL,T淋巴细胞亚群百分比计数为:CD3+细胞55.3%~87.6%,CD3+CD4+细胞25.2%~57.6%,CD3+CD8+细胞15.0%~42.1%,CD4+CD25+细胞2.5%~10.5%,CD4+CD45RA+细胞5.0%~27.2%,CD8+CD28+细胞4%~19.3%,CD4+/CD8+比值0.7~2.9。结论健康成年人T淋巴细胞亚群的百分比分布存在性别和年龄差异,由于这种差异不大,可以合并数据建立上海地区健康成年人外周血T淋巴细胞亚群的参考区间。 相似文献
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目的用流式细胞术分析脑脊液中T淋巴细胞及其亚群,探讨不同类型神经系统疾病患者脑脊液中T淋巴细胞亚群百分率差异,寻找在疾病诊断和治疗监测中有意义的实验室检测指标。方法采用流式细胞术测定神经系统疾病患者脑脊液和外周血T淋巴细胞亚群。结果采用流式细胞术分析脑脊液中T淋巴细胞亚群时,运用侧向散射光(SS)vs.CD45能更准确的确定淋巴细胞群;但流式细胞术只适用于检测神经系统免疫相关疾病患者脑脊液中T淋巴细胞亚群,不适用于分析神经系统变性疾病患者。中枢神经系统炎性疾病和脊髓炎患者脑脊液中CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞和CD3+CD8+T淋巴细胞百分率最高,脱髓鞘疾病患者脑脊液T淋巴细胞亚群百分率最低,但各类神经系统疾病患者脑脊液中T淋巴细胞百分率无明显差异(P>0.05)。细菌性脑膜炎患者脑脊液中CD3+T淋巴细胞和CD3+CD4+T淋巴细胞百分率最高,明显高于脱髓鞘疾病患者(P=0.032),但与病毒性脑膜炎患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。各类神经系统疾病患者脑脊液中CD4/CD8比值明显高于外周血,其中细菌性脑膜炎和脊髓炎患者脑脊液中CD4/CD8比值最高,脱髓鞘疾病脑脊液中CD4/CD8比值最低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。脑脊液IgG生成指数与脑脊液中CD3+CD4+T淋巴细胞百分率有一定相关性(r=0.324,P=0.032)。结论流式细胞术分析神经系统炎性疾病较脑脊液常规检测具有优势,敏感性更高,可同时分析脑脊液免疫状况。流式细胞术分析在神经系统相关炎性疾病具有重要意义,CD3+CD4+T淋巴细胞高百分率与神经系统炎性疾病密切相关。但流式细胞术对于神经系统变性疾病的临床应用有限。 相似文献
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流式细胞术检测肺结核患者血清中T淋巴细胞亚群的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨肺结核患者血清中T淋巴细胞亚群的改变。方法采用先进的流式细胞术分别测定了29例结核菌阴性及49例结核菌阳性的初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群计数。结果初治活动性肺结核患者血清中CD4^+、CD4^+/CD8^+降低,而CD3^+、CD8^+升高,与正常对照组比较,CD8^+、CD4^+/CD8^+差异有显著性(P〈0.05);老年结核患者的CD3^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+均较青年结核病患者低,其中CD4^+/CD8^+差异有显著性;病变范围广泛者的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+较病变范围小者低,CD3^+差异有显著性;痰菌阳性者与阴性者比较,CD4^+/CD8^+下降,CD8^+升高,但差异无显著性。结论初治活动性肺结核患者的T细胞亚群变化存在其自身特点。对肺结核患者T淋巴细胞亚群的检测有助于判断病情、了解抗结核治疗效果及预后。 相似文献
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流式细胞术计数淋巴细胞亚群的全血质控品的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 研究流式细胞术(FCM)计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。方法 流式细胞术多色分析方法计数不同保存剂处理后、不同时间内血液中淋巴细胞亚群。结果 成功研制出FCM计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。在2~8℃冰箱内保存72d内,各种白细胞的光散射特点及CD45保持稳定,淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞群与细胞碎片分离良好,可通过光散射或荧光/光散射两种方式设门分析淋巴细胞亚群。本质控品在不同保存时间的变异较小,FCM计数血液淋巴细胞亚群的室内批间变异系数〈6.5%,全国56个实验室的室间质评变异系数〈13%。结论 本全血质控品可用于临床FCM计数血液淋巴细胞亚群全过程的室内质量控制和室间质量评价,对提高淋巴细胞亚群计数的质量,保证结果的准确性有重要意义。 相似文献
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流式细胞术检测体液T淋巴细胞亚群的临床应用 总被引:3,自引:1,他引:3
目的探讨胸水、腹水、肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群的检测方法及临床价值。方法采用流式细胞术检测良、恶性疾病患者的50例胸水、46例腹水、47例肺泡灌洗液(BALF)中T淋巴细胞亚群的水平并分组进行比较。结果 1)胸水:结核性胸膜炎组胸水Ts细胞占T淋巴细胞的(27.36±6.41)%、Th细胞占T淋巴细胞的(67.98±7.41)%、Th/Ts比值为2.60±0.64,肺部恶性肿瘤组胸水Ts细胞占T淋巴细胞的(67.97±4.20)%、Th细胞占T淋巴细胞的(37.61±4.80)%、Th/Ts比值为0.47±0.10,与结核性胸膜炎组比较,恶性组Th、Th/Ts比值显著下降(P0.01)而Ts显著升高(P0.01);2)肺泡灌洗液:肺良性疾病组肺泡灌洗液Ts细胞占T淋巴细胞的(44.54±9.56)%、Th细胞占T淋巴细胞的(49.28±12.88)%、Th/Ts比值为1.13±0.29,肺部恶性肿瘤组肺泡灌洗液Ts细胞占T淋巴细胞的(65.11±7.77)%、Th细胞占T淋巴细胞的(34.57±6.65)%、Th/Ts比值为0.54±0.19,与良性病变组比较,恶性组Th下降(P0.05),Th/Ts比值显著下降(P0.01),而Ts显著升高(P0.01)。3)腹水:结核性腹膜炎组腹水Ts细胞占T淋巴细胞的(33.11±3.34)%、Th细胞占T淋巴细胞的(66.69±3.78)%、Th/Ts比值为2.03±0.28,恶性组腹水Ts细胞占T淋巴细胞的(56.64±9.34)%、Th细胞占T淋巴细胞的(35.86±3.30)%、Th/Ts比值为0.65±0.10,与结核性腹膜炎组比较,恶性组Th、Th/Ts比值显著下降(P0.01),而Ts显著升高(P0.01)。结论胸腹水、肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群检测可用于分析性质并有助于评估患者局部免疫功能状态。 相似文献
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目的探讨阿德福韦酯抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞各亚群的影响。方法对41例慢性乙型肝炎患者采用流式细胞术检测阿德福韦酯(ADV-dpv)治疗前、治疗12周和24周后与11例对照者外周血T淋巴细胞亚群进行比较,并结合血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TbiL)水平及乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量水平进行统计学分析。结果治疗前各组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组患者血清中ALT、TBiL水平及HBV-DNA载量水平与T淋巴细胞亚群失衡存在一致性,表现为慢性乙型肝炎(CHB)组和慢性重型肝炎(SH)组的ALT高于肝炎肝硬化(LC)组,差异有统计学意义(P<0.05),LC组和SH组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于CHB组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ADV-dpv治疗12周和24周患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);各组患者ALT和TBiL水平及HBV-DNA载量较治疗前明显好转。结论慢性乙型肝炎在发展为重度和肝硬化的过程中外周血T淋巴细胞随病情的进展显著减少,经ADV-dpv抗病毒治疗后,肝功能明显改善,HBV-DNA复制明显减少,外周血淋巴细胞亚群绝对细胞数CD3+、CD4+、和CD8+进行性升高,T细胞亚群的状态呈逐渐改善的趋势。 相似文献
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摘要:目的?考察多聚甲醛(PFA)浓度和固定时间对流式细胞术检测人外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比和平均荧光强度的影响。方法?以健康人外周血为研究对象,将六色荧光抗体标记后溶血处理的细胞分别用PBS、1% PFA(10 g/L)和4% PFA(40 g/L)进行重悬或固定,用流式细胞仪在固定0、4、8、12、24、48和72 h后检测CD19-CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、CD3-CD19+B、CD3-CD56+NK细胞占淋巴细胞百分比,及CD45、CD3、CD4、CD8、CD19、CD56的平均荧光强度。结果?与PBS对照组相比,72 h内,PFA浓度及固定时间对外周血T、B、NK淋巴细胞亚群百分比均没有影响(P均>0.05);固定8 h内,PBS对各淋巴细胞亚群平均荧光强度均无影响,1% PFA组CD4平均荧光强度下降,4% PFA组CD45、CD3、CD4、CD8平均荧光强度均下降;固定24 h后,各淋巴细胞亚群平均荧光强度均下降,同时4% PFA固定后平均荧光强度均低于1% PFA(P<0.05)。结论?使用流式细胞术检测人外周血淋巴细胞亚群,细胞染色后若8 h内检测用PBS进行细胞重悬检测效果最好,PFA固定不应超过12 h,1% PFA固定效果优于4% PFA。 相似文献
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目的 了解类风湿性关节炎患者T淋巴细胞的异常变化.方法 根据临床症状和X线分期将47例强直性脊柱炎(AS)患者分为两组:确诊AS组和可能AS组.用流式细胞仪检测确诊AS组、可能AS组和健康对照组外周血T细胞亚群及人类白细胞抗原(HLA-B27),同时检测红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白A(IgA).并分析T细胞亚群与CRP、HLA-B27、IgA在AS疾病中的相关性.结果 确诊AS患者CD3+无明显变化,CD4+T细胞(48.16 ±7.17)明显升高,CD4 +/CD8+比值(3.80±0.28)增加,高于可能AS组CD4+ (35.13±6.46)、CD4+/CD8+ (2.32±0.23),CD8+明显减少(20.45±6.41)低于可能AS组(24.40±7.11)(P均<0.05).T细胞亚群的表达有随着CRP、IgA的升高而升高的趋势.结论 在AS患者的外周血中CD8+T细胞显著降低、CD4+T细胞明显升高,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了AS的发病,AS患者的易感性可能与细胞因子的免疫应答有关.早期检测T淋巴细胞亚群可能为RA的诊断及治疗提供依据.因此,T淋巴细胞亚群比例失衡在RA的发病中可能起着更为重要的作用. 相似文献
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中国人血液淋巴细胞免疫表型参考值调查 总被引:5,自引:0,他引:5
目的建立健康中国成人血液淋巴细胞免疫表型分析参考值.方法用Simultest IMK-Lymphocyte试剂盒的荧光抗体对102例健康中国成人血液进行染色,以FACSort流式细胞仪进行分析,Simulset程序获取数据并分析结果,SPSS软件进行统计.结果 18~65岁健康中国成人淋巴细胞参考值范围CD+3细胞是50%~84%(955~2 860/μl),CD-3CD+19细胞为5%~18%(90~560/μl),CD+3CD+4细胞为27%~51%(550~1 440/μl),CD+3CD+8细胞为15%~44%(320~1 250/μl),CD-3、CD+16和/或CD+56细胞为7%~40%(150~1 100/μl),CD+3CD+4/CD+3CD+8比值为0.71~2.87.随着年龄增长CD+3CD+4细胞略有升高,CD+3CD+8细胞略有降低.NK细胞在大年龄组女性低于男性,且有统计学差异(P<0.05).与高加索人和美国人相比,中国人的CD+3CD+8细胞和NK细胞(CD-3,CD+16和/或CD+56)的相对值(百分率)与绝对值均高,CD-3CD+19细胞和CD+3CD+4细胞仅相对值较低,但绝对值不少.CD+3CD+4/CD+3CD+8比值向低值漂移.结论种族、性别、年龄和环境因素可影响健康人淋巴细胞表型分布. 相似文献
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王建中 《中华检验医学杂志》2008,31(5)
血液淋巴系肿瘤的流式细胞免疫表型分析(FCI)属于一种高度复杂的试验,有其特有的医学适应证;对实验中抗体及其组合的选择、数据分析与报告有较高要求;从事血液淋巴系肿瘤的FCI人员需要经过专门的培训与教育. 相似文献
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流式细胞术检测单个淋巴细胞内细胞因子表达及其临床应用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 寻找一种准确、敏感的检测 T淋巴细胞内细胞因子水平的方法 ,为研究 T细胞极化状态在疾病发生发展过程中的作用提供可靠的手段。 方法 用 PMA、 ionomycin作刺激剂 ,刺激全血中淋巴细胞表达细胞因子 ,以 mon-ensin阻断细胞因子分泌至胞外 ,应用两种免疫荧光抗体同时标记淋巴细胞的膜表面特异的分子和表达并被阻滞在胞内的细胞因子 ,然后用流式细胞仪进行检测和分析。 结果 本方法检测 1 8例正常人淋巴细胞的分泌细胞因子水平 ,其中CD4 + T淋巴细胞中 Th1占 1 9.5 1 %± 4 .96% ,Th2占 1 5 .66%± 3.95 % ;CD8+ T淋巴细胞中 Tc1占 1 6.2 2 %± 1 .78% ,Tc2占 9.2 0 %± 1 .96% ;而 1 2例妊高征孕妇的 Th1、Tc1百分比例明显高于正常人 ( P<0 .0 1 ) ,Th2的比例显著低于正常人( P<0 .0 1 )。 结论 双抗体标记流式细胞仪检测法可以客观、准确地检测淋巴细胞表达细胞因子的水平 ,判断 T淋巴细胞的极化状态。妊高征患者与正常人相比存在 T淋巴细胞的极化水平异常 ,可能与妊高征的发生发展有关 相似文献
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目的建立福州地区健康儿童外周血淋巴细胞亚群及活化的正常参考范围。方法选取福州地区0~18岁健康儿童593例为研究对象,按年龄分为新生儿组(0~28d)、婴儿组(~12个月)、幼儿组(~3岁)、学龄前组(~7岁)、学龄组(~12岁)和少青组(~18岁),采集外周血以美国BD公司生产的四色荧光抗体进行标记,以FACSCalibur流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、B淋巴细胞亚群CD3-CD19+、NK细胞CD3-CD16+CD56+及淋巴细胞活化指标CD4+CD38+、CD4+AntiHLA-DR+、CD8+CD38+、CD8+Anti-HLA-DR+的百分率和绝对计数,以Multi SET软件获取数据并分析结果,SPSS 10.0软件进行统计分析。以百分位数法,采用95%可信区间确定正常参考值范围。结果除CD3-CD16+56+绝对计数在各年龄组间无差异外,淋巴细胞亚群及淋巴细胞活化指标在不同年龄组之间的差异均有统计学意义,表现为CD3+绝对计数、CD3+CD4+、CD4+CD38+百分率和绝对计数、CD4+/CD8+比值随着年龄的增长呈降低趋势。CD4+Anti-HLA-DR+的百分率随着年龄的增长呈增高趋势。新生儿组CD3+、CD3+CD4+、CD4+CD38+、CD8+CD38+的百分率和绝对计数及CD4+/CD8+比值明显高于其它年龄组,CD3-CD19+、CD8+AntiHLA-DR+的百分率和绝对计数明显低于其它年龄组。在不同性别之间CD3+CD4+和CD3-CD19+、CD4+CD38+、CD4+Anti-HLA-DR+和CD8+CD38+的百分率和绝对计数的差异有统计学意义,表现为女童明显低于男童。儿童淋巴细胞亚群绝对计数的参考值高于成人。结论健康儿童淋巴细胞免疫表型的分布存在性别和年龄差别,由于这种差别细微,可以在同一种族同一区域建立统一的正常参考值范围。本研究成功建立福州地区健康儿童淋巴细胞亚群及活化的正常参考范围。 相似文献