高压氧治疗对急性脑创伤后血脑屏障损伤大鼠MMP-9 mRNA表达的影响

目的 观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗对急性脑创伤后血脑屏障损伤大鼠MMP-9 mRNA表达的影响,探讨高压氧治疗急性脑损伤的机制.方法 选取40只SD大鼠,采用自由落体打击法制备急性脑创伤模型.造模成功后采用数字表法随机分为4组,每组10只.分别为正常对照组:动物置于加压舱内,模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件.急性颅脑损伤24 h组:动物颅脑打击后1h,置于加压舱内,模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件,于伤后24 h断头取材.急性颅脑损伤高压氧治疗24h组:动物颅脑打击后1h和12 h,置于高压氧舱内,在0.25 MPa HBO下各停留40 min,于伤后24 h断头取材.急性颅脑损伤常氧高氮治疗24 h组:动物颅脑打击后1h和12 h,置于高压氧舱内,在0.25 MPa常氧高氮环境下各停留40 min,于伤后24 h 6只断头取材行含水量及RT-PCR测定,4只行脑组织伊文蓝(Evans blue,EB)测定.结果 急性颅脑损伤伤侧和非伤侧脑组织含水量为77.39 mg和72.25 mg,与急性颅脑损伤HBO治疗24 h组(70.83 mg、70.27 mg)比较差异有统计学意义(P＜0.05).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,脑组织含水量较未治疗组下降(P＜0.01),高压氧治疗组半球及海马EB均显著增加(P＜0.05,P＜0.01).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,损伤侧和非损伤侧半球及海马EB较未治疗组下降(P＜0.0,1),急性颅脑损伤组及0.25 MPa常氧高氮组损伤侧半球及海马EB多于非损伤侧(P＜0.05),0.25 MPa HBO治疗组损伤侧半球及海马EB高于非损伤侧(P＜0.05).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,损伤侧和非损伤侧半球及海马MMP-9 mRNA较未治疗组下降(P＜0.0,1).急性颅脑损伤组、0.25 MPa常氧高氮组及0.25 MPa HBO治疗组损伤侧半球及海马MMP-9mRNA高于非损伤侧(均P＜0.05).结论 HBO治疗急性脑创伤可以保护血脑屏障,从而减轻脑水肿,机制之一是HBO治疗减少了MMP-9 mRNA表达.     

高压氧对脑梗塞后患者血清一氧化氮、一氧化氮合酶含量的影响

目的　观察高压氧 (HBO)对脑梗塞后血清一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响。方法　将脑梗塞患者分为 HBO治疗组和非 HBO治疗组 ,观察不同病期血清一氧化氮和一氧化氮合酶含量的变化 ,并与正常对照组进行比较。结果　 HBO治疗组一氧化氮含量较非 HBO治疗组上升快 ,在治疗后第 15天恢复正常 ,但在 1个疗程 HBO治疗结束后 ,却又有所下降 ;两组一氧化氮合酶含量在治疗后均有上升 ,且未能恢复到正常水平 ,两组之间无明显差异。结论　 HBO通过提高 NO的含量 ,减轻缺血区脑组织的损伤 ,改善脑血循环。HBO对 NOS有一定影响 ,但作用不大。应适当延长 HBO疗程 ,尽可能维持血清 NO基态释放量 ,提高受到低氧抑制的 NOS活性     

高压氧预处理对高原人体一氧化氮及其合酶的影响

目的:探讨高压氧预治疗(HBO)对高原人体一氧化氮及其合酶的影响。方法:①海拔3 700m的20名习服男青年,于HBO预处理前(对照组)、预处理5次(A组,10人)和预处理2次(B组,10人)后的第2天、第8天和第2天、第5天作自身对比运动负荷实验,运动结束后测血中检测一氧化氮(NO)及其合酶(NOS)的含量;②29名青年分为HBO组(11人)和对照组(18人),HBO组于进入高原前2天在海拔1 400m接受HBO预处理,每天一次,连续2天,第3天两组同时乘车进驻海拔5 200m,到达后第5天清晨采空腹静脉血;③20名青年自海拔1 400m乘车抵达海拔3 700m,分为HBO组(10人)和对照组(10人),HBO组连续HBO预处理3天,每天一次,第4天两组同时乘车进驻海拔5 380m,到达后第5天清晨采空腹静脉血。结果:海拔3 700m5、200m和5 380m,HBO预处理组较对照组NO、NOS增高,差别有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论:HBO预处理可提高NO的含量,减轻缺氧组织的损伤,改善血液循环。适当延长HBO疗程,尽可能维持血清NO基态释放量,提高受到低氧抑制的NOS活性。     

高压氧预处理对高原人体一氧化氮及其合酶的影响

目的:探讨高压氧预治疗(HBO)对高原人体一氧化氮及其合酶的影响。方法:①海拔3700m的20名习服男青年,于HBO预处理前(对照组)、预处理5次(A组,10人)和预处理2次(B组,10人)后的第2、第8天和第2天、第5天作自身对比运动负荷实验,运动结束后测血中一氧化氮(NO)及其合酶(NOS)的含量;②29名青年分为HBO组(11人)和对照组(18人),HBO组于进入高原前2天在海拔1400m接受HBO预处理,每天1次,连续2天,第3天两组同时乘车进驻海拔5200m,到达后第5天清晨采空腹静脉血;③20名青年自海拔1400m乘车抵达海拔3700m,分为HBO组(10人)和对照组(10人),HBO组连续HBO预处理3天,每天1次,第4天两组同时乘车进驻海拔5380m,到达后第5天清晨采空腹静脉血。结果:海拔3700m、5200m和5380m,HBO预处理组较对照组NO、NOS增高,差别有显著性(P<0.01或<0.05)。结论:HBO预处理可提高NO的含量,减轻缺氧组织的损伤,改善血液循环。适当延长HBO疗程,尽可能维持血清NO基态释放量,提高受到低氧抑制的NOS活性。     

大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ结合配体mRNA的表达

目的 探讨大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶（nNOS）羧基末端PDZ结合配体（carboxy-terminal PDZ ligand of nNOS，CAPON）mRNA的表达变化及其意义。方法采用脊髓横断模型，用实时荧光定量聚合酶链式反应（realtime-PCR）及原位杂交与免疫荧光技术结合的方法检测正常成年大鼠脊髓内以及脊髓损伤后不同时间点损伤段脊髓组织中CAPONmRNA的表达，采用cresylviolet染色计数脊髓组织内存活神经元。结果 CAPON mRNA在对照组大鼠脊髓内呈低水平表达于前角神经元，脊髓损伤后表达于灰质各部分神经元及白质。在损伤早期2h表达开始升高，于8h达到高峰，随后1d有下降趋势，3d时稍有上升，损伤后14d恢复至正常水平。而nNOSmRNA在损伤后2h迅速上调，于8h达高峰，随即下降至正常水平。在此过程中，有神经元凋亡现象的发生。损伤后2h存活神经元的数量即减少，随后稍有增多，但仍少于对照组，3d后存活神经元再度减少，持续至14d。结论 大鼠脊髓损伤后CAPONmRNA表达发生变化，提示CAPON可能通过调节nNOS的活性及亚细胞定位而影响神经元的凋亡，在脊髓损伤病理过程中发挥积极的调节作用。     

大鼠睡眠剥夺后下丘脑一氧化氮合酶mRNA表达的变化

目的观察快动眼睡眠剥夺大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS )及诱导型一氧化氮合酶(iNOS )mRNA表达的时相变化。方法小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4h、48h及 72h后 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR )检测其下丘脑nNOS及iNOSmRNA的表达。结果睡眠剥夺 2 4h组nNOSmRNA表达量显著增加 (P <0 .0 1 ) ,剥夺 48h组与对照组比较无显著差异 ,剥夺 72h组nNOSmRNA的表达量低于对照组水平 (P <0 .0 5 ) ;睡眠剥夺 2 4h和 48h组iNOSmRNA的表达量无显著变化 ,但剥夺 72h组iNOSmRNA的表达量大幅度增加 (P <0 .0 1 )。结论睡眠剥夺后NOS基因表达增加 ,可能是睡眠“反跳”现象的机理之一 ;持续的睡眠剥夺状态下较高水平的NO还可能参与了睡眠剥夺对机体功能的损伤     

氧惊厥时大鼠海马组织一氧化氮合酶基因表达的变化

目的 探讨一氧化氮合酶基因在氧惊厥发生机制中的作用.方法 40只SD大鼠按数字表法随机分为5组:正常对照组、氧惊厥组、惊厥前组、氮氧组、抑制剂+高压氧(HBO)组,每组8只.氧惊厥组:实验动物放入动物高压氧舱内,用纯氧加压至600 kPa,当动物发生惊厥大发作时减压.惊厥前组:纯氧加压至600 kPa,动物出现惊厥前期症状时开始减压.氮氧组:动物在含氧3.5％的氮氧混合气下,在600 kPa停留30 min,再减压.抑制剂+HBO组:动物进舱前10 min腹腔注射L-NAME(Nω-硝基-L-精氨酸甲酯),其他处理同氧惊厥组.正常对照组:动物置于加压舱内,模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件.各组动物出舱后取海马组织,抽提RNA后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组iNOS、nNOS的mRNA表达量变化.结果 相对于正常对照组(0.3563±0.1036,0.5625±0.1035),氧惊厥组和抑制剂+HBO组海马组织中的iNOS(0.5513±0.1253,0.8588±0.1062)和nNOS(0.9300±0.1061,1.2238±0.1374)的表达均显著增加(P＜0.05或P＜0.01);氮氧组NOS基因表达改变不明显;NOS抑制剂可诱导氧惊厥动物海马组织的NOS基因表达.结论 NOS抑制剂可通过不完全阻断NOS的合成,延缓氧中毒的发作及降低发作程度,在氧惊厥发病机制中起重要作用.     

急性缺氧对大鼠肾组织一氧化氮合酶基因表达的影响

目的了解急性缺氧后大鼠肾组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）基因表达的变化,探讨急性缺氧引起肾损害的分子机制。方法１５只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、缺氧后１０ｍｉｎ组、缺氧后４ｈ组。实验组大鼠在低压舱内模拟上升至５０００ｍ、停留４５ｍｉｎ,出舱后分别在１０ｍｉｎ、４ｈ处死大鼠取肾,提取总ＲＮＡ,用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测大鼠肾组织内ｂＮＯＳｍＲＮＡ、ｅＮＯＳｍＲＮＡ、ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达水平。结果ｂＮＯＳｍＲＮＡ在急性缺氧后１０ｍｉｎ明显下降,４ｈ后恢复正常;ｅＮＯＳｍＲＮＡ急性缺氧后１０ｍｉｎ、４ｈ无明显变化;ｉＮＯＳｍＲＮＡ急性缺氧后１０ｍｉｎ无变化,至４ｈ则无基因表达。结论急性缺氧可导致大鼠ｂＮＯＳｍＲＮＡ、ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达下调,ＮＯ在急性缺氧的病理生理过程中起到重要作用。     

+GZ重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的探讨＋ＧＺ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达变化。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ，实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测大鼠心肌组织ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ暴露后３０ｍｉｎ和６ｈ大鼠心肌组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ明显升高，ｅＮＯＳｍＲＮＡ明显降低，但２４ｈ时均恢复正常。结论＋ＧＺ暴露可使大鼠心肌组织内ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达发生改变，其在心肌损伤中可能起一定的作用，但这种变化是可逆的。     

胃癌中一氧化氮合酶的表达及意义

目的：探讨胃癌中三种一氧化氮合酶的表达在胃癌发生、发展中的意义。方法：分别选取胃癌标本98例、正常及良性病变胃组织标本10例。所有标本以SABC法进行三种NOS鼠单克隆抗体免疫组织化学染色。结果：nNOS、eNOS和iNOS在正常及良性病变胃组织中均可见不同程度的表达，NOS在癌旁胃组织中的表达明显高于正常及癌组织，nNOS、eNOS和iNOS阳性率分别为28.6%（28例）、49.1%（48例）及50.0%（49例）。高分化腺癌中eNOS和iNOS的阳性率明显高于nNOS，而在其它类型癌组织中无明显差异。结论：NO是胃癌发生的重要的促发因素之一。三种NOS在不同类型癌组织中的不同表达，反映了肿瘤的异质性特点。     

抗痫胶囊对癫痫小鼠海马一氧化氮合酶活力与蛋白表达的影响

 目的探讨抗痫胶囊对小鼠海马不同亚区一氧化氮合酶活性的影响.方法采用NADPH-d和ABC免疫组化法对戊四唑致痫后,服用抗痫胶囊的小鼠海马不同亚区NOS活性变化的进行研究.结果戊四唑致痫组小鼠海马CA1、CA3齿状回NOS、nNOS阳性细胞数目明显少于正常对照组(P＜0.01),抗痫胶囊各组NOS、nNOS阳性细胞数高于致痫组(P＜0.01).讨论抗痫胶囊对戊四唑海马NOS神经元的明显保护作用,可能是其治疗癫痫的重要机理之一.     

大鼠脑创伤后神经元型和诱生型一氧化氮合酶的相互影响

目的 探讨大鼠创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)之间相瓦影响的作用机制.方法 雄性Wistar大鼠250只采用成组设计方法分成假手术组、创伤组、7-硝基吲唑(7-NI)治疗组、氨基胍(AG)治疗组、AG和7-NI联合治疗组共5组,用Marmarou方法造成大鼠TBI,伤后1,3,6,12 h、1,3,7,14 d采用免疫组织化学检测海马CAI区nNOS和iNOS蛋白表达情况.结果 各组nNOS表达在伤后6 h均达高峰,各组高峰值差异无统计学意义(P>0.05),在伤后12 h 7-NI治疗组与创伤组差异无统计学意义(P>0.05),AG治疗组与联合治疗组高于创伤组(P<0.05).各组iNOS表达在伤后3 d达高峰,各治疗组高峰值均低于创伤组(P<0.05).结论 大鼠TBI后nNOS和iNOS之间通过NO的反馈机制相互影响,nNOS活性的增强是iNOS表达的始动因子之一,iNOS活性增强可以下调nNOS的表达.     

诱导型一氧化氮合酶在脊髓损伤后组织中的定位和定量研究

 目的研究诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)在大鼠脊髓损伤后局部分布和表达的规律.方法分别于大鼠脊髓压迫伤后6、12、24、48、96h等5个时间点,应用免疫组织化学和图像分析技术,对脊髓组织中iNOS的分布和表达规律进行定位和定量研究.结果iNOS在正常对照组织中没有表达,损伤后开始出现,免疫组化阳性部位为细胞浆内的棕色染色部分,主要分布在脊髓的前角和中央管周围的大多角形细胞以及后角的小圆细胞,图像分析表明伤后12、24、48h等组的测量值分别与正常对照组相比有显著性差异(P＜0.05).结论脊髓损伤后脊髓组织中存在iNOS表达,其变化规律对进一步研究NO在脊髓损伤中的作用有一定的参考价值.     

早期高压氧治疗对急性颅脑外伤患者失语症的疗效观察

目的 研究早期高压氧(HBO)治疗对急性颅脑外伤患者失语症的疗效.方法 将2004年1月至2007年8月在我院住院的62例急性颅脑外伤患者分为HBO治疔组和常规治疗组,常规治疗组采用临床常规治疗,HBO治疗组在常规治疗的基础上,实施24～48次HBO治疗,并且在治疗结束后1年内每3个月进行1次随访.在治疗前、后分别采用西方失语成套测试法(western aphasia,WAB)检测并进行CT检查,对他们的语言功能和恢复情况进行评价和比较.结果 HBO治疗组显效率(83.8%)显著高于常规治疗组(54.8%),经x2检验P＜0.05;CT检查证实患者病变部位阻塞的血管已经恢复冉通或已获得重建.结论 早期HBO治疗有利于促进或恢复患者的语言功能.     

高压氧综合治疗急性脑梗死的疗效及最佳治疗时间窗的研究

目的 比较高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗与常规疗法治疗急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)的疗效及探讨HBO治疗的最佳治疗时间窗.方法 将2006年6月至2010年12月入住我院的ACI患者196例经知情同意后分为HBO组(98例)和对照组(98例),HBO组再按HBO 治疗时间分为＜6h、6～48 h、＞48 h3个亚组,在常规治疗的基础上加用HBO,HBO治疗采用多人氧舱,在舱内停留120 min,压力0.25 MPa(2.5 ATA),戴面罩吸入纯氧60 min(30 min 2次,中间间歇10min吸舱内空气),加、减压各25 min,1次/d,10d为1个疗程,疗程间隔3～5d,共3个疗程.对照组按照病程亦分为＜6h、6～48 h、＞48 h3个亚组.对所有患者分别于治疗前及疗程结束后进行美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和Barthel指数(BI)评分,并与常规治疗的ACI患者(对照组)进行比较.结果 治疗后HBO各亚组的总有效率(97.3％、90.0％、80.7％)显著高于常规治疗各亚组(85.7％、77.1％、57.1％)(均为P＜0.01);HBO组中＜6h亚组的有效率明显高于6～48 h和＞48 h亚组(P＜0.05),各亚组NIHSS评分明显低于常规治疗组,BI评分明显高于常规治疗组各亚组(均为P＜0.01);HBO组中＜6h亚组明显优于6～48 h和＞48 h亚组(P＜0.05).结论 HBO治疗ACI的疗效显著,并且在发病6h内开始治疗为最佳.     

内皮型一氧化氮合酶在急性放射性脑水肿中的表达

目的：探讨大剂量＾６０Ｃｏγ刀照射后脑血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）表达变化及其与急性放射性脑水肿的关系。方法单次２００Ｇｙ＾６０Ｃｏγ刀照射大鼠右侧尾状核头部,于照射后１４ｄ内分批活杀动物,采用光镜,电镜、免疫组化及原位杂交技术研究照射后急性放射性脑水肿的发生发展及脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ表达变化。结果照射后２ｈ出现急性放射性脑水肿病理改变。照射后３ｄ达高峰;脑血管内皮细胞ｅＮＯＳ于照