多发性硬化患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞FOXP3 mRNA的表达及临床意义

目的探讨多发性硬化（MS）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量以及叉头样转录因子（FOXP3）表达水平及其临床意义。方法（1）按Poser诊断标准结合头颅MRI增强扫描,排除合并其他神经系统疾病和免疫系统疾病,选择临床确诊和临床可能的MS患者53例（男15例,女38例）。所有患者近期均未行特殊免疫治疗。以统一标准进行登记临床评价、扩展的残癌状态评分;以健康体检者作为对照组,共51例（男14例,女37例）;（2）流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量的变化;（3）免疫磁珠分离出CD4^＋CD25^＋T细胞,RT-PCR法检测CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3 mRNA的表达,并进行半定量分析。结果（1）MS患者外周血中CD4^＋CD25high T细胞数量与正常组比较没有明显变化（P〉0.05）,但在活动期低于正常组,且差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）同一个体在疾病活动期外周血中CD4^＋CD25 high T细胞数量较非活动期减少（P〈0.05）;（3）MS患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞的FOXP3 mRNA表达降低（P〈0.05）,在活动期降低更明显（P〈0.01）。结论（1）就总体而言MS患者外周血CD4^＋CD25 high T细胞数量变化不明显,但CD4^＋CD25 high T细胞抑制活性降低,FOXP3 mRNA表达减少且与MS疾病活动性有关;（2）就个体而言MS患者外周血中CD4^＋CD25 high T细胞数量与疾病的活动性有关。     

原发性干燥综合征患者外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞的表达及意义

目的原发性干燥综合征（PSS）患者外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞的表达及意义。方法用流式细胞仪检测25例PSS患者及20名健康人外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞的水平,同时测定PSS患者外周血活动性指标C反应蛋白（CRP）及IgG,分析PSS患者外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞的表达水平及其与活动性指标的相关性。结果PSS患者外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞占CD4＋百分比显著低于健康人组（P〈0.05）,且与活动性指标CRP及IgG呈负相关（P〈0.05）。结论提示PSS患者外周血CD4＋CD25＋high调节性T细胞的表达不仅与PSS发病有关,且与病情活动有相关性。     

乳腺癌患者外周血CD4~＋ CD25~（high）调节性T细胞的表达及其临床意义

目的了解乳腺癌患者外周血CD4＋CD25high调节性T细胞的状态及其临床意义。方法采用流式细胞仪测定46例乳腺癌患者及29名健康对照者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞及其表面功能性标志性分子细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3（FoxP3）。结果乳癌组与健康对照组比较,外周血CD4＋CD25＋FoxP3调节性T细胞显著增多（P〈0.01）,CD4＋CD25highT调节细胞和CD4＋CTLA-4T细胞也明显著上升（均P〈0.05）。结论在乳腺癌发展过程中CD4＋CD25high调节叉状头/翅膀状螺旋转录因子3细胞可能起着重要的作用,有必要进行大样本研究以作进一步探讨。     

鼻咽癌及其高危人群外周血CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平及意义

目的：探讨鼻咽癌（NPC）及其高危人群外周血中CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平的变化及意义。方法：流式细胞仪检测外周血T细胞亚群、CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞及NK细胞水平。结果：鼻咽癌患者外周血CD4^＋CD25^＋占T淋巴细胞的（2.96±1.34）%,高于EBV-VCA-IgA抗体阳性健康携带者及健康者（P〈0.05）,但与临床分期无明显关系（P〉0.05）;EBV-VCA-IgA阳性组与正常对照组水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。NPC患者外周血CD3^＋、CD4^＋细胞明显降低,NK细胞水平高于EBV-VCA-IgA抗体阳性健康携带者及健康者（P〈0.05）。结论：鼻咽癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋细胞明显降低,CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平升高,提示鼻咽癌患者免疫功能低下,可能与肿瘤的发生发展密切相关。     

重症肌无力胸腺中CD4+CD25+ Treg细胞分布与数量变化的临床意义

目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者胸腺内CD4 CD25 天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义.方法 采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达, 同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血中CD4 CD25 T细胞在CD4 T细胞中的比例.结果 MG增生胸腺中CD25表达与对照胸腺相比显著升高(P＜0.05),与MGFA分期呈正相关.增生胸腺中CD4 CD25 细胞占CD4 细胞比例明显高于对照胸腺(P＜0.05),而外周血中CD4 CD25 T细胞比例无显著变化(P＞0.05).结论 胸腺内nTreg细胞数量的下降与MG自身耐受的破坏有重要的关系,进一步研究胸腺内nTreg细胞数量和功能的变化有助于了解MG的发病机制.     

溃疡性结肠炎患者血浆MDSCs的检测及临床意义

目的检测溃疡性结肠炎（UC）患者血浆中髓源性抑制细胞（MDSCs）水平,并探讨其临床意义。方法选取50例UC患者为研究组,选择同期50例健康体检者为对照组,应用流式细胞仪检测两组外周血MDSCs和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）水平,并分析UC患者外周血MDSCs与CD4＋CD25＋Treg、白细胞（WBC）计数和血小板（PLT）计数的相关性。结果与对照组比较,研究组患者外周血CD4＋CD25＋Treg明显降低（P〈0.05）,MDSCs比例、WBC计数和PLT计数明显升高（P〈0.05）。与UC缓解期比较,UC活动期患者外周血CD4＋CD25＋Treg比例明显降低（P〈0.05）,MDSCs比例、WBC计数和PLT计数明显升高（P〈0.05）。UC患者MDSCs与WBC计数、PLT计数呈正相关（P〈0.05）,与CD4＋CD25＋Treg之间呈负相关（P〈0.05）。结论 UC患者外周血MDSCs水平明显升高,与UC患者病情活动度有关,检测MDSCs有助于UC发病机制的认识和辅助诊断。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的：探讨HCV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法：选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果：HCV感染组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比例明显高于对照组（P〈0.01）;慢性感染组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组（P〈0.05）;肝硬化组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于慢性感染组（P〈0.05）。结论：HCV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。     

乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎、5例慢性重症乙型肝炎患者的CD4＋CD25＋调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果（1）重型乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（2．52±0．94）％,较慢性乙型肝炎组的（5．25±2．17）％差异有统计学意义（P〈0．05）,比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义（P均〈0．01）;（2）慢性乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0．05）;（3）乙肝病毒携带者组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（8．51±2．82）％,与健康对照组的（8．51±2．82）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）HBV基因型C型组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（6．42±2．36）％,较HBV基因型B型组的（7．64±2．87）％稍为下降,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+CD127-调节T细胞的检测及临床意义

目的探讨CD4＋CD25＋CD127-调节T细胞（Treg）在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎（RA）患者和20正常健康者分为两组,采用流式细胞仪检测两组调节T细胞的表达频率,检测两组实验室指标,观察两组实验室指标与调节T细胞的关系。结果与正常对照组相比,RA组白细胞（WBC）、免疫球蛋白A（IgA）、抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）、糖酸蛋白（α1-AGP）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;血红蛋白（Hb）、CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋CD127-T细胞的表达频率降低（P〈0.05）。Spearman相关分析显示,CD25＋T细胞与Hb、IgM、ESR呈正相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与IgM呈正相关（P〈0.01或P〈0.05）;CD25＋T细胞与RBC、IgA呈负相关,CD4＋CD25＋T细胞与补体C4呈负相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与ASO呈负相关（P〈0.05）。结论CD4＋CD25＋CD127-Treg在RA患者的外周血中显著降低,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了RA的发病,早期检测可能为RA的诊断及治疗提供依据。     

哮喘患者外周血Th1、Th2、CD4＋CD（25）＋T细胞的变化及其意义

目的探讨哮喘患者外周血Th1、Th2、CD4＋CD25＋T细胞的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术检测52例急性哮喘患者（急性组）、56例慢性哮喘患者（慢性组）和60名健康对照人群（对照组）外周血中Th1、Th2和CD4＋CD25＋T细胞的水平,并计算Th1与Th2的比值。结果急性哮喘患者外周血中Th1、CD4＋CD25＋T细胞水平和Th1/Th2比值明显低于慢性哮喘患者和健康对照人群（P〈0.05）;急性哮喘患者外周血中Th2水平明显高于慢性哮喘患者和健康对照人群（P〈0.05）。结论 Th细胞和CD4＋CD25＋T细胞在哮喘的疾病活动中起到重要的作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因。     

CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Treg细胞的表达水平,探讨COPD患者体内免疫功能的状态及Treg细胞在疾病进展中的临床意义。方法选择AECOPD和COPD稳定期患者各30例,20例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪进行检测外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞、CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例。SPSS17．0软件进行统计学分析处理。结果AECOPD组和COPD组外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例分别为（9．52±0．95）％和（9．72±0．97）％均低于对照组（10．22±1．10）％,差异无统计学意义（F=2．48,P=0．093）。3组间CD4＋CD25＋CD127^（low/-）Treg细胞比例差异有统计学意义（F=13．57,P=0．0）,AECO．PD组（4．50±0．83）％显著低于COPD稳定期（5．22±0．64）％和对照组（5．61±0．67）％,而COPD稳定期较对照组降低,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COPD患者外周血中CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞降低,存在免疫内环境的失衡,Treg细胞可能参与了COPD的发病和急性加重过程。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

冠心病与外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的关系

目的 探讨不同类型冠心病患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平变化,以及CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉粥样硬化严重程度的相关性.方法 选择2012年6月-2012年12月在杭州市第一人民医院心内科住院,经冠状动脉造影术检查及治疗的患者57例,其中造影检查正常对照组13例,稳定型心绞痛组14例,不稳定型心绞痛组15例,急性心肌梗死组15例.采用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例,评价各组间差异,并对外周血T淋巴细胞亚群与冠状动脉粥样硬化严重程度进行相关性分析.结果 ①外周血CD4＋CD25＋细胞占CD4＋淋巴细胞比例在对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、心肌梗死组分别为（57.51＆#177;12.62）％、（50.19＆#177;9.27）％、（39.85＆#177;11.88）％和（32.37＆#177;9.56）％;②急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例较稳定型心绞痛组和对照组显著减少（P＜0.05）,但是急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组之间,以及稳定型心绞痛组和对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.③外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉Genisi评分呈显著负相关（r=-0.617,P＜0.01）.结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞参与了冠心病的发生发展,是导致动脉粥样斑块不稳定的原因之一,与斑块的不稳定呈显著负相关.     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

Graves’病患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达及其意义

目的分析Graves′病(Graves′disease,GD)患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达水平,探讨CD28分子在GD免疫病理机制中的作用。方法选取105例GD患者为试验组,67例健康者为对照组,通过溶血及流式细胞术检测所有受试对象外周血T细胞表面膜型CD28的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中可溶性CD28的含量。结果试验组外周血CD4+CD28+T细胞为(23.367±8.562)%,CD8+CD28+T细胞为(10.156±3.114)%,较对照组[分别为(30.786±5.143)%和(17.200±3.624)%]显著减少(P<0.0.5、P<0.0.1),血清中可溶性CD28水平观察组[(2.35±0.58)μg/L]较对照组[(0.53±0.23)μg/L]显著增加(P<0.01)。结论共刺激分子CD28很有可能参与了GD的免疫病理机制。     

反复自然流产患者外剧血中CD4＋CD25＋Treg细胞、IL-8和IL-10的表达

目的对反复自然流产患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）百分率和IL-8、IL-10含量变化及可能产生的作用进行探讨。方法采用三色流式细胞术检测120例反复自然流产患者、120名正常妊娠妇女和120名正常非妊娠妇女外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞比例,ELISA法检测上述研究对象IL-8和IL-10含量。结果反复自然流产组妇女外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的百分率和IL-10水平明显低于正常非妊娠组和正常妊娠组．而IL-8明显高于正常非妊娠组和正常妊娠组,差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、IL-8和IL-10水平与反复自然流产的发生有关。     

多发创伤合并全身炎症反应综合征患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化特点及其对细胞免疫的影响

目的观察严重多发创伤患者早期全身炎症反应综合征（SIRS）过程中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg细胞）比例的变化，探讨其与患者继发感染之间的关系。方法符合SIRS诊断标准的23例严重多发创伤患者作为病例组，于确诊后的24h内抽取静脉血，用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例（Treg％）及CD4／CD8的比值。同时留取细胞培养，以嗜银染技术定量观察外周血淋巴细胞核仁形成区银染蛋白（Ag—NORs），以核仁银染面积与核面积的比值（IS％）表示，了解淋巴细胞的增殖情况。对人选患者于诊断成立的第1d和第5d留取痰、分泌物等标本行细菌学培养，观察患者的继发感染情况。选择同期健康查体者40例作为对照组。结果与对照组比较，病例组早期Treg％显著升高[（14．21±3．43）％比（9．53±3．22），P〈0．01]，IS％及CD4／CD8显著下降[（5．94±0．66）％比（6．74±0．95）％，（1．22±0．25）％比（1．72±0．36）％，P均〈0．01]。病例组中发生继发感染14例，其Treg％较无继发感染患者显著增高[（18．69±4．21）％比（12．58±2．49）％，P〈0．01]，CD4／CD8显著下降[（1．15±0．25）％比（1．39±0．25）％，P〈0．01]。结论检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞的水平有助于评估严重多发创伤患者的细胞免疫状态，预测继发感染。     

HIV／AIDS患者CD4^＋、CD8^＋及WBC检测分析

目的分析HIV／AIDS患者外周血T辅助细胞（CD4^＋）、T抑制细胞（CD8^＋）和白细胞（WBC）检测结果。方法CD4^＋和CD8^＋计数通过免疫荧光标记,采用流式细胞仪检测;白细胞（WBC）计数采用全自动细胞分析仪检测。结果118例HIV／AIDS住院患者,WBC降低组（3．00±0．61）×10^9/L的CD4^＋和CD8^＋分别为（68．60±38．98）个/ul和（266．89±126．52）处／ul,WBC正常组（7．13±5．12）×10^9／L的CD4＋和CD8＋分别为（104．39±61．37）个/ul和（380．17±134．06）个/ul,两者差异有统计学意义（t1＝5．78,守3．62,t3=5．35,P均〈0．01）;两组别CD4^＋／CD8^＋比值比较均呈有统计学意义（P〈0．05）。结论HIV,AIDS患者在发病过程中与CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、WBC有密切相关,建议HIV感染者尽早进行医学咨询并做CD4^＋、CD8^＋和血常规的检测,以了解病情的进展及进行抗病毒治疗。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-7与细胞免疫的关系

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-7含量与T淋巴细胞亚群、调节性T细胞百分比的关系,探究IL-7对慢性乙型肝炎细胞免疫作用的影响。方法慢性乙型肝炎患者组、慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带组、健康对照组,采用ELISA法检测受试者外周血IL-7含量,流式细胞仪技术检测外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+调节性T细胞百分比。结果 CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血IL-7含量分别为(1.68±0.58)ng/mL、(3.83±0.62)ng/mL和(6.25±0.32)ng/mL,3组间存在显著性差异(P0.05);CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血T细胞亚群CD4+T淋巴细胞分别为(31.3±3.3)%、(38.1±6.8)%、(43.2±9.4)%,CD8+T淋巴细胞分别为(24.8±5.2)%、(28.1±3.4)%、(30.5±8.6)%;CD4+CD25+调节性T细胞分别为(10.9±1.3)%、(7.4±1.0)%、(4.2±1.1)%。CHB组外周血IL-7明显低于HBV携带组及健康对照组,且与CD4+T细胞百分比呈负相关(r1=-0.58,P0.05),与CD8+T细胞百分比呈正相关(r2=0.63,P0.05),与CD4+CD25+调节性T细胞百分比呈负相关(r3=-0.43,P0.05)。结论 CHB患者外周血IL-7负调控调节性T细胞,对CD8+T细胞的细胞免疫有促进作用。