子痫前期患者胎盘及脐带组织 IDO、MIF表达变化及意义

目的观察子痫前期(PE)患者胎盘及脐带组织吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达变化,并探讨其意义。方法 PE患者66例,其中轻度32例(轻度组)、重度34例(重度组),同期健康晚孕妇女42例作为对照组。分别采用RT-PCR法和Western blot法检测胎盘、脐带组织中IDO、MIF mRNA和蛋白,用彩色超声多普勒诊断仪检测各组产前胎儿的脐动脉血流阻力指数(RI),记录新生儿体质量。结果重度组、轻度组、对照组胎盘、脐带组织IDO mRNA及蛋白相对表达均逐渐升高,MIF mRNA及蛋白相对表达、RI均逐渐降低;组间两两比较,P均<0.01。重度组新生儿体质量均低于轻度组和对照组,P均<0.01。PE患者中,胎盘、脐带组织IDO、MIF mRNA相对表达均呈负相关(r分别为-0.468、-0.455),P均<0.01;胎盘、脐带组织IDO mRNA表达水平与RI均呈负相关(r分别为-0.317、-0.526),与新生儿体质量均呈正相关(r分别为0.398、0.461),P均<0.01;胎盘、脐带组织MIF mRNA表达水平与RI均呈正相关(r分别为0.393、0.502),与新生儿体质量均呈负相关(r分别为-0.302、-0.431),P均<0.01。结论 PE患者胎盘及脐带组织中IDO表达降低、MIF表达升高,与胎儿RI升高和新生儿体质量降低有关,可能参与PE的发病。     

雷公藤多甙对慢性脑低灌注大鼠海马CA1区环氧化酶-2表达的影响

目的 观察雷公藤多甙(TWP)对慢性脑低灌注大鼠海马CA1区环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 采用永久性结扎双侧颈总动脉制成大鼠慢性脑低灌注模型,在模型组的基础上,TWP低剂量组和高剂量组及生理盐水组分别予以TWP10 mg·kg-1·d-1和30 mg·kg-1·d-1及生理盐水连续灌胃,造模后1月、2月及3月应用免疫组织化学染色观察大鼠海马CA1区COX-2的表达.结果 1月时,各组间COX-2的表达差异无显著性(P>0.05);2月及3月,与正常对照组比较,模型组和生理盐水组COX-2表达显著增加(P<0.01);与模型组和生理盐水组比较,TWP高剂量组和低剂量组COX-2表达显著降低(P<0.01),但高剂量组和低剂量组间比较差异无显著性(P>0.05),结论 慢性脑低灌注大鼠海马CA1区COX-2表达在造模后2月明显增高,TWP能下调海马CA1区COX-2的表达,这种作用在高剂量和低剂量组间差异无显著性.     

吲哚胺2,3-二加氧酶抑制剂对慢性脑低灌注大鼠认知功能损害的行为学改善

目的观察使用吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)抑制剂后慢性脑低灌注大鼠认知功能损害的行为学改善,及血犬尿氨酸(KYN)、犬尿喹啉酸(KYNA)水平的变化。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组,对照组和IDO抑制剂组,各10只,后2组采用改良的永久性双侧颈总动脉结扎术制作慢性脑低灌注大鼠模型。Morris水迷宫检测大鼠空间学习与记忆能力变化,高效液相色谱-荧光检测法检测血KYN、KYNA的水平,免疫组织化学检测大鼠海马CA1区IFN-γ、TNF-α表达。结果与假手术组比较,对照组IFN-γ、TNF-α表达明显升高(P<0.05);与对照组比较,IDO抑制剂组大鼠第4、5天逃避潜伏期缩短,平台象限游泳距离百分比增加,KYN[(15.33±0.90)μmol/L vs(1.69±0.94)μmol/L]及KYNA[(39.51±3.81)μmol/L vs(25.66±6.80)μmol/L]水平明显降低(P<0.05),但IFN-γ、TNF-α表达无显著差异(P>0.05)。结论 IDO抑制剂不影响炎性因子表达,但可减少血KYN及KYNA表达,可改善慢性脑低灌注所致的认知功能损害的空间学习及记忆能力。     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的 研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用.方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组.卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型.末次激发24 h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF) Th2细胞因子(IL-4和IL-13).Western blot检测肺组织IDO蛋白表达.结果 正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P＜0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组肺组织IDO)较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P＜0.05).结论 布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关.     

慢性脑低灌注大鼠海马CA1区VEGF和磷酸化tau蛋白的表达及意义

目的 观察慢性脑低灌注大鼠海马CA1区血管内皮生长因子(VEGF)和磷酸化tau蛋白的表达及意义.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组(对照组)、假手术组和模型组.采用永久性结扎双侧颈总动脉建立慢性脑低灌注模型(2VO);实验开始后1、2、3月,应用免疫组织化学染色法检测海马CA1区VEGF和磷酸化tau蛋白的表达.结果 与对照组和假手术组比较,模型组海马CA1区VEGF表达在1、2月时明显增高(P＜0.05),3月时各组间表达差异无显著性(P＞0.05).磷酸化tau蛋白表达在1月时各组间差异无显著性(P＞0.05);2和3月时,模型组表达较对照组和假手术组明显增高(P＜0.05).结论 慢性脑低灌注时VEGF表达增高可能是一种自身保护机制,磷酸化tau蛋白参与了慢性脑低灌注认知功能损伤过程.     

吲哚胺2,3-双加氧酶——多种肝病中发挥双刃剑作用的重要介质

吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是一种重要的免疫调节酶,可降解哺乳动物必需氨基酸色氨酸水平,通过犬尿氨酸途径催化起始和限速步骤并产生多种代谢产物参与免疫应答。IDO一方面对微环境发挥免疫抑制作用,导致感染、肿瘤细胞免疫逃逸等;另一方面,对细菌、寄生虫等病原体同样发挥抑制作用,一定程度上保护机体免受病原体的侵害。因此,IDO被认为是在多种肝脏疾病发生发展中具有双刃剑作用的重要介质。本文就IDO在病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、肝棘球蚴病中的最新研究进展作一综述。     

脑慢性低灌注大鼠海马M1 受体、ADAM17水平变化及意义

目的观察脑慢性低灌注老龄大鼠模型海马组织M1受体及解整合素—金属蛋白酶17（ADAM17）表达的变化,探讨阿尔茨海默病（AD）与脑慢性低灌注之间的联系。方法将56只老龄大鼠随机分为A组和B组,各28只。A组永久性阻断双侧颈总动脉,制作脑慢性低灌注模型。B组只进行相应的手术步骤,而不结扎、阻断血流。采用Y型电迷宫分别于术后14、28 d检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法和免疫印迹法检测上述时间点海马组织M1受体和ADAM17的表达。结果A组术后14、28 d学习记忆能力较B组减退,M1受体和ADAM17表达较B组明显下降（P均〈0.01）。结论脑慢性低灌注可损害老龄大鼠学习记忆能力,导致AD发生,其机制可能与海马组织M1受体及ADAM17的表达下降有关。     

IFNγ、IL1诱导人脑膜成纤维细胞IDO抗弓形虫增殖

目的探讨IFN-γ、IL-1诱导人脑膜成纤维细胞(Human meninx fibroblast,HMF)抗弓形虫感染的机制.方法采用3H-尿嘧啶(3H-U)特异标记的弓形虫在HMF内的增殖实验, 以及通过反相高效液相色谱仪检测吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的活性.结果 IFN-γ、IL -1单独或协同都可诱导HMF产生IDO,降解胞内必需氨基酸色氨酸,弓形虫合成蛋白质时, 由于发生"色氨酸饥饿"而被抑制生长,加入外源性色氨酸可逆转IFN-γ、IL-1对弓形虫的抑制作用.结论诱导HMF产生IDO降解胞内色氨酸是IFN-γ、IL-1抗弓形虫感染的机制 .     

慢性脑灌注不足大鼠海马区早老素-1的表达

目的观测慢性脑灌注不足(CVI)大鼠海马区早老素-1(PS-1)基因及其蛋白产物的动态表达,以探讨脑缺血对PS-1表达的影响。方法110只雄性W istar大鼠,随机分为对照组及CVI组,每组55只。根据手术后不同时间再将大鼠分为术后3、6、12 h,1、2、3、7、14 d和1、2、4个月组,每组5只。结扎双侧颈总动脉建立CVI模型,于术后规定时间取脑组织,行原位杂交及W estern印迹检测PS-1基因及其蛋白产物的表达。结果PS-1 mRNA阳性细胞主要是神经元,在大脑皮质Ⅲ、Ⅴ层锥体细胞染色最强;海马CA3、齿状回的表达比CA1区更强。与对照组相比,CVI组随着缺血时间的延长,阳性细胞数量减少,结构欠清晰,呈固缩或均匀着色,但明显的细胞坏死改变较少见;组织明显疏松。半定量分析表明,与对照组比较,CVI组阳性细胞积分光密度从第12小时开始升高(7 423±1 609对6 889±2 296),至第3天达高峰(13 356±3 503对7 201±2 239,P<0.01),之后逐渐下降至接近或略低于对照组水平。在缺血时间更长的CVI组中,齿状回PS-1mRNA阳性神经元数量较CA1区保留更多。W estern印迹结果与PS-1 mRNA的变化近似,与对照组积分光密度(183±36)比较,PS-1蛋白含量于双侧颈总动脉结扎术后第12小时轻度升高(249±57),第3天达高峰(966±178),第14天下降至对照组水平,1个月后略低于对照组(103±25)。结论脑缺血可以通过影响PS-1的表达促进缺血性脑损伤。     

慢性脑低灌注的病理生理学和药物治疗

慢性脑低灌注时,脑组织发生一系列病理生理学改变,临床主要表现为进行性认知功能减退,是血管性痴呆、Alzheimer病和Binswanger病等多种疾病发展过程中的一个共同的病理学过程。目前对慢性脑低灌注的临床治疗方法和手段极其有限。因此,研究其发病机制以及预防和治疗措施显得尤为重要。     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用。方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组。卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF)Th2细胞因子(IL-4和IL-13)。Western blot检测肺组织IDO蛋白表达。结果正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P0.05);哮喘组肺组织IDO较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P0.05)。结论布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关。     

大鼠脑缺血再灌注后海马组织PI3-K信号通路的变化

目的 探讨脑缺血再灌注（I/R）损伤后海马组织PI3-K信号通路的变化情况.方法 线栓法制备脑I/R大鼠模型,采用Western印迹法检测大鼠海马组织PI3-K的表达.结果 与正常对照组比较,脑缺血1 h再灌注12、24、72 h各组,海马组织PI3-K的表达均明显增加,且在12～72 h之间PI3-K表达有逐渐增加的趋势.结论 PI3-K信号通路参与了脑I/R引起的海马神经元损伤的病理过程.     

吲哚胺2,3-双加氧酶参与调控寄生虫与宿主免疫互作关系的研究进展

吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是一种重要的免疫调节酶,主要通过耗竭色氨酸(tryp-tophan,Trp)和产生多种代谢产物来调节免疫效应.近年来,对IDO免疫功能的研究大多局限在肿瘤、自身免疫性疾病等领域,而在寄生虫病中的研究相对较少,尤其是寄生虫与宿主免疫互...     

大鼠海马脑片缺血-再灌注模型中一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的 建立器官型海马脑片缺血-再灌注模型,以阐明一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血-再灌注中的作用。 方法 以12只出生7-8 d的Sprague-Dawley乳鼠制备海马脑片,根据培养时间随机分为4组,每组2个微孔膜,每个Millcell-CM微孔膜放置6张脑片,在培养液和气体界面上培养脑片,4组中每组36张脑片。培养14 d后,缺氧、缺糖30 min,再灌注12、24和36 h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹技术,分别检测脑片组织中一氧化氮、NOS的mRNA和蛋白质水平的变化;用改良镉还原法检测培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量;生化法榆测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平。 结果 缺血-再灌注模型的脑片组织,诱导性的一氧化氮合酶(iNOS)和神经源性的一氧化氮合酶(nNOS)在mRNA和蛋白质水平均表达上调,培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量明显高于对照组,差异有显著意义(P<0.05)。同时,培养液中LDH的水平随再灌注时间的延长而升高。结论 一氧化氮及NOS在脑缺血-再灌注损伤中起着重要作用。     

吲哚胺-2,3双加氧酶、白细胞介素-10及白细胞介素-17变化与慢性阻塞性肺疾病的相关性

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者血中吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)、白细胞介素(IL)-10及IL-17变化及其临床意义。方法检测33例COPD稳定期患者及21例健康对照组外周血中IDO mRNA、IL-17及IL-10水平。结果与健康对照组相比,COPD稳定期患者IDO mRNA及IL-10下降(P0.05),IL-17升高(P0.05)。结论 COPD稳定期患者中IDO减少,诱导IL-17分泌增加,IL-10分泌减少,IDO的减少可能参与了COPD慢性炎症的发生发展,提高机体树突细胞IDO的分泌有望为COPD的治疗开辟新的思路。     

小鼠泡型包虫囊液对小鼠骨髓来源树突状细胞表达IDO的影响

目的 探讨小鼠泡型包虫囊液(MCF)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)表达IDO的能力。方法 通过体外诱导培养获得BMDCs,分别与MCF(MCF组)、rmIFN-γ(阳性对照组)和RPMI-1640培养基(阴性对照组)进行共培养,在不同时间点收集各组BMDCs,采用Real-time PCR方法检测BMDCs表面IDO mRNA转录水平,Western blotting方法检测BMDCs表面IDO蛋白水平,ELISA方法检测BMDCs上清液中IDO浓度变化。结果 MCF组BMDCs表面IDO mRNA相对表达量和BMDCs上清液中IDO浓度在24 h达到峰值,明显高于阴性对照组(F=303.305,5752.473,P<0.01);而MCF组BMDCs表面IDO蛋白相对表达水平在48 h达到最高值,明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(F=70.971,P<0.01)。结论 MCF具有上调BMDCs表面IDO表达的能力,为进一步揭示泡型包虫病的免疫耐受分子机制提供了理论依据。     

慢性脑低灌注小鼠模型构建及其认知功能研究

目的 通过改良微弹簧双侧颈总动脉狭窄（BCAS）法构建慢性脑低灌注（CCH）小鼠模型,并观察其认知功能。方法 本实验时间为2022年4—5月。选取30只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为假手术组和模型组,各15只。模型组小鼠通过改良微弹簧BCAS法构建CCH小鼠模型,主要使用直径0.08 mm的非吸收外科缝合线,将直径0.18 mm的钢丝与颈总动脉（CCA）牢固结扎,然后缓慢抽出钢丝。假手术组小鼠仅分离两侧CCA,随后缝合消毒。术后第1天进行MRI扫描;术后第1天、1个月和2个月,分别从假手术组和模型组随机选取5只小鼠,检测其脑血流量（CBF）及低灌注区占比;两组小鼠均于术后2个月进行Morris水迷宫实验,以检测其实验第1～5天游泳距离、逃避潜伏期及实验第6天60 s内穿过平台象限的次数。结果 T2WI显示,术后第1天两组小鼠均未发生急性脑梗死及其他异常改变。术后第1天、1个月、2个月,模型组小鼠CBF少于假手术组,低灌注区占比高于假手术组（P<0.05）;术后1个月、2个月,模型组小鼠CBF多于术后第1天,低灌注区占比低于术后第1天（P<0.05）。实验第3、4、5天,...     

细粒棘球蚴抗原诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶的动态观察

目的动态检测细粒棘球蚴不同抗原体外诱导树突状细胞表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)。方法在体外实验的条件下,获得C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs),分别应用15μg/ml重组抗原B(rAgB)、5mg/ml小鼠囊型包虫囊液(MHF)、1 000U/ml IFN-γ(阳性对照)刺激BMDCs,在6、18、24、48、60h采用实时荧光定量RT-PCR动态监测IDO、IL-10mRNA相对表达情况;在不同时间点收集各组DCs,应用Western blot检测IDO蛋白的表达。结果 FQ-RT-PCR显示,rAgB处理组IDO mRNA在24h时上调26.8倍,IL-10mRNA在48h时上调65.1倍,MHF处理组干预24h时IDO mRNA、IL-10mRNA表达分别上调12.6倍和3.9倍。Western blot显示IDO的表达可被rAgB、MHF上调,rAgB处理组在24h时出现IDO条带,MHF处理组于48h出现MHF条带。结论 rAgB、MHF均可上调DCs表面IDO的表达,并在一定时间内rAgB上调IDO表达的能力强于MHF。推测在CE的慢性感染过程中,IDO作为调节宿主反应的分子开关可能在Th2型反应中发挥着主导作用,棘球蚴致机体免疫逃避中可能参与抑制炎症反应。     

大鼠慢性脑灌注不足时的运动诱发电位

目的 制备大鼠慢性脑灌注不足模型,观察运动诱发电位(MEP)变化,研究慢性脑低灌注对脑传导功能的影响.方法 采用双侧颈总动脉结扎制作慢性脑灌注不足动物模型,实验分为对照组、缺血半月组、缺血1月组和缺血2月组共4组.使用电刺激诱发,双下肢记录,刺激电极放于皮层运动区,记录电极置于对侧腓肠肌,记录皮层MEP,观察潜伏期和波幅变化.结果 慢性低灌注期MEP潜伏期显著延长(P<0.01),并随低灌注持续时间延长而出现MEP潜伏期延长更为明显.结论 慢性低灌注可以引起脑内传导功能受损,临床上MEP可用来反映慢性脑灌注不足后轴索的功能状态.