屋尘螨鼻激发在变应性鼻炎研究中的应用价值

屋尘螨鼻激发是人为将一定剂量的屋尘螨变应原接触鼻黏膜从而激发相应的鼻炎症状,以观察屋尘螨变应原与变应性鼻炎相关性的试验方法,通过观察屋尘螨鼻激发前后气道黏膜的细胞学、免疫炎症介质以及气道反应性等变化来探讨上下气道的相互联系.因此它在变应性鼻炎的病理生理、免疫学等发病机制以及疗效评估等研究中很有价值.本文就屋尘螨鼻激发在...     

屋尘螨鼻激发在变应性鼻炎研究中的应用价值

屋尘螨鼻激发是人为将一定剂量的屋尘螨变应原接触鼻黏膜从而激发相应的鼻炎症状,以观察屋尘螨变应原与变应性鼻炎相关性的试验方法,通过观察屋尘螨鼻激发前后气道黏膜的细胞学、免疫炎症介质以及气道反应性等变化来探讨上下气道的相互联系。因此它在变应性鼻炎的病理生理、免疫学等发病机制以及疗效评估等研究中很有价值。本文就屋尘螨鼻激发在变应性鼻炎中的研究进展进行综述。     

屋尘螨和粉尘螨主要变应原的序列多态性分析

目的 探讨不同地域间屋尘螨和粉尘螨主要变应原变异体的差异。方法 分别提取中国华南地区培养的粉尘螨和欧洲商业化培养的屋尘螨和粉尘螨的螨体、螨卵和全螨培养物总RNA,采用RT-PCR技术扩增第1组变应原的包含前导肽段、酶原肽段和成熟肽段,以及第2组变应原的包含前导肽段和成熟肽段的目的片段,根据国际标准参照物进行序列比较。 结果 欧洲商业化的屋尘螨Der p 1主要变异体是Der p 1.0105,除了第124V、50Y和19M位氨基酸有频繁的置换外,其余为散在的置换,出现8种新的变异体;Der p 2主要变异体是Der p 2.0104,置换集中在第40V、4T7、111M和114D位,出现6种新的变异体。中国华南地区的粉尘螨Der f 1变异体很少,出现3种新的变异体;与欧洲商业化的粉尘螨相比,中国华南地区有不同的Der f 2变异体,出现6种新的变异体。来自螨体、螨卵和全螨培养物的各主要变应原变异体无明显差异。 结论 不同地域间尘螨的主要变异体不同。     

屋尘螨致敏蛋白组分Derp1、Derp2和Derp10检测的临床意义

尘螨是最常见的室内变应原来源之一,诱导人IgE反应最主要的尘螨是屋尘螨和粉尘螨。为了解变应原IgE组分检测的临床诊断意义和作用,该文就Der p1、Der p2和Der p10的研究进展进行综述。     

江西地区AR患者变应原分布情况及血清尘螨sIgE与IgG4水平的关系

目的探讨江西地区变应性鼻炎（AR）患者常见变应原分布情况及血清尘螨特异性IgE（sIgE）和IgG4水平的关系。方法对164例AR患者进行11种常见变应原皮肤点刺试验（SPT）,采用ELISA法检测血清尘螨sIgE和sIgG4。结果变应原SPT阳性率为100%（164/164例）,变应原主要为屋尘螨（65.3%）、粉尘螨（58.2%）、热带螨（36.6%）和为德国小蠊（15.5%）;引起AR的单种变应原阳性76例,2种阳性者38例,≥3种阳性者50例;AR组血清尘螨sIgE和sIgG4水平高于对照组（P均〈0.01）;尘螨变应原阳性强度与血清尘螨sIgE水平呈正相关（r=0.221 7,P〈0.05）,血清尘螨sIgE与IgG4水平呈正相关（r=0.184 3,P〈0.05）。结论屋尘螨、粉尘螨、热带螨、德国小蠊是江西地区AR患者主要的变应原。AR患者血清尘螨sIgE和IgG4水平明显升高,监测血清sIgE和IgG4水平对AR的治疗有指导意义。     

螨制剂舌下免疫治疗对单一和多重致敏变应性鼻炎的疗效评估

目的观察单一和多重变应性鼻炎患者舌下脱敏的疗效异同并分析原因。方法回顾性分析舌下脱敏治疗1年以上单一和多重变应性鼻炎患者终止治疗1年后的疗效,并对粉尘螨变应原组分与其他点刺变应原作同源进化树分析。结果纳入患者50例,舌下免疫治疗显效22例,有效15例,无效13例,总有效率为74%。50例患者中30例(60%)为多重变态反应患者,阳性率最高的前3种变应原依次为蟑螂(83%)、冬季花粉(70%)和蚕丝(63%)。用有序多分类资料比较的秩和检验分析舌下脱敏治疗1年以上单一尘螨过敏患者与多重变态反应患者的疗效,两组总体分布相同。结论使用舌下含服粉尘螨滴剂治疗变应性鼻炎,多重与单一尘螨变态反应患者治疗效果相当。粉尘螨滴剂亦可用于多重变态反应患者常规治疗。     

屋尘螨抗原致敏大鼠支气管上皮细胞白介素6、白介素8和转化生长因子β1的表达

目的 探讨屋尘螨抗原(Derp1)对大鼠原代支气管上皮细胞白介素6(IL-6)、IL-8和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将实验随机分成正常对照组和实验组,实验组中细胞分别暴露于3个不同的Derp1浓度(1、5、10 mg/L)及3个不同的培养时间点(4、8和24 h).然后用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测细胞及细胞上清液中IL-6、IL-8和TGF-β1的表达及含量.结果 与对照组相比,实验组各指标有明显变化.Derp1刺激4h,IL-6和IL-8表达开始升高,直至8～24 h呈高水平.而在Derp1浓度≥5 mg/L条件下,IL-6和IL-8表达最明显,与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).而TGF-β1 则随着时间和浓度的增加.其表达水半呈逐渐上升趋势,各时间点的表达差异均有统计学意义(P＜0.05).各炎症指标(IL-6,IL-8,TGFβ1)ELISA结果与PCR趋势基本一致.结论 Derp1刺激气道上皮细胞,引起支气管上皮细胞免疫反应,释放一系列炎症因子如IL-6、IL-8和TGF-β1.从而参与哮喘气道炎症反应及哮喘的气道重塑.     

屋尘螨过敏原对人支气管上皮细胞IL-32和相关炎症因子的影响

目的 探究IL-32在气传过敏原诱导的固有免疫反应中的作用.方法 将同一批次处在指数生长期的人支气管上皮细胞(16HBECs)随机分为4组,设置空白对照组(A组),不同浓度(B:2μg/mL,C:10μg/mL,D:20μg/mL)屋尘螨(house dust mite,HDM)稀释液组,B、C和D组均分别刺激16HB...     

海南变态反应性疾病患儿对屋尘螨/粉尘螨和仓储螨的特异性IgE

目的探讨海南变态反应性疾病患儿对尘螨和仓储螨的特异性IgE水平。方法对海南变态反应性疾病患儿进行13种常见变应原皮肤点刺和7种螨的体外特异性IgE检测。结果 121例患儿中对屋尘螨和粉尘螨的皮肤点刺阳性率为100%,而对热带无爪螨的阳性率为85.8%。7种螨的体外特异性IgE依次为屋尘螨99.2%、粉尘螨95.0%、热带无爪螨87.6%、家嗜甜螨79.7%、害嗜鳞螨67.8%、腐食酪螨59.5%和粗脚粉螨52.9%。对仓储螨过敏的患儿同时都对屋尘螨和热带无爪螨过敏,并且IgE水平更高。除热带无爪螨外,其他仓储螨的特异性IgE有很好的相关性。结论除屋尘螨和粉尘螨外,热带无爪螨也是海南地区的重要致敏原,其他仓储螨亦有可能引起慢性变态反应性疾病。     

高渗盐水与蒸馏水气道激发试验的相关性研究

采用双盲随机法对12例哮喘患者分别吸入高渗盐水(HS)和蒸馏水(UNWD)进行气道激发试验的相关性研究。结果证实:两者气道激发试验的反应性均为100%,高渗盐水(HS)PC_(20)-FEV_1和蒸馏水(UNWD)PD_(20)-FEV_1之间呈正相关,哮喘的轻重程度与HSPC_(20)和UNWD-PD_(20)呈反比。UNWD气道激发的敏感性并不低于HS,且方法简单、无副作用。     

Clinical Effectiveness of Tyrophagus putrescentiae Allergy by Local Nasal Immunotherapy Using Strips of Dermatophagoides pteronyssinus

Background. House dust mites are a major source of aeroallergens for patients with allergic rhinitis and asthma. Most patients with allergic rhinitis are simultaneously sensitized by Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) and Tyrophagus putrescentiae (Tp). Dp and Tp allergy in allergic rhinitis can be caused by cross-reactivity, and the group 2 mite allergens appear to be the major cross-reactive allergens in mites. We previously demonstrated that local nasal immunotherapy (LNIT) with Dp-coated strips could modulate the serum levels of Dp-specific IgE. The aim of this study was to investigate whether Tp allergy could be modulated by LNIT with Dp. Methods. Both Tyr p2-specific IgE in the sera and its effect on Tyr p2-triggered basophil histamine release (BHR) were measured to evaluate the Tp-mediated allergic reaction before and after LNIT. Results. The results showed that not only was Tyr p2-specific IgE reduced, but also Tyr p2-triggered histamine release in the sera after LNIT with Dp allergen strips. There was a significant reduction of Tyr p2-specific IgG1 and upregulation of IgG4 after LNIT with Dp allergen strips. When the amounts of histamine were compared between the two groups, rDer p2-triggering or rTyr p2-triggering histamine release was significantly reduced in the Dp treatment group compared with the normal saline treatment group. No matter in the rDer p2-triggering or rTyr p2-triggering histamine release, differences between before LNIT and after LNIT were statistically significant in the Dp group. Conclusion. Our study demonstrated that not only was Tyr p2-specific IgE reduced in the sera, but also its biological activity of Tyr p2-triggered BHR after LNIT with Dp strips. It is conceivable that the clinical effectiveness of Tp allergy by LNIT with Dp allergen strips may exist.     

不同化学制剂及复配对户尘螨的药效

目的通过有效制剂的复配以降低单一化学抑螨/杀螨剂的浓度并保证尘螨防治效果。方法参照国标GB13917.1-92规定的方法,选择6种化学制剂或其复配制剂,对户尘螨（Dermatophagoides pteronyssinus）进行室内药效比较。结果喷药24小时后,1.8%苯甲酸苄酯的杀螨率达100%;4%八硼酸二钠＋0.05%苄索氯铵＋0.9%苯甲酸苄酯复配制剂的杀螨率为88%;其余4种制剂杀螨率均低于70%,效果不佳。结论1.8%苯甲酸苄酯的急性杀螨效果最好,其次为4%八硼酸二钠＋0.05%苄索氯铵＋0.9%苯甲酸苄酯复配制剂。提示在保持一定杀螨效果的基础上,复配可降低单一化学抑螨/杀螨剂的使用浓度,并规避了苯甲酸苄酯的非水溶性质,可通过广泛长期使用而达到尘螨变应原的防治效果。     

屋尘螨8类变应原(Der p 8)克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

目的 对屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus) 8类变应原Der p 8进行克隆表达、纯化及免疫原性分析,并用生物信息学方法分析其同源性。方法 根据已知Der p 8基因序列,设计PCR引物;提取屋尘螨总RNA,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增得到Der p 8的cDNA片段,以cDNA和设计的引物进行PCR扩增;扩增产物连接至T载体并转化入大肠埃希菌(E.coli Top10)中,培养后挑选阳性单克隆菌落测序。测序正确后,转入表达载体pET-32a,经酶切鉴定、测序后转入表达菌BL21,大量表达重组蛋白Der p 8。用亲和层析法纯化后进行免疫印迹分析(Western blotting)。利用生物信息学方法分析Der p 8基因的同源性。 结-果 酶切鉴定显示Der p 8表达载体构建成功,目的基因分子量约为700 bp;SDS-PAGE电泳显示Der p8重组蛋白成功表达,分子量约为 38 kD,且主要以包涵体形式存在。Western blotting结果显示Der p 8重组蛋白具有免疫原性。同源性分析结果显示本实验克隆Der p 8基因与NCBI基因库的Der p 8基因同源性为76.97%。结论 本实验成功克隆表达并纯化出具有免疫原性的Der p 8重组蛋白,为临床上应用重组蛋白于诊断和治疗提供理论基础。     

屋尘螨重组变应原Der p 2的表达、纯化及免疫学活性鉴定

目的大量诱导表达含pET24a-Derp2质粒的BL21工程菌,表达产物以重组蛋白包涵体的形式存在,经包涵体洗涤与溶解后,使用结合6组氨酸的镍柱进行亲和层析纯化蛋白质,用梯度复性方法进行重组蛋白的复性,再用屋尘螨过敏性哮喘患者阳性血清经Western blot方法分析Derp2重组蛋白的免疫学特性。纯化后的融合蛋白Derp2具有较高的纯度及较强的免疫活性,可望作为有效的屋尘螨变应原诊断试剂和疫苗的候选分子。     

海南省蜉蝣过敏原临床致敏性

目的了解海南省临床蜉蝣过敏情况,为过敏性鼻炎的流行病学研究及临床诊断、治疗和预防提供依据。方法对500例过敏性鼻炎患者用蜉蝣过敏原进行前臂皮肤点刺试验,然后随机选择20例蜉蝣点刺阳性患者进行蜉蝣过敏原鼻黏膜激发试验。结果 500例皮肤点刺试验中,蜉蝣阳性者占58.6%（293/500）,20例阴性对照者皮肤点刺均为阴性100%（20/20）;20例蜉蝣皮肤点刺阳性患者中过敏原鼻黏膜激发试验阳性者为20例（100%）,20例阴性对照未见阳性反应。结论皮肤点刺和过敏原鼻黏膜激发试验结果相符合,蜉蝣为海南省重要过敏原。     

不同过敏原对变应性鼻炎患者症状及生活质量影响的比较

目的探讨武汉地区常见过敏原——尘螨和艾蒿所致的变应性鼻炎(AR)患者之间的症状严重程度以及对患者生活质量影响的差异。方法选取经血清变应原特异性IgE(sIgE)检测的单一对尘螨过敏的变应性鼻炎患者46例、单一对艾蒿过敏的变应性鼻炎患者39例。用症状视觉模拟评分量表(VAS)评价患者症状的严重程度;用鼻结膜炎相关生活质量问卷(RQLQ)评价患者的生活质量。通过对调查结果的分析判断,对比2种不同过敏原所致变应性鼻炎患者VAS和RQLQ评分,并初步计算同种过敏原不同性别之间、同性别不同过敏原间患者症状及生活质量影响的差异。结果对尘螨过敏的变应性鼻炎患者在VAS得分各方面均较艾蒿组高,其中2组之间鼻部症状差异有统计学意义(P<0.05),眼部以及胸部症状差异无统计学意义(P>0.05)。尘螨组及艾蒿组内男性和女性之间各项症状差异均无统计学意义(P>0.05);两过敏原组之间男性和男性、女性和女性相比,除鼻部症状差异有统计学意义(P<0.05)外,其余症状差异无统计学意义(P>0.05)。RQLQ评分两过敏原组差异无统计学意义(P>0.05),尘螨组及艾蒿组内男女之间相比除鼻炎相关行为和情感反应项目得分差异有统计学意义(P<0.05)外,其余生活质量评分项目差异无统计学意义(P>0.05);两过敏原组之间男性和男性,女性和女性相比各项生活质量评分差异均无统计学意义(P>0.05)。结论由尘螨和艾蒿所致的变应性鼻炎患者的症状存在差异,尘螨所致的变应性鼻炎患者症状较重;这2种过敏原均影响变应性鼻炎患者的生活质量,但两者之间无明显差异。