肝细胞生长因子与三七皂苷对自体肝细胞脾内移植的影响

目的：探索促进肝化脾增量及缩短其再生周期的新途径。方法：应用肝细胞生长因子（ＰＨＧＦ）与三七皂苷（ＰＮＧＳ）于自体肝细胞脾内移植（ＩＨＡＰ）的动物模型上，分别于移植术后２周、１２周时对病理组织学、电镜形态、肝化脾匀浆谷丙转氨酶含量及脾内肝细胞增殖指数等指标进行观察分析。结果：移植术后２周，三七皂苷组脾内肝细胞水肿、变性程度较轻，肝化脾匀浆丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）含量达（９２８．０±２６８．１）Ｕ／ｇ，较对照组［（６３９．４±１３８．４）Ｕ／ｇ］明显增高（Ｐ＜０．０１）；移植术后１２周，肝细胞生长因子组脾内肝细胞生长好，数量、面积大，肝化脾匀浆ＡＬＴ含量达［（２３２４．８±４００．８）Ｕ／ｇ］，增殖指数（Ｉｐ达３．８３％±０４２％［对照组分别为（１８３９．４±３６８．４）Ｕ／ｇ、２．８９％±０．４４％］，与对照组相比差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结论：三七皂苷在早期对脾内肝细胞有一定的抗损伤保护作用，而肝细胞生长因子对加速肝化脾增量及缩短其再生周期有明显作用。     

三七皂苷对肾小管上皮细胞内活化蛋白-1和肝细胞生长因子表达的影响

目的探讨三七皂苷干预肾小管间质损害的效果及机制。方法体外培养人类近端肾小管上皮细胞,用三七皂苷等干预后,采用ELISA法检测活化蛋白-1和肝细胞生长因子。结果三七皂苷尤其是三七皂苷联合缬沙坦能抑制活化蛋白-1的分泌和促进肝细胞生长因子的分泌。结论三七皂苷尤其是联合血管紧张受体拮抗剂可通过抑制活化蛋白-1的分泌和促进肝细胞生长因子的表达,从而减少纤维连接蛋白、转化生长因子-β1的分泌,以减缓肾小管间质纤维化进程。     

肝细胞生长因子和表皮生长因子对体外肝细胞生长的影响

取成年小鼠肝细胞在RPMI1640培养液中加热60℃胎肝提取液(FE_(60)HSS),加热80℃胎肝提取液(FE_(80)HSS)及加热60℃成年雄性小鼠颌下腺提取液(M_(60)EGF),用I~(125)UdR掺入法测定其肝细胞DNA合成,结果显示FE_(60)HSS为8575±17cpm,FE_(80)HSS为4788±990cpm,M_(60)EGF为4592±1120cpm,和对照组1902±657cpm比较差异有非常显著意义(P值均<0.01)。FE_(60)HSS组对细胞DNA合成较FE_(80)HSS明显,说明HSS对加热80℃不很稳定。     

肝硬化鼠自体肝细胞脾内移植实验研究

本实验通过诱导大鼠肝硬变，在模型上进行半肝切除，正体肝细胞脾内移植，通过光镜，电镜，组织化学及＾９９ｍ锝标记亚锡酸钠（ＥＨＩＤＡ）扫描等，观察肝硬变情况下移植于脾内的肝细胞在不同时期的形态结构与功能变化，结果显示：移植于脾内的肝细胞能长期存活，并维持基本正常的肝细胞形态结构和功能，而且增殖能力较正常强，显示肝细胞脾内移植可能成为临床上难治性肝病的一种治疗手段。     

肝细胞生长因子和表皮生长因子对移植颗粒脂肪成活的影响

目的探讨表皮生长因子(EGF)和肝细胞生长因子(HGF)对移植颗粒脂肪的血运重建及脂肪成活的影响,为提高移植颗粒脂肪的成活率提供理论和实验依据。方法在颗粒脂肪移植的动物模型中,分别应用EGF、HGF、EGF+HGF。微刻度试管测量各组脂肪的存活体积,HE染色后观察移植体组织细胞形态学改变,免疫组化法检测各组移植组织的微血管密度值。结果同一时间段,各实验组组织中微血管密度值明显高于对照组。术后14d起,各实验组组织中脂肪存活体积明显高于对照组。结论 EGF和HGF均能促进移植颗粒脂肪的血管生成,并显著提高移植颗粒脂肪的成活率。HGF和EGF具有协同作用。     

自体骨髓干细胞移植对肝硬化患者的自蛋白及肝细胞生长因子的影响

目的探讨自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化患者促进肝细胞再生及改善肝功能的机制,并同成人新鲜血浆的疗效进行比较。方法40例肝硬化患者分为两组,一组采用自体骨髓干细胞移植治疗,另一组采用成人新鲜血浆治疗。观察两组患者治疗前后肝功能指标、肝细胞生长因子、白细胞、血小板的变化并进行比较。结果自体骨髓干细胞移植在改善肝脏功能、促进肝细胞再生、提升免疫功能的疗效明显优于成人新鲜血浆。结论自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化,可提高白蛋白及肝细胞生长因子的合成、分泌,促进肝细胞损伤的修复,使肝硬化的症状得到改善。     

自体肝细胞脾内移植治疗急性肝衰竭的实验研究

目的 为临床应用自体肝细胞脾内移植治疗急性肝衰竭探索新路。方法 用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠制备急性外科型肝衰竭模型，采用肝中叶门静脉分枝插管，用Ｉ型胶原酶灌注制备游离肝细胞，行自体肝细胞脾内移植。结果 病理组织学观察移植组１０周后大鼠脾内有弥散状、团状或单排列状肝细胞存在；同位素＾９９ｍＴｃ－ＨＩＤＡ测定证实其肝功能接近正常；对照组术后２４ｈ死亡３０％，４８ｈ累计死亡５５％，移植组分别为２０％和３０％。     

肝细胞生长因子对子宫内膜癌细胞增殖影响的实验研究

目的观察肝细胞生长因子(HGF)对子宫内膜癌细胞HEC-2B增殖的影响及子宫内膜癌细胞HEC-2B中HGF受体C-met的表达,了解HGF对子宫内膜癌细胞的作用及其机制。方法体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-2B,用RT-PCR的方法检测HEC-2B中HGF受体C-met有表达。对HEC-2B进行24 h血清饥饿后用不同剂量的HGF作用于HEC-2B。用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)分析细胞的增殖力,用流式细胞仪检测细胞的增殖周期。结果C-met在HEC-2B细胞中稳定表达,HGF促进细胞的增殖,并在一定的范围内有剂量依赖关系,各处理组与对照组相比,P<0.05。当HGF浓度达到60 ng.mL-1时,增殖水平较对照上调约1.9倍。结论HGF/C-met能够在体外促进子宫内膜癌细胞的增殖。     

MTT法检测异种肝细胞生长因子对大鼠肝细胞体外增殖的影响

目的 :研究肝细胞生长因子对大鼠肝细胞原代培养的影响。方法 :利用胶原酶原位二步灌注法分离大鼠肝细胞 ,接种并预培养 1 .5 h后 ,用含不同浓度 HGF的培养基继续培养至 48h,MTT比色法检测肝细胞生长因子对原代培养大鼠肝细胞增殖的影响。结果 :在所设加样量范围内 ,培养基所含 HGF为 1 0 μg/m L时 ,原代培养大鼠肝细胞的增殖出现最高峰。结论 :HGF对原代培养的大鼠肝细胞的增殖有明显的影响 ,但其作用效果无剂量依从关系     

自体肝细胞脾内移植治疗急性肝衰竭的实验研究

目的 探索临床应用自体肝细胞脾内移植治疗急性肝衰竭的新路。方法 用Wistar大白鼠制备急性外科型肝衰竭漠型,采用肝中叶门静脉分枝插管,用Ⅰ型胶原酶灌注制备游离肝细胞,行自体肝细胞脾内移植。结果 病理组织学观察移植组10wk后大鼠脾内有弥散状、团状或单排列状肝细胞存在;同位素^99mTc-HIDA测定证实其肝功能接近正常;对照组术后24h死亡30％,48h累计死亡55％．移植组分别为20％和30％。结论 实验提示脾内移值肝细胞可以存活且有一定代谢功能．能显提高急性肝衰竭大鼠的存活率。     

肝细胞生长因子与脑缺血

肝细胞生长因子 (hepatocytegrowthfactor,HGF)于 2 0世纪80年代从完全分化的肝细胞中被识别、提纯和克隆。最初它被认为是肝脏特异的致有丝分裂原 ,可促进肝细胞的生长及肝组织的再生。目前 ,已知HGF是一种间质来源的多效性生长因子 ,它具有广泛的生物学效应 ,参与机体多种器官组织细胞的生长、再生和重塑过程 ,其受体是原癌基因C met(C met protoncogene)的产物。近年来 ,HGF在基础及临床研究方面皆已取得了很大进展。现仅就其特性 ,尤其在脑缺血损伤中的研究进展综述如下。1　HGF及其生物学特性1982年在部分肝切除的大鼠血浆中提取…     

肝细胞生长因子的研究进展

就肝细胞生长因子国内外的基础和临床研究成果作一简要综述。     

肝细胞生长因子与急性肾衰竭

肝细胞生长因子（HGF）是一种问充质来源的一种多效性因子，对多种器官的多种细胞具有促有丝分裂，细胞移动及形态发生等多种生物学作用。在急性肾衰竭（ARF）中可减轻小管损伤，并加速肾小管细胞的功能恢复，促进肾小管生成，有较强的细胞保护和营养作用。     

肝细胞生长因子与脑梗死

肝细胞生长因子(hepatoeyte growth bctor,HGF)是1984年Nakamura等[1]发现并命名的,是一种可促使Madin-Darby犬肾细胞系和其他上皮细胞克隆分散为单个细胞的多肽因子,血管组织中也存在HGF及其受体C-met的局部调节系统.最近发现,急性脑梗死的梗死灶周围可见HGF表达上调[2,3],从而推断HGF可能参与了脑梗死的发生发展.本文对其与细胞生长因子的关系综述如下.     

肝细胞生长因子对转化生长因子诱导肾小管上皮细胞转分化的影响

目的应用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化,研究肝细胞生长因子(HGF)对肾小管上皮细胞的表型重塑的作用和机制。方法在正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E细胞株)培养液中分别加入TGF-β1及HGF,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态变化;免疫组织化学方法检测肌纤维母细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法分析测定培养细胞上清液中纤维连结蛋白(FN)的含量;RT-PCR检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达。结果1TGF-β1诱导肾小管上皮细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞样形态;α-SMA的表达、上清液FN含量、细胞CTGFmRNA表达明显增加(P<0.05)。2单纯HGF对细胞形态学、α-SMA的表达及FN含量与空白对照组无明显影响;不同浓度HGF组的CTGFmRNA表达较空白对照组均增加(P<0.05)。3HGF能抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞形态学改变;α-SMA的表达、FN水平均比诱导组TGF-β1明显下降(P<0.05);HGF抑制了TGF-β1诱导的CT-GFmRNA表达(P<0.05)。结论HGF能够负性调控TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化作用,减少FN分泌;HGF对TEMT的负性调节作用可能是通过减少CTGF表达来实现的。     

肝细胞脾内移植治疗大鼠肝衰竭

目的:优化急性肝衰竭模型的构建方法及探讨经脾内同种异体肝细胞移植治疗大鼠急性药物性肝衰竭的疗效,并观察脾内移植肝细胞的生物学活性。方法:采用D-氨基半乳糖(D-gal)建立大鼠急性药物性肝衰竭模型。腹腔注射不同剂量的(1.0,1.2,1.4,1.6g/kg)D-gal后,以肝功能指标、病理形态学、死亡率等综合评估肝脏细胞损伤的状态,确定模型构建的最佳方案。造模后24h,随机分为2组进行治疗,Ⅰ组:经脾内移植肝细胞悬液1ml(4.4×107个);Ⅱ组:经脾内移植不含肝细胞的培养液1ml。观察大鼠1周的存活率、肝脏功能和病理变化及移植肝细胞的生物学活性。结果:①不同剂量的D-gal可导致不同程度的肝损伤,而以1.2g/kgD-gal造模组的大鼠死亡率适中,肝功能损害及其肝脏病理组织学改变均符合临界急性肝衰竭的程度,较好地模拟了急性肝衰竭的病理生理改变且稳定性较好。②移植后3d,Ⅰ组与Ⅱ组大鼠存活率相比具有显著性差异(P<0.01);肝功能指标:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBiL)均有明显改善(P<0.01);肝组织病理切片显示:Ⅰ组的肝组织损伤程度明显比Ⅱ组轻。经HE和PAS染色证实,移植的肝细胞在受体脾内结构和功能保持较好。结论:①D-gal1.2g/kg腹腔注射可较好构建SD大鼠急性肝衰竭模型。②经脾内肝细胞移植能明显提高药物性肝衰竭大鼠的存活率、改善肝功能及肝组织病理变化。     

肝细胞生长因子对冠状动脉平滑肌细胞增殖迁移的影响

为观察肝细胞生长因子(HGF)对牛冠状动脉平滑肌细胞(BCASMC)增殖、迁移的影响,分离和培养BCASMC,采用四甲基偶氮唑蓝法观察HGF对BCASMC增殖的作用,倒置显微镜观察BCASMC的迁移。结果显示,对照组、HGF组BCASMC的D值相差显著(P<0.05),HGF组的BCASMC增殖率为45.2％,且迁移明显。提示HGF能促进BCASMC的增殖和迁移。     

肝细胞生长因子在人肝细胞中的表达及对肝细胞损伤的保护作用

目的　构建肝细胞生长因子 (HGF)真核细胞表达载体 ,并观察其在人正常肝细胞中的表达以及对细胞增殖和抗损伤能力的影响。方法　利用基因重组技术将HGF与绿色荧光蛋白 (GFP)融合并构建真核表达质粒 ,通过脂质体介导法 ,导入正常人肝细胞系中。用荧光显微镜以及免疫组织化学方法观察HGF表达情况。采用 [3 H] TdR掺入DNA法、PCNA免疫组织化学观察肝细胞DNA合成 ,了解肝细胞增殖能力的变化。用CCl4造成急性肝细胞损伤 ,通过测定细胞存活率、细胞内丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、K+ 的漏出量了解肝细胞的抗损伤能力。结果　酶切鉴定证实HGF片断已克隆到pEGFP N3 的BamHⅠ和SalⅠ位点之间 ,在转染人正常肝细胞后 ,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达 ,用免疫组化方法进一步证实了HGF蛋白在细胞中的表达。 [3 H] T转导HGF的肝细胞的DNA合成明显增加 (转染 96h后 ,[3 H] TdR掺入量为对照组的 7倍 )。PCNA免疫组化结果显示转导HGF的肝细胞阳性率明显增加 ,肝细胞增殖活性增加。转导HGF的肝细胞抗CCl4损伤的能力明显增强 ,肝细胞存活率显著提高 (83%与 6 1% ,P <0 0 5 ) ,细胞内丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、K+ 的漏出显著降低 (分别为 35 16U·L-1与 6 5 31U·L-1,P <0 0 1,5 5 9mmol/L与 6 0 2mmol/L ,P     

人参及人参皂甙对荷瘤小鼠血清中表皮生长因子含量的影响

给Ｃ５７ＢＬ／６小鼠移植Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（２×１０＾７）２周后，以放射免疫法测定其血清中表皮生长因子（ＥＧＦ）含量，肿瘤组为０．２８±０．０９μｇ／Ｌ，正常鼠组为０．１８±０．１１μｇ／Ｌ，移植肿瘤后服用人参煎剂组（人参组）为０．１６±０．１０μｇ／Ｌ，移植肿瘤后服用人参皂甙组（人参皂甙组）为０．２９±０．１１μｇ／Ｌ。肿瘤组鼠的ＥＧＦ含量明显高于正常鼠，人参组明显低于肿瘤组鼠，人参皂甙组与肿瘤