双调蛋白在人体睾丸组织的表达特征

目的确定双调蛋白在人体睾丸组织和精子的表达特征,比较双调蛋白在正常人和隐睾症患者睾丸组织的表达差异。方法收集正常睾丸组织、精液精子和隐睾症患者的睾丸组织,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测双调蛋白的表达水平。结果双调蛋白在正常睾丸组织和精子均有表达,主要分布于睾丸长型精子细胞和成熟精子尾部;与正常睾丸组织比较,双调蛋白在隐睾组织的表达显著减少、隐睾组织生精小管的表达基本消失。结论在隐睾症睾丸中双调蛋白的表达显著减少,提示双调蛋白表达与睾丸发育有一定关系。     

同源盒A10和P53蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 研究结直肠癌组织中同源盒A10(HOXA10)和P53蛋白表达与临床病理特征及预后的关系。方法 收集2017年4月至2019年10月在西安市中心医院行手术治疗的97例结直肠癌患者的组织标本,采用免疫组织化学染色法检测癌组织及对应癌旁正常组织中HOXA10和P53蛋白表达情况。分析HOXA10和P53蛋白表达与临床病理特征的关系;Spearman相关性分析结直肠癌组织中HOXA10和P53表达的相关性;Kaplan-Meier生存曲线分析HOXA10和P53蛋白表达与患者术后生存率的关系。结果 97例结直肠癌组织中HOXA10和P53蛋白阳性表达率为74.2%和68.0%,对应癌旁正常组织中阳性表达率为35.1%和29.9%,差异均有统计学意义(P<0.001)。结直肠癌组织中HOXA10和P53蛋白表达呈正相关(r=0.657,P<0.05)。结直肠癌组织中HOXA10蛋白表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及浸润深度有关,P53蛋白表达与肿瘤直径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移、脉管浸润及浸润深度有关,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访32(5～61...     

利用高通量基因芯片建立与分析单侧隐睾症睾丸基因表达谱

目的:利用高通量基因芯片技术分析单侧隐睾症睾丸组织中差异表达的基因。方法:抽提6例单侧隐睾症患者和3例正常生育男性患者睾丸组织中mRNA,反转录后,探针标记cDNA。使用高通量cDNA微阵列人类全基因表达谱基因芯片(45 034个基因)检测睾丸组织基因表达谱。差异表达基因在MAS系统中进行Path-way和GO分析。结果:Ratio>3.0或<0.33的数据项为差异表达的基因,单侧隐睾症患者睾丸生精组织中共检测到346个差异表达基因。其中上调基因60个,主要分布在1、15、5和19号染色体,集中在细胞周期、纤毛或鞭毛运动、DNA复制等聚类。下调基因286个,主要分布在1、19、16和11号染色体等,集中在精子发生和抗凋亡相关的基因聚类中。结论:单侧隐睾症涉及多功能基因表达的变化;单侧隐睾症睾丸基因表达谱的建立可为分析单侧隐睾症的遗传因素和探讨其生精功能异常的病因提供新的理论基础。     

表皮生长因子和表皮生长因子受体在隐睾症男童表达的改变及其临床意义

目的:探讨表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)在隐睾症男童的表达改变及其临床意义。方法：用放射性免疫法测定血清EGF，免疫组化法测定EGFR表达。结果(1)5—9岁及10—14岁隐睾症男童血清EGF水平显著低于正常男童(P＜0．01)，(2)腹腔隐睾症患者的血清EGF水平比腹股沟管内及腹股沟管外隐睾症患者显著为低，(3)睾丸固定术后6个月血清EGF水平显著增高(P＜0．05)，(4)2—4岁患者间质细胞中EGFR的表达显著低于5岁以上的患者(P＜0．05)，(5)腹腔隐睾症及腹股沟管内隐睾症患者的EGFR阳性表达显著低于腹股沟外隐睾症患者(P＜0．01)。结论：EGF及EGFR的表达可能和年龄及睾丸位置有关。睾丸固定术可改善隐睾症男童的EGF及EGFR的表达。     

CR16在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:研究糖皮质激素区域表达基因16(corticosteroids and regional expression 16,CR16)在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达,探讨CR16在精子发生中的作用。方法:采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CR16蛋白和CR16 mRNA在48例特发性无精子症患者(病例组)和10例正常生育男性(正常组)睾丸组织中的表达情况。结果:CR16蛋白表达于睾丸生精小管上皮,主要分布在支持细胞与生精细胞连接区,在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达显著弱于正常生育男性睾丸组织中的表达。CR16 mRNA在病例组睾丸组织中的表达水平显著低于正常组。结论:特发性无精子症患者睾丸组织中CR16表达水平显著降低,这可能与无精子症相关。     

Clusterin蛋白在男性不育症睾丸组织中的表达及意义

目的 探讨Clusterin蛋白在男性不育症患者睾丸组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化染色法和Western blot法检测了10例正常睾丸组织,8例梗阻性不育患者睾丸组织,13例非梗阻性不育患者睾丸组织标本中Clusterin蛋白的表达水平.结果 免疫组化染色结果表明,3组睾丸组织中Clusterin蛋白都有表达,.正常睾丸组织、梗阻性不育患者睾丸组织、非梗阻性不育患者睾丸组织中阳性或强阳性表达率分别为100%(10/10),87.5%(7/8),46%(6/13),非梗阻性不育睾丸组织中Clusterin蛋白表达水平显著低于正常睾丸组织(P<0.05).Western blot法检测结果也表明,该蛋白在非梗阻性不育睾丸组织中的表达较正常睾丸组织显著降低,而在梗阻性不育睾丸组织中的表达无显著性降低.结论 Clusterin蛋白的表达降低与非梗阻性不育症的发生密切相关.     

端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义

目的 :研究端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义。　方法 :应用核酸原位杂交技术检测 4 7例男性不育症病人和 10例正常睾丸组织中端粒酶hTERT基因的表达和定位 ,并应用HPIAS 10 0 0高清晰度图像处理系统对hTERT阳性信号进行图像分析。　结果 :端粒酶hTERT基因阳性表达与生殖细胞 (精原细胞、精母细胞、精子细胞 )的分布定位一致 ,并且其表达强度与男性不育症病人睾丸组织中的生殖细胞的数量和密度显著相关 ,在唯Sertoli细胞综合征病人睾丸组织中无端粒酶hTERT基因的表达。　结论 :端粒酶活性的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因之一     

前列腺癌患者癌组织中miR-647和HOXA9表达水平及其与预后的关系分析

目的 通过检测前列腺癌组织中微小RNA(microRNA,miR)-647、同源盒A9(HOXA9)表达水平，分析miR-647、HOXA9与前列腺癌患者预后的关系。方法 收集本院108例前列腺癌患者术中切除的癌组织及其对应的癌旁组织，使用qRT-PCR技术检测组织中miR-647和HOXA9 mRNA表达水平，免疫组化法检测HOXA9蛋白表达水平，并分析miR-647、HOXA9表达水平与患者临床病理特征及预后的关系；Pearson相关系数分析miR-647与HOXA9的相关性。结果 前列腺癌组织中miR-647表达水平(0.65±0.12)显著低于癌旁组织(1.01±0.09)(P<0.05),HOXA9 mRNA表达水平(1.86±0.37)明显高于癌旁组织(1.03±0.10)(P<0.05);癌组织中HOXA9蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);前列腺癌组织中miR-647与HOXA9呈负相关(r=-0.680,P=0.000);miR-647、HOXA9表达水平与患者T分期、淋巴结有无转移、Gleason评分以及前列腺特异抗原(PSA)水平有关...     

HOXA11在人子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及与不育的关系

目的检测HOXA11蛋白在正常月经周期子宫内膜、早孕蜕膜和不明原因不育子宫内膜组织中的表达,探讨HOXA11与不明原因不育及雌孕激素受体(ER、PR)表达的相关性。方法采用免疫组织化学和Western-Blot方法对38例正常子宫内膜、15例早孕蜕膜和19例不明原因不育子宫内膜组织中HOXA11、ER及PR的表达。结果HOXA11蛋白在子宫内膜腺上皮和基质细胞均有表达,以分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜表达量较高;在不育内膜的表达量显著降低(P<0.05);ER、PR在各组表达量的变化与HOXA11相同,即分泌中晚期子宫内膜和早孕蜕膜的表达量较高,而在不育内膜的表达量显著下降(P<0.05)。结论HOXA11基因在着床期子宫内膜的分化、发育以及着床后妊娠的维持起一定作用;HOXA11表达量下降与ER、PR表达量降低相关;HOXA11表达下降或缺失可能是女性不明原因不育的原因之一。     

精子发生相关基因SPATA48在人和小鼠睾丸组织中的表达研究

目的通过分析精子发生相关基因SPATA48在人和小鼠睾丸组织中的表达,探讨SPATA48在精子发生中的作用。方法收集2010年1月至2017年12月在深圳市第二人民医院就诊的非梗阻性无精子症患者和正常生育者睾丸活检样本各60例;腹腔注射白消安方法建立小鼠无精子症模型,小鼠在不同时期处死后解剖留取各个脏器;提取小鼠各脏器组织、两组睾丸组织以及人精母细胞、精原细胞和支持细胞中mRNA;并购买人肺、肾、肝脏、脾脏等组织mRNA样本。利用RT-PCR方法检测SPATA48基因在各种细胞和组织器官、两组人睾丸组织中的表达水平,并利用免疫组化方法检测SPATA48蛋白在各种细胞和两组人睾丸组织中的表达水平,对各检测指标进行相关统计分析。结果 RT-PCR结果表明SPATA48基因特异表达在睾丸组织中,肺、肾脏、肝脏、脾脏等其他组织中均不表达;非梗阻性无精子症患者睾丸组织中无SPATA48基因表达,三种睾丸细胞仅精母细胞存在阳性表达。无精子症模型小鼠,随白消安处理时间的延长,SPATA48基因表达显著减弱(P0.05)。免疫组化结果显示,在正常生育者睾丸中SPATA48蛋白主要表达在精母细胞和圆形精子细胞中,在非梗阻性无精子症患者睾丸中无SPATA48蛋白表达。结论 SPATA48特异表达在人和小鼠睾丸组织中,无精子发生的睾丸组织无表达,提示SPATA48基因在精子发生中具有重要作用。     

氟他胺诱导大鼠隐睾生殖母细胞残留模型

目的:观察胚胎期氟他胺(Flu)对SD大鼠睾丸生殖细胞发育的影响,建立研究隐睾生殖母细胞(Go)发育缺陷机制及治疗的模型。方法:36只SD孕鼠随机分为Flu组(n=20)、玉米油组(n=8)和空白对照组(n=8)3组,Flu组和玉米油组于妊娠12～21 d(GD12-21)分别给予Flu 25 mg/(kg.d)和1 ml/(kg.d)皮下注射,在出生后1 d(PD1)、PD10、PD20、PD80收集标本,观察睾丸形态学、组织学的差异,免疫组化及RT-PCR检测神经母细胞粘附分子(NCAM)表达。结果:Flu诱导隐睾发生率为43.9%(29/66)。PD20、PD80隐睾睾丸质量、脏器系数较对照组有显著性差异;PD10 Flu诱导睾丸组织中可见Go迁移障碍,滞留于管腔中央,Flu诱导PD20、PD80隐睾组织中仍可见迁移障碍的Go位于管腔中央;免疫组化检测结果显示迁移障碍的Go胞膜阳性表达NCAM,且PD10、PD20睾丸RT-PCR检测结果显示Flu诱导隐睾组织中NCAM的mRNA表达高于对照组。结论:Flu成功诱导大鼠隐睾Go残留模型,可以用于研究隐睾生殖母细胞发育缺陷的机制及治疗。     

Mutational analysis of HOXA10 gene in Chinese patients with cryptorchidism

Cryptorchidism is one of the most common congenital anomalies and affects 2–4% of full‐term new born boys. Its aetiology is poorly understood at present. HOXA10 plays a pivotal role in regulation of testicular descent. Male mice mutant for Hoxa10 exhibit unilateral or bilateral cryptorchidism as a result of impaired development of the gubernaculums. In this study, we performed mutation analysis of HOXA10 gene in a cohort of 98 cryptorchid patients. And we found a mutation (N27K) in a boy with unilateral cryptorchidism. The mutation was not detected in 106 healthy controls. Both in silico analyses and functional studies showed that the mutation affected the function of HOXA10. The results demonstrated that mutation in HOXA10 gene contributes to the pathogenesis of cryptorchidism, but may not be a common cause.     

HOXA10基因在多囊卵巢综合征患者子宫内膜的表达

目的了解同源框基因A10（HOXA10）和胰岛素（INS）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜的表达,探讨PCOS患者子宫内膜功能异常的机制。方法采集PCOS患者50例（PCOS组）子宫内膜,分为高胰岛素组（bINS,25例）和高睾酮组（hT,25例）;对照组20例取自月经周期规律妇女的增殖期子宫内膜。采用免疫组化、Western-blot和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测HOXA10、INS蛋白及mRNA在两组子宫内膜的表达。结果（1）免疫组化结果显示,HOXA00在PCOS组的表达较对照组明显减弱（P〈0．01）;而INS表达却均明显增高（P〈0．01）。（2）Western-blot结果也显示,HOXA10在PCOS组（包括hINS组和hT组）的表达显著低于对照组（P均〈0．01）,而INS的表达显著高于对照组（P均〈0．01）。hINS组与hT组比较,HOXA10表达更显著降低（P〈0．05）;而INS的表达水平在两组之间无显著差异（P〉0．05）。（3）RT-PCR结果显示,HOXA10mRNA的表达在PCOS组（包括hINS组和hT组）显著低于对照组（P均〈0．01）,而INSmRNA表达显著高于对照组（P均〈0．05）。结论PCOS患者的子宫内膜呈现HOXA10表达降低和INS表达增高的状态,可能是该类患者子宫内膜功能异常的原因之一。     

Prevalence of carcinoma in situ and other histopathological abnormalities in testes of men with a history of cryptorchidism

The incidence of invasive testicular cancer is increased in men with a history of cryptorchidism. Previous studies based on relatively small series indicated that the risk of carcinoma in situ of the testis also is increased in these men. In our study 500 consecutive men 20 to 30 years old, who were previously admitted to a department of surgery with the diagnosis of testicular maldescent, were asked to participate in a screening for carcinoma in situ of the testis. Of the men 300 consented to testicular biopsy. The biopsies were evaluated by light microscopy for carcinoma in situ and other histopathological abnormalities. Carcinoma in situ was diagnosed in 5 patients (1.7%, 95% confidence limits 0.5 to 3.9%). However, the true risk of carcinoma in situ might be higher, since 2 men who had been treated for testicular cancer before they were offered biopsy were excluded from the study. Advanced spermatogenesis, including the spermatid stage in all tubules, was found in biopsy specimens from only 37% of the men. In 80% of these specimens even the number of late spermatids was decreased. Thus, our study, based on a large number of testicular biopsies from an unselected group of men with testicular maldescent, provided further evidence that these men have an increased risk for carcinoma in situ of the testis. Our data combined with the results of other Scandinavian studies indicate that the true prevalence of carcinoma in situ in men with a history of cryptorchidism is approximately 2 to 3%. Additionally, we confirmed that spermatogenic function is severely impaired in maldescended gonads. Invasive testicular cancer can be prevented if the neoplasm is detected at the stage of carcinoma in situ. In our opinion the magnitude of prevalence of carcinoma in situ found in men with a history of cryptorchidism justifies that these men should be offered testicular biopsy when they reach adulthood.     

Testicular volume and masculine identity in men with unilateral cryptorchidism: results of a community-based survey in Korea

We determined the influence of cryptorchidism on testicular volume and masculine identity in young men living in a community. Of the 27,202 men aged 20 years dwelling in the community, we randomly selected a 10% sampling fraction of whom 2,080 men (a response rate of 77.0%) agreed to participate in the study. All volunteers underwent a standard evaluation, including a detailed medical history and physical examination. For the evaluation of the influence of cryptorchidism on masculine identity, we used the Bem Sex Role Inventory (BSRI). Among participants, 38 (1.8%) had cryptorchidism or a history of surgery for cryptorchidism (right 15, left 21, bilateral 2). In total, 29 had had undergone surgery (mean age at the time of operation; 8.9±3.9 years, range; 2–19 years). Of 25 men who had undergone orchiopexy due to unilateral cryptorchidism, the testicular volume of the affected side was significantly smaller than that of the contralateral side. Of the 36 patients with unilateral cryptorchidism, the contralateral testicular volume of men who had undergone orchiopexy was not different with that of those who had undergone orchiectomy or had not undergone surgery. When we compared the scores for masculinity and femininity using the BSRI between men with and without testis in the scrotum, there were no differences between the two groups. Our results demonstrate that delayed orchiopexy does not improve the testicular volume of the affected side or the masculine identity in men with unilateral cryptorchidism. In addition, these findings suggest that there is a need to increase the awareness of cryptorchidism among all parties involved in the health care of children.