钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在致心肌肥大中的作用

心肌细胞内持续的Ca2 平台激活钙调神经磷酸酶（CaN)，使活化T细胞核因子c(NF-ATc)去磷酸化并进入胞核，去磷酸化的NF－ATc再与锌指转录因子（GATA4）等相互作用，活化多种心肌肥厚的相关基因导致心肌肥厚，免疫抑制剂环胞素A（CsA),FK506等可抑制CaN活性，消除心肌肥厚而改善心衰。     

培哚普利对肾血管性高血压大鼠心肌钙调神经磷酸酶及丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的研究两肾一夹高血压大鼠心肌肥厚过程中钙调神经磷酸酶(CaN)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK，包括胞外信号调节激酶、c-Jun NH2-末端激酶、p38丝裂原活化蛋白激酶)的变化，探讨血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利对心肌肥厚和CaN、MAPK的影响。方法制作两肾一夹高血压大鼠模型；以左心室重、左心室重与体重比值、心肌细胞横截面积、左心室后壁和室间隔厚度作为大鼠心肌肥厚指标；应用RT-PCR法测定大鼠心肌CaN和MAPK mRNA表达，采用免疫印迹法检测CaN蛋白表达，以对硝基苯磷酸作底物测定CaN活性。结果两肾一夹术后2个月大鼠已发生心肌肥厚，术后3个月心肌肥厚进一步加重；手术组大鼠左心室心肌CaN mRNA、蛋白表达和CaN活性以及c-Jun NH2-末端激酶mRNA表达均高于同龄假手术组。培哚普利治疗可逆转大鼠心肌肥厚和CaN、c-Jun NH2-末端激酶的变化。结论培哚普利可通过抑制胞内CaN和c-Jun NH2-末端激酶信号通路逆转两肾一夹高血压大鼠心肌肥厚。     

螺内酯抗钙调神经磷酸酶依赖的肾性高血压大鼠心肌肥厚作用机制

目的　观察螺内酯抗钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)依赖的肾性高血压大鼠心肌肥厚的作用。方法　 2 0只Wistar大鼠随机分为 3组 :2组采用一肾一夹模型制造肾性高血压 ,其中螺内酯组 (n =7)予螺内酯灌胃 ,高血压组 (n =7)予水灌胃 ;假手术组 (n =6 )只予水灌胃。称重法测定心重比 ,发色底物法测CaN活性 ;半定量PCR测定各组心肌组织中心房利钠因子mRNA的水平 ,同时用免疫组织化学染色方法 ,观察心肌中CaN及活化T细胞核因子的表达。结果　肾性高血压大鼠经螺内酯灌胃 4周 ,其心重比较未干预组明显降低 (P <0 0 5 ) ,心房利钠因子mRNA水平较手术组明显降低 (P <0 0 5 ) ,与假手术组水平接近 ,心肌肥厚受到抑制 ,同时发现心肌中CaN活性较未干预组显著下降 ,免疫组化显示螺内酯干预组心肌中CaN及活化T细胞核因子表达降低。结论　螺内酯抑制肾性高血压心肌肥厚的机制与其下调心肌胞浆中CaN表达及其活性有关     

不同肾上腺素能受体阻滞剂对超压力负荷大鼠左室重构的影响

目的比较卡维地洛（CAR）、美托洛尔（MET）和特拉唑嗪（TER）对超压力负荷下心肌组织钙调神经磷酸酶（calc ineurin,CaN）通路的影响,并探讨CAR改善心肌重构的机制。方法以腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型。大鼠分为5组,每组10只,即手术组、CAR干预组、MET干预组、TER干预组及假手术组。采用免疫沉淀法检测左心室心肌组织中CaN、活化的T细胞核因子（NFAT3）、锌指转录因子（GATA4）的磷酸化及其蛋白的表达以及c-myc蛋白的表达。结果与假手术组相比,术后14 d,左室心肌明显肥厚,CaN、GATA4磷酸化增强、c-myc蛋白表达增加（P<0.01）,NFAT3磷酸化减弱;CAR明显改善左室肥厚,MET次之,而TER的作用不明显。CAR干预组大鼠左室心肌中CaN、GATA4的磷酸化较手术组减弱,c-myc蛋白的表达较手术组减弱（P<0.01）,MET次之（P<0.01）,而TER作用不明显。结论CAR与MET均能明显改善左心室的肥厚,其作用机制可能与通过抑制了CaN信号通路进而抑制心肌肥厚的相关基因c-myc的表达有关。     

钙调神经磷酸酶信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制.方法选择慢性风湿性二尖瓣病变接受二尖瓣置换术的充血性心力衰竭患者39例,分为心功能Ⅱ级组12例,心功能Ⅲ级组15例,心功能Ⅳ级组12例;正常对照组38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者,30例为健康体检者).苏木素-依红染色检查心肌组织病理变化,免疫沉淀法测心肌组织CaN、活化T细胞核因子(NFAT3)、锌指转录因子(GATA4)磷酸化及蛋白表达以及α-骨骼肌蛋白(α-skeletal-actin)表达,RT-PCR检测肌球蛋白重链信使核糖核酸(β-MHC mRNA)表达.结果充血性心力衰竭患者心肌呈典型的重塑心肌的病理改变.充血性心力衰竭患者心肌组织CaN磷酸化、GATA4磷酸化、α-skeletal-actin蛋白表达及β-MHC mRNA表达明显高于正常对照组,随心功能恶化,其表达逐渐增加(P＜0.05或0.01);NFAT3磷酸化随心功能恶化而减弱(P＜0.05或0.01).结论CaN信号通路在充血性心力衰竭患者心肌重塑机制中可能起着重要的作用.     

钙调神经磷酸酶在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用及抑制CaN活性对心肌肥厚的影响.方法制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型, 术后2月, 经心脏超声证实大鼠心肌肥厚后,分别予环孢菌素A( CsA)或培多普利治疗.观察CsA、培多普利对大鼠心肌肥厚程度,CaN mRNA、蛋白质表达和CaN活性的影响.结果两肾一夹术后2月,手术组大鼠左室后壁和室间隔厚度均较假手术组增高21%(P<0.01),CsA治疗后较治疗前分别下降16%和14%(P<0.01),培多普利治疗后左室后壁和室间隔厚度亦较治疗前下降.同时大鼠左室心肌CaN mRNA和蛋白质表达、CaN活性均显著下降.结论 CaN参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚,抑制CaN活性可逆转心肌肥厚.     

心肌肥厚大鼠细胞核内蛋白激酶和蛋白磷酸酶的活性

探讨细胞核磷酸化和去磷酸化在心肌肥厚发生中的作用 ,制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核 ,同位素3 2 P掺入法测激酶活性 ,无机磷生成显色法测定蛋白磷酸酶活性。结果发现 ,与对照组比较 ,腹主动脉缩窄组心肌细胞核丝裂素活化蛋白激酶活性增加 82 .0 3 %(P <0 .0 5) ,膜丝裂素活化蛋白激酶活性无显著变化 ,胞浆丝裂素活化蛋白激酶活性下降 53 .69%(P <0 .0 1 ) ;蛋白激酶A活性均无明显变化。细胞核磷酸酶 2A活性增加 44 .95 %(P <0 .0 5) ,膜磷酸酶 2A增加 36 .75 %(P <0 .0 5) ;细胞核磷酸酶 2B活性增加 43 .57%(P <0 .0 5) ,胞浆磷酸酶活性均无显著增加。正常组心肌细胞核丝裂素活化蛋白激酶活性与胞浆无显著差异 ,但腹主动脉缩窄组心肌丝裂素活化蛋白激酶活性为核 >膜 >胞浆 ,蛋白激酶A活性分布无显著差异 ;磷酸酶 2A、2B和 2C活性分布为核 <膜 <胞浆。结果提示 ,压力超负荷时细胞核内蛋白磷酸化和去磷酸化水平增高 ,可能在介导心肌肥厚的发生中起重要作用。     

Ca~(2+)-CaN-NFAT信号通路在心肌肥大中的作用及研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是Ca2 的下游因子,在细胞内钙升高引起的心肌肥大中有重要作用。现综述Ca2 CaN及其下游因子活化T细胞核因子3(NFAT3)和锌指转录因子(GATA4)在心肌肥大中的作用及近年的研究进展。     

钙调神经磷酸酶在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

目的　探讨钙调神经磷酸酶 (CaN)在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用及抑制CaN活性对心肌肥厚的影响。方法　制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型 ,术后 2月 ,经心脏超声证实大鼠心肌肥厚后 ,分别予环孢菌素A(CsA)或培多普利治疗。观察CsA、培多普利对大鼠心肌肥厚程度 ,CaNmRNA、蛋白质表达和CaN活性的影响。结果　两肾一夹术后 2月 ,手术组大鼠左室后壁和室间隔厚度均较假手术组增高 2 1 % (P <0 0 1 ) ,CsA治疗后较治疗前分别下降 1 6 %和 1 4 % (P <0 0 1 ) ,培多普利治疗后左室后壁和室间隔厚度亦较治疗前下降。同时大鼠左室心肌CaNmRNA和蛋白质表达、CaN活性均显著下降。结论　CaN参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚 ,抑制CaN活性可逆转心肌肥厚     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节.方法24只Wistar大鼠随机分为2组实验组和对照组.实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水.测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET-1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβ mRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达.结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANF mRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P＜0.05)的表达.结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大.螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大.     

螺内酯抗CaN依赖的肾性高血压大鼠心肌肥大的研究

目的观察螺内酯(Spironolactone,Spiro)抗钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)依赖的肾性高血压大鼠心肌肥大的作用.方法20只Wistar大鼠随机分为3组两组采用一肾一夹模型制造肾性高血压,其中spiro组(n=7)给予螺内酯灌胃,op组(n=7)予水灌胃;假手术组(sham op n=6)只给予水灌胃.称重法测定心重比,发色底物法测CaN活性;同时用免疫组织化学染色方法,观察心肌中CaN及活化T细胞核因子(nuclear factor of activatedT cell,NFAT)的表达.结果肾性高血压大鼠经螺内酯灌胃4周,其心重比较未干预组明显降低(P＜0.05),心肌肥大受到抑制,同时发现心肌中CaN活性较未干预组显著下降,免疫组化显示螺内酯干预组心肌中CaN及NFAT表达降低.结论螺内酯抑制肾性高血压心肌肥大的机制与其下调心肌胞浆中CaN表达及其活性有关.     

钙调神经磷酸酶与心肌肥厚的研究现状

心肌肥厚是临床上高血压、心肌梗死等心血管疾病共有的病理过程。初期有一定的代偿作用,晚期可以导致心律失常、猝死、心力衰竭。研究表明〔1〕:心肌肥厚的启动和发展与多条细胞信息通道有关,如钙调神经磷酸酶系统(CaN)、蛋白激酶C(PKC)系统、Wnt信号通路、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)系统、mir-RNA133和磷脂酰肌醇3(PI3K)介导的信号系统等。     

三磷酸肌醇受体/钙调神经磷酸酶信号通路激活致心肌肥厚的研究

目的 研究激活心肌细胞三磷酸肌醇受体（IP3R）是否触发钙调神经磷酸酶（CaN)介导的心肌肥厚信号通路。方法 培养Wistar乳鼠心肌细胞检测心肌细胞蛋白和核酸合成，细胞内钙变化，CaN，活化T细胞核因子3（NFAT3）及锌指转录因子（GATA4），胚胎基因（α-actin,β-MHC）及即刻早期基因（c-fos,c-myc)表达。结果 给予IP3能时间和剂量依赖性也增加心肌细胞蛋白和核酸合成，能明显致心肌细胞内钙增加；IP3刺激心肌细胞IP3受体，能明显激活心肌细胞CaN/NFAT3/GATA4信号通路，促使心肌细胞的早期即刻基因和胚胎基因表达。结论 激活IP3R介导的CaN/NFAT3/GATA4信号通路能显地促使心肌细胞肥大，这条信号通路不同于已知的G蛋白偶联受体介导的心肌肥厚信号转导途径。     

清肝降压饮对自发性高血压大鼠心肌CaN表达的影响

目的 观察清肝降压饮抑制自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚的作用,并探讨其作用机制.方法 将SHR随机分为模型对照组、清肝降压饮低剂量组、清肝降压饮高剂量组和西药组,并用Wistar大鼠做空白对照.灌胃4周后,通过RT-PCR、免疫组化方法检测大鼠心肌钙调神经磷酸酶(CaN)的表达.结果 清肝降压饮可明显降低SHR的血压和心室质量指数,降低心肌CaN的表达.结论 清肝降压饮可通过降低SHR心肌CaN的表达,降低SHR的血压和心室质量指数,产生防治心肌肥厚的效应.     

环孢霉素A抑制肾性高血压大鼠心肌肥大的作用机制

目的观察环孢霉素A对肾性高血压大鼠心肌肥大的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 20只Wistar大鼠随机分为3组两组采用一肾一夹模型制造肾性高血压,其中高血压组(n=7)予生理盐水腹腔注射;CsA组(n=7)给予环孢霉素A(CsA)5 mg·kg-1·d-1腹腔注射;假手术组(n=6)只给予生理盐水腹腔注射.称重法测定心重比,发色底物法测CaN活性;半定量PCR测定各组心肌组织中心房利钠因子(ANF)及CaNmRNA的水平,同时用免疫组织化学染色方法,观察心肌中CaN及活化T细胞核因子(nuclearfactor of activated T cell,NFAT)的表达.结果肾性高血压大鼠经CsA干预4周,其心重比较未干预组明显降低(P＜0.05),ANF mRNA水平较手术组明显降低(P＜0.05),与假手术组水平接近,心肌肥大受到抑制,同时发现心肌中CaN活性较未干预组显著下降,CaN mRNA水平较手术组明显降低(P＜0.05),免疫组化显示CsA干预组心肌中CaN及NFAT表达降低.结论 CsA抑制肾性高血压心肌肥大的机制与其下调心肌胞浆中CaN表达及其活性有关.     

心肌细胞核钙调素Ⅰ和CREB磷酸化在压力负荷大鼠心肌肥厚中的作用

目的探讨钙调素Ⅰ(CaM Ⅰ)及核转录因子CREB磷酸化在压力超负荷大鼠心肌肥厚中的作用.方法100只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(n=50)和心肌肥厚组(n=50),制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型,模型复制成功后4周,以改良差速离心和密度梯度离心法提纯细胞核,以蛋白印迹法测定心肌细胞核CREB及磷酸化CREB(pCREB)表达,免疫组化法观察左室心肌组织CaMⅠ蛋白表达及分布,延续转录分析法观察阻断CaM后心肌细胞核c-fos mRNA的变化.结果与对照组比较,心肌肥厚组pCREB蛋白光密度明显增加(104.71 vs 75.29,P＜0.05),CREB蛋白光密度无明显变化(128.43vs 113.86,P＞0.05);CaMⅠ分布于细胞核及细胞浆,心肌肥厚组CaMⅠ蛋白表达较对照组明显增加(21.64 vs 17.24,P＜0.05);使用CaM抑制剂后心肌肥厚组心肌细胞核c-fos mRNA表达明显降低(144.6 vs 54.1,P＜0.05).结论压力超负荷时心肌细胞核内CaMⅠ蛋白表达增加,可能通过增加核转录因子CREB磷酸化,上调早期基因c-fos表达参与心肌肥厚的发生.     

醛固酮诱导心肌肥大的机制

醛固酮可在肾上腺外组织如心肌血管分泌,外周及心血管局部的醛固酮都参与诱导心肌肥大,而且局部的醛固酮更有效促进心肌肥大.它通过上调钙通道数量诱导心肌肥大;其信号转导机制可能是通过活化钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)、血管紧张素受体-Ⅰ(AT-1)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)、转录因子(AP-1)、核因子(NF-κB)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、磷脂酶C(PLC)、甘油二酯(DAG)、蛋白激酶C(PKC)等多条复杂的途径,而且它们之间还可能存在交互对话.     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节。方法24只Wistar大鼠随机分为2组:实验组和对照组。实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水。测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβmRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达。结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANFmRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P<0.05)的表达。结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大。螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大。     

瞬时受体电位通道C亚族参与高血压心室肥厚机制研究的新进展

心肌肥厚的发生及逆转一直是心血管病研究的热点。传统观点认为Ca^2＋超载是心肌肥厚发生的基础。近年的相关研究提示瞬时受体电位通道C亚族（Transient receptor potential channels,TRPC）可能通过调节细胞内Ca2＋变化而参与心肌肥厚的发生发展过程。也有新的证据表明TRPC通道参与并调节心室肥厚过程主要是通过TRPC通道本身的激活与调节,心脏微结构域的作用及钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）、活化的T细胞核因子（nuclear factor of activated T cells,NFAT）等信号传导效应因子间相互协调的信号传导实现的。TRPC通道可能成为阻止和逆转心室肥厚的药物作用新靶点。