5-氟尿嘧啶化疗耐药的研究进展

5-氟尿嘧啶(5-FU)自1957年问世以来,已被广泛应用于胃肠、头、颈、胸和卵巢等部位恶性肿瘤的治疗.作为嘧啶类似物,5-FU通过抑制胸苷酸合成酶并将其代谢产物整合到DNA和RNA中发挥抗癌作用.5-FU单药或联合用药虽至今仍用于胃肠道恶性肿瘤的一线治疗,但因患者易对其产生耐药性而使总体有效率降低.5-FU化疗耐药可能源自于酶的异常、基因异常和肿瘤微环境异常等因素.本文对5-FU作用机制及其化疗耐药机制的研究进展做一综述.     

斑贞1号、川芎嗪和5-氟尿嘧啶联合对人胃癌细胞肺耐药蛋白基因表达影响

目的探讨斑贞1号、川芎嗪（TMP）和5-氟尿嘧啶（5-FU）联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与LRP表达的相关性。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）比较人胃癌细胞SGC-7901/ADR细胞在单纯5-FU和5-FU联合斑贞1号及TMP处理组肺耐药蛋白（LRP）mRNA的表达情况。结果 5-FU组与阴性对照组比较,LRPmRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）;而5-FU联合斑贞1号及TMP处理组LRP mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论斑贞1号、TMP和5-FU联合逆转SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与LRP基因相关,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。     

RNAi沉默Sox2表达对结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶的增敏作用

［摘要］目的: 研究Sox2与5 氟尿嘧啶（5 FU）诱导人结肠癌细胞（SW620）化疗敏感性及耐药家族基因表达的关系,探讨结直肠癌细胞化疗耐受的机制。方法: 经慢病毒包装干扰质粒Sox2沉默SW620细胞后,采用蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR和免疫荧光技术检测干扰前后细胞内Sox2的表达变化,CCK8法检测细胞对5 FU敏感性的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,并检测ABC耐药家族基因的表达情况。结果： 靶向Sox2干扰后,Sox2 mRNA及蛋白表达下调,Sox2的阳性表达率显著减少;干扰Sox2后SW620细胞对5 FU敏感性高于对照组细胞,IC50值明显下降,细胞之间差异有统计学意义（P<0.05）;Sox2干扰后细胞凋亡率明显高于对照组,ABC耐药家族基因的表达水平明显下降。结论： 靶向干扰Sox2后有效地抑制了Sox2在SW620细胞中的表达,Sox2干扰后显著提高了SW620细胞对5 FU的敏感性,降低了ABC耐药基因的表达,为寻求新的基因靶向治疗提供了可能。     

硬脂酰辅酶A去饱和酶1在结肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药中的作用

目的 通过建立结肠癌5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)耐药细胞株,探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl CoA desaturase 1,SCD1)在结肠癌细胞5-FU耐药中的作用.方法 采用5-FU浓度间歇性递增与高浓度反复诱导筛选的方法建立对5-FU耐药的结肠癌细胞株HCT116(HCT116/5FU).CCK-8实验检测HCT116、HCT116/5FU、HCT116-Control、HCT116-OE-SCD1 各组细胞在5-FU 作用下的存活率以及半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,1C50).制作结肠癌组织和癌旁组织芯片并以免疫组化方法检测SCD1的表达.定量PCR及Western blot检测各组细胞SCD1的表达;CCK-8实验、平板克隆形成及结晶紫染色实验检测各组细胞存活状况.Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.HCT116-Control、HCT116-OE-SCD1裸鼠皮下成瘤实验观察SCD1对肿瘤生长的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达.结果 HCT116的5-FU IC50为(0.90±0.06)μg/mL,HCT116/5FU的5-FU IC50为(15.02±0.81)μg/mL,耐药倍数约为16.7倍.SCD1在耐药结肠癌组织内的表达高于普通结肠癌组织和对应的结肠癌癌旁组织.HCT116/5FU中SCD1的表达显著高于HCT116(P＜0.01).过表达SCD1能降低结肠癌细胞的凋亡率.裸鼠皮下成瘤实验显示过表达SCD1能增加结肠癌细胞对5-FU的抵抗.在5-FU处理48 h后,HCT116-OE-SCD1组细胞凋亡相关蛋白bcl-2、caspase3的表达低于HCT116-Control组(P＜0.01).结论 成功建立了5-FU获得性耐药的结肠癌细胞模型,SCD1促进结肠癌细胞对5-FU的抵抗.     

DBC1在胃癌耐药中的作用和机制初探

目的 初步探讨乳腺癌缺失基因1(deleted in breast cancer 1,DBC1)在胃癌耐药中的作用和可能机制。方法 选取对化疗敏感和化疗耐药的胃癌患者,利用免疫组织化学染色法检测DBC1表达差异;在SGC7901胃癌细胞系中通过DBC1-shRNA载体下调DBC1的表达,利用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium, MTT)、流式细胞术观察胃癌细胞对顺铂(cisplatin, CDDP)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)等化疗药物的敏感性;利用Western blot检测多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein, MRP)的表达变化,初步揭示可能的分子机制。结果 在化疗耐药的胃癌患者中,DBC1表达明显高于化疗敏感的胃癌患者;在SGC7901胃癌细胞,下调DBC1表达可以提高胃癌细胞对CDDP和5-FU的敏感性、降低半抑制浓度(half maximal inhibitory c...     

细胞分裂周期因子25-A与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药的相关性研究

目的 探讨细胞分裂周期因子25-A(CDC25A)与胃癌化疗药物奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶耐药的相关性.方法 选取2016年7月至2020年11月本院收治的100例胃癌患者作为观察组,进行奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶方案化疗,根据化疗后疗效评估标准,分为敏感组(n=53,完全缓解+部分缓解)和耐药组(n=47,稳定+进展),...     

胃癌术后早期5-氟尿嘧啶腹腔化疗临床研究

目的探讨胃癌切除术后早期5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔化疗(EPIC)可行性.方法151例胃癌术后患者分为EPIC、早期静脉化疗(EPVC)、对照3组.EPIC组胃癌切除术后2～3 d给予5-Fu腹腔注射;EPVC组胃癌切除术后2～3 d 5-Fu静脉化疗;对照组术后早期不用任何方式化疗.分别观察:EPIC组和EPVC组消化道反应、骨髓抑制和肝肾功损害等毒副反应;EPIC组和对照组术后切口感染或裂开、吻合口漏、腹腔脓肿或出血、化学性腹膜炎和粘连肠梗阻等并发症发生;近期生存率.结果EPIC组和EPVC组比较,前组消化道反应、骨髓抑制和肝肾功损害等毒副反应明显降低(P＜0.05);和对照组比较,各项并发症无明显增加(P＞0.05).近期1年至1.5年生存率EPIC组高于另外2组.结论5-Fu胃癌术后早期腹腔化疗是安全可行的,较静脉化疗毒副反应小,有着较大活疗上的优势.     

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶联用对肝癌的化疗增敏作用研究

目的 通过体内和体外实验,探讨金雀异黄素(Gen)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对肝癌的化疗增敏效果.方法 体外实验中根据干预方法分别将人肝癌细胞株Bel-7404、SMMC-7721和HepG2分为溶剂对照(NC)组、10μmol/L Gen处理组、2μmol/L 5-FU处理组及Gen+5-FU联合处理组,利用CCK-8法及流式细胞技术研究Gen与5-FU联用对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.体内实验分别构建Bel-7404肿瘤细胞系异种移植(CDX)和Liver-0117人源肿瘤组织异种移植(PDX)裸小鼠模型,然后将荷瘤裸小鼠模型分为4组:NC组、Gen处理组、5-FU处理组和Gen+5-FU联合处理组,观察不同剂量Gen与5-FU单独或联合处理肝癌模型对肿瘤生长的影响.结果 在处理24、48、72 h后,Gen+5-FU联合处理组Bel-7404、SMMC-7721和HepG2细胞增殖率均低于NC组、Gen处理组及5-FU处理组(P均<0.01);处理72 h后Gen+5-FU联合处理组Bel-7404、SMMC-7721和HepG2细胞凋亡率均高于NC组、Gen处理组及5-FU处理组(P均<0.01).对于Bel-7404荷瘤裸小鼠,给药28 d后NC组、Gen(15 mg/kg)处理组、5-FU(30 mg/kg)处理组、Gen(15 mg/kg)+5-FU(20 mg/kg)联合处理组肿瘤相对体积(RTV)分别为15.35±2.92、17.51±3.11、12.93±4.88、13.67±3.54,组间差异无统计学意义(F=1.822,P>0.05);提高Gen剂量至40 mg/kg干预21 d后,Gen(40 mg/kg)处理组的RTV低于NC组(9.73±5.85 vs 17.54±5.06),差异有统计学意义(P<0.05).对于PDX模型Liver-0117荷瘤裸小鼠,给药18 d后,Gen(15 mg/kg)+5-FU(20 mg/kg)联合处理组的RTV低于5-FU(30 mg/kg)处理组(12.64±0.92 vs 18.76±0.68),差异有统计学意义(P<0.05),相对肿瘤抑制率(T/C)为0.576.结论 Gen与5-FU联用在体外表现出较好的化疗增敏效果,但对于不同荷瘤裸小鼠模型其增敏效果不同.     

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶联用对肝癌的化疗增敏作用

目的 通过体内和体外实验,探讨金雀异黄素(Gen)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对肝癌的化疗增敏效果.方法 体外实验中根据干预方法分别将人肝癌细胞株Bel-7404、SMMC-7721和HepG2分为溶剂对照(NC)组、10μmol/L Gen处理组、2μmol/L 5-FU处理组及Gen+5-FU联合处理组,利用CC...     

血红素氧合酶-1对人胃癌SGC7901细胞5-氟尿嘧啶化疗敏感性的影响

目的:体外观察血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对人胃癌细胞SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响及其可能的机制?方法:应用不同浓度锌原卟啉(ZnPP)?氯化血红素(Hemin)单独或联合5-FU作用于人胃癌SGC7901细胞不同时间,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察药物对细胞生长抑制作用;Western blot分析细胞HO-1蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;活性氧(ROS)检测试剂盒分析其凋亡机制?结果:ZnPP和5-FU均可明显抑制人胃癌SGC7901细胞生长,呈剂量依赖性;5-FU联用ZnPP(10 μmol/L)与单用药相比,明显提高了细胞生长抑制率和凋亡率(P < 0.05),联用Hemin(10 μmol/L)则明显降低细胞生长抑制率和凋亡率(P < 0.05);人胃癌SGC7901细胞中可见HO-1表达,单用5-FU或Hemin后均能使其表达增强,联用ZnPP可逆转此现象;单用5-FU与对照组比较,细胞内ROS活性明显增高,联用后ZnPP可进一步提高细胞内ROS活性(P < 0.05),而联用Hemin明显降低细胞内ROS活性水平(P < 0.05)?结论:ZnPP抑制HO-1表达,能够增强人胃癌SGC7901细胞对5-FU化疗敏感性,这一作用可能与增加细胞内ROS活性有关?     

5-氟尿嘧啶联合人参皂苷Rg3抑制胃癌细胞的增殖

目的探讨5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合人参皂苷Rg3对胃癌细胞增殖的抑制作用。方法MTT法检测5-FU联合Rg3对人胃癌细胞MGC-803和MKN-28细胞增殖的抑制作用。构建体外肿瘤球模型研究5-FU联合人参皂苷Rg3对肿瘤球的生长抑制作用;流式细胞仪检测5-FU联合人参皂苷R驴对MKN-28细胞的凋亡诱导作用“构建胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组（阴性对照组）、5-FU组、Rg3组和5-Fu＋Rg3组（联合给药组）;研究5-Fu联合人参皂苷Rg3对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,统计各组肿瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线。结果MGC-803胃癌细胞和MKN-28胃癌细胞给药48h后,联合给药组细胞存活率显著低于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。MGC-03胃癌细胞肿瘤球和MKN-28胃癌细胞肿瘤球给药7d后,联合给药组肿瘤球体积显著小于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。细胞凋亡实验结果显示：联合给药组诱导肿瘤细胞凋亡能力显著强于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。荷瘤裸鼠实验结果显示：各给药组均能有效抑制肿瘤的生长,与阴性对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。联合给药显著延长荷瘤裸鼠的中位生存期,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论5-Fu与Rg3均具有抗胃癌细胞的作用,二者联合应用是一种潜在的治疗胃癌的有效手段。     

多西他赛联合奥沙利铂及氟尿嘧啶治疗晚期胃癌临床观察

目的评价多西他赛联合奥沙利铂及氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌的临床疗效与安全性。方法对无法手术切除的38例晚期胃癌患者采用多西他赛（75mg／m2,静脉滴注,第1天）联合奥沙利铂（75mg／m2,静脉滴注,第1天）及氟尿嘧啶（750mg／m2,静脉滴注,第1～5天）联合化疗。21d为1个周期,共2-6个周期。伴肝转移者先行选择性肝动脉化疗栓塞术。以反应率、疾病无进展时间、生存期、毒副反应作为评价标准。结果完全有效2例（5．3％）,部分有效19例（50．0％）,疾病稳定12例（31．6％）,疾病进展5例（13.2％）,总有效率55．3％（21／38）,中位疾病无进展时间和中位总生存期分别为5．3个月和10．8个月。15例化疗后行手术治疗,伴随症状有不同程度缓解,Karnofsky评分明显提高。毒副反应为WHO3～4度者11例,其中嗜中性粒细胞减少6例（15．8％）,白细胞减少3例（7．9％）,恶心呕吐1例（2．6％）,口腔黏膜炎1例（2．6％）,无化疗相关死亡。结论多西他赛联合奥沙利铂及氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌疗效明显,不良反应轻且易于控制。     

人胰腺癌细胞中对5-氟尿嘧啶耐药相关基因的检测分析

目的:利用基因芯片技术,对体外筛选获得的耐不同浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)的胰腺癌细胞株基因表型进行对比,找出不同耐药表型细胞株的基因表达改变情况,以此发现一些与胰腺癌细胞5-FU耐药相关的重要基因或通路?方法:用不断增加浓度的5-FU反复刺激细胞,直到细胞能完全耐受不同浓度5-FU,获得耐不同浓度5-FU的MIAPaCa-2细胞株?由基因芯片筛选出明显改变的基因后再用实时定量PCR方法验证?结果:本研究成功地获得两种对5-FU耐药的胰腺癌细胞株,低耐药表型MIA-FU-2.4和高耐药表型MIA-FU-10.0?基因分析结果提示耐药可能与广泛的基因表达改变相关?在MIA-FU-2.4和MIA-FU-10.0两种表型中分别有1 075及1 628个基因出现了表达改变,涉及细胞周期?细胞黏附?信号转导?DNA修复和凋亡等多种生物学功能?结论:胰腺癌MIAPaCa-2细胞株5-FU耐药的发生涉及多种细胞生物学功能改变,特别与凋亡?DNA修复?细胞周期等基因和一些信号转导途径相关?     

DPYD基因表达与胃癌患者5-氟尿嘧啶敏感性及毒副反应的相关性

目的 观察二氢嘧啶脱氢酶基因（DPYD）表达与胃癌患者5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性及毒副反应的相关性。方法 选取2018年1月—2023年1月在广安市人民医院治疗的胃癌患者60例,取新鲜切除的肿瘤非坏死组织。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织DPYD表达强度,实时荧光定量聚合酶链反应检测DPYD mRNA表达,体外药敏试验检测胃癌原代细胞对5-FU的敏感性。术后均采用以5-FU为基础的综合化疗方案,化疗结束后统计化疗效果、毒副反应发生率及严重程度。比较不同DPYD表达强度患者5-FU敏感性;采用Pearson法分析DPYD mRNA表达与药敏指数的相关性;比较不同DPYD表达强度患者毒副反应。结果 60例患者的肿瘤组织中,DPYD低表达34例,高表达26例,高表达患者DPYD光密度值高于低表达患者（P <0.05）。DPYD低表达患者化疗总有效率、5-FU敏感率高于高表达患者（P <0.05）。DPYD mRNA表达与化疗效果（r=-0.664）、药敏指数（rs=-0.892）呈负相关（P <0.05）。DPYD低表达患者3、4级上消化道反应、神经毒性、骨髓抑制、皮肤感...     

二氢青蒿素抑制ATF2的磷酸化提高胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性

目的探讨二氢青蒿素与5-氟尿嘧啶协同抗胃癌效应的机制。方法 MTT实验检测胃癌细胞系BGC-823的细胞活力;流式细胞术检测BGC-823细胞的凋亡;Western blot实验检测BGC-823细胞中ATF2、磷酸化ATF2、Bcl-xl的表达水平及细胞色素c的释放水平和Caspase-3活化水平。结果 5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素对BGC-823的细胞活力抑制率[(67.1±5.5)%]和凋亡诱导率[(37.3±2.9)%]均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组[细胞活力抑制率:(18.9±1.5)%,P0.05];凋亡诱导率[(9.5±0.9)%,P0.05]。5-氟尿嘧啶+二氢青蒿素+ATF2质粒组BGC-823的细胞活力抑制率[(26.5±2.1)%]和凋亡诱导率[(14.9±1.1)%]显著低于5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组(P0.05)。5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组的ATF2磷酸化水平和Bcl-xl表达水平均显著低于5-氟尿嘧啶单治疗组,同时5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素治疗组的细胞色素c释放水平及Caspase-3活化水平均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组。结论二氢青蒿素通过抑制ATF2的磷酸化增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞的杀伤活性。     

多西他赛联合顺铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌的临床观察

目的 评价多西他赛联合顺铂和5-氟脲嘧啶治疗晚期胃癌的临床疗效和毒性反应.方法 对19例晚期胃癌患者于第1天静脉滴注多西他赛75mg/m2,第2～4天静脉滴注顺铂25mg/(m2·d)及醛氢叶酸100mg/(m2·d),第2天开始持续静脉滴注72h的5-氟尿嘧啶750mg/(m2·d),每21天为1个周期,治疗2～3周期后评定疗效.结果 全组完全缓解(CR)0例,部分缓解(PR)7例,稳定(SD)8例,进展(PD)4例,总有效率36.8%.最常见的毒副反应为骨髓受抑,Ⅲ° Ⅳ°粒细胞减少占42.1%,其它毒副反应可以耐受.结论 多西他赛联合顺铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌有较好疗效,毒副作用可耐受.     

Breast cancer resistance protein expression and 5-fluorouracil resistance

Objective To filtrate breast cancer resistance protein （BCRP）-mediated resistant agents and to investigate clinical relationship between BCRP expression and drug resistance. Methods MTT assay was performed to filtrate BCRP-mediated resistant agents with BCRP expression cell model and to detect chemosensitivity of breast cancer tissue specimens to these agents. A high performance liquid chromatography （HPLC） assay was established, and was used to measure the relative dose of intracellular retention resistant agents. RT-PCR and immunohistochemistry （IHC） were employed to investigate the BCRP expression in breast cancer tissue specimens. Results MTT assay showed that the expression of BCRP increased with the increasing resistance of 5-fluorouracil （5-Fu） （P〈0.05, n=3） in the cell model, while HPLC assay indicated that the intracellular retention dose of 5-Fu was significantly correlated with the expression of BCRP （t=-0.897, P〈0.05, n=3）. A total of 140 breast cancer tissue specimens were collected. BCRP-positive expression was detected in forty-seven specimens by both RT-PCR and IHC. As shown by MTT assay subsequently, the resistance index （RI） of 47 BCRP-positive breast cancer tissue specimens to 5-Fu was 7-12 times as high as that of adjacent normal tissue samples. BCRP expression was related to 5-Fu resistance （R2=0.8124, P〈0.01）. Conclusion Resistance to 5-Fu can be mediated by BCRR Clinical chemotherapy for breast cancer patients can be optimized based on BCRP-positive expression.     

UNC5B-AS1在胃癌中差异表达的临床意义及对胃癌细胞活力和迁徙的影响

本文旨在研究长链非编码RNA UNC5B-AS1在胃癌中差异表达的临床意义及其对胃癌细胞活力和迁徙的影响。从TCGA和GEO数据库中筛选出所有差异表达的mRNAs和lncRNAs,通过qRT-PCR检测mRNA水平UNC5B-AS1在胃癌中的差异表达;CCK-8实验检测UNC5B-AS1表达对胃癌细胞增殖的影响;划痕实验检测UNC5B-AS1对胃癌细胞迁移的影响。结果显示,相较于癌旁组织,UNC5B-AS1在人胃癌组织中表达显著下调,但胃癌患者的总生存期无显著影响,高表达UNC5B-AS1的胃癌患者无复发生存期较差,且相对于Ⅰ期胃癌患者,Ⅱ-Ⅳ期的胃癌患者高表达UNC5B-AS1,异常表达的UNC5B-AS1对胃癌细胞的增殖无显著影响,然而敲降UNC5B-AS1,胃癌细胞的迁移能力显著增加;过表达UNC5B-AS1,胃癌细胞的迁移能力显著抑制。结果推测UNC5B-AS1可作为评价胃癌复发和转移的相关标志物和潜在的治疗靶点。     

奥沙利铂联合亚叶酸钙/氟尿嘧啶治疗晚期胃癌的临床观察

目的:观察奥沙利铂(L-OHP)联合亚叶酸钙(LV)、氟尿嘧啶(5-Fu)治疗晚期胃癌的近期疗效和毒副作用。方法:35例均接受L-OHP 200 mg静脉滴注,第1天;LV 200 mg/m2静脉滴注30 min,然后给予5-Fu 200 mg/m2静脉推注,后续5-Fu 400mg/m2静脉滴注,第1~5天,4周重复,至少治疗2周期后判定疗效。结果:可评价疗效者34例,完全缓解2例,部分缓解14例,总有效率47.1%。可评价毒性患者34例,胃肠道反应为最主要毒副作用,其次为骨髓抑制白细胞减少、周围神经毒性。结论:L-OHP联合LV、5-Fu治疗晚期胃癌疗效较好,不良反应较轻能耐受,是晚期胃癌可供选择方案。