临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶的检测

目的：检测临床分离的临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株的发生率、耐药性、流行性以及酶的基因型别。方法：采用双纸片法、琼脂稀释法、PCR、脉冲场电泳对1999年复旦大学附属华山医院临床分离的559株肺克雷伯菌和427株大肠埃希菌进行检测。结果：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产ESBL菌株的发生率分别为51％和23.6％,产ESBL菌株主要分布于ICU和神经外科病房,对大多数的β-内酰胺酶和非β-内酰胺类抗菌药物耐药;PFGE显示,产ESBL菌株（尤其是产ESBL肺炎克雷伯菌株）在ICU病房中存在同一菌株的克隆传播;PCR检测显示TEM型是最为常见的β-内酰胺酶型别,CTX-M型ESBL亦较为普遍。结论：产ESBL菌株在临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中较为普遍,而且为多重耐药菌株,在医院内中存在流行与传播。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性观察

目的：调查大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况，观察其耐药性，指导用药。方法：应用复合纸片表型确证试验及双纸片协同试验，检测105株大肠埃希菌和47株肺炎克雷伯菌的ESBLs。体外抗生素敏感性试验应用肉汤数量稀释法。结果：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率为17.1%和31.9％。确证试验检测 阳性率为21.7％，双纸片协同法阳性率为19.1%。产酶菌株对青霉素类、头孢菌素类及氨曲南的耐药率达66.7%-100.0%,明显高于非产酶菌株5.7％-59.8％。阳性菌株对氨基甙类、氟喹诺酮类、磺胺类的交叉耐药率达44.4％-93.3%。对头孢西丁和氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为33.3％-38.9％和61.1％-73.3%。所有受试菌对亚妥培南敏感。头孢噻肟为本地检测ESBLs最适底物。结论：及时、准确地检测ESBLs，合理使用抗菌药物，显得十分迫切和必要。     

新疆乌鲁木齐地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的 了解新疆乌鲁木齐地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率及其耐药情况,指导临床合理选择抗菌药物.方法 菌株鉴定采用VITEK TWO全自动微生物分析仪,K-B纸片扩散法进行药敏试验,ESBLs采用双纸片增效法,对一年来新疆医科大学第一附属医院肺炎克雷伯菌的耐药谱进行回顾性调查.结果 共检出391株肺炎克雷伯菌,经确认试验,产ESBLs菌株167株,其阳性率为42.71%.产ESBLs肺炎克雷伯菌对青霉素类药物耐药率最高,对氨苄西林的耐药率高达100.00%;对亚胺培南的耐药率最低,对美洛培南及哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦也显示出较高的敏感性;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类等药物具有较高的多重耐药性.结论 肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率及多重耐药率高,对大多数抗菌药物耐药且呈多重耐药,亚胺培南、β-内酰胺酶抑制剂复合物可用于控制肺炎克雷伯菌引起的感染.     

2003~2005年肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的携带率及其耐药性变迁

目的:了解本地区三年间肺炎克雷伯菌产超广谱β-酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性的变迁。方法:通过纸片确证实验检测ESBLs,运用K-B法进行体外微生物敏感性实验。结果:共检出ESBLs阳性菌株78株(产酶率为34.36%),2003、2004、2005年产酶率分别为27.6%、31.9%和40.2%。产ESBL菌株对第1、2、3代头孢菌素均高度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂和碳青霉烯类抗生素保持较高的敏感性。结论:本地区肺炎克雷伯菌中产ESBLs率呈逐年递增趋势,临床应合理选择抗生素,重视ESBLs感染的控制和流行。     

浙江省嘉兴地区多重耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶编码基因分子生物学研究

目的：确定浙江省嘉兴地区临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌E3株所产β－内酰胺酶编码基因序列及亚型。方法：肺炎克雷伯菌E3株经酶抑制剂增强的肉汤稀释法鉴定为ESBLs细菌，PCR扩增其β－内酰胺酶编码基因片段，克隆后双脱氧链终止法测定苷酸序列并确定亚型，重组细菌表型鉴定。结果：E3株同时产SHV和TEM型两种β－内酰胺酶，其中SHV基因片段含812个核苷酸，编码266个氨基酸，为SHV－11型β－内酰胺酶；TEM基因片段含973个核苷酸，编码288个氨基酸，为TEM－1型β－内酰胺酶。含TEM－1和SHV－11编码基因的重组细菌经酶抑制剂增强的肉汤稀释法鉴定为阴性。结论：E3株肺炎克雷伯菌同时产生SHV－11和TEM－1两种广谱β－内酰胺酶，广谱β－内酰胺酶的种类和数量可影响ESBLs的表型检测结果。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测与分析

目的：掌握肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β－内酰胺酶发生率及对多种抗生素耐药现状,比较三种检测方法。方法：按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）1999年版推荐的纸片扩散法的筛选试验和试验,同时以非NCCLS推荐的双纸片协同法检测超广谱β－内酰胺酶。结果：超广谱β－内酰胺酶发生率肺炎克雷伯菌35．8％,大肠埃希菌34．1％。超广谱酶林对多种抗生素耐药率高。确证试验与协同试验相符率高。结论：本院肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β－内酰胺酶发生率高,临床应慎用第三代头孢菌素和氨曲南。筛选法可疑株必须做确证试验。协同试验直观,便于观察,有一定的漏检率和误检率。纸片间距离问题不宜规定统一标准。     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性

目的了解超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性、耐药特点,指导临床用药。方法采用纸片确证法检测65株产ESBLs菌并对其体外抗生素耐药性作初步研究。结果ESBLs总阳性率为37．4％,大肠埃希菌的ESBLs的阳性率为44．1％,肺炎克雷伯菌的ESBLs的阳性率为31．1％。产ESBLs菌株对三代头孢的耐药率明显高于不产酶株。大肠埃希菌对阿米卡星的耐药率较肺炎克雷伯菌低,肺炎克雷伯菌对头孢西丁、头孢吡肟的耐药率较大肠埃希菌低。结论治疗ESBLs菌引起感染,应用亚胺培南、含β-内酶胺酶抑制剂类抗生素及其药敏试验显示敏感的有效药物。     

尿路感染产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药特征分析

目的：分析尿路感染产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及耐药特点。方法对2011～2012年尿路感染患者尿培养中分离到的细菌进行培养鉴定和药敏实验,并对产ESBLs耐药表型的菌株用双纸片法进行确证。结果1189株尿路感染菌株中分离到大肠埃希菌547株（46．0％）,肺炎克雷伯菌81株（6．8％）,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率为64．4％和64．2％。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对头孢替坦、亚胺培南、美洛培南敏感率较高（均超过90％）,产ESBLs肺炎克雷伯菌对呋喃妥因、头孢比肟和阿米卡星敏感率（分别为14．9％、41．7％、77．1％）显著低于产ESBLs大肠埃希菌（77．3％、66．8％、95．8％）,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论大肠埃希菌是尿路感染的主要致病菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率均较高且具多重耐药特征。     

肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶的临床分布及耐药性分析

目的了解肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的临床分布及耐药性。方法采用纸片扩散确证试验对我院分离的156株肺炎克雷伯菌进行ESBLs测验,应用K-B法进行药敏试验。结果156株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs99株,阳性率为63.5%。痰及咽拭子中所占比例最高,达59株(37.8%);在新生儿病区产生最高,有34株(21.8%),其次为小儿ICU25株(16%)。156株肺炎克雷伯菌对15种抗菌药物除亚胺培南均有不同程度的耐药.结论产ESBLs在痰及咽试子新生儿病区产生最高。亚胺培南是治疗肺炎克雷伯菌引起感染的首选药物。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌耐药性分析及对策

目的　了解临床肺炎克雷伯菌 (Kpn)、大肠埃希菌 (Eco)及其产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)菌株的耐药情况。 方法　应用Micro -Scan .autoSCAN - 4全自动微生物分析系统进行细菌分离、鉴定。药敏试验采用微量肉汤稀释法测定MIC。ESBL检测按照NCCLS1 999年推荐的标准进行确认试验。结果　分离出Kpn 2 1 4株 ,Eco 40 8株。ESBL阳性率 :Kpn为 2 6 .1 7% (56/ 2 1 4 ) ,Eco为 2 7.94% (1 1 4 / 4 0 8)。产ESBL菌株对氨苄西林、哌拉西林、氨曲南、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢他啶、头孢曲松等耐药率在 97.4%～ 1 0 0 % ,对所有头孢类抗生素的耐药性与非产ESBL菌株比较差异有高度显著性。结论　产ESBL菌株耐药严重 ,临床上治疗上述两种细菌感染的疾病时 ,使用抗生素应注意产酶株的发生及对 β-内酰胺类抗生素广泛耐药问题 ,同时医院应采取有效措施 ,控制ESBL院内的传播与流行     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性

目的：了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性。方法:用VITEK-32全自动微生物分析仪对650株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌进行ESBLs及耐药性检测。结果:650株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中176株产ESBLs，ESBLs总阳性率为27．1％。产ESBLs菌对氨苄西林、替卡西林、头孢西丁、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率为93．1％-100％，对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类均有不同程度的耐药(26．9％-93．1％)，对亚胺培南的耐药率最低。结论:治疗产ESBLs菌感染，应用亚胺培南及其它药敏试验显示敏感的药物。     

肺炎克雷伯杆菌β-内酰胺酶的分子特性

目的 探讨头孢哌酮（MIC≥8mg/L）加舒巴坦后头孢哌酮的最低抑菌浓度（MIC）降低2倍以上的肺炎克雷伯杆菌β－内酰胺酶分子特性。方法 用PCR扩增和DNA测序方法,测定分子量及等电点以及酶动力。结果 4株为克雷伯杆菌含有TEM型基因,2株肺炎克雷伯杆菌TEM型酶的氨基酸序列与TEM－1相比在117位及118位发生了氨基酸变异。4株肺炎克雷伯杆菌都产生2种以上的酶,等电点从5.4-9.3,相对分子量从23000－34000。酶动力学研究表明,肺炎克雷伯杆菌中99592及99607产生的酶能够水解头孢他啶、头孢噻肟及头孢曲松,并且99592的酶活性大于99607的酶活性。结论 肺炎克雷伯杆菌可能产生新的抑制剂敏感的TEM型超广谱酶。     

外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的:了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases,ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型.方法:琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值,分别用TEM、SHV和CTX-M的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因.接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR),产物测序,确定基因类型.结果:93.5%的菌株含CTX-M基因,38.7%的菌株含SHV基因,87.1%的菌株含TEM基因.测序明确了TEM-1,CTX-M-1,3,14,22等基因类型.结论:外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以CTX-M为主.     

产碳青霉烯酶KPC-2肺炎克雷伯菌局部流行

目的 了解我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯茵的耐药机制及其同源性分析.方法 收集2006年3月～9月我院对碳青霉烯类抗生素敏感性下降的肺炎克雷伯菌共10株,采用Etest法测定细菌对各抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);通过等电聚焦电泳(IEF)检测所产生的β-内酰胺酶.并通过聚合酶链反应(PCR)及序列分析确定其基因型;接合试验和Southern杂交进行基因定位;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对这些菌株进行同源性分析.结果 10株肺炎克雷伯菌均产KPC-2(pl 6.7)、DHA-1(pl 7.8)和SHV-28(pl 7.6),其中3株同时产TEM-1广谱酶(pl 5.4).blaKPC-2位于60kb左右可接合性质粒上.10株菌株对β-内酰胺类抗生素呈多重耐药,但对多黏菌素,替加环素,复方SMZ敏感.PFGE证实为同一克隆株的传播.结论 质粒介导的KPC-2造成肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性下降.并在我院短暂流行;携带KPC-2基因的临床菌株同时携带多种耐药基因.     

ICU肺炎克雷伯杆菌感染患者耐碳青霉烯类及预后的相关因素分析

目的 分析ICU肺炎克雷伯杆菌感染患者耐碳青霉烯类及影响预后的相关因素,为细菌耐药的防治提供临床参考。方法回顾190例ICU肺炎克雷伯杆菌感染患者的细菌培养标本中分离到的肺炎克雷伯杆菌菌株,并结合每例患者的临床资料,统计分析影响肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类的相关因素,并对影响患者预后的相关因素进行分析。结果190例患者的细菌培养标本中共分离到230个肺炎克雷伯杆菌菌株,从痰液标本中分离的菌株占首位（60.00%）;耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌共分离到130株（56.52%）,2009至2011年3年间耐药率呈逐年上升趋势。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的产生与感染部位数目、碳青霉烯类的使用密切相关（均P＜0.05）;MODS、恶性肿瘤、急性生理与慢性健康状况评估系统（APACHE）II评分、喹诺酮类的使用与肺炎克雷伯杆菌感染患者的预后密切相关（均P＜0.05）。结论肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类的比例呈逐年上升趋势,其耐药产生与抗生素的使用密切相关。患者的基础疾病情况、APACHEII评分及喹诺酮类的使用与肺炎克雷伯杆菌感染患者的转归相关。     

铜陵地区产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的了解本地区医院分离出的产超广谱产β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株的构成比及耐药特征,为临床制定合理的抗感染治疗方案提供参考。方法2003年10月1日至2004年9月30日从本地区五家医院各类临床标本分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌作为受试菌,采用Kirby-Bauer纸片扩散法和ESBLs确认试验进行ESBLs的检测及耐药性测定。结果产ESBLs的大肠埃希菌检出率为31%,肺炎克雷伯菌为31.6%,产ESBLs的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌株较不产ESBLs的菌株对各种临床常用抗生素耐药性明显增高,并表现出多重耐药。产ESBLs的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌株对临床常用的头孢呋辛、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均超过70%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在50%左右,对氟喹诺酮类的耐药率在41.7%～72.7%,未发现对亚胺培南的耐药株。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌如此高的检出率应引起临床上高度重视,碳青霉烯类抗生素应该作为治疗产ESBLs菌严重感染的首选药物。     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药特征及联合治疗策略

目的 分析耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的基因分型和耐药性,并评估头孢他啶/阿维巴坦(CZA)与其他抗菌药物联合使用对CRKP治疗效果的影响,为临床提供更有效的治疗策略。方法 分析2023年10-12月成都市第三人民医院住院患者标本中分离的CRKP菌株。采用Atofms100全自动微生物质谱检测仪和MicroScan-96细菌鉴定及药敏分析仪对菌株进行鉴定和药敏分析,用胶体金免疫层析技术对菌株进行耐碳青霉烯酶基因分型。采用纸片扩散法检测CZA与氨曲南(ATM)、美罗培南(MEM)联合应用的药敏反应。结果 共分离出CRKP 210株,其中产丝氨酸碳青霉烯酶126株(占比60.0%),产金属β-内酰胺酶81株(占比38.6%)。CRKP对多数β-内酰胺类和碳青霉烯类抗生素表现出高耐药率,而对多粘菌素B、替加环素和CZA表现出较高敏感性。携带不同耐药基因类型的CRKP在药物敏感性上有所分化。CZA与ATM、MEM的联合药敏试验显示,对于产金属β-内酰胺酶和产丝氨酸碳青霉烯酶CRKP菌株,CZA与ATM展现出良好的协同作用,协同率分别为100.0%(81/81)和99.2%(125/126);对于产丝氨酸碳青霉烯酶CRKP,CZA与MEM也显示出协同作用,协同率为99.2%(125/126)。结论 CRKP分离率高,耐药性强。不同基因亚型的CRKP抗菌药物敏感性有所差异。CZA与ATM、MEM的联合使用为治疗不同基因分型CRKP感染提供了有效策略。建议在临床治疗中,根据CRKP的产酶类型选择合适的联合用药方案。     

小儿肺炎克雷伯氏杆菌肠炎51例临床分析

目的：探讨小儿肺炎克雷伯氏杆菌肠炎的临床特征,药敏试验及治疗等问题。方法：对经粪便细菌培养证实的51例小儿肺炎克雷伯氏杆菌肠炎的临床资料进行回顾性分析,结果：735例腹泻患儿粪便标本中,肺炎克雷伯氏杆菌检出率6．9％,51例病例中,迁延性及慢性腹泻占78．4％,2岁以下婴幼儿占76．5％,药敏试验结果对头孢哌酮,丁胺卡那霉素较敏感。结论：肺炎克雷伯氏杆菌是本地区小儿腹泻的主要致病菌之一,易引起2岁以下婴幼儿迁延性及慢性腹泻,治疗上强调调整肠道微生态平衡,加强支持治疗,必要时选用敏感抗生素,防止滥用广谱抗生素及糖皮质激素。