骨髓增殖性肿瘤与缺血性卒中

【摘要】 骨髓增殖性肿瘤常出现血管并发症,最常累及脑血管,以缺血性卒中最为常见。骨髓增殖性肿瘤作为缺血性卒中的病因之一,其诊断与治疗不同于其他病因所致卒中。白细胞增多、JAK2V617F基因突变等相继被发现与缺血性卒中相关。本文对骨髓增殖性肿瘤伴缺血性卒中的发生、机制及防治的新进展进行综述。     

继发性癫痫JAK2V617F点突变研究(附一例报道)

国外几个不同研究小组几乎同时于2005年报道了JAK2V617F点突变在骨髓增生性疾病(MPD)发病中的作用[1-3],使JAK2V617F点突变与MPD的关系成为研究热点。随后,JAK2V617F点突变与非血液系统疾病的研究日益开展,但其与继发性癫痫的相关研究尚未见报道。此研     

骨髓增殖性肿瘤伴发卒中的临床分析

目的 提高对骨髓增殖性肿瘤伴发卒中诊断和治疗的认识。 方法 收集2008年11月～2011年12月北京天坛医院血液科收治的骨髓增殖性肿瘤伴卒中患者的临床资料、实验室及影像学检查结果［包括病史、年龄、临床表现、颈部血管彩色多普勒超声、颅脑计算机断层扫描（computed tomography,CT）或磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）、全血细胞计数、JAK2V617F基因突变检查］,并对治疗随访评价。 结果 骨髓增殖性肿瘤伴卒中16例,其中脑梗死13例,脑出血1例,短暂性脑缺血发作2例;脑梗死患者中4例患者梗死复发。真性红细胞增多症7例,原发性血小板增多症4例,原发性骨髓纤维化5例。7例患者卒中于骨髓增殖性肿瘤诊断前发生,8例同时诊断,1例骨髓增殖性肿瘤诊断后发生。13例有不同程度血细胞升高,13例行JAK2基因突变检测,阳性率76.9%。14例行颈部血管彩色多普勒超声检查均显示颈动脉和锁骨下动脉不同程度增厚、斑块形成伴狭窄。16例患者均服用阿司匹林治疗,其中15例患者同时接受羟基脲和（或）α干扰素治疗。 结论 本组病例结果提示,卒中患者需仔细阅读全血细胞计数,重视骨髓增殖性肿瘤的诊断,JAK2基因突变检测有助于骨髓增殖性肿瘤的早期诊断。骨髓增殖性肿瘤患者常伴有颈部血管的结构异常。卒中患者需重视骨髓增殖性肿瘤的诊治。     

慢性骨髓增殖性疾病致出血性脑梗死1例报道

慢性骨髓增殖性疾病（chronic myeloproliferative disor—ders，CMPD）是以一系或多系髓系细胞增殖为主要特征的克隆性造血干细胞疾病。CMPD致出血性脑梗死国内报道的病例很少，现报道1例如下。     

动脉血栓性疾病的遗传性因素

鉴于当前对动脉血栓性疾病中遗传因素的研究不断增多,本文从止血因素、血小板表面受体、纤溶因素、同型半胱氨酸代谢酶、一氧化氮合酶、抗氧化酶和脂蛋白等多系统相关基因多态性方面对这些遗传因素与动脉血栓性疾病关联性的现代认识和研究趋势进行了综述,旨在为血栓防治提供新的线索。     

年龄对人骨髓间充质干细胞体外增殖能力的影响

背景：人骨髓间充质干细胞的增殖和分化可以修复组织器官损伤,随着年龄增长人体组织修复能力减弱,是否人骨髓间充质干细胞增殖能力随年龄增长而减弱尚不清楚。目的：观察年龄对人骨髓间充质干细胞体外增殖能力的影响。方法：15份骨髓标本来源于青岛市中心医院骨折或行髋关节置换患者,其中儿童、成年人、老年人各5例,年龄分别为7~12岁,20~55岁,60~90岁。抽取人骨髓组织,采用密度梯度离心法分离出单核细胞并接种于培养瓶内,在第5天计数集落形成单位;当贴壁细胞融合后进行传代,第1代细胞分两种方式进行培养：192个细胞接种于2个96孔板观察单细胞克隆形成能力,12 500个细胞以5×103/cm2接种于培养瓶内并以此密度连续传代观察细胞增殖率。结果与结论：不同年龄人群骨髓间充质干细胞体外培养集落形成单位和细胞增殖率无明显区别(P > 0.05),但单细胞克隆形成能力随年龄增长而下降(P < 0.01)。提示骨髓间充质干细胞的数量和增殖能力没有随年龄的增长而下降,但其中能形成单细胞克隆未定向干细胞的数量随年龄的增长而减少。     

儿童骨髓增生异常综合征造血前体细胞增殖与白细胞介素15的影响

白细胞介素15是一种重要的骨髓生长调节因子,可能具有刺激骨髓增生异常综征 CD34+细胞增殖的作用。 目的：观察白细胞介素15对儿童骨髓增生异常综合征造血细胞增殖的影响。 方法：采用细胞计数、MTT抑制实验检测0,10,20,50,100,200 µg/L白细胞介素15对18例1~14岁儿童骨髓增生异常综合征患者 CD34+细胞增殖的影响,找出白细胞介素15作用的峰浓度。以白细胞介素15达到峰值的浓度为实验组,不加白细胞介素15的为对照组,培养12 d以了解细胞最佳增殖时间。 结果与结论：体外培养的骨髓CD34+细胞在培养第8天生长状况最好,并且随着白细胞介素15 质量浓度的增加,其活细胞数也随着增加,当白细胞介素15为100 µg/L时,其增殖状况最好;当白细胞介素15为200 µg/L时,其增殖状况反而欠佳。在培养的第8天,白细胞介素15对骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+细胞抑制率最低,当其浓度在0~100 µg/L范围内,随质量浓度增加,其抑制作用递减,而当其质量浓度>100 µg/L其抑制作用有所增强。说明白细胞介素15呈时间和剂量依赖性地促进骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+造血干/祖细胞增殖。     

年龄对人骨髓间充质干细胞体外生长与衰老的影响

背景：随着传代次数的增加,体外培养的人骨髓间充质干细胞被发现逐渐呈现衰老细胞的特征,但是,年龄是否影响人骨髓间充质干细胞的衰老进程则报道罕见。 目的：观察年龄对体外培养的人骨髓间充质干细胞数量、增殖和衰老以及氧化应激的影响。 设计、时间及地点：单因素设计,细胞学体外对比观察,于2007-07/12在中南大学湘雅二医院完成。 材料：骨髓来源于中南大学湘雅二医院门诊28名健康自愿者,其中健康老年人14名,男10名,女4名;年龄60~73岁,平均65岁。健康年轻人14名,男9名,女5名;年龄18~28岁,平均25岁。 方法：无菌条件下穿刺健康自愿者髂后上嵴,抽取骨髓2.0~3.0 mL,注入含肝素的无菌抗凝管中,加等体积的无菌PBS稀释,离心后以1×105/cm2骨髓来源的有核细胞接种于6孔板培养,于接种4 d后换液,去除未贴壁细胞,以后每3 d换液。 主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况,流式细胞仪检测表面抗原,比较两组原代细胞集落形成数量、首次传代和第2代骨髓间充质干细胞传代时间、早代龄骨髓间充质干细胞经衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性的衰老细胞计数及其上清液丙二醛水平。 结果：两组体外培养的原代和第2代骨髓间充质干细胞在形态上无差异,早期呈集落样生长。流式细胞仪检测显示,两组骨髓间充质干细胞的免疫表型一致,CD44、CD105阳性表达,不表达CD34。老年人骨髓间充质干细胞首次传代与次代传代时间显著长于年轻人,集落形成单位显著少于年轻人(P < 0.05)。第5代老年人骨髓间充质干细胞开始出现较多宽大扁平的衰老细胞,经β-半乳糖苷酶染色胞浆呈蓝绿色。第5代年轻人骨髓间充质干细胞大多保持梭形细胞外观,β-半乳糖苷酶染色阴性。老年人骨髓间充质干细胞上清液中丙二醛水平随代数增加而逐渐升高。骨髓间充质干细胞的β-半乳糖苷酶染色阳性细胞百分比和上清液丙二醛水平显著高于同代年轻人(P < 0.05)。 结论：人骨髓间充质干细胞的数量和增殖随年龄增长而降低;体外培养的早代龄老年人骨髓间充质干细胞出现衰老征象,伴随氧化应激而增高。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖与多向分化的能力

背景：生理条件下机体内多数骨髓间充质干细胞增殖并不明显,然而在一定刺激下可表现出旺盛的有丝分裂活动,具有很强的增殖倍增能力,且体外实验表明其具有多向分化潜能。 目的：进一步验证体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖与多向分化潜能。 方法：全骨髓法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,贴壁筛选法进行纯化,倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长特征,MTT法绘制细胞生长曲线,免疫组化法对细胞表面干细胞标志CD44进行鉴定。取传至第4代细胞,分别用成骨、成软骨、成脂肪和成神经诱导剂予以培养,通过碱性磷酸酶染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色、油红O染色、NeuN抗体免疫组化染色进行分化能力鉴定。 结果与结论：分离培养的细胞呈长梭形或多边形,细胞生长曲线呈S形,群体倍增时间约为31 h,免疫细胞化学染色后CD44呈阳性表达,CD34呈阴性。第4代骨髓间充质干细胞成骨诱导2周后出现钙盐沉积,成软骨诱导培养2周后Ⅱ型胶原检测呈阳性,成脂肪诱导培养2周后在细胞的胞浆内充满大量红色脂肪滴,成神经诱导6 h后细胞出现突起,类似神经元的轴突和树突纤维,NeuN免疫组化染色呈阳性。表明体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖能力旺盛,可向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经元样细胞方向分化。     

荧光活性染料DiI标记的大鼠骨髓基质干细胞生长增殖及其成骨分化

背景：目前关于骨髓基质干细胞的标记报道较多,各有其优缺点,寻找一种有效、简便的细胞标记与示踪的方法尤为关键。 目的：观察经荧光活性染料DiI标记的大鼠骨髓基质干细胞生长增殖与成骨分化情况。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-09/12在南方医科大学组织工程研究中心完成。 材料：SD大鼠10只,由南方医科大学实验动物中心提供。DiI应用液为美国Molecular Probe Inc 公司产品。 方法：全骨髓法体外分离培养大鼠骨髓基质干细胞,取传至第3代细胞,加入无血清的DMEM制成细胞悬液,再加入1×109 L-1的DiI应用液5 μL,37 ℃下孵育25 min,清洗离心后,加入DMEM高糖完全培养基,荧光显微镜观察细胞荧光强度及形态变化。另取传至第3代细胞,加入含地塞米松、维生素C、β-磷酸甘钠、体积分数为10%胎牛血清的成骨诱导剂进行诱导分化。 主要观察指标：DiI标记后细胞形态变化,XTT比色法测定细胞增殖状况,细胞上清液中乳酸脱氢酶活性,成骨诱导后细胞碱性磷酸酶活性及成骨分化能力。 结果：锥虫蓝染色见骨髓基质干细胞活力好,仅偶见蓝染细胞,荧光显微镜下DiI标记后全部细胞的胞浆、胞膜均显红色荧光,标记的骨髓基质干细胞呈梭形,胞浆丰富,保持了良好的正常形态,DiI标记阳性率为100%,标记早期细胞形态呈荧光环状,48 h后细胞中荧光颗粒增多,荧光增强,细胞核未染荧光。与未标记细胞比较,DiI标记的骨髓基质干细胞增殖吸光度、培养上清液乳酸脱氢酶活性、碱性磷酸酶活性均无明显变化(P > 0.05)。成骨诱导7 d后,钙钴法染色两组骨髓基质干细胞均见不同程度的胞质呈棕黑色改变。 结论：DiI能有效标记体外培养的骨髓基质干细胞,并在细胞内稳定表达,且标记细胞形态良好,对活体细胞无毒性作用;此外,DiI标记不影响骨髓基质干细胞的生长、增殖及成骨分化能力。     

Association of V617F Jak2 mutation with the risk of thrombosis among patients with essential thrombocythaemia or idiopathic myelofibrosis: A systematic review

Introduction

Many studies evaluated the association of V617F Jak-2 with the risk of thrombosis in patients with essential thrombocythaemia, but the results of these studies were inconsistent. Few studies evaluated the association of V617F Jak-2 mutation with the risk of thrombosis in patients with idiopathic myelofibrosis. Therefore, we performed a systematic review of the studies that assessed the risk of thrombosis associated with V617F Jak-2 in patients with ET or IM.

Materials and Methods

We searched MEDLINE and EMBASE databases and reference lists of retrieved articles. Odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (CI) were calculated for each trial and pooled.

Results

We included 21 studies involving patients with essential thrombocythaemia and 6 studies patients with idiopathic myelofibrosis. In essential thrombocythaemia patients, V617F Jak-2 was associated with a significant increased risk of thrombosis (OR 1.92, 95% CI 1.45-2.53), both of venous (OR 2.49, 95% CI 1.71-3.61) and arterial (OR 1.77, 95% CI 1.29-2.43) vessels. In idiopathic myelofibrosis patients, the risk of thrombosis associated with V617F Jak-2 tended to be increased (OR 1.76, 95% CI 0.91-3.41).

Conclusions

Our systematic review suggests that V617F Jak-2 increases the risk of thrombosis in essential thrombocythaemia patients by about two fold while its role in idiopathic myelofibrosis patients is uncertain.     

Myeloid sarcoma with megakaryoblastic differentiation mimicking a sellar tumor

Myeloid sarcoma (MS) is a localized extra‐medullary tumor mass of immature myeloid cells, arising de novo or related to acute myeloid leukemia, of which it can be a forerunner, a coinciding or late event. Less commonly, MS represents an acute blastic transformation of myelodysplastic syndromes or myeloproliferative neoplasms. This rare condition commonly consists of a proliferation of more or less immature cells with a myeloid immunophenotype, very exceptional cases showing a megakaryoblastic or erythroid differentiation. The most common localization of MS is the skin, lymph node, soft tissues and bones, but CNS involvement is exceedingly rare, with no cases reported in the sellar region. We report a 54‐year‐old man, affected by myeloproliferative neoplasm, JAK2 V617F‐positive of 13 years duration, who acutely presented with a third cranial nerve palsy; neuroradiology documented a space‐occupying lesion at the level of the sellar, upper clival and right parasellar regions, that was sub‐totally removed with a trans‐sphenoidal approach. The histological examination documented a proliferation of large, blastic cells, frequently multinucleated; a diagnosis of MS with megakaryoblastic differentiation, arising in a background of chronic idiopathic myelofibrosis, was suggested by immunohistochemistry, owing to CD42b, CD45, CD61 and LAT (linker for activation of T cells) positivity. In addition, homozygous JAK2 V617F mutation was detected from the myeloid sarcoma specimen. A few weeks after surgery, an acute blastic leukemic transformation occurred and, despite chemotherapy, the patient died 2 months after surgery. To the best of our knowledge, this is the first MS case with megakaryoblastic differentiation arising within the CNS.     

Transitional Care for Young People with Neurological Disorders: A Scoping Review with A Focus on Patients with Movement Disorders

Childhood-onset movement disorders represent a heterogenous group of conditions. Given the complexity of these disorders, the transition of care from pediatric to adult medicine is an important consideration. We performed a scoping review of the literature on transitional care in chronic neurological disease, exploring key transitional issues and proposed transitional care models. Our aim was to describe the current knowledge and gaps about the transition process of young adults with chronic neurological disorders, paying special attention to childhood onset movement disorders. A total of 64 articles were included in the qualitative synthesis; 56 articles reported on transitional care issues, and 8 articles reported on transitional care models. Only 2 articles included patients with movement disorders. The following 4 main transitional issues were identified following synthesis of the available literature: (1) inadequate preparation for the transition process, (2) inappropriate and inconsistent transition practices, (3) inadequate adult services, and (4) heightened emotional response surrounding transition. Of the reported transitional care models, multidisciplinary ambulatory care was the most common approach. In studies evaluating patient-related outcomes, positive health, educational, and vocational outcomes were found. The available literature provides insights on issues that can arise during transition that should be addressed to improve patient and caregiver comfort and satisfaction with care. Further research is needed to evaluate how transitional care programs affect outcomes and their cost effectiveness. More studies are required to determine the needs and outcomes specific to patients with childhood onset movement disorders. © 2020 International Parkinson and Movement Disorder Society     

短暂性脑缺血发作患者糖代谢异常的调查

目的 调查我院短暂性脑缺血发作（transient ischemic attack,TIA）住院患者的糖代谢异常情况。方法 收集2007年7月～2009年3月在我院神经内科住院的经临床诊断为TIA的患者129例,记录患者临床资料及血糖等生化指标,对患者进行颅脑计算机断层扫描（computed tomography,CT）或磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）、血糖等生化指标检查。结果 本组129例TIA患者中,糖代谢异常72例（55.8%）,其中糖尿病35例（27.1%）,糖调节受损37例（28.7%）;正常糖耐量57例（44.2%）。前循环TIA患者58例,糖代谢异常31例（53.4%）;后循环TIA患者71例,糖代谢异常41例（57.7%）,前后循环TIA患者糖代谢异常的频率无明显差异。结论 TIA患者合并糖代谢异常的比例较高,前、后循环TIA患者的糖代谢异常的发生率无明显差别,通过口服葡萄糖耐量试验（oral glucose tolerance test,OGTT）可以更准确地发现糖代谢异常。     

颅内血管支架成形术并发急性血栓形成临床分析

目的探讨颅内动脉狭窄血管内支架成形术并发急性血栓形成机制。方法对16例症状性颅内动脉狭窄(狭窄率>50%)患者行血管内支架(PC冠脉支架)成形术,术后1个月、3个月、6个月进行系统随访。结果16例病人行颅内动脉血管内支架成形术,技术成功率100%。2例术后10min内出现不同程度的意识淡漠、言语不清等神经功能缺失症状,即刻脑血管造影见支架内急性血栓形成,前向血流延迟,及时选送微导管于支架内应用尿激酶接触性溶栓治疗均获得成功,术后随访6个月与术前对比无遗留任何神经功能缺失。结论颅内动脉支架成形术并发急性血栓形成的原因可能是多因素的,但术前充分有效的抗血小板治疗是防治支架内急性血栓形成的重要措施。