HPLC法测定宫颈癌患者血浆顺铂浓度的研究

目的建立一种便捷、准确测定宫颈癌化疗患者血浆中顺铂(Cisplatin,DDP)浓度的高效液相色谱测定法(HPLC),为实时监测血浆顺铂浓度及制定化疗方案提供实验依据。方法取500μL待检者血浆,先将血浆样本经甲醇沉淀蛋白,取上清液经二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)衍生,再由三氯甲烷萃取。色谱柱为Ultimate Acclaim120C18(5μm,4.6mm×250mm),流动相为甲醇∶水=75∶25;流速为1.0mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温35℃;进样量20μL。结果血浆顺铂浓度检测的线性范围为0.2~10mg/L(r=0.9995),最低检测限为0.057mg/L(S/N=3),相对回收率为100.8%±3.6%,日内和日间RSD均10%。结论该方法处理过程简便、快速,重复性好,可用于宫颈癌化疗患者血浆顺铂浓度测定和顺铂药物动力学研究。     

HPLC法测定阿司匹林维C片中阿司匹林的含量

目的采用HPLC法测定阿司匹林维C片中阿司匹林的含量。方法色谱柱:AgilentC18柱(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(23:5:5:67);检测波长:276nm;流速:1.0mL/min;进样量10μL。结果阿司匹林在0.5～200μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(R=0.9994),平均回收率为99.09%,RSD为0.3%(n=6)。结论本方法简便可行,准确可靠,可用于制剂的质量控制。     

血浆样品中叶黄素的快速测定

目的建立一种血浆样品一步处理的简易方法,以解决血浆中叶黄素的大批量快速测定问题。方法取人体新鲜静脉血为样品,采用甲醇去蛋白并提取叶黄素,液相色谱测定。色谱条件为:C18色谱柱(250 mm×4.60 mm×5μm),甲醇∶乙腈(65∶35)为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长446 nm,进样量20μl,柱温25℃。同时测定叶黄素标准溶液及血浆样品在常温下放置10 h及-20℃条件下放置10 d内叶黄素含量的变化情况。结果叶黄素在0.005~0.200μg/ml浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999);回收率为95.2%~96.0%;方法的检出限(LOD)为0.010μg/ml,定量限(LOQ)为0.05μg/ml;相对标准偏差为1.5%。同时血浆样品在-20℃冷冻状态下10 d之内稳定。结论该方法操作简单,稳定性好,适用于大样本人群叶黄素的测定。     

参七脉心通胶囊质量控制方法研究

目的建立参七脉心通胶囊的质量控制方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),以人参皂苷Rg1作为指标成分进行定量测定。结果色谱条件为:色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18(5μm,4. 6 mm×250 mm);流动相∶乙腈-水(25∶75);检测波长:203 nm;流速:0. 8 m L/min;柱温:25℃;进样量10μL。人参皂苷Rg1进样量在5. 39～50. 30μg/m L范围内与峰面积呈良好线性,相关系数r=0. 999 7。平均加样回收率为99. 70%,RSD=1. 08%。结论所建立的检测方法准确、可靠、专属性强,可作为参七脉心通胶囊的质量控制方法。     

饮用水中高氯酸盐的离子色谱碳酸盐体系测定法

目的建立饮用水中高氯酸盐的离子色谱(IC)碳酸盐体系测定方法。方法水样经0.22μm针式过滤器过滤,当水样中硫酸盐浓度小于300 mg/L时,可直接进样;硫酸盐浓度大于300 mg/L时,可使用lC-Ba离子色谱前处理柱降低硫酸盐浓度后再进样,进样体积为250μl。选用Metrosep A supp 4(250 mm×4.0 mm)色谱柱及Metrosep A supp 5 Guard(5 mm×4.0 mm)保护柱进行色谱分离,以4.0 mmol/L碳酸钠-1.7 mmol/L碳酸氢钠溶液作为淋洗液,等度淋洗,采用电导检测器进行定性和定量分析。结果在5～140μg/L的线性范围内,所得高氯酸盐的回归方程为y=0.000 619x-0.000 522,r=0.999 6。该方法的检出限为2μg/L,定量下限为5μg/L;加标回收率为94.0%～104.0%,RSD为0.18%～3.86%。结论该方法样品预处理简便、耗时短,仪器普及率高,操作简单、快速,经济成本较低,准确度和精密度均较高,可用于检测饮用水中的高氯酸盐。     

气相色谱法同时测定食品中3种抗氧化剂

目的:建立气相色谱—氢火焰离子化检测器法同时测定食品中3种抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)的方法,用于各种食品样品中BHA、BHT和TBHQ的含量测定。方法:取一定量油类样品,用10 ml甲醇分3次振摇萃取,用滤纸过滤后取1μl进行色谱分析;色谱条件为:色谱柱SPB-1柱(15 m×0.53 mm×0.50μm),初始温度120℃,保持5 min后,以40℃/min的速率升至220℃,保持1 min;载气氮气流速为25 ml/min,柱头压4 psi,进样量1.0μl,分流比为25∶1。结果:BHA在2.0~100.0μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r=0.99995;BHT在2.0~100.0μg/L浓度范围内相关系数r=0.9997;TBHQ在2.0~100.0μg/L浓度范围内相关系数r=0.9998。BHA、BHT和TBHQ的平均回收率基本在95%以上。用本法调查了1 859种食品中BHA、BHT和TBHQ的含量。结论:方法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于各种食品及油脂类中BHA、BHT和TBHQ的同时测定。     

高效液相色谱法测定茶叶中咖啡因的含量

目的:建立HPLC法快速测定茶叶中的咖啡因.方法:甲醇 水=70 30(v/v);Agilent-C18柱(4.6 mm×300 mm,5 μm);流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长286 nm,进样量10μL.结果:咖啡因在10～125 μg/mL时,浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),加标回收率为98.40%～101.07%,最低检出限为1μg/mL,相对标准偏差RSD为0.08%～1.32%.结论:用该方法测定茶叶中的咖啡因,操作简单、快速、准确,结果令人满意.     

气相色谱法测定碘仿纱布中的乙醇和甘油含量

目的建立同时测定碘仿纱布中甘油、乙醇含量的气相色谱方法。方法采用气相色谱直接进样法。色谱条件:色谱柱为HP-5MS毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm);柱流速为1.0 ml/min;柱温采用程序升温方式,80℃保持3 min以20℃/min的升温速率升温至240℃保持10 min;氢火焰离子化检测器(FID)温度为300℃;载气为N2(30.0 ml/min)、H2(40.0 ml/min)、空气(400.0 ml/min);进样口温度为250℃;进样量为1.0μl,分流进样,分流比为20∶1。结果乙醇和甘油浓度在1.00 mg/ml~20.00 mg/ml时呈良好的线性关系,乙醇的回归方程为у=630 343x-1 599,相关系数(r)=0.999 6,平均回收率为99.63%,RSD为0.35%;甘油的回归方程为у=836 077x-806,r=0.999 5,平均回收率为99.86%,RSD为0.24%。结论该方法经方法学的验证,测定方法简便,结果准确,重现性好,可同时有效测定碘仿纱布中甘油、乙醇的含量。     

HPLC测定如意金黄膏中姜黄素含量

目的:建立HPLC法测定如意金黄膏中姜黄素含量的方法。方法:色谱柱:Agela promosil C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇—异丙醇—0.5%醋酸溶液(19:25:56);检测波长:430 nm;柱温:30℃;流速:0.6 ml/min。结果:姜黄素在0.0448~0.224μg(r=0.9995)范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,回收率为98.84%(RSD=1.76%)。结论:方法简便、准确。     

HPLC法测定排石利胆片中芍药苷的含量

目的:通过HPLC方法测定排石利胆片中芍药苷的含量。方法:选择Hypersil CN(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80),检测波长:230nm,进样量10μl,1.0m L/min流速,柱温为室温(25℃)条件下进行检测。结果:芍药苷在1.14ug·m L-1~57.00ug·m L-1范围内线性关系良好,线性方程为:Y=238459X-334145(r=0.9992),平均回收率为100.02%,RSD 1.6%。结论:高效液相色谱方法操作简单、结果准确、灵敏度高,可有效评估排石利胆片中芍药苷的含量。     

HPLC法测定清胰利胆颗粒中丹皮酚的含量

目的：建立HPLC法测定清胰利胆颗粒中丹皮酚的分析方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱Agilent TC-C18（4.6×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（30：70）,流速为1mL·min^-1,柱温为30℃;检测波长：284nm。进样量：10μL。结果：方法学考察表明,丹皮酚进样量在0.02278-0.3417μg范围内具有良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为100.24%,RSD为0.59%（n=7）。结论：该方法准确、简便、快速,可用于清胰利胆颗粒中丹皮酚的含量测定方法。     

HPLC法测定赤芍中芍药苷的含量

目的建立赤芍中芍药苷的含量测定方法。方法色谱柱为Waters symmetry C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸（B）线性梯度洗脱,0 min：10%A,5 min：15%A,25 min：22%A,45 min：70%A,46 min：80%A,50 min：80%A;平衡时间15 min;流速：0.8 mL.min-1;进样量20μL;柱温25℃;DAD检测器采集范围：195～400 nm;检测波长：230 nm。结果芍药苷在0.39μg～15.6μg范围内线性关系良好,r2=0.9999,平均回收率为94.8%,RSD=2.7%。结论该法简便,重复性、稳定性良好,可作为赤芍中芍药苷的含量测定方法,对赤芍的质量评价具有重要的参考价值。     

高效液相色谱法在测定田银通脉颗粒中皂苷含量中的应用

目的建立田银通脉颗粒中三七总皂苷中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定田银通脉颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。色谱柱为Diamon-silTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.05%磷酸水(B)梯度洗脱(0～8 min,20%A;8～40 min20%～30%A;40～60 min,30%～45%A);流速为1.0 ml/min;柱温为室温;检测波长:203 nm。结果三七皂苷R1在0.212～3.392μg范围内线性关系良好,r=0.999 6,平均回收率为100.21%,RSD=1.71%(n=9);人参皂苷Rg1在0.832～13.312μg范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均回收率为100.24%,RSD=1.62%(n=9),人参皂苷Rb1在0.816～13.056μg范围内线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为99.66%,RSD=1.59%(n=9)。结论所建立的高效液相色谱法测定田银通脉颗粒中的三七皂苷R1、人参皂苷Rg、人参皂苷Rb1含量的方法准确、可靠,专属性强,可有效控制田银通脉颗粒的质量。     

离子色谱法测定饮用水消毒副产物亚氯酸盐、氯酸盐和溴酸盐

目的建立饮用水中消毒副产物（DBP）亚氯酸盐、溴酸盐、氯酸盐的离子色谱检测方法。方法用IonPac23（4×250mm）型阴离子分析柱和（4×50mm）型阴离子保护柱。DS6抑制型电导检测器,抑制器采用ASRS3004mm型,淋洗液浓度：4.5mmol/L Na2CO3~0.8 mmol/L NaHCO3,流速：1.0ml/min。结果本方法线性关系良好（r≥0.999）,精密度高,5.0μg/L添加水平相对标准偏差（RSD）〈10%。在10.0μg/L、50.0μg/L、150.0μg/L三种浓度添加水平下,平均回收率在96.9%~99.1%之间。亚氯酸盐、溴酸盐、氯酸盐最低检测浓度分别为3.1μg/L、3.0μg/L、3.7μg/L。结论该方法操作简单,灵敏度高,适用于饮用水中亚氯酸盐、溴酸盐、氯酸盐的检测。     

三黄片及大黄中大黄素大鼠体内药动学研究

目的利用反相高效液相色谱法,探讨中药制剂三黄片与生药大黄提取物中大黄素在大鼠体内的药代动力学差别,探讨中药制剂工艺和配伍对药效成分代谢的影响。方法 SD大鼠随机分为三黄片组和大黄组,每组5只,分别灌胃三黄片、大黄提取物后,于不同时间点尾静脉采血,通过建立的反相高效液相色谱及样品处理法,检测大鼠血浆中大黄素的浓度,采用药动学程序3P87对其进行统计处理,确定大黄素药动学模型及相关药代动力学参数。结果三黄片及大黄中大黄素在大鼠体内呈二室开放模型,主要药代动力学参数为,三黄片组：Cmax/μg.ml^-1=3.528±0.72,t1/2（a）/h=1.429±0.201,t1/2（β）/h=4.620±0.536,t1/2（Ka）/h-1=0.405±0.097,Tmax/h=1.520±0.210,AUC0-∞/μg.h.ml-1=31.297±2.001,CL（s）/L.h^-1.kg-1=0.018±0.002,Lagtime/h=0.041±0.006。大黄组：Cmax/μg.ml^-1=2.547±0.214,t1/2（a）/h=1.501±0.929,t1/2（β）/h=4.598±0.541,t1/2（Ka）/h-1=0.389±0.101,Tmax/h=1.478±0.243,AUC0-∞/μg.h.ml^-1=26.729±3.010,CL（s）/L.h-1.kg^-1=0.024±0.002。结论与大黄组比较,三黄片中大黄素在大鼠体内的吸收增加,分布及达峰时间延长,血浆清除减少,生物利用度较大黄药材高,其原因可能与大黄素和复方其他成分的相互作用,或复方的制剂工艺有关。     

截肢创伤对大鼠心肌硫化氢／胱硫醚-γ-裂解酶体系的影响

目的研究创伤后新型气体信号分子硫化氢（H2S）血液浓度及心肌胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）活性的动态变化，探讨创伤致心血管系统损伤的机理。方法采用手术的方法建立大鼠左后肢断肢创伤模型，雄性Wistar大鼠63只，随机分为正常对照组和截肢后1h、2h、4h、6h、12h、24h、48h、72h组，每组7只。各组分别于相应的时间点处死，测定血液H2S浓度及心肌CSE的活性。并观察光镜下心肌组织形态学变化。结果肢体创伤后血浆H2s浓度逐渐下降，至创伤后6h达最低值（40．714±7．135μmol／L），与对照组（55．654±6．332μmol／L）比较P〈0．05，而后逐渐恢复；心肌CSE活性创伤后初期变化不明显，而后逐渐下降，至创伤后12h达最低值（14．211±1.311pmol·min^-1·mg^-1），与对照组（16．242±1．220pmol·min^-1·mg^-1）比较P〈0．05，而后逐渐恢复。结论肢体创伤可以导致心肌H2S／CSE体系下调，提示新型气体信号分子H2S可能参与了创伤导致的心肌损伤。     

枸杞子芦丁微波提取-高效液相含量测定法研究

目的建立一种微波提取一反相高效液相测定枸杞子芦丁含量的方法。方法色谱条件：Dikma Kromasil C18色谱柱（4．6mm×200mm,5μm）,以甲醇-0．3％磷酸（37：63）为流动相,采用等度洗脱的方式,流速为1ml·min^-1,检测波长为257mm,柱温为25℃,进样量为5脚;用回流提取、超声提取、微波提取三种方法前处理样品,考察它们对枸杞芦丁含量测定的影响：对枸杞芦丁微波提取-反相高效液相色谱含量测定方法进行了方法学考察。结果芦丁的线性范围为0．004—0．11mg／ml（相关系数为0．9998）。平均回收率（n=5）为101．48％,不同产地枸杞子样品中的芦丁含量存在着较大的差异,真伪枸杞子样品中的芦丁含量存在着极大的差异。结论该方法准确可靠,重现性好,适用于测定枸杞子中芦丁的含量,为枸杞子的质量标准研究提供了实验数据。     

超高效液相色谱法同时测定维生素强化食品中多种水溶性维生素

目的建立可同时测定维生素强化食品中7种水溶性维生素的超高效液相色谱法。方法采用梯度洗脱超高效液相色谱法，Waters ACQUITY UPLC^TM BEH C18柱（2．1mm×50mm，1．7μm），流动相A为辛烷磺酸钠0．8g／L水溶液（冰乙酸调pH=2．8）；B为甲醇，检测波长270nm，流速0．4ml／min。结果各种维生素含量测定方法的线性关系良好，r=0．9992—0．9998，回收率98．1％～100．2％，RSD=0．17—0．72。用该法测定了市售维生素饮料和维生素强化食品中维生素的含量，结果准确。结论本方法操作简便，分析速度快，灵敏度高，精密度好，结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定避孕套中苯佐卡因的含量

目的：采用高效液相色谱法（HPLC）测定避孕套中苯佐卡因（benzocaine）的含量。材料与方法：采用Polaris C18-A（5μm 250×4.6mm）色谱柱,用乙腈-水60：40作为流动相,检测波长为265nm,流速：1.0ml＊min-1,进样量10μl。结果：苯佐卡因在98.5μg/ml~492.5μg/ml范围内呈良好的线性关系（相关系数R2=0.9998）,精密度（RSD）0.7%,平均回收率为102.4%。结论：该方法操作简便可行,适用于含苯佐卡因避孕套中苯佐卡因含量的质量控制。     

高效液相色谱法测定五维葡钙口服溶液中维生素B_1、维生素B_2的含量

目的建立以高效液相色谱法测定五维葡钙口服溶液中维生素B1、维生素B2含量的方法。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(5μm,250mm×4.6mm)。流动相为0.005mol/L庚烷磺酸钠溶液(含0.5%冰醋酸和0.05%三乙胺)-甲醇(72∶28),柱温30℃,流速为1ml/min,检测波长为260nm,进样量20μl。结果维生素B1、维生素B2检测浓度的线性范围分别为7.82~23.97μg.mL-1(r=0.9996)、8.26~34.81μg.mL-1(r=0.9992);平均回收率分别为102.5%(RSD=0.6%)、99.4%(RSD=0.8%)。结论本方法简便准确、灵敏度高、结果可靠,可用于五维葡钙口服溶液中维生素B1、维生素B2的含量测定。