紫草提取成分对表皮免疫系细胞的影响

研究认为紫草对角叉菜胶水肿有抗炎、抗菌作用,但未见对表皮免疫系细胞影响的详细研究的报道。本次探讨了紫草提取物及其成分右旋紫草素、alkannin对郎格罕细胞(LC)与树状表皮T细胞(DETC)的影响。 实验动物为BALB/c小鼠(10～12周龄),耳廓部皮下给予紫草提取物及其成分右旋紫草素与alkannin。24h后制成表皮片(Epidermal sheet),进行以Ia抗体及Thy-1,2抗体的免疫染色,以共焦点激光显微镜观     

紫草细胞培养生产紫草素的研究

目的:探索用紫草细胞生产紫草素的培养条件。方法:用正交试验考察紫草素生产培养基中L-苯丙氨酸、IAA、Ca(NO_3)_2·4H_2O的浓度对紫草素形成的影响;用摇瓶试验考察通气量对紫草素形成的影响。结果:紫草生产培养基中的L-苯丙氨酸、IAA、Ca(NO_3)_2·4H_2O的合适浓度分别为100、2、800 mg/L。通气量以150 r/min较为合适。结论:本研究可为紫草细胞培养生产紫草素提供数据。     

紫草素对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对人宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Hela细胞,分为对照组和紫草素组(浓度分别为4,8,16,32,64μmol·L-1),采用MTT法检测紫草素对Hela细胞增殖的抑制作用;紫草素处理Hela细胞24h后,采用流式细胞术观察细胞凋亡率的改变;Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移力的变化;Western blotting法分析黏着斑激酶(FAK)蛋白表达及FAK磷酸化水平的变化;实时荧光定量PCR技术检测FAK mRNA表达的情况。结果:紫草素对Hela细胞的增殖具有抑制作用,且具有浓度和时间依赖性;细胞凋亡率随着紫草素浓度的增加而逐步增高,其中32,64μmol·L-1的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡(P<0.001)。4,8,16μmol·L-1的紫草素作用于Hela细胞后,能够显著降低Hela细胞的穿膜细胞数(P<0.05)。紫草素能够呈浓度依赖性的下调Hela细胞中FAK蛋白和mRNA的表达,使FAK磷酸化水平降低。结论:紫草素可显著抑制Hela细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制FAK磷酸化水平有关。     

中药紫草的临床应用

紫草是传统中草药,又名东紫草、地血、紫丹。近年来对紫草的研究不断加深,对其药理作用和药用价值多有报道,临床应用也更加广泛。现将其临床应用情况介绍如下: 一、实验研究 化学成分:紫草及新疆紫草根及根茎中主要含多种萘醌类化合物:紫草素(Shikonin)、乙酰紫草素(Acetylshikonin)、ββ──二甲基丙烯酰紫草素(ββ──Dimethylacrylshikonin)、异丁酰紫草素(lso-butyl-shikonin)等十多种紫草素衍生物;有报道紫草或其幼苗(Ⅱ)与紫草茸(Ⅰ)具不相同成分,实验表明紫草(Ⅱ)中主含萘醌类化合物──紫草素及其衍生物,紫草茸(Ⅰ)中主含树脂蜡及水溶性红色素等。     

软紫草与硬紫草萘醌类化学成分的研究

目的:对软紫草与硬紫草中萘醌类化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱等方法分离纯化,通过理化常数和波谱数据鉴定化合物结构,利用圆二色谱测定萘醌化合物绝对构型。结果:从软紫草中分离得到6个化合物,鉴定为阿卡宁(AE-1),乙酰阿卡宁(AE-2),β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(AE-3),异丁酰阿卡宁(AE-4),α-甲基-正丁酰阿卡宁+异戊酰阿卡宁(AE-5),β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁(AE-6);从硬紫草中分离鉴定了6个化合物,分别为紫草素(LE-1),乙酰紫草素(LE-2),β,β-二甲基丙烯酰紫草素(LE-3),异丁酰紫草素(LE-4),α-甲基-正丁酰紫草素+异戊酰紫草素(LE-5),β-羟基异戊酰紫草素(LE-6)。结论:软紫草中萘醌类化学成分绝对构型为S型,硬紫草中为R型。     

紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨

目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。     

紫草素对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究紫草素(shikonin)对感染HPV16的宫颈癌Caski细胞作用。方法:对宫颈癌Caski细胞进行HPV病毒基因鉴定,将紫草素配成不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol·L~(-1))作用于体外培养的宫颈癌Caski细胞,用MTT方法检测不同浓度紫草素作用不同时间(12 h、24 h、36 h)后对Caski细胞增殖能力的影响;采用Annexin V/PI试剂染色不同浓度紫草素(5、10、20、40μmol·L~(-1))作用24 h后的宫颈癌Caski细胞,上流式细胞仪观察细胞凋亡改变;用DAPI染色观察5、10、20、40μmol·L~(-1)紫草素作用于Caski细胞24 h后的凋亡形态学变化。结果:紫草素对宫颈癌Caski细胞具有抑制增殖、促进凋亡作用,在一定范围内,随着浓度和时间增加,抑制增殖作用逐渐增加;凋亡数目逐渐增多,其中20、40μmol·L~(-1)的紫草素可明显抑制细胞增殖并诱导其凋亡,DAPI染色可观察到典型的细胞凋亡改变:细胞核碎裂、固缩;且细胞凋亡现象随紫草素浓度增加而愈加明显。结论:紫草素可抑制感染HPV16的宫颈癌Caski细胞增殖并促进其凋亡。     

微乳对左旋紫草素增溶作用的实验研究

目的:研究o/w型微乳对左旋紫草素的增溶作用。方法:以伪三角相图法制备了聚氧乙烯蓖麻油甘油醚(EL)-乙醇-肉豆蔻酸异丙酯(IPM)-水的微乳体系,用比色法测定了在微乳和水中左旋紫草素的溶解度。结果:左旋紫草素在微乳中的溶解度为水中的955倍。结论:微乳对左旋紫草素有明显的增溶作用,为紫草素相关制剂的研究提供了依据。     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究紫草素诱导体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡作用及其机制。方法:流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率变化;免疫组化法(SABC法)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:紫草素可诱导细胞凋亡,改变细胞周期分布,多数细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);紫草素可上调Bax和下调Bcl-2基因蛋白的表达,与空白组对照差异有统计学意义(P<0.05)。结论:紫草素能够诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,其凋亡机制可能与促进Ishikawa细胞中Bax上调,Bcl-2下调相关。     

2-氨基磷酸茚处理对新疆紫草悬浮细胞次生代谢物积累的影响

用不同浓度2-氨基磷酸茚(AIP),并结合茉莉酸甲酯(Me JA)处理新疆紫草悬浮细胞,测定不同处理组、不同处理时间细胞中迷迭香酸及乙酰紫草素、脱氧紫草素、β,β'-二甲基丙烯酰紫草素、异戊酰紫草素等次生代谢物的含量,考察AIP抑制苯丙氨酸通路后对紫草悬浮细胞中次生代谢物合成、积累的影响。结果显示Me JA处理能够明显促进新疆紫草细胞中次生代谢物的合成积累;AIP处理能够抑制新疆紫草细胞中上述次生代谢物的积累,并在二者联合处理时能一定程度上抵消Me JA的促进作用,且抑制作用的强弱与处理剂量、处理时间存在正相关性。表明苯丙氨酸途径在紫草素类化合物生物合成中具有重要作用,可为通过细胞培养方式生产紫草素类化合物的代谢调控及紫草素类化合物生物合成等进一步研究提供参考。     

紫草及紫草制剂的抗炎作用研究进展

目的:为紫草和紫草制剂的抗炎机制研究及产品开发提供参考。方法:以"紫草""紫草素""制剂""抗炎""进展""zicao""shikonin""anti-inflammatory"等为关键词,在Pub Med、CNKI等多个数据库中查询建库至2017年12月31日的相关文献,对紫草、紫草素和紫草复方制剂抗炎作用的相关研究进行综述。结果与结论:共检索到相关文献128篇,其中有效文献41篇。紫草以新疆软紫草品质最佳,而滇紫草、泰山紫草等也被逐步肯定。紫草醇提物抗炎效果最优,紫草素及其衍生物的抗炎活性突出。紫草、紫草素及紫草复方制剂治疗烧烫伤、湿疹、银屑病、过敏性紫癜、关节炎、静脉炎、妇科炎症、急性肺损伤、重症急性胰腺炎伴肺损伤或肝损伤、局部脑缺血等多种疾病的实验研究正逐步深入,多认为其抗炎机制与NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、CCR、COX-2、IL-22、IL-17等密切相关。紫草及紫草制剂现已广泛用于临床治疗湿疹、皮炎、妇科炎症、皮肤创面及黏膜损伤等多种炎症性疾病,其剂型多为油剂、膏剂、栓剂、喷雾剂等。如何高效发挥紫草及紫草制剂的抗炎作用,尚有待在微观层面运用生物组学技术等继续深入研究。     

右旋紫草素和紫草素促进大鼠肉芽组织增生的组织学研究

曾报道,紫草的醚提物能加速棉球诱导的肉芽组织增生。本次对右旋紫草素和紫草素促进大鼠肉芽组织增生的作用进行了组织学研究。 材料和方法:①棉球诱导肉芽组织增生试验:右旋紫草素和紫草素分别溶于1％吐温80。雄性Wistar大鼠体重约为250g,随机分组。在乙醚麻醉下,背部皮肤消毒后做一切口,皮下植入一重约(20±1.0)mg的消毒棉球(其中右旋紫草素组及紫     

紫草素对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响

目的探讨紫草素调控HNF1A-AS1/miR-20b-5p轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响。方法将子宫内膜癌细胞HEC-1B分为对照组、紫草素低、中、高剂量组、si-NC组、si-HNF1A-AS1组、miR-NC组、miR-20b-5p组、pcDNA-NC+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+miR-NC+紫草素组、pcDNA-HNF1A-AS1+miR-20b-5p+紫草素组。CCK-8检测细胞存活率和顺铂对HEC-1B细胞的半抑制浓度值(IC_(50));流式细胞术检测凋亡;RT-PCR检测HNF1A-AS1和miR-20b-5p的表达;Western blot检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、MRP1表达。双荧光素酶报告基因实验和RT-PCR验证HNF1A-AS1对miR-20b-5p的靶向调控作用。结果低、中、高剂量紫草素处理后HEC-1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P0.05,P0.05),HNF1A-AS1、CyclinD1、MRP1表达降低,miR-20b-5p和Cleaved-caspase-3表达升高,IC_(50)值降低(P0.01)。干扰HNF1A-AS1表达或过表达miR-20b-5p后,HEC-1B细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1、MRP1蛋白表达降低,Cleaved-caspase-3表达升高,IC_(50)值降低(P0.01)。HNF1A-AS1靶向负调控miR-20b-5p表达。过表达HNF1A-AS1可以逆转紫草素对子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P0.01)。过表达miR-20b-5p可以逆转pcDNA-HNF1A-AS1对紫草素处理的子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞增殖、凋亡和顺铂耐药性的影响(P0.01)。结论紫草素可抑制子宫内膜癌细胞存活,诱导细胞凋亡,提高其顺铂敏感性,其机制与调控HNF1A-AS1/miR-20b-5p轴有关。     

用四川紫草提取紫草素的工艺优化研究

目的 以四川紫草为原料,研究紫草素的提取工艺.方法 采用正交实验,考察提取温度、提取时间、提取的料液比(95%乙醇/四川紫草,ml/g)、提取次数4因素对砂紫草素提取效果的影响.结果 影响紫草素提取效果的因素次序是:提取时间＞提取温度~提取次数＞提取的料液比.结论 提取紫草素的最优工艺条件:温度50℃;时间3 h;料液比为:7 ml 95%乙醇/g四川紫草;提取次数为3次.     

紫草素抗妇科恶性肿瘤作用机制的研究进展

紫草的主要有效成分之一紫草素是一种萘醌类化合物,已被证实具有抗病毒、抗肿瘤、抗炎等多种生物活性。有大量研究表明,紫草素在抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、诱导细胞坏死、抑制侵袭转移等方面发挥重要作用。近年关于紫草素在妇科恶性肿瘤中的研究日益增多,故本文对该成分作用机制进行综述,以期为其深入研究和相关新药开发提供参考。     

紫草素对银屑病T淋巴细胞增殖、活化的影响

目的:研究具有凉血、解毒作用的中药单体紫草素对银屑病病理状态下异常活化的T淋巴细胞功能及相关信号转导通路的影响。方法:选取Jurkat E6-1 T淋巴细胞,以佛波醇酯和离子霉素活化Jurkat E6-1 T淋巴细胞,同时将0. 5～2μg/m L浓度的紫草素作用于细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞膜CD69的表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞释放白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用Realtime-PCR和Western blotting法分别观察核转录因子mRNA及蛋白的表达影响。结果:不同浓度的紫草素均可明显抑制细胞增殖、CD69表达及Th1类细胞因子分泌;均可有效降低[Ca2+]i和蛋白激酶C(PKC)磷酸化蛋白的水平;显著降低核转录因子NF-AT mRNA的表达,下调c-Jun的mRNA及蛋白表达并可抑制核因子-κB蛋白的表达。以上各项指标均有一定量效关系。结论:紫草素可以通过抑制过度活化的T淋巴细胞功能从而发挥免疫调控作用,为紫草素治疗银屑病的作用机制及应用前景提供实验依据。     

紫草素对人角质形成细胞HaCaT增殖抑制以及细胞毒性的初步研究

目的研究紫草素对人角质形成细胞HaCaT细胞增殖的抑制作用,以及对细胞凋亡的影响,并对其细胞毒作用进行初步研究。方法以不同浓度的紫草素处理HaCaT细胞,MTT法检测紫草素对HaCaT细胞增殖抑制作用,并计算其IC50;流式细胞仪检测紫草素对HaCaT细胞凋亡的作用,Western blotting检测其对Caspase-3以及Bcl-2蛋白的影响;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)释放量、同时检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放量。结果紫草素可明显抑制HaCaT细胞增殖,24h和48h其半数致死量分别为1.43μg/ml和0.80μg/ml;紫草素可明显促进HaCaT细胞凋亡,且剂量越大,凋亡率越明显,紫草素促进角质形成细胞凋亡作用与诱导Caspase-3以及抑制Bcl-2蛋白表达有关。紫草素直接作用于HaCaT细胞后,细胞培养上清中NO和LDH释放量明显增加。结论紫草素直接抑制人角质形成细胞增殖,诱导凋亡,但也具有一定的细胞毒作用。     

紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用研究

目的研究紫草素体外诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的作用,并初步探讨其诱导凋亡的机制,为紫草素的临床应用提供实验依据。方法采用MTT法测定各组药物对Ishikawa细胞的增殖抑制作用;流式细胞术观察紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞周期及其凋亡率的影响;应用RT-PCR法检测紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞中Bax及其Bcl-2蛋白表达的影响。结果紫草素对Ishikawa细胞的增殖有明显抑制作用,并呈明显的量效关系和时间依赖性。紫草素主要将细胞阻滞于G1期,并且同一时间点下紫草素诱导Ishikawa细胞凋亡的作用具有浓度依赖性。紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的机制与蛋白Bax及Bcl-2表达相关,通过促进Bcl-2表达下调与Bax表达上调从而诱导子宫内膜癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论紫草素可以有效抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性。促进细胞凋亡并将细胞周期阻止于G1期,其机制可能与抑制Ishikawa细胞中Bax与Bcl-2蛋白的表达有关。     

紫草素对人肝癌HepG2细胞生长的影响及机制研究

目的:研究紫草素对人肝癌HepG2细胞生长的影响并探讨其可能的作用机制。方法:以不同浓度紫草素(0.3、0.5、0.7μg/ml)和顺铂(40μg/ml)分别干预对数生长期人肝癌HepG2细胞;采用MTT比色法测定细胞增值抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用RT-PCR法检测细胞中Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达并计算Bax/Bcl-2比值,采用Western blotting技术检测Caspase-3蛋白表达。结果:经紫草素干预48 h能够显著提高HepG2细胞增殖抑制率,延长细胞周期G_0/G_1期并缩短G_2/M期,提高细胞凋亡率(Apoptosis Index,AI),上调Bax mRNA表达并下调Bcl-2 mRNA表达、提高Bax/Bcl-2表达比值,上调Caspase-3蛋白表达,上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论:紫草素能够通过抑制增殖并促进凋亡而对人肝癌HepG2细胞生长起到一定抑制作用,其机制可能与紫草素能够调节细胞周期以及调节凋亡相关基因、蛋白表达有关。