HPLC法测定人血浆中帕罗西汀的浓度

目的:建立测定人血浆中帕罗西汀浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Phenomenex Gemini C18,流动相为0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH3.5)-乙腈(62.5:37.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为205nm,柱温为35℃。结果:帕罗西汀血药浓度在0.00781～0.5μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9994),最低定量限为0.2μg·mL-1;日内、日间RSD分别为3.2%～6.4%、4.5%～8.6%;萃取回收率>54%,方法回收率>97%。结论:本方法快速、简便、灵敏、准确,可用于帕罗西汀体内药动学研究。     

RP-HPLC法检测奈韦拉平原料药中有关物质

目的 建立RP-HPLC测定奈韦拉平原料药中已知杂质A、B、C和未知杂质的方法.方法 RP-HPLC法,以Gemini C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)(Phenomenex),乙腈-0.025mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH5.0)(20∶80)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温35℃,进样量50μL.结果 奈韦拉平杂质线性范围A为0.1203 μg·mL-1 ～0.6016μg·mL-1,r =0.9998;B为0.1198μg·mL-1～0.5992μg·mL-1,r =0.9999;C为0.1195μg·mL-1～0.5976μg·mL-1,r =0.9999.平均回收率A为98.87％,RSD=1.03％;B为100.43％,RSD=0.62％;C为99.19％,RSD =1.69％.结论 本方法准确、简便、快捷,可用于奈韦拉平有关物质的测定.     

HPLC法同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮的浓度

目的:建立同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮浓度的高效液相色谱法。方法:采用MERCKPurospherC18色谱柱,0.02mo·lL-1醋酸盐缓冲液(pH=3.6)-乙腈(60∶40)为流动相,检测波长为245nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,进样量为40μL。结果:厄贝沙坦和吡格列酮检测浓度的线性范围分别为0.1～12μg·mL-1(r=0.9997)、0.1～12μg·mL-1(r=0.9998),萃取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内RSD小于4.4%,日间RSD小于8.1%。结论:该方法准确、灵敏、快速,可用于同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮的浓度。     

RP-HPLC法测定人血浆中米氮平的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中米氮平浓度的方法。方法:色谱柱为美国DiamonsilC18,流动相为甲醇-0.3%正丁胺溶液(80∶20),流速为1.0mL·min-1,检测波长为292nm。结果:米氮平血药浓度在0.1～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测限为0.05μg·mL-1;相对回收率为95.74%～98.91%,绝对回收率为90.44%～91.81%;日内、日间RSD均<2%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,可用于米氮平临床药动学研究与不良反应监测。     

RP-HPLC法同时测定人血浆中茶碱和多索茶碱的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法同时测定人血浆中茶碱和多索茶碱浓度的方法。方法:色谱柱为XterraRP18,流动相为甲醇-水(35:65),流速为1.0mL·min-1,检测波长为269.9nm,柱温为35℃,内标为非那西丁。结果:茶碱和多索茶碱浓度分别在1.563～50μg·mL-1(r=0.9995)、0.3125～10μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性关系良好;茶碱、多索茶碱提取回收率分别为32.53%～35.08%、31.88%～34.55%,方法回收率分别为92.82%～109.41%、90.68%～102.72%,日内、日间RSD均<15%。结论:本方法快速、灵敏、准确,可用于同时测定人血浆中茶碱和多索茶碱的浓度。关键词茶碱;多索茶碱;反相高效液相色谱法;血药浓度监测     

HPLC法测定人血浆中多西紫杉醇浓度

目的:建立测定人血浆中多西紫杉醇浓度的方法。方法:使用外标法,血浆样品经乙腈提取,振荡离心,过滤离心后进样以高效液相色谱法测定,色谱柱为KromasilC18,流动相为乙腈,流速为1.0mL·min-1,检测波长为230nm,柱温为室温,灵敏度为2.0AUFS,进样量为10μL。结果:多西紫杉醇血药浓度在0.167～3.333μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9952),检测下限为0.167μg·mL-1;提取回收率在84.7%～87.5%之间,日内、日间RSD均<10%。结论:本方法简便、准确、快速,适用于多西紫杉醇血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度的方法。方法:血浆样品采用—20℃甲醇快速沉淀蛋白后进行测定,其中色谱柱为shim-packCLS-ODS,流动相为甲醇∶1%三乙胺(冰醋酸调pH6.5)=55∶45,流速为1.0mL·min-1,检测波长370nm,进样量为50μL,柱温为40℃。测定总浓度的样品采用冰醋酸酸化上清液。并以该法测定了不同时间点离体人血浆中9-硝基喜树碱内酯型、羧酸盐型浓度和总浓度的变化。结果:9-硝基喜树碱血药浓度在0.10～10.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),定量下限为0.10μg·mL-1,平均方法回收率、酸化回收率各为101.02%、101.46%。结论:本法操作简便、快速,适用于9-硝基喜树碱内酯结构稳定性的研究。     

LC-MS法测定人血浆中丙戊酸钠的浓度

目的:建立测定人血浆中丙戊酸钠浓度的方法。方法:以霉酚酸为内标,血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白后,采用液-质联用(LC-MS)法进样测定。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为0.05%乙酸铵-乙腈(40:60),流速为0.2mL·min-1,柱温为30℃;通过电喷雾离子源(ESI)正负离子同时检测,丙戊酸钠、内标霉酚酸的检测离子分别为m/z166→143、m/z320→321。结果:丙戊酸钠血药浓度在2.5～200μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9983),最低检测限为0.2μg·mL-1;高、中、低3种浓度的日内、日间RSD分别<3%、12%,方法回收率为105.5%～108.99%,绝对回收率均>70%。结论:本方法简便、快速、灵敏、准确,能够有效检测人血浆中丙戊酸钠的含量。     

气相色谱法测定人血浆中卵磷脂络合碘的浓度

目的建立一种人血浆中卵磷脂络合碘浓度测定方法。方法采用衍生气相色谱法,在酸性环境下将其衍生成碘丁酮,环己烷萃取后1μL进样分析。采用毛细管色谱柱OV-1701(50m×0.53mm),电子捕获检测器。气化室温度:230℃,柱温:105℃;检测器温度:260℃,高纯氮气10mL·min-1。结果血浆中药物浓度在0.04～0.4μg·mL-1内线性关系良好(r=0.9954),最低检测限为0.02μg·mL-1,平均回收率82.55%,RSD为2.864%。结论该方法结果准确,可靠,使用于测定人血浆中卵磷脂络合碘浓度。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中比阿培南的浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中比阿培南浓度的方法并对其药动学进行研究。方法:血浆样品经7%硫酸锌溶液沉淀处理后,采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Agilent Zorbax Bonus-RP,流动相为甲醇-0.03%冰乙酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL.min-1,检测波长为300nm。单剂量与多剂量给药后比阿培南血药浓度数据采用DAS2.0药动学软件计算药动学参数。结果:比阿培南血药浓度在0.2～50μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998);平均方法回收率为96.8%～99.4%,日内、日间RSD均<8%。单剂量静脉滴注低、中、高3个剂量比阿培南后的药动学参数分别为:t1/(21.47±0.23)、(1.38±0.28)、(1.52±0.06)h,cmax(8.92±4.13)、(19.07±3.08)、(35.60±0.05)mg.L-1,AUC0～(t11.17±3.01)、(22.14±3.97)、(45.26±3.85)mg.h.L-1;多剂量静脉滴注比阿培南后的药动学参数为:t1/(21.59±0.13)h、cma(x18.96±6.03)mg.L-1、AUCs(s24.57±2.81)mg.h.L-1。结论:健康受试者单剂量静脉滴注比阿培南后,在150～600mg范围内呈线性药动学特征;多剂量给药后,比阿培南在体内无蓄积现象。     

Simultaneous determination of zidovudine and nevirapine in human plasma by RP-LC

A simple method for the simultaneous determination of zidovudine and nevirapine in human plasma by reversed-phase liquid chromatography with UV detection at 265 nm was developed. A solid–liquid extraction procedure with internal standard was applied to the samples prior to analysis. The system requires a Zorbax SB-C18 column, 250×4.6 mm I.D. and a mobile phase composed of potassium dihydrogen phosphate (10 mM; pH 6.5)-acetonitrile (83:17, v/v). Peak-areas are linear; correlation coefficients are better than 0.999; both inter- and intra-day accuracy and precision are lower than 15%. Extraction recoveries are higher than 90% for both zidovudine and nevirapine. The method proposed was employed to determine the levels of the two retroviral drugs in plasma from HIV infected human subjects.     

鸡屎藤次苷在大鼠体内的药动学研究

目的:测定大鼠血浆中鸡屎藤次苷的含量,并研究其在大鼠体内的药动学过程.方法:采用HPLC -UV法测定大鼠尾静脉注射给药后血浆中鸡屎藤次苷的血药浓度.色谱条件为:DiamonsilTM C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇一乙腈-0.1％冰醋酸(3:2:95,v/v/v),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:230 nm.通过BAPP2.0软件求算其药动学参数.结果:鸡屎藤次苷血浆浓度在0.2～40μg·mL-1(Y=0.07321X-0.00939,γ=0.9940)范围内线性关系良好.日内精密度不大于7.1％,日间精密度不大于13.5％,准确度RE值在一4.5％～1.8％之间.鸡屎藤次苷提取回收率为64.5％～73.1％,内标物提取回收率为74.5％.主要药动学参数为t1/2=(33.5+4.39) min,AUC0-180mm=(922±129) μg·min· mL-1.结论:该法专属、准确、灵敏,适用于鸡屎藤次苷在大鼠体内的药动学研究,为进一步研究鸡屎藤次苷体内药动学行为提供了依据.     

在线SPE HPLC-DAD方法测定大鼠血浆环磷酰胺浓度(英文)

建立快速简便的在线固相萃取液相(on-line SPE HPLC-DAD)分析方法,测定大鼠血浆中环磷酰胺的浓度。该方法为:将Acclaim Polar Advantage II C18保护柱(PA II柱,10mm×4.6mm,5μm)作为在线SPE柱,去蛋白的血浆样品进样后,100%H2O洗脱1min;经PA II C18柱(150mm×4.6mm,5μm)分析,流动相为乙腈水(40:60,v/v),流速为1mL/min,检测波长为195nm。经过验证发现该方法的选择性好,线性、精密度、准确度和灵敏度高,可用于临床监测环磷酰胺浓度。     

LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度

目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测。采用AgilentZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1 mm×12.5 mm,5μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z 138.2→121.0,乙胺丁醇m/z 205.2→116.1,吡嗪酰胺m/z 124.1→81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0。分析时间为5 min。结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1～6.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1～5.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μg.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确率为90.4%～108.7%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析。     

RP-HPLC内标法测定大鼠血浆中盐酸氟桂利嗪的含量

目的建立RP-HPLC内标法测定大鼠血浆中盐酸氟桂利嗪含量的方法。方法色谱柱：Shimadzu ODS C18柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相：甲醇-磷酸二氢钾（0.01mol/L,pH=3.5）（68：32）;流速：1.0mL/min;检测波长：254nm;柱温：30℃;进样量：20μL;内标：对羟基苯甲酸丙酯。结果盐酸氟桂利嗪在0.01～0.12μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997（n=7）,信噪比（S/N）〉3时,最低检测浓度为3.48×10-3μg/mL;平均回收率为89.83%,RSD值为2.76%。结论本方法简便、灵敏,回收率和精密度高,可用于盐酸氟桂利嗪新剂型研究中血药浓度的测定及其药代动力学研究。     

HPLC法测定人体内咪达唑仑血药浓度

目的建立人体血浆中同时测定咪达唑仑HPLC测定法。方法采用HPLC法,色谱柱为Hypersil ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(60:40)(含0.1%二乙胺,0.05%磷酸溶液),流速为1.0ml/min,柱温为室温,检测波长225nm。结果咪达唑仑在0.25~4μg/ml内呈良好的线性关系(r=0.9997),咪达唑仑最低检测浓度为50ng/ml,回收率96.81%~100.98%,萃取回收率87.69%~92.99%。日内、日间RSD(n=3)均小于5.89%。结论本方法简便、准确,可靠,可用于人体血浆中测定咪达唑仑的浓度。     

LC-MS/MS法测定人体内的血浆中蝙蝠葛碱质量浓度

目的建立人血浆中蝙蝠葛碱质量浓度的测定方法。方法采用LC-MS/MS。色谱柱为Agi-lent TC-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(体积比为60∶40∶0.8);流速700μL.min-1;柱温30℃;进样量20μL。结果血浆中内源性物质不干扰蝙蝠葛碱和内标原阿片碱的测定,蝙蝠葛碱的线性范围为1.0～200μg.L-1,血浆中平均回收率为65.3%～73.4%,蝙蝠葛碱的定量下限为1.0μg.L-1。结论 LC-MS/MS方法简单,快速,专属性强,灵敏度高,可用于人血浆中蝙蝠葛碱质量浓度的测定。     

葛根素微乳灌胃后大鼠血浆中葛根素的测定

目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的葛根素,用于葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。方法取血浆样品,用乙腈沉淀蛋白,Phenomenex C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）分离,4-羟基苯甲醛为内标,乙腈-0.1%醋酸溶液（23∶77）为流动相,流速0.8 mL.min-1,紫外检测波长250 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果葛根素的线性范围为0.10～10.00μg·mL-1（r=0.999 6）,定量下限为0.10μg.mL-1,提取回收率〉79%,方法回收率〉92%,日内、日间精密度RSD〈6%。结论本方法灵敏度好、准确性高,可用于大鼠血浆中葛根素浓度的测定以及葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。     

LC-MS/MS法测定犬体内托拉塞米浓度及相对生物利用度研究

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬体内托拉塞米的浓度,并研究托拉塞米缓释片的相对生物利用度。方法:色谱柱为Waters Sym-metry-C18(100mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇∶20mmol/L甲酸铵(65∶35,V∶V);流速0.4mL/min;柱温30℃。采用两制剂双周期随机交叉试验设计,分别给予6只Beagle犬受试制剂或参比制剂5mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。结果:托拉塞米线性范围为0.02～5μg/mL,最低定量限为0.02μg/mL,分析方法灵敏、稳定、特异性高。受试制剂和参比制剂的主要药动学参数:峰浓度(Cmax)、达峰时间(tmax)和药-时曲线下面积(AUC0-48h)分别为(2.6±0.5)g/mL和(3.0±0.6)g/mL、(3.3±1.4)h和(1.2±0.8)h、(36.1±11.0)g.h.mL-1和(32.1±13.1)g.h.mL-1。以AUC0-48h计算,受试制剂的相对生物利用度F为(118.0±28.3)%。结论:该方法操作简单、准确、重复性好,并成功地运用于犬体内托拉塞米相对生物利用度的研究。