薏苡仁提取物诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡和抑制增殖的体内实验

细胞凋亡 ( Apoptosis)是由基因调控的主动的细胞死亡过程 ,与细胞增殖互补 ,共同维持机体的器官组织细胞数量的稳定。恶性肿瘤的发生和发展的过程 ,是细胞的过度增殖和细胞凋亡受到抑制的过程 [1] 。化疗诱导肿瘤细胞凋亡已成为肿瘤综合治疗中的重要手段。胃癌是我国最常见的恶性肿瘤 ,但目前有关化疗诱导胃癌细胞凋亡的研究极少。本研究用小鼠 SGC- 790 1胃癌模型 ,研究体内薏苡仁提取物 (康莱特 ,KLT)对 SGC- 790 1胃癌细胞凋亡和增殖的影响 ,以评价 KLT化疗的临床价值。材料与方法一、动物模型 　昆明种小鼠 2 0只 ,2 5g左右 ,由…     

Midkine shRNA对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究shRNA 干扰midkine对胃肿瘤细胞SGC7901生物学特性的影响.方法:构建midkine基因的特异性小RNA干扰质粒,采用脂质体2000转染SGC7901细胞,检测细胞的增殖和克隆形成能力以及细胞凋亡情况.结果:与对照组相比,转染重质粒后1-5天, SGC7901细胞增殖明显受到抑制(P＜0.01),细胞形成克隆数明显降低(P＜0.01),并且有明显的亚二倍体峰出现(P＜0.05).结论:针对midkine基因的特异性小RNA干扰质粒在体外能有效抑制人胃癌细胞SGC7901 midkine表达,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞凋亡增加,为midkine 基因靶向治疗提供一定的实验依据.     

Midkine shRNA对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究shRNA干扰midkine对胃肿瘤细胞SGC7901生物学特性的影响。方法：构建midkine基因的特异性小RNA干扰质粒,采用脂质体2000转染SGC7901细胞,检测细胞的增殖和克隆形成能力以及细胞凋亡情况。结果：与对照组相比,转染重质粒后1—5天,SGC7901细胞增殖明显受到抑制（P〈0．01）,细胞形成克隆数明显降低（P〈0．01）,并且有明显的亚二倍体峰出现（P〈0．05）。结论：针对midkine基因的特异性小RNA干扰质粒在体外能有效抑制人胃癌细胞SGC7901 midkine表达,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞凋亡增加,为midkine基因靶向治疗提供一定的实验依据。     

熊果酸抑制胃癌细胞SGC7901增殖和诱导细胞凋亡的机制

背景与目的:研究表明熊果酸(ursolicacid,UA)可抑制多种肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡,但目前有关UA作用于胃癌细胞的报道较为少见。环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在多种癌前病变及癌组织中高表达。本研究旨在探讨熊果酸抑制人胃癌细胞SGC7901增殖和诱导凋亡的机制。方法:MTT法检测0、10、20、30、40!mol/LUA作用不同时间对SGC7901细胞增殖的影响;荧光染料Hoechst33258染色观察不同浓度UA作用24h细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞周期变化及凋亡率;Westernblot法检测COX-2蛋白以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达。放射免疫分析法测定COX-2催化产物前列腺素E2(prostaglandinE2,PGE2)。结果:20～40!mol/LUA可抑制SGC7901细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性,作用12、24、36、48h的半数抑制浓度(IC50)分别为(57.50±1.18)!mol/L、(34.28±2.05)!mol/L、(27.54±1.11)!mol/L、(24.83±1.02)!mol/L;20～40!mol/LUA作用24h后,SGC7901细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(9.10±2.39)%、(26.30±1.25)%、(35.20±2.26)%;同时COX-2蛋白表达及其催化生成产物PGE2浓度下降,凋亡相关蛋白Bcl-2表达减少,Bax无明显变化。结论:熊果酸对SGC7901细胞具有增殖抑制及诱导凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞周期、抑制COX-2表达进而减少PGE2生成以及下调凋亡相关蛋白Bcl-2表达有关。     

环磷酰胺诱导小鼠HAC肝癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的 探讨环磷酰胺对荷瘤鼠ＨＡＣ肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法 建立小鼠ＨＡＣ肝癌荷瘤模型,用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法检测环磷酰胺作用下,ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡和ＰＣＮＡ表达的变化。结果 １５ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺的抑瘤率４３％。ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡指数１．９３％,较荷瘤对照组１．１１％明显升高（Ｐ〈０．０５）。增殖指数３５．７５％,较荷瘤对照组５６．３８％明显下降（Ｐ〈０．０１）。结论 环磷酰胺有诱导     

ApoG2对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡影响的观察

目的:研究Apogossypolone(ApoG2)对人胃癌细胞系SGC7901体外增殖和凋亡的作用。方法:采用MTT法检测浓度分别为3.125、6.250、12.500、25.000和50.000μmol/L的ApoG2作用于SGC7901细胞24、48和72h后对细胞生长的影响;MGG染色法观察10、20和30μmol/L ApoG2作用24h后细胞形态学的变化;流式细胞术检测10、20、30和40μmol/L ApoG2作用24h后细胞凋亡;RT-PCR方法检测10、20和30μmol/L ApoG2作用细胞24h后,SGC7901细胞中Bcl-2、Bax和NF-κB mRNA表达量的变化。结果:随着药物浓度的增大,ApoG2抑制胃癌细胞增殖的作用逐渐增强,呈剂量依赖性(P<0.05),24、48和72h的半数抑制浓度分别为32.58、25.11和14.16μmol/L;MGG染色可见,随着药物浓度的增大,细胞的生长变慢,胞质变疏松,细胞核深染,核质比例增大,出现典型的细胞死亡形态。流式细胞术检测细胞凋亡可见,经不同浓度的ApoG2处理24h后,SGC7901细胞发生凋亡,0μmol/L早期凋亡率为(1.92±0.55)%,晚期凋亡率为(2.80±0.86)%,10μmol/L早期凋亡率为(3.36±0.55)%,晚期凋亡率为(13.09±0.93)%,20μmol/L早期凋亡率为(5.07±0.70)%,晚期凋亡率为(16.48±1.03)%,30μmol/L早期凋亡率为(7.44±1.47)%,晚期凋亡率为(18.32±1.44)%,40μmol/L早期凋亡率为(7.88±1.22)%,晚期凋亡率为(25.49±1.59)%,随药物浓度的增加凋亡率明显增高,P值均<0.01;RT-PCR检测结果显示,药物干预后,胃癌细胞中Bcl-2和NF-κB的mRNA表达降低,而Bax的表达量升高,差异有统计学意义,P<0.05。结论:ApoG2在体外具有抑制胃癌细胞SGC7901的增殖并杀伤肿瘤细胞的作用。     

苦瓜蛋白诱发胃癌细胞SGC7901凋亡的研究

目的：探讨苦瓜蛋白抗肿瘤活性的机制。方法：从新鲜的苦瓜种子中分离纯化苦瓜蛋白,通过MTT比色法分析其对SGC7901细胞以及正常人二倍体细胞2BS增殖的影响,并应用光镜、电镜观察及流式细胞术等手段,研究苦瓜蛋白诱发胃癌细胞SGC7901的形态学、DNA含量变化。结果：苦瓜蛋白对胃癌细胞SGC7901的IC50约为18ug/ml,在相同剂量下对2BS细胞的抑制率仅为8％;与对照组细胞相比,加药后的SGC7901细胞发生的凋亡形态学改变及DNA含量变化。结论：苦瓜蛋白对胃癌细胞SGC7901的增长具有明显的抑制作用,并能诱发其凋亡。     

姜黄素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用机制

 目的 探讨姜黄素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用及其相关机制。方法 以不同浓度的姜黄素作用于胃癌SGC-7901细胞，利用倒置相差显微镜观察细胞生长形态变化，通过MTT检测细胞生长抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot 检测胃癌细胞中Fas及survivin的表达情况。结果 姜黄素能显著抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长并呈量-效和时-效关系，流式细胞术检测到亚二倍体凋亡峰，细胞凋亡率增加，Western blot结果提示经姜黄素作用后Fas表达率上升，survivin表达率下降。结论 姜黄素能抑制胃癌细胞SGC-7901的生长并促进其凋亡，姜黄素可能通过上调Fas及下调survivin的表达而诱导凋亡。     

苦瓜蛋白诱发胃癌细胞SGC7901凋亡的研究

目的:探讨苦瓜蛋白抗肿瘤活性的机制.方法:从新鲜的苦瓜种子中分离纯化苦瓜蛋白,通过MTT比色法分析其对SGC7901细胞以及正常人二倍体细胞2BS增殖的影响,并应用光镜、电镜观察及流式细胞术等手段,研究苦瓜蛋白诱发胃癌细胞SGC7901的形态学、DNA含量变化.结果:苦瓜蛋白对胃癌细胞SGC7901的IC50约为18μg/ml,在相同剂量下对2BS细胞的抑制率仅为8%;与对照组细胞相比,加药后的SGC7901细胞发生典型的凋亡形态学改变及DNA含量变化.结论:苦瓜蛋白对胃癌细胞SGC7901的增长具有明显的抑制作用,并能诱发其凋亡.     

重楼醇提取物含药血清对胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡影响的观察

目的:观察重楼醇提取物含药血清对胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响。方法:以重楼醇提取物不同浓度含药血清培养SGC7901细胞后,以MTT法检测对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化。结果:不同给药剂量组含药血清作用于SGC7901细胞24、48和72h后,细胞生存率显著降低,且与时间和剂量呈依赖关系。不同给药剂量组含药血清作用于SGC7901细胞24h后,细胞阻滞发生在S期;凋亡率分别为(6.67±1.34)%、(13.12±1.34)%和(20.43±1.24)%,联合用药组为(22.61±3.01)%,空白组动物血清组凋亡率(4.35±1.09)%及氟尿嘧啶(5-FU)组(19.22±1.66)%比较,差异均有统计学意义,P<0.01。结论:重楼醇提取物含药血清对SGC7901细胞生长有明显抑制作用,并可诱导SGC7901细胞凋亡。     

解毒消瘕饮诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的电镜观察和定量分析

目的观察中药复方解毒消瘕饮含药血清对SGC-7901胃腺癌细胞凋亡作用的超微结构改变。方法采用解毒消瘕饮含药血清,与胃腺癌细胞共培养24h和72h,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构的变化;以胞质为参照空间,随机摄片并通过SIS软件按体视学原理和方法,测试胃癌细胞中细胞核和线粒体的体积密度（Vv）、形状因子（PE）、平均周长（L）、平均体积（V）及平均表面积（S）,比较这些参数在不同组间的差异。结果解毒消瘕饮含药血清干预下可见胃癌细胞表面微绒毛减少,细胞体积减小,细胞核异染色质多聚集于核膜下,线粒体体积缩小,嵴减少,电子密度增高;解毒消瘕饮含药血清干预24h的胃癌细胞与对照组比较,细胞核和线粒体Vv、PE、V、S、L有统计学意义（P〈0．05）。结论解毒消瘕饮含药血清能诱导胃癌细胞凋亡,出现细胞核异染色质边聚、线粒体固缩等凋亡早期的超微结构变化;电镜图像定量分析能客观反映细胞核及线粒体的变化情况。     

解毒消癥饮诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的电镜观察和定量分析

目的 观察中药复方解毒消癥饮含药血清对SGC-7901胃腺癌细胞凋亡作用的超微结构改变.方法 采用解毒消癥饮含药血清,与胃腺癌细胞共培养24 h和72 h,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构的变化;以胞质为参照空间,随机摄片并通过SIS软件按体视学原理和方法,测试胃癌细胞中细胞核和线粒体的体积密度(Vv)、形状因子(PE)、平均周长(L)、平均体积(V)及平均表面积(S),比较这些参数在不同组间的差异.结果 解毒消癥饮含药血清干预下可见胃癌细胞表面微绒毛减少,细胞体积减小,细胞核异染色质多聚集于核膜下,线粒体体积缩小,嵴减少,电子密度增高;解毒消癥饮含药血清干预24 h的胃癌细胞与对照组比较,细胞核和线粒体Vv、PE、V、S、L有统计学意义(P＜0.05).结论 解毒消癥饮含药血清能诱导胃癌细胞凋亡,出现细胞核异染色质边聚、线粒体固缩等凋亡早期的超微结构变化;电镜图像定量分析能客观反映细胞核及线粒体的变化情况.     

茉莉酸甲酯对胃癌SGC7901细胞生长抑制机制探讨

目的:探讨茉莉酸甲酯(MJ)对胃癌SGC7901细胞生长的抑制作用及其机制。方法:四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞生长活性;Hoechst 33258荧光染色法观察凋亡细胞核的形态学变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡率;蛋白质印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达。结果:MTT法显示,MJ对胃癌SGC7901细胞生长有显著抑制作用,且呈剂量-时间依赖关系,0.5、1.0和2.0mmol/L MJ作用6h后,抑制率分别为(7.10±0.84)%、(18.22±1.82)%和(26.89±1.56)%,溶剂对照组为(0.43±0.26)%,顺铂(DDP)组为(10.44±1.17)%,总体比较差异有统计学意义(F=232,P=0.000),各组间比较差异均有统计学意义,P值均<0.01;采用MJ上述3种浓度作用12h后,抑制率分别为(12.44±1.20)%、(32.70±1.29)%和(52.94±2.29)%,溶剂对照组为(0.31±0.41)%,DDP组为(22.60±1.97)%,总体比较差异有统计学意义(F=1 013,P=0.000),各组间比较差异均有统计学意义,P值均<0.01;MJ三种浓度作用24h后,抑制率分别为(17.37±1.95)%、(41.79±4.40)%和(71.93±4.65)%,溶剂对照组为(0.34±0.21)%,DDP组为(27.72±2.45)%,总体比较差异有统计学意义(F=444,P=0.000),各组间比较差异均有统计学意义,P值均<0.01;其中以浓度为2.0mmol/L MJ作用24h后,对SGC7901细胞的抑制率效果最佳。荧光染色法观察MJ能够诱导人胃癌SGC7901细胞株的凋亡。流式细胞检测显示,MJ可促进胃癌SGC7901细胞的凋亡,凋亡率为(68.14±7.91)%;与溶剂对照组(6.98±1.45)%相比,差异有统计学意义,P=0.013。蛋白质印迹法检测显示,MJ可上调凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达;事先采用辣椒素受体拮抗剂(Cap)预处理,MJ的抗胃癌SGC7901细胞的效应可被消除,与MJ单独给药组相比,MJ对癌细胞的生长抑制率下降为(38.79±2.77)%,P=0.05;凋亡细胞明显减少;肿瘤细胞凋亡率降为(39.81±4.57)%,P=0.045;凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9表达也降低。结论:MJ有显著抑制胃癌SGC7901细胞增殖的作用;辣椒素受体(VR1)可能介导了MJ对SGC7901细胞增殖的抑制作用,使细胞内凋亡信号通路激活,促进了肿瘤细胞的凋亡。     

紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

 目的　探讨紫杉醇对胃癌细胞的诱导凋亡作用及其诱导的胃癌细胞凋亡的周期时相性。方法　用Sub-G1法检测紫杉醇诱导胃癌细胞MKN-28的凋亡,API法检测紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的周期时相性,并分选后激光共聚焦显微镜技术（PSC）观察形态学,MTT法检测紫杉醇对临床胃癌组织细胞的敏感性。结果　Sub-G1法结果显示紫杉醇能诱导胃癌细胞的凋亡,紫杉醇（浓度10 mg／L）诱导胃癌细胞凋亡在10 h后达到高峰;API法检测结果显示紫杉醇诱导胃癌细胞发生凋亡的时相在G2／M期,PSC形态学观察到G2／M期凋亡特征;MTT法结果显示紫杉醇诱导的20例临床胃癌组织标本中,有16例抑制率大于50 %。结论　紫杉醇能诱导胃癌细胞发生凋亡,相对较敏感,其诱导的胃癌细胞凋亡具有周期时相性。     

二甲胂酸诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究

目的探讨二甲胂酸（DMAA）诱导胃癌细胞SGC-7901的凋亡作用。方法用不同浓度的二甲胂酸与人的胃癌细胞SGC-7901共育一段时间后观察细胞的存活、形态学改变及生物学变化。结果其中以0．5～5．0mmol／L浓度的DMAA诱导其凋亡的作用最明显。主要形态学表现为细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成；电泳结果上则显示明显的梯形凋亡条带。而当DMAA浓度≥10mmol／L时细胞核和细胞质中的荧光减弱，细胞呈坏死趋势；同时，MTT结果显示随着DMAA浓度的升高，细胞的活性明显降低。结论DMAA在低浓度时能有效诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，而高浓度时主要导致其坏死。     

p53基因和血管生成抑制素基因共转染对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的:探讨血管生成抑制素(angiostatin,AS)基因和p53基因共转染人胃癌细胞株SG7901后对其凋亡的影响. 方法:分别将p53、AS基因以及p53联合AS基因转染SG7901细胞;采用RT-PCR法检测转染后SG7901细胞中目的基因的表达;通过细胞集落形成实验和MTT法观察不同转染对细胞的生长抑制作用;FCM法检测p53基因和AS基因对SGC7901凋亡的影响.结果:经p53或AS基因转染后,SG7901细胞的集落数量及大小均有不同程度的降低;且p53和AS基因具有协同作用,以共转染组降低最为明显,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法检测结果表明,共转染组细胞的生长情况较其他2组单基因转染的细胞更为缓慢(P<0.05).共转染组凋亡率较AS基因单转染组、p53基因单转染组以及空载体转染组均高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:p53和AS基因均能诱导胃癌细胞SG7901的凋亡,且两者具有协同作用.     

胃癌病变演化中细胞凋亡与增殖及其与HSP70表达关系的临？…

目的 研究胃癌和癌前病变中细胞凋亡与增殖,及其与热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）表达的关系及临床生物学意义。方法 应用免疫组织化学ＳＰ法检测１５８例胃粘膜病变石蜡标本中ＨＳ７０和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达;并用ＤＮＡ缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ法）对其中５６例标本进行细胞凋亡的原位观察。结果 ＨＳＰ７０在胃癌中过表达、与不典型增生和肠上皮化生组相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）;细胞增殖指数ＰＩ在Ｈ     

冰茶栓含药血清诱导人胃癌SCC-7901细胞凋亡

[目的]观察冰茶栓含药血清对体外培养的胃癌SGC-7901细胞凋亡的诱导作用。[方法]通过血清药理学的方法制备冰茶栓含药血清。将冰茶栓含药血清与体外培养的人胃癌SGC-7901细胞共同培养48h后，应用光学显微镜观察细胞形态的变化：用DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的梯状条带：用流式细胞术检测凋亡峰（亚G1峰）来分析研究冰荼栓含药血清诱导的细胞凋亡。[结果]经过冰荼栓含药血清作用后，SGC-7901细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变；DNA琼脂糖凝胶电泳有特异性梯状条带出现；流式细胞仪检测出现凋亡峰，并显示凋亡率为27．44％，而空白血清组凋亡率仅为4．71％。[结论]冰茶栓含药血清可诱导胃癌细胞SGC-7901发生凋亡，为冰茶栓临床抗胃癌治疗提供实验依据。     

抑制JNK通路对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡影响的研究

目的:研究JNK信号传导通路对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力;蛋白质印迹法检测细胞内磷酸化JNK及总JNK的表达水平;流式细胞术碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡及细胞周期分布。为研究JNK通路活性对TRAIL抗肿瘤作用的影响,将实验分为空白对照组、TRAIL单药组(100μg/L)、JNK抑制剂组(SP600125,20μmol/L)和联合用药组(SP600125+TRAIL)。结果:采用25、50、100和200μg/LTRAIL作用于MGC803细胞24 h,细胞活力仅轻度下降。进一步研究发现,TRAIL作用后细胞内磷酸化JNK水平明显升高,提示JNK信号通路被活化。同TRAIL单药组相比,联合用药组的细胞活力明显降低〔(53.5±3.2)%vs(88.3±1.1)%,P<0.05〕,细胞凋亡明显增加〔(21.3±5.1)%vs(5.7±0.1)%,P<0.05〕,G2/M期细胞比例明显升高〔(38.0±6.0)%vs(25.7±2.9)%,P<0.05〕。结论:抑制JNK通路能明显增强TRAIL对MGC803细胞的抗肿瘤作用,其机制可能与诱导细胞凋亡及G2/M期阻滞有关。     

薏苡仁酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的实验研究

目的　探讨薏苡仁酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法　应用形态学方法 ,流式细胞术 (FACS) ,DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生 ,应用RT PCR检测凋亡相关基因Fas与FasL的变化。结果　薏苡仁酯对人宫颈癌HeLa细胞的生长有明显的抑制作用 ,并诱导肿瘤细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质碎裂 ,DNA凝胶电泳显示清晰的DNA梯形条带 ,FACS检测到凋亡率最高为 13%。AnnexinV标记的方法检测凋亡时发现 ,坏死与凋亡共存。在薏苡仁酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡过程中 ,凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强 ,而FasL转录水平减低。结论　除了坏死 ,凋亡也为薏苡仁酯抑癌的机制之一。薏苡仁酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡可能与Fas基因与FasL基因表达有关。