蛋白激酶C与脑血管病

蛋白激酶C(PKC)是一种钙 /磷依赖性蛋白激酶 ,广泛存在于各种细胞中。正常情况下 ,PKC几乎都以无活性的形式存在于胞浆中 ,当受到外界刺激时可发生移位激活而发挥其作用。近年来的研究发现 ,PKC在脑缺血性损伤和蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中起重要作用。     

冠心病患者的血小板、红细胞蛋白激酶C及其抑制剂活性表达的研究

蛋白激酶C(PKC)是细胞信息传递中起重要作用的一种钙和磷脂依赖性蛋白激酶。PKC通过对蛋白质的磷酸化而发挥生理作用。鉴于血小板中PKC的底物较多，其中40kd蛋白是PKC作用最明显底物。PKC在血小板聚集中起着重要调节作用。本研究通过观察冠心病患者在不同时期血小板PKC、蛋白激酶C抑制剂(PKCI)以及红细胞PKC活性变化，以探讨PKC与冠心病发病的关系。     

蛋白激酶C与脑血管病

蛋白激酶C(PKC)是一种钙／磷依赖性蛋白激酶，广泛存在于各种细胞中：正常情况下，PKC几乎都以无活性的形式存在于胞浆中，当受到外界刺激时可发生移位激活而发挥其作用。近年来的研究发现，PKC在脑缺血性损伤和蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中起重要作用。     

PKC/CPI-17通路对冠状动脉旁路移植术桥血管张力的影响

目的观察PKC/CPI-17通路对冠状动脉旁路移植术(CABG)中不同类型桥血管张力的影响,探讨其对糖尿病桥血管痉挛的作用。方法使用体外血管环灌流的方法,观察基础状态下及蛋白激酶C(PKC)激动剂(PMA)和抑制剂(Cal-C)灌流条件下,去甲肾上腺素(PE)和乙酰胆碱(Ach)介导的废弃桥血管张力的变化。比较糖尿病组和非糖尿病组桥血管上述张力变化,并以Western blot的方法评价两组患者桡动脉(RA)桥血管PKC、CPI-17蛋白表达的差异。结果 RA、大隐静脉(GSA)对PE收缩反应强于乳内动脉(IMA)(P0.01,P0.05);PMA使PE诱导的RA收缩作用增强,Cal-C使PE诱导的RA收缩作用减弱。糖尿病组RA对PE最大收缩反应[(3.78±0.62)g]明显强于非糖尿病组[(3.21±0.75)g,P0.05]。且糖尿病组RA和IMA中PKC、CPI-17蛋白表达显著上升(P0.05)。结论 PKC/CPI-17通路在CABG术桥血管痉挛中发挥重要作用,糖尿病通过影响该通路的表达影响桥血管痉挛。     

内皮素、蛋白激酶C、盐酸法舒地尔和蛛网膜下腔出血

颅内动脉瘤破裂蛛网膜下腔出血 (SAH)导致的迟发性脑血管痉挛 ,是影响患者预后的主要原因。目前还没有能够有效预防和治疗脑血管痉挛的药物。近年来 ,内皮素 (ET)生成增多和蛋白激酶C(PKC)激活在脑血管痉挛过程中的作用越来越受到重视。盐酸法舒地尔 (HA10 77)是一种针对PKC的扩血管药 ,具有很强的对抗血管痉挛作用。文章综述了ET、PKC在SAH后血管痉挛过程中的作用和HA10 77对抗血管痉挛的作用。     

蛋白激酶Cα与血管平滑肌细胞表型转化

目的　建立血管平滑肌细胞 (VSMC)的收缩及合成表型 ,探讨蛋白激酶Cα(PKCα)亚型对其转化的影响。方法　用酶消化法及传代培养分别获 2种VSMC表型细胞 ,细胞特性通过免疫细胞化学及透射电镜鉴定。用竞争性逆转录聚合酶链反应 (竞争RT PCR) ,观察 2种表型细胞的PKCα表达。结果　酶消化法分离的VSMC较传代培养的VSMC显示缬蛋白(desmin)表达呈强阳性。2种表型细胞经超微结构观察分别显示典型的收缩表型及合成表型变化。PKCα表达在酶消化法分离的VSMC中明显高于传代培养的VSMC(t=3 .5 68;P <0 .0 5 )。结论　PKCα亚型在收缩表型的表达量明显高于合成表型 ,提示该亚型对维持VSMC的收缩表型起了一定作用。研究中选用竞争RT PCR方法克服了以往使用 β actin的局限性。     

蛋白激酶C与糖尿病心肌病

持续高血糖可导致糖尿病心肌病 (DC)。近年来研究认为高血糖可通过激活二脂酰甘油 (DAG) 蛋白激酶C(PKC)信号转导系统 ,调节细胞的生长、收缩性、通透性、细胞外基质成分和基因表达 ,引起心肌细胞肥大 ,心肌微血管病变和间质纤维化 ,影响心功能 ,在DC发病中起重要作用。阻断DAG PKC通路对DC的防治具有重要意义。     

氧化砷诱导胃癌细胞凋亡的信号传导途径研究

目的 检测氧化砷(As2O3)诱导胃癌细胞株(SGC-7901和MKN-45)凋亡过程中cAMP、蛋白激酶C(PKC)和酪氨酸蛋白激酶(PTK)活性变化，以探讨其诱导胃癌细胞凋亡过程中可能存在的信号传导途径。方法 应用钙离子拮抗剂、PKC和PTK抑制剂研究其对AS2O3诱导胃癌细胞凋亡过程的影响，以TUNEL法检测细胞凋亡率。以放射免疫法测定As2O3作用前后细胞内cAMP水平的变化。抽提PKC和PTK蛋白，以Lowry法测定As2O3作用前后各自蛋白表达水平的变化。结果 钙离子拮抗剂对As2O3诱导胃癌细胞凋亡过程没有影响，PKC和PTK抑制剂不仅本身能诱导胃癌细胞凋亡，且对As2O3诱导胃癌细胞凋亡具有协同作用。在As2O3诱导胃癌细胞凋亡过程中存在cAMP浓度增高和PKC、PTK活性显著降低，提示cAMP、PKC和PTK可能参与As2O3诱导胃癌细胞凋亡的作用。结论 PKC和PTK抑制剂可以通过影响信号传导系统诱导胃癌细胞凋亡，并能促进As2O3诱导胃癌细胞凋亡。     

MAPK家族与糖尿病并发症

丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)是细胞促增殖和传递应激信号的关键激酶 ,该家族包括ERK、JNK、p38等亚族。最近的研究显示 ,糖尿病状态下的高糖 蛋白激酶C(PKC)通路、糖基化终产物、氧化应激、生长因子、渗透压、牵张刺激等都可激活MAPK家族 ,使转录因子活性升高 ,参与糖尿病慢性并发症的发生。阻断MAPK通路将可能成为糖尿病慢性并发症治疗的新方向。     

PKC在细胞凋亡中的作用

引起细胞凋亡的原因较多 ,目前发现蛋白激酶 C(proteinkinase C,PKC)在凋亡发生过程中起着信号传导作用。作为细胞信号传导重要成分的 PKC在细胞的凋亡中起着重要作用。PKC是一个富含丝 /苏氨基酸的激酶 ,由 77～ 2 3Kd的多肽单链构成〔1〕,除在凋亡方面发挥作用外还参与调节神经兴奋性、突触塑形、细胞增生和分化、基因表达及细胞坏死。1　PKC分类与结构根据 PKC结构及特征 ,把它们分成三大类〔1～ 3〕。经典 PKC(CPKC)包括 α、β1 、β2 和 γ四种亚型。新型 PKC(n PKC)包括 δ、ε、η、θ、ξ五种亚型。不典型 PKC(a PK…     

甲状腺刺激抗体对甲状腺细胞分泌功能影响的信号途径

目的探讨甲状腺刺激抗体(TSAb)对甲状腺细胞分泌功能影响的信号途径。方法选择福建医科大学附属协和医院2003-01~10的Graves病(GD)40例,作为观察组;以院内健康职工40人,作为对照组。应用以酶联免疫吸附法(ELISA)测定蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性;应用PKA、PKC激活和抑制剂激活和阻断信号通路;应用放免法检测T3。结果(1)TSAb呈时间剂量依赖性激活甲状腺细胞中的PKA和PKC(P<0.05)。(2)TSAb刺激甲状腺细胞T3分泌的效应与PKA激活剂相似,且可被PKA抑制剂抑制,PKC激活剂佛波酯(TPA)和抑制剂无此效应。TPA可部分抑制TSAb和PKA激活剂刺激的T3分泌。结论TSAb刺激甲状腺细胞T3分泌主要是通过环腺苷酸(cAMP)-PKA途径,PKC途径可影响cAMP-PKA途径而抑制TSAb刺激的T3分泌。     

内向整流钾通道6.2亚基对鱼藤酮诱导PC12细胞毒性的调节作用及其相关信号通路的实验研究

目的:探讨ATP敏感性钾离子通道亚基内向整流钾通道(Kir)6.2过表达对鱼藤酮诱导的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞毒性作用的调节作用及其相关信号通路。方法:转染Kir6.2质粒于PC12细胞48 h后,分别采用细胞免疫荧光和Western blot方法观察Kir6.2的表达,然后用水溶性四氮唑盐(WST-1)法检测3组细胞(正常对照组、转染组、空载体组)在500 nmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞活力;Western blot检测胞内蛋白激酶C(PKC)及磷酸化PKC(p-PKC)的变化。结果:细胞免疫荧光及Western blot结果显示转染组Kir6.2在细胞中表达较正常组和空载体组明显增高,WST-1检测发现转染组细胞活力较其他2组增高(P<0.05)。在Kir6.2过表达的PC12细胞中,p-PKC的活性上调,且不被PKC抑制剂所抑制。结论:Kir6.2过表达可拮抗鱼藤酮诱导的PC12细胞毒性,且这一神经保护作用与PKC信号通路相关,尤其是p-PKC。     

星形胶质细胞缺氧缺糖后PKC PKA PKG CaMKⅡ表达的变化及对AQP4的影响

目的探讨星形胶质细胞在缺氧、缺糖情况下蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶G(PKG)及钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达变化情况。方法取2 d龄新生SD大鼠的大脑皮层进行星形胶质细胞的纯化与培养,通过缺氧、缺糖处理建立缺血细胞模型。以实验处理方式的不同分为对照组和模型组,通过RT-PCR法检测星形胶质细胞水通道蛋白4(AQP4)表达的变化,采用Western blot法检测星形胶质细胞PKC、PKA、PKG和CaMKⅡ的表达情况。比较两组各项指标的差异。结果模型组的AQP4表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。模型组的PKC表达水平低于对照组,CaMKⅡ表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。PKA、PKG的表达水平在两组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论缺氧、缺糖导致的星形胶质细胞的PKC表达水平下降及CaMKⅡ表达水平升高,可能与星形胶质细胞水肿有关。     

内皮素、蛋白激酶C、盐酸法舒地尔和蛛网膜下腔出血

颅内动脉瘤破裂蛛网膜下腔出血（SAH）导致的迟发性脑血管痉挛,是影响患者预后的主要原因。目前还没有能够有效预防和治疗脑血管痉挛的药物。近年来,内皮素（ET）生成增多和蛋白激酶C（PKC）激活在脑血管痉挛过程中的作用越来越受到重视。盐酸法舒地尔（HA1077）是一种针对PKC的扩血管药,具有很强的对抗血管痉挛作用。文章综述了ET、PKC在SAH后血管痉挛过程中的作用和HA1077对抗血管痉挛的作用。     

蛋白激酶C及抑制剂在肺癌耐药中的研究进展

耐药已成为当今肺癌化疗过程中的一大难题,其作用机制至今还不十分清楚.蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)作为多种信号传导过程中的枢纽,不仅参与细胞信息传递、分泌、细胞分化、增殖,更重要的是参与肿瘤细胞的凋亡和分化.国内外研究表明通过抑制PKC的活性,减少其表达量可以增加细胞内药物的积聚导致胞内有效浓度的上升,从而降低肿瘤细胞耐药率.PKC抑制剂对肿瘤细胞具有明显的诱导分化、增强细胞毒性、促进细胞凋亡的作用.目前已有部分PKC抑制剂进入了临床的Ⅰ/Ⅱ期研究中,并取得了一定的疗效,通过对其作用机制的进一步深入探讨,有望在肺癌耐药的研究中取得更多的突破.     

蛋白激酶C对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的作用

蛋白激酶C(PKC)在缺氧性肺动脉高压的发病机制中起着重要的作用。但PKC对正常和慢性缺氧肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上电压门控钾离子通道(Kv通道)的影响尚少报道。我们的研究旨在探讨PKC对慢性缺氧PASMC膜上Kv通道的作用，以进一步阐明缺氧性肺动脉高压的发病机制。     

钾通道与气道的功能调控

气道平滑肌(ASM)中有多种钾通道分布。ASM细胞的静息膜电位及张力和钾通道密切相关。钾通道通过cAMP、cGMP和PKC等多种信号途径参与部分ASM活性物质介导的舒缩反应,参与气道中神经组织的兴奋性传递及气道高反应性的形成等病理生理过程。钾通道开放剂对ASM收缩、气道中神经递质的释放及气道高反应性有一定的抑制作用。     

阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白与MAPK信号通路的关系

β淀粉样蛋白(Aβ)与AD密切相关.细胞的生命活动与基因的表达及活化有密切的关系.在细胞中存在一些特殊的蛋白质信息传递链,它们将细胞外部的种种调节信号传递到核内基因,引起细胞生理活动的相应变化.这些蛋白质信息传递链被称为细胞信号转导通路.丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是其中一条主要的基本信息传递链,它与细胞的生长、发育、分化、凋亡等均有密切联系[1].     

012 钾通道与气道的功能调控

气道平滑肌(ASM)中有多种钾通道分布.ASM细胞的静息膜电位及张力和钾通道密切相关.钾通道通过cAMP、cGMP和PKC等多种信号途径参与部分ASM活性物质介导的舒缩反应,参与气道中神经组织的兴奋性传递及气道高反应性的形成等病理生理过程.钾通道开放剂对ASM收缩、气道中神经递质的释放及气道高反应性有一定的抑制作用.     

脂多糖刺激大鼠肝组织后Src抑制的蛋白激酶C底物的表达变化

蛋白激酶C（PKC）作为信号转导主要成员而参与内毒素诱导肝损伤。然而，目前关于PKC参与内毒素肝损伤的分子机制尚不明确。Src抑制的蛋白激酶C的底物（SSeCKS）为一种新发现的支架蛋白，通过锚定主要信号调节因子蛋白激酶C（PKC）而调节其与下游底物的结合，从而辅助调控细胞因子的分泌和有丝分裂。有研究表明，SSeCKS是一种炎症反应蛋白，在内毒素小鼠模型中发现SSeCKS在多个组织中表达增加b1。对内毒素肝损伤中SSeCKS表达变化的研究鲜见报道。因此，我们检测了脂多糖（LPS）诱导肝损伤过程中SSeCKS的表达情况及其细胞定位。