SARS相关病毒基因组序列的研究

严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)是由SARS相关病毒(SARS—CoV)引起的一种新的烈性呼吸道传染病。SARS—CoV是一种新的冠状病毒，基因组结构符合典型的冠状病毒特征，编码基因从5′端起分别为：RNA依赖的RNA聚合酶、突起蛋白、包膜蛋白、膜蛋白，3′端为核衣壳蛋白。对14株SARS—CoV的4个变异点分析，可将14株病毒分成两个基因型，即第9404、19084、22222、27827位的T：T：T：T／C：G：C：C两型。对SARS—CoV的基因组的全面了解不仅为疾病的发病机理研究提供主要线索，而且将为SARS的诊断、预防和治疗提供帮助。     

SARS冠状病毒S蛋白基因片段的表达及其单克隆抗体的制备

目的: 表达SARS冠状病毒S蛋白片段,并制备特异性单克隆抗体(mAb).方法: 原核表达SARS冠状病毒S蛋白片段,从SARS病毒cDNA中扩增S蛋白(N端205至419aa)基因片段,测序结果正确.将该基因片段插入pQE-30中,构建重组质粒pQE-30-S1m,以重组质粒转化E.coli M15诱导表达His-S1m蛋白.纯化后免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb.结果: 表达并纯化了重组蛋白His-S1m,获得1株抗His-S蛋白的mAb1H2.Ig亚类鉴定为IgG1a,轻链为κ型.经Western blotting检测,mAb1H2与S蛋白发生特异性反应,而与His蛋白无交叉反应.结论: 成功表达了重组S蛋白并制备了特异性mAb,为SARS-CoV的早期诊断及进一步研究S蛋白的功能奠定了基础.     

SARS临床检测实验室消毒初探

现已证实 ,严重急性呼吸系统综合征 (severeacuteres piratorysyndrome,SARS)的病原体为变异的冠状病毒 (SARSCorovirus,SARS CoV) [1] ,其传染性强、生存时间长。保证实验室工作人员的安全 ,是目前SARS临床检测工作的当务之急。在至今尚无先例与规律可循的情况下 ,我科作为SARS定点医院 (三级甲等定点医院 )的专业临床检测实验室 ,根据国家的相关规定 ,结合SARS临床检测的特殊性和我科实验室现有条件 ,对SARS检测实验室的消毒措施进行了大量调研与实践 ,摸索、总结出一些经验 ,并取得了防止SARS在实验室交叉感染的初步成效。…     

SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体在SARS尸检组织中的表达

目的 观察SARS死者的尸检组织中SARS冠状病毒(SARS-CoV)的存在与分布情况。方法 应用免疫组化技术检测4例尸检标本肺、脾脏、淋巴结、脑、垂体、心、肝、肾、胰腺、气管、食道、胃肠道和骨髓等组织的SARS-CoVN蛋白。结果 肺泡上皮、肺、脾、淋巴结内浸润的单核细胞／巨噬细胞、脑神经元、肝细胞、肾远曲小管上皮细胞、胰腺腺泡细胞、垂体嗜酸细胞、甲状旁腺嗜酸性细胞、肾上腺皮质细胞、气管及支气管浆液腺上皮细胞、食道粘膜鳞状上皮、胃肠道柱状上皮细胞及胃壁细胞、骨髓早幼粒细胞及小静脉内皮细胞等细胞质内SARS-CoVN蛋白单克隆抗体均为阳性。结论 SARS-CoV可侵犯全身多种器官和组织。SARS-CoVN蛋白单克隆抗体在胃肠道、肾远曲小管及汗腺细胞内的阳性表达，对研究SARS—CoV传播途径具有重要意义。     

SARS-CoV-2与宿主固有免疫系统的相互作用

2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19,我国通称新型冠状病毒肺炎,简称新冠肺炎)是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的一种以肺部病变为主的呼吸道传染病,...     

SARS病毒17株蛋白质序列的初步分析

SARS是一种传染性很强的呼吸系统疾病,分析其致病病毒各株的序列特征,旨在进一步研究SARS病毒的感染途径、免疫机制及预防治疗方案等。作者对已测序的17株SARS病毒的核酸序列进行了N—J进化树分析,预测了各株病毒5种主要蛋白的编码序列,初步分析了各株SARS病毒5种蛋白核酸编码序列及氨基酸序列的突变情况。     

SARS病人SARS冠状病毒核壳抗原抗体的变化规律

OBJECTIVE: To assess serum antibody responses of patients with severe acute respiratory syndrome (SARS) to nucleocapsid (N) antigen of SARS-associated coronavirus. METHODS: The serum levels of IgM and IgG antibodies to N antigen were measured in 200 healthy blood donors and 13 SARS patients at different time points of acute and convalescent phases using indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with N fusion proteins of SARS-associated coronaviruses. RESULTS: The IgM positive critical value of 0.233 and IgG of 0.239 were selected as the threshold value for positive results that equals the product of 2.1 and the mean IgM and IgG levels of 200 healthy blood donors. In 13 patients with SARS, the antibody responses to N antigen were not detectable in the first week after the onset of symptoms. The IgM and IgG seroprotection rates were 83.3% and 66.7% respectively in the second week, both reaching 100% at the third week. IgM seroprotection rates was 61.5% in the second month, and 38.5% at third month. The IgG peaked one month after the onset and remained at high levels in the following 2 months. CONCLUSION: The antibody responses suggest that N protein of SARS is immunodominant and plays an important role in viral pathogenesis. This ELISA-based test for detecting anti- N antigen may be of significant value for SARS diagnosis.     

广西部分野生动物SARS病毒朔原的初步研究

目的:研究SARS病毒可能的动物来源及其与缩主的关系,为SARS的预防与控制策略提供科学依据.方法:用新型冠状病毒核酸扩增(Real-time PCR)荧光法检测人工饲养野生动物99只咽拭、肛拭和组织标本的SARS病毒基因,用ELISA法检测野外捕获的野生动物117只血样标本SARS冠状病毒总抗体.结果:人工饲养动物SARS病毒基因全部阴性,自然来源的野生动物SARS冠状病毒总抗体阳性率5.12%,鸟纲阳性率22%,爬行纲阳性率20%.结论:SARS病毒并非来源于人工饲养的野生动物,而是来源于自然界野生动物,其中蛇、鹰、蛤蚧、鳖最为可能.老鼠可能是SARS病毒的最原始宿主,通过蛇、鹰、蛤蚧、鳖对鼠猎食而感染、携带并富集,然后经宰杀而传染人类.禁止捕猎贩运和宰杀野生动物和控制鼠类媒介是防范SARS的发生和控制扑灭SARS疫情的首要措施.     

SARS病毒基因及蛋白系统分析

目的：分析比较SARS病毒与冠状病毒科中病毒基因和蛋白的同源性。方法：利用互联网、分子生物学软件对SARS病毒与冠状病毒科中病毒基因和蛋白同源性分析，构建蛋白进化树。结果：SARS病毒在某些区域基因序列与冠状病毒存在相当大的差异，具有自身比较保守的基因组序列结构。SARS病毒的三个结构蛋白(S、M和N)中与同科其他病毒存在很高的同源性；不同地域SARS病毒的基因序列存在差异。结论：SARS病毒不是其他冠状病毒的变异体，而是一种与冠状病毒类似，可能早已经独立存在，此前未被人类所认识的新病毒。     

肝癌和癌旁组织中HCV—RNA及其负链的研究

该研究采用ELISA法,对肝癌患者的血清检测HCV—Ab,用Nested-PCR法对患者的血清、肝癌组织和癌旁组织检测HCV-RNA和HCV-RNA负链,探讨肝细胞癌中是否存在HCV-RNA及其复制状态。对照组血清检测HCV-Ab、HCV-RNA1/17阳性。肝癌组16/31 HCV-RNA阳性;癌旁组织15例测到HCV-RNA负链,癌组织只有6例测到负链。结论:血清中抗HCV检测不能完全反映肝内是否曾有HCV感染情况。癌组织和癌旁组织均能检出HCV-RNA,说明肝癌组织中感染着丙型肝炎病毒。肝癌组织中确实存在HCV-RNA负链,说明HCV-RNA能在肝组织内不断地自我复制。     

乙型肝炎病毒和巨细胞病毒关系的研究

用血清学方法对血清中乙型肝炎病毒(HBV)标记物和人巨细胞病毒(HCMV)特异性抗体间的关系进行了研究探讨。HBsAg阳性的236份血清中,HCMV-IgM的阳性率显著高于对照组。对各种HBV标记物分别和HCMV特异性抗体的关系进行了分析,血清中HBeAg与HCMV-IgM间密切相关。如果排除HBeAg的影响,HBsAg同HCMV-IgM的关系无统计学意义。研究结果表明,HBV同HCMV活动性感染间存有一定关系,二者可以相互诱发或促进,引起双重感染。     

风疹患儿及育龄妇女风疹病毒感染的血清学研究

用酶联免疫吸附试验(ELISA)对沈阳市1988年临床诊断为风疹的患儿,有致畸史或早孕感冒的育龄妇女及1986年正常产妇血清做风疹病毒抗体的测定。风疹患儿急性期血清54份,抗风疹病毒IgM抗体阳性率为27.78%,IgG抗体阳性率为24.07%,与对照组差别有高度统计学意义(P<0.01);2份恢复期血清IgM抗体均阳性,IgG抗体1份阳转,1份效价增高4倍。提示1988年沈阳市确有风疹流行。流行期有致畸史或早孕感冒的育龄妇女血清36份,抗风疹病毒IgM抗体阳性率为16.67%,非流行期正常产妇血清60份,IgM抗体阳性率为1.67%,两者差别有高度统计学意义(P<0.01)。提示流行期有致畸史或早孕感冒的育龄妇女与风疹感染有关。正常产妇血清的抗风疹病毒IgG抗体阴性率为13.33%。说明我国育龄妇女中风疹易感者较多。     

酒精中毒和HBV易感性关系的研究

为证实酒精中毒树Ｑｕ比非中毒树Ｑｕ对ＨＢＶ感染是否具有更高的易感性，我们应用酒精性免疫抑制的树Ｑｕ模型，观察了酒精性免疫抑制与没有免疫抑制的非酒精中毒树Ｑｕ对ＨＢＶ的易感性，结果表明，酒精中毒的树Ｑｕ在发生免疫功能明显受损的同时对ＨＢＶ易感性显著增高。     

TT病毒粪-口传播途径的初步探讨

①目的 探讨TT病毒（TTV）经粪－口传播的可能性。②方法 采用半巢式聚合酶链反应，检测6例TTV感染的肝病病人粪便标本中TTV－DNA，测序，与N22和TA278株核苷酸比较并进行基因分型，探讨粪便中TTV－DNA检出率与血清中病毒滴度的关系。③结果 血清病毒滴度较高的2例病人（10^7/L,10^6/L)的粪便标本中检出了TTV－DNA，滴度分别为10^7/L,10^6/L，基因型分别为G1a,G1b；在血清病毒滴度为10^4/L的4例病人中，仅1例在粪便中检出了TTV－DNA，滴度为10^4/L，基因型为G2。④结论 肝病病人粪便标本中TTV含量与血清滴度直接相关，TTV具有经粪－口传播的可能性。     

先天性巨细胞病毒、乙型肝炎病毒和弓形体感染的研究

对青岛市276例产妇及其新生儿脐血巨细胞病毒(HCMV)抗体,乙型肝炎病毒(HBV)标记物及弓形体抗体进行了检测。产妇HCMV感染率为98.91%,活动性感染率为18.48%;HBV感染率为39.13%;弓形体感染率仅为1.81%。HCMV,HBV和弓形体的先天性感染率分别为3.99%,2.17%和0。从新生儿出生时情况看,HCMV先天性感染所致危害远大于HBV和弓形体。