肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7增菌培养基的研制及模拟标本增菌效果观察

[目的 ]研制肠出血性大肠杆菌 (EHEC)O157∶H7增菌培养基 ,以提高感染人群和污染标本中O157∶H7的检出率。 [方法 ]以实验室常用方法测定研制的增菌培养基N mEHEC中胆盐、新生霉素的最佳用量及培养时间 ;比较N mEHEC与文献采用的N mEC对粪便模拟标本 (大便悬液 不同浓度O157∶H7菌悬液 )中O157∶H7的检出率。 [结果 ]N mEHEC中胆盐用量以 8 0g/L ,新生霉素用量 2 0mg/L ,37℃培养 16～ 2 4h为宜。N mEHEC对模拟标本中的非目的菌 (正常大便悬液中的细菌 )和目的菌 (O157∶H7)之比为 90∶1和 90 0∶1时检出率均为 10 0 % ,9× 10 3∶1和 9× 10 4∶1时为 81 3%和 5 0 % ;而N mEC在 90∶1时检出率为 10 0 % ,90 0∶1、9× 10 3∶1时分别为 5 0 %、6 43% ,9× 10 4∶1时则未检出。两种增菌培养基在培养前只有 90∶1时可以检出 ,其检出率分别为 75 %和 78 1%。 [结论 ]N mEHEC具有良好的选择性增菌作用 ,适用于感染人群和污染标本O157∶H7的增菌。     

EHEC增菌培养基对O157:H7大肠杆菌增菌效果的观察

观察增菌培养基对O157:H7大肠杆菌的增菌效果。以实验室常用方法测定目的菌及非目的菌在增菌培养基中生长的灵敏度及选择性,比较几种培养基对粪便标本中O157:H7的检出率。实验证明,N·mEHEC培养O157:H7大肠杆菌及非目的菌,出现可见生长的最低接种浓度（cfu/ml）,前者明显小于后者,呈现良好的选择性,对粪便标本中O157:H7的检出率N·mEHEC明显高于N·mEC。N·mEC对O157:H7大肠杆菌具有良好的选择性增菌作用,可显著提高感染人群和污染标本O157:H7菌的检出率。     

龙岩市1999～2005年O157大肠杆菌监测研究

[目的]为了解龙岩市O157大肠杆菌人的感染、食品污染以及动物和媒介昆虫带菌情况.[方法]1999～2005年采集腹泻病人粪便、动物粪便以及各类食品、苍蝇、养殖场污水等标本,mEC增菌后用SMAC进行分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型、毒力及特征基因检测等.[结果]共检测2212份标本,检出O157大肠杆菌29株,阳性率为1.31%.其中猪粪为3.42%,牛粪为2.62%,牛肉为2.33%,鸡肉为2.06%,养殖场污水为2.27%.其余标本均未检出目的菌.O157:H718株,O157:NM 6株,O157:H?5株.对12株O157:H7,进行了rfbO157和fliCH7基因的测定,结果rfbO157均为阳性,而fliCH7均为阴性.对18株(O157:H7 14株、O157:NM 3株、O157:H?1株),进行了SIT2、SLT1、eaeA、hly4种毒力基因检测,结果仅2株O157:H7 eaeA hly阳性,1株O157:H7 hly阳性,其余菌株均为阴性.检出菌株对环丙沙星、氟嗪酸、丁胺卡那、庆大霉素敏感.检出ESBLs 2株.[结论]我市畜、禽中存在O157大肠杆菌,未检出含有SLT2、SLT1毒素的菌株,未发现O157大肠杆菌病例和食物中毒患者,应加强宿主动物O157大肠杆菌监测.     

郑州市腹泻患者、宿主动物及食品中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7监测

为了解郑州市腹泻患者、宿主动物及食品感染或污染O157∶H7状况,建立全市流行病学监测网,在辖区内采集动物(牛、羊、猪、鸡、狗等)、门诊腹泻患者粪便及市售食品进行监测。1.材料与方法:mEC增菌培养基、SMAC培养基、抗-E.coliO157∶H7免疫磁珠、磁铁架、O157抗血清、H7抗血清等均由河南省疾病预防控制中心提供,有效期内使用。检测方法按照《2005年重点肠道传染病国家级监测点工作会议》的方法进行。2.结果:2005年共检测腹泻病现症患者粪便标本179份,年龄6月龄至74岁,居住地分布于4个区。6月上旬检测3份阳性,检出率为1.68%,其中2例为产…     

河南豫东地区产志贺样毒素E.coli O157:H7感染病例的流行病学调查研究

[目的]探讨河南省局部地区腹泻病人感染及携带大肠杆菌O157：H7的情况，观察带菌时间及预后。[方法]采用流行病学监测方法发现病人，通过病人粪便mEC肉汤增菌14h、胶体金免疫卡筛选、免疫磁珠法集菌、CHROMAGAR—O157：H7显色培养基分离、rfbO157、rfbO111、hlyA、stx1、stx2、eaeA引物PCR扩增方法进行毒力因子测定等方法，观察、研究感染病人的发病和预后。[结果]从1303份腹泻病人中共分离出的38株O157：H7菌株，检出率2．9％，PCR rfbO157扩增均为阳性。其中2株具有stx2、hlyA和eaeA毒力基因，36株为O157：H7不产毒株。[结论]我省首次从病人中分离出O157：H7产毒株，病人发病后可于第3～8d内检出病原体。     

河南省6类食品中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7污染状况调查

[目的] 调查肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在河南省6类食品中的分布特征、污染状况及季节分布. [方法] 依据河南省自然地理概况分5个采样区域,按夏冬季在销售环节随机取样.选择性增菌培养后,用O157胶体金试剂筛查,免疫磁珠富集后分离病原菌,应用全自动生化鉴定系统和血清学的方法进行鉴定. [结果] 1 463份食品中共检出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7共28株,检出率1.9%,其中鲜肉和生食蔬菜检出率较高,分别为3.3%和3.2%.夏季检出率(2.5%)明显高于冬季检出率(1.1%). [结论] 肠出血性大肠埃希氏菌O157∶H7在食品中污染较为严重,其检出率的高低与O157∶H7感染性腹泻的流行强度呈正相关.应加强畜禽屠宰、蔬菜生产和销售环节的监督监测,预防O157食源性暴发.     

商丘市家禽家畜肠出血性大肠杆菌带菌情况调查分析

目的 调查商丘市家禽携带肠出血性大肠杆菌O157：H7状况及分布。方法　选择７个县１个区采动物粪便标本。用mEC肉汤增菌１４小时，用胶体金免疫标记卡筛选，免疫磁珠法集菌，ＣＨＲＯＭＡＧＡＲ－Ｏ１５７：Ｈ７显色培养基分离，rfbo157.rfbo111,hlya,stxl,stx2,eaeA 引物ＰＣＲ扩增等方法进行了原菌分离，毒力因子鉴定。结果　1091份标本中共分离出的48株O157：H7菌株，PCRrfo157扩增均为阳性。其中6株具有stx2,hIyA和eaeA毒力基因，结论 出血性大肠菌O157：H7在我市的家畜家禽中普遍存在。     

郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况调查

[目的]了解郯城县O157大肠杆菌动物宿主带菌情况。[方法]标本直接接种mEC肉汤增菌液,先用免疫金标法筛选,后用免疫磁珠富集分离山梨醇麦康凯、麦康凯琼脂平板,点种CHROMagar O157显色琼脂平板,纯化菌进行生化反应、血清学等检测。[结果]入户采集牛、驴、羊、猪、鸡等新鲜粪便275份,共检出4株O157：H7,6株O157：H-,2株O157：H38,1株O157：H19,1株O157：H45,共计14株。[结论]2000年调查的动物粪便带菌率为5.09%。     

2008-2012年南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7监测结果

目的 了解南宁市肠出血性大肠杆菌0157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据.方法 2008-2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型等方法进行检测.结果 在2 139份腹泻患者标本中未检出阳性标本;在3 088份外环境标本中检出阳性标本20份.南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染阳性率呈现逐年下降趋势;不同动物粪便肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性率不同,以牛粪检出阳性率最高.结论 南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7仍有散在的动物感染,应加强对动物粪便的管理及肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测工作.     

武汉市2002～2003年大肠埃希菌O157:H7监测情况

目的了解武汉市大肠埃希菌O157：H7在腹泻病人中的检出情况和宿主动物带菌及毒力基因情况。方法根据广覆盖的原则，选择8家大型综合医院作为O157：H7监测点，监测腹泻病人的带菌情况；其中2家医院的肾病内科监测可疑肾衰病人，选择3家养殖场，采集猪、奶牛、鸡的粪便标本，采集生猪肉、奶制品等，用mEC培养基进行病原菌分离培养，用“金卡”作初筛，用聚合酶链反应(PCR)进行毒力基因分析。结果8家监测点共监测腹泻病人858例，肾病内科肾衰病人6例，未检出大肠埃希菌O157：H7或O157：H^-；3个宿主动物监测点共采集奶牛、猪、鸡的粪便标本318份，检出大肠埃希菌O157：H^- 8株，带菌率为252％，其中猪的带菌率最高为5．88％，奶牛为1．96％，鸡未检出；食品类生猪肉中检出1株O157：H^-，检出率为1．00％；对9株菌株进行O抗原PCR和H抗原PCR鉴定，O抗原均为阳性，H抗原为阴性；单克隆血清抗体6株阳性；并进行毒力基因鉴定，均为阴性。结论武汉市到目前为止尚未发现O157：H7病人，猪和奶牛是主要宿主，其带菌率没有明显差异，生猪带菌率有明显的上升，且从生猪肉中检出1株O157：H^-，尚未检出带病毒基因的菌株；而武汉市居民以食用猪肉为主，值得密切关注。提示加强宿主动物和食品大肠埃希菌O157：H7监测，特别是生猪的监测，结合腹泻病人的监测，对控制大肠埃希菌O157：H7的流行有重要意义。     

河南豫东地区产志贺样毒素Ecoli O157∶H7感染病例的流行病学调查研究

[目的 ]探讨河南省局部地区腹泻病人感染及携带大肠杆菌O15 7∶H7的情况 ,观察带菌时间及预后。[方法 ]采用流行病学监测方法发现病人 ,通过病人粪便mEC肉汤增菌 14h、胶体金免疫卡筛选、免疫磁珠法集菌、CHROMAGAR O15 7∶H7显色培养基分离、rfbO15 7、rfbO111、hlyA、stx1、stx2、eaeA引物PCR扩增方法进行毒力因子测定等方法 ,观察、研究感染病人的发病和预后。[结果 ]从 130 3份腹泻病人中共分离出的 38株O15 7∶H7菌株 ,检出率 2 9% ,PCRrfbO15 7扩增均为阳性。其中 2株具有stx2、hlyA和eaeA毒力基因 ,36株为O15 7∶H7不产毒株。[结论 ]我省首次从病人中分离出O15 7∶H7产毒株 ,病人发病后可于第 3～ 8d内检出病原体     

岳麓区大肠埃希菌O157:H7宿主动物带菌情况初步调查

目的初步调查湖南省长沙市岳麓地区不同乡镇大肠埃希菌O157:H7宿主动物带菌情况,为制定防治措施提供科学依据。方法于2010年11月采集长沙市岳麓区境内散养的鸡、鸭、猪、牛等家畜家禽粪便标本33份,按国标常规培养法检测大肠埃希菌O157:H7,并对数据进行统计分析。结果 33份标本中共检出阳性标本4份,总阳性率为12.1%(4/33),其中散养的鸡的粪便中大肠埃希菌O157:H7阳性检出率为13.6%(3/22);在4份散养的鸭子粪便中,检出1份阳性。结论长沙市岳麓地区已存在大肠埃希菌O157:H7感染,应引起足够重视。     

基础实验室检测出血性大肠杆菌O157:H7方法的改进

O157:H7大肠杆菌是出血性大肠杆埃希菌(Entero-hemor-rhagi c.coli EHEC)的一个常见的血清型。O157:H7存在引发食物中毒的隐患,故对该菌的预防性检测已成为对该种疾病的控制中一个极为重要的环节了。基层实验室因实验条件的限制而无法开展出血性大肠杆菌O157:H7检测,故本人结合基层实验室的实际状况对北京市疾病预防控制中心陈倩、贾珍珍等建立的一套检测方法进行相应的改进,以使基层实验室能更好地开展该项检测。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株 EHEC 882364由南京市疾病预防控制中心提供;大肠杆菌ATCC25922由江苏省疾病预防控制中心提供。1.1.2 培养基和试剂 营养肉汤;加入新生霉素的mEC增菌     

普通腹泻病人中检出O157∶H7大肠埃希菌情况分析

目的了解现症腹泻病人及家禽家畜的O157∶H7大肠埃希菌感染情况.方法应用流行病学、细菌学等方法调查检测.结果 1999～2000年先后3次从腹泻病人粪便中检测到O157∶H7大肠埃希菌,检出率分别为1.92%、3.85%和4.35%,但未检出带病毒基因,故阳性腹泻病人的临床症状不严重也无并发症出现.家禽家畜O157∶H7的检出率1999年为3.24%(7/216),2000年为5.02%(13/259),且菌株的毒力基因携带率较高为70.00%(14/20).结论腹泻病人及家禽家畜中存在O157∶H7感染,做好"三管一灭"和加强O157∶H7的监测,是防治O157∶H7引起感染性腹泻病的有力措施.     

岳麓区大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况初步调查

目的 初步调查湖南省长沙市岳麓地区不同乡镇大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况,为制定防治措施提供科学依据.方法 于2010年11月采集长沙市岳麓区境内散养的鸡、鸭、猪、牛等家畜家禽粪便标本33份,按国标常规培养法检测大肠埃希菌O157∶H7,并对数据进行统计分析.结果 33份标本中共检出阳性标本4份,总阳性率为12.1％ (4/33),其中散养的鸡的粪便中大肠埃希菌O157∶H7阳性检出率为13.6％ (3/22);在4份散养的鸭子粪便中,检出1份阳性.结论 长沙市岳麓地区已存在大肠埃希菌O157∶ H7感染,应引起足够重视.     

潍坊市首次检出O157：H7大肠杆菌

O157:H7大肠杆菌是出血性大肠杆菌(EHEC)的主要血清型。我国自1986年江苏省首次检出后,山东、北京、浙江等地也相继从腹泻病人大便中分离到该菌。为了解O157:H7大肠杆菌在潍坊市的感染情况,1999年5～10月对本市部分腹泻病人大便,牛、猪粪便,鸡肠内容物,市售牛、羊、猪肉标本进行了检测。     

2009年贵港市出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻监测结果分析

目的 动态观察O157大肠埃希菌的分布特征,掌握贵港市O157大肠埃希菌的来源,为制定本市肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻的防治策略与措施提供依据.方法 通过采集腹泻病人粪便、动物粪便、苍蝇、肉类等标本,采用国标 GB/T4789.36-2008大肠埃希菌O157:H7/NM法检测O157:H7.结果 采集各类标本953份检测O157:H7,检出菌株29份,阳性率为3.04%.结论 该市在动物粪便、苍蝇、肉类中均检出了O157:H7菌,说明目前该市虽未发现人感染O157大肠埃希菌的病例,但发生人间散发流行乃至暴发的条件仍存在,需重视此病的防控.     

河南省6类食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7污染状况调查

目的：调查肠出血性大肠埃杀菌O157：H7在河南省6类食品中的分布特征、污染状况及季节分布。方法：依据河南省自然地理概况分5个采样区域，按夏冬季在销售环节随机取样。选择性增菌培养后，用O157胶体金试剂筛查，免疫磁珠富集后分离病原菌，应用全自动生化鉴定系统和血清学的方法进行鉴定。结果：1463份食品中共检出肠出血性大肠埃希菌O157：H7共28株，检出率1．9％，其中鲜肉和生食蔬菜检出率较高，分别为3．3％和3．2％。夏季检出率（2．5％）明显高于冬季检出率（1．1％）。结论：肠出血性大肠埃希氏菌O157：H7在食品中污染较为严重，其检出率的高低与O157：H7感染性腹泻的流行强度呈正相关。应加强畜禽屠宰、蔬菜生产和销售环节的监督监测，预防O157食源性暴发。     

2005-2009年河南省肠出血性大肠埃希菌O157：H7监测分析

目的监测河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在腹泻患者和宿主动物中带菌及毒力基因情况,探索疾病发生的原因和相关因素。方法对2005-2009年河南省监测点所送可疑菌株进行血清学和PCR复核,对确认菌株进行stx1、stx2、eaeA、hlyA毒力基因测定。结果河南省2005-2009年共监测各类标本10 732份,检出O157∶H7菌株255株,检出率为2.38%;其中动物粪便标本的检出率为6.31%,检出率最高的为羊粪（8.04%）,其次为牛粪（7.20%）;各年份菌株检出率之间有一定差异;河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的产毒株主要来自于羊、牛、鸡粪便及蝇类和生肉标本;毒株类型主要为stx2、eaeA、hlyA组合型。结论河南省肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在人群和各类动物中均存在,最重要的动物宿主是羊和牛;部分食品在加工环节有可能被污染,存在引起暴发的危险性。     

漳州市家畜家禽携带O157大肠杆菌的调查

[目的]了解漳州市家畜家禽携带O157大肠杆菌的情况，为防制工作提供依据。[方法]采集家畜家禽的新鲜粪便或肛拭标本，EC肉汤增菌，O157大肠杆菌病原体快检金卡筛选，SMAC选择性培养基分离培养，对可疑菌落进行血清学、生化试验鉴定，及PCR检测rfbO157、fliCH7基因。[结果]从1122份猪、鸭、鹅、鸡粪便或肛拭标本中检出19株O157大肠杆菌，其中猪源17株、鸭1株、鹅1株。根据血清学及动力试验，11株O157：H7；3株O157：H?；5株O157：NM。[结论]漳州市部分家畜家禽中存在3种类型的0157大肠杆菌，在防制工作中应引起重视。