荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果比对分析

目的:探讨分析应用荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的结果.方法:选取2018年8月～2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者,按数字法随机分两组,各15例,对照组仪器采用RLC480仪检测,观察组仪器采用荧光定量PCR仪检测,通过对患者HBV DNA水平的测定,对比分析不同仪器检测的结果.结果:RLC...     

荧光定量PCR检测HBV DNA

目的：探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBV M)表现模式的关系。方法：对1207例慢性乙型肝炎患者进行血清HBV DNA荧光定量PCR分析，HBV M检测采用ELISA法。结果：血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关，HBsAg与HBeAg的存在影响HBV DNA水平变化。结论：HBbAg和HBV DNA有明显的相关，抗—HBe、抗HBc阳性者病毒末完全停止复制，只是复制水平降低。     

荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物相关性

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV—DNA）与乙型肝炎患者血清病毒标志物（HBV～M）的相关性,为乙肝的早期诊断、病情预测及临床用药提供指导。方法：选择2012年1月到2012年6月半年内682例乙肝患者,分离患者血清标本,采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA,并采用ELISA法检测HBV～M,以不同的HBV—M模式做统计分析。结果：大三阳与[-HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）]模式的HBV—DNA阳性率分别98．85％和98．04％,两者HBV—DNA阳性率明显高于其他HBV—M模式,差异具有统计学意义（P〈0．05）。大三阳的HBv—DNA含量为（5．8×10^6土2．3×10^5）,明显高于其他模式。结论：不同乙肝病毒标志物模式HBV—DNA的检出率及病毒含量有差异,同时对患者做HBV—DNA检测与乙肝病毒标志物检测,对乙肝的早期诊断、病情判断及临床用药都有重要意义。     

闽南肝癌高发区HBV-DNA荧光定量PCR检测的意义

[目的 ]分析闽南肝癌高发区乙肝病毒感染者血清 HBV- DNA含量与 HBVM的关系 ,探讨 HBV- DNA定量检测的应用价值。 [方法 ]用荧光定量 PCR技术 ,测定 398份血清中 HBV- DNA含量 ,同时检测 HBVM。 [结果 ]乙肝大三阳患者 HBV- DNA含量最高 (x=10 7.2 8± 1 .1 6 ) ,阳性率 10 0 % ,小三阳次之 (x=10 4.42± 1 .3 2 ) ,阳性率 5 4.8%。肝癌组HBV- DNA阳性率高达 6 6 .7% ,高于其他肝病组。 [结论 ]闽南肝癌高发区乙肝病毒感染人群中 ,HBV- DNA总阳性率较高 ,乙肝病毒持续复制可能是闽南地区肝癌发生的主要因素之一。     

国产与进口荧光定量PCR试剂检测HBV DNA的结果比较

目的:评价国产和进口HBV DNA定量检测试剂盒的性能和应用。方法:同时用国产和进口HBVDNA定量检测试剂盒对200例临床血清样本进行检测,比较试剂的特异性、灵敏度和符合率,分析检测结果。结果:国产科华试剂的特异性为100%,而灵敏度(68.1%)和符合率(74.5%)均低于CAP/CTM系统;CAP/CTM系统与科华试剂相比,对相同标本检出的HBV DNA水平数值更高。结论:结合临床诊治和检测的效率、以及患者费用等各方面因素,可选择适当的检测试剂。     

荧光定量PCR检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒 DNA

目的探讨定量检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)的临床意义.方法采用荧光定量PCR检测PBMC及血清中HBV-DNA含量.结果 49例慢性乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA阳性率分别为44.9%(22/49),51.0%(25/49),两者阳性率无统计学意义的差异(P＞0.05),具有一致性;血清HBV-DNA高水平组PBMC的HBV-DNA含量与低水平组比较,两者有统计学意义差异(P＜0.01);血清HBV- DNA高水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(100%)与血清低水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(42.9%)比较,两者有统计学意义的差异(P＜0.05);在24例血清HBV-DNA阴性患者中,发现5例PBMC HBV-DNA阳性.结论 PBMC的HBV-DNA检测可反映病毒在体内的复制程度,是对慢乙肝患者血清HBV-DNA检测有意义的补充,有助于临床上对慢乙肝患者血清病毒复制状态的了解及指导治疗用药.     

荧光定量PCR检测血浆游离DNA方法的建立

[目的] 建立TaqMan探针定量PCR 术检测血浆游离DNA的方法.[方法] 构建重组质粒pMD-18-TGAPDH、pMD-18-T-sRY作为标准品,并通过软件设计出TaqMan探针,优化定量PCR体j募≯并对其特异性进行分析.[结果] 建立了1个检测GAPDH和4个检测SRY荧光定量PCR方法,得到上述5个荧光PCR的扩增动力曲线和定量标准曲线,模板起始浓度与阈值循环数(CT值)之间有很好的相关关系(r分别为0.97.0.99.0.98、0.97、0.99).[结论] 成功建立了定量检测血浆游离DNA的方法,其灵敏度高、特异性强,有望成为一种检测孕母血浆游离DNA含.量的快速简便方法.     

2种荧光定量PCR扩增仪检测结果的比较

目的:观察2种荧光定量PCR扩增仪测定乙肝病毒定量(HBV DNA)的结果是否一致。方法:用2台PCR扩增仪同时对20份标本进行检测,观察2台荧光定量PCR定量扩增仪对HBV DNA测定结果的差异。结果:对20份标本HBV DNA含量的对数值进行相关性分析,二者相关性良好(r=0.96)。结论:通过2种荧光定量PCR扩增仪对20份随机样本的检测结果比较,2种仪器检测结果具有较好的一致性,可用于同时检测HBV DNA。     

血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性

目的 探讨HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式之间的相关性.方法 将265例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的荧光定量PCR检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行HBV DNA与乙肝病毒标志物的分析研究.结果 乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率98.3%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组阳性率77.8%,HBsAg、HBcAb阳性组阳性率83.3%;HBsAg阳性组阳性率60%;:HbeAb、HBcAb阳性组阳性率42.1%;HBsAb阳性组阳性率38.1%;全阴性组阳性率3.1%.结论 HBV DNA荧光定量PCR法检测在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大(3.1%～98.3%);乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV-DNA阳性率较高;HBsAg及其抗体阳性者也可检出HBV DNA,甚至乙肝模式全阴性者仍可检出HBV DNA.说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的.因此同时检测乙肝标志物和HBV DNA有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断.     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者唾液HBV-DNA的意义

目的 探讨唾液HBV-DNA在乙型肝炎中的意义。方法 采用荧光定量PCR法检测250例来新乡市中心医院就诊的HBV感染者的唾液和血清。结果 250份标本血清中HBV—DNA为阴性的有25例（10．0％）;唾液中HBV-DNA为阴性的有68例（27．2％）。血清中HBV-DNA大于10^3U／ml的有225例（90％）,唾液中HBV-DNA大于10^3U／ml的有182例（72．8％）。其中大于10^3U／ml标本中,血清209例（83．6％）,唾液123例（49．2％）,血清与唾液HBV—DNA水平之间存在相关性（r=0．79,P〈0．01）。结论乙型肝炎患者的唾液和血清中含有感染性的高载量HBV—DNA,可成为传染源之一。为乙型肝炎的流行病学研究提供了新的思路和理念。     

荧光定量PCR在检测角膜炎泪液中单疱病毒DNA的应用价值

单纯疱疹性角膜炎主要是由单纯疱疹病毒1型引起的一种致盲率很高的传染性眼病。目前尚缺少实验室的病原学早期诊断技术。为此,作者采用荧光定量PCR技术检测45例各种类型角膜炎泪液中HSVDNA,以期达到早期快速定量检测HSVDNA来诊断HSK的目的。现报告如下。 1 临床资料 1.1 对象本组45例各型角膜炎患者,男25例,女20例,     

荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义

目的:探讨血清免疫标志物模式与 HBV DNA之间关系.方法:对 780例临床血清标本分别进行荧光定量聚合酶链 反应( FQ- PCR)和酶联免疫吸附试验( ELISA)对比检测.结果:在 780例临床标本中, HBsAg( )、HBeAg( )和 HBcAb( )模式 345例, HBV DNA阳性 335例,阳性率为 97.1%( 335/345),血清病毒载量对数值的均值为 7.84 ± 1.20; HBsAg( )、HBeAb( )和 HBcAb( )模式 294例, HBV DNA阳性 167例,阳性率为 56.8%( 167/294),载 量对数值的均值为 5.02± 1.19; HBsAg( )和 HBcAb( )模式 141例, HBV DNA阳性 49例,阳性率为 34.8%( 49/141), 载量对数值的均值为 4.89± 1.07.结论: HBeAg是反映 HBV DNA复制的重要指标,定量测定 HBV DNA能真实反映 HBV复制状况,为乙型肝炎的诊断、治疗及预后判断提供指导意义.     

500例乙肝PCR荧光定量检测结果分析

目的分析乙肝病毒核酸(HBV-DNA)含量检测的结果与乙肝血清标志物检测结果的关系。方法用荧光定量PCR和ELISA两种方法检测500份乙肝病毒感染者血清,并对其结果进行分析。结果500例HBV-DNA定量检测阳性283例,阴性217例;52例HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb组阳性患者(大三阳)检出HBV-DNA阳性51例,66例HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb组阳性患者(小三阳)检出HBV-DNA阳性39例。结论大、小三阳两组患者检出HBV-DNA差异有非常显著性(P<0.001),联合运用乙肝标志物与HBV-DNA检测有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断。     

沙眼衣原体DNA的荧光定量PCR检测

沙眼衣原体(CT)的实验室检测技术主要分为细胞培养观察包涵体的经典细胞生物学方法；免疫学方法和以核酸扩增技术为代表的分子生物学检测方法。长期以来一直以前者作为沙眼衣原体感染诊断的金标准，但该方法操作复杂，技术要求高，所需时间长，所受影响因素多，因此，一直未得到普遍应用。本实验采用实时荧光定量PCR（fluorescence quantitatire PCR，FQ-PCR)方法，检测沙眼衣原体，克服了上述缺点，取得了较好的效果。现报告如下。     

定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义

采用定量PCR技术检测了140例病毒性肝炎患及31例HBaAg携带血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA基因音量．结果显示123例乙型肝炎患及31例HBsAg携带血清HBV DNA基因音量范围在10^1至10^p拷贝／微升，17例其它类型肝炎及30例健康正常人均未检出HBV DNA；与定性PCR及分子斑点杂检测比较，定量PCR的灵敏度更高．该方法是一种快速、敏感、特异的定量PCR技术，可用于乙型肝炎的临床诊断和实验研究。     

荧光定量PCR法与ELISA法检测乙肝病毒感染相关性探讨

目的分别采用荧光定量PCR法和ELISA法检测乙肝病毒标志物,探讨两种方法的相关性。方法采集490份乙肝表面抗原呈阳性的体检者的血清,采用ELISA法和FQ-PCR两种方法进行HBV DNA定量检测,比较分析其结果。结果 HBs Ag(+),HBe Ag(+),HBc Ab(+)阳性组血清中HBV DNA阳性检出率为95.6%,HBs Ag(+),HBe Ag(+)组阳性检出率为100.0%,HBs Ag(+),HBe Ab(+),HBc Ab(+)组阳性检出率为20.6%,HBs Ag(+),HBc Ab(+)组阳性检出率为36.4%。第1组、第2组、第3组相比较,差异具有显著性(P<0.05);第3组和第4组相比差异也具有显著性(P<0.05)。不同性别感染者HBV DNA阳性检出率无显著性差异(P>0.05),但男性感染者的阳性均值略高于女性感染者。结论荧光定量PCR和ELISA两种方法在检测乙肝病毒标志物中有密切相关性,荧光定量PCR法结果更为科学可靠。     

荧光定量PCR检测生殖道内沙眼衣原体感染的应用

目的评价DNA定量测定技术在生殖道衣原体感染诊断中的应用价值。方法比较荧光定量DNA测定与传统检测手段对衣原体感染的检测结果。结果用荧光定量PCR法测定DNA来检测沙眼衣原体（CT）感染,其敏感性和特异性均比传统的方法高。结论CT—DNA定量测定不宜用作短期判愈,在沙眼衣原体诊断中具有巨大的潜力。     

荧光定量PCR检测脂肪肝患者血浆循环DNA及其临床意义

目的检测脂肪肝患者血浆循环DNA（plasma circulatingDNA,PC-DNA）是否发生显著改变,探讨PC-DNA作为脂肪肝早期筛查标志物的可能性。方法从本院体检人群中选取脂肪肝患者和年龄与性别都与之匹配的健康对照人群作为研究对象,采集受试者的全血,分离血浆,提取PC-DNA,采用荧光定量PCR对看家基因—人生长激素基因（HGH）的DNA浓度进行定量以评价PC-DNA水平;另外,我们还检测了每份样本中谷丙转氨酶（ALT）、谷氨酰转移酶（GGT）及高密度脂蛋白（HDL）的浓度。最后,利用t检验和Spearman＇s correlation coefficients等分析方法对数据进行统计分析。结果在脂肪肝患者中PC-DNA的水平（Median=4.10）明显高于健康对照人群的PC-DNA水平（Median=3.47）,P值等于0.0329;分析PC-DNA水平与ALT、GGT及HDL之间的相关性,发现PC-DNA与ALT及GGT正相关,而与HDL呈负相关。结论检测脂肪肝患者PC-DNA水平,并联合ALT、GGT及HDL等生化指标,可筛查脂肪肝。     

裂谷热病毒荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于裂谷热病毒的检测。方法通过序列对比在裂谷热病毒L基因保守区设计引物及Taqman探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达37拷贝/μl,通过检测同为蚊媒传播的日本脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、基孔肯亚病毒无交叉反应。结论本方法的建立在国境口岸传染病的防控方面有较好的应用前景。     

登革1型病毒荧光定量PCR快速检测

目的建立登革1型病毒的快速特异的荧光定量PCR检测方法。方法设计登革1型病毒特异的引物和TaqMan探针,制作标准曲线,并检测其特异性、重复性、再现性和敏感性,采用荧光定量PCR和常规PCR对临床标本进行检测比较。结果成功构建了标准曲线,回归方程为Y=-3.410logX+45.10,相关系数R²=0.999,扩增效率Eff=96.5%,灵敏度可达10³ copies/mL,此荧光定量PCR方法对登革1型病毒检测高度特异,与其他3型登革病毒和乙型脑炎病毒之间并无交叉反应;采用登革病毒种特异引物探针和本研究建立的登革1型病毒型特异引物探针对166份cDNA样本进行荧光定量PCR检测,均发现126份为阳性,阳性率均为75.9%,Ct值为20.84～36.36,浓度范围为1～1.3×104copy/μL;常规PCR方法检测到其中36份为阳性,阳性率为21.7%。结论荧光定量PCR方法能够快速灵敏地检测登革1型病毒,并能实现对病毒滴度的绝对定量。