胃腺癌p53基因点突变的研究

目的 探讨胃腺癌原发灶及淋巴结转移灶与ｐ５３基因突变的关系。方法 用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测４７例胃腺癌及相关淋巴结转移灶ｐ５３基因第７外显子的突变。结果 ４７例原发灶有８例（１７％）、淋巴结转移灶有１８例（３５％）检测到ｐ５３基因突变。原发灶与转移灶同时发生鹤煌有７２例（１５％）。胃癌原发灶ｐ５３基因突变与患者年龄、性别、病灶大小、肿瘤部位、肉眼类型、浸润深度、组织学类型、临床分期无关（Ｐ〉０．     

肺癌p53基因突变的临床意义

目的：研究肺癌ｐ５３基因突变的临床意义，方法：运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性分析方法（ＳＳＣＰ），检测原发性肺癌约ｐ５３基因的第５￣８外显子点突变。结果：８例肺良性疾病均无点突变发生，４０例肺癌中１９例（４７．５％）有点突变发生，点突变发生与临床分期和淋巴结果及状态相关（Ｐ〈０．０２）。结论：证实ｐ５３基因点突变在肺癌的发生和进展中起着相当重要的作用。     

抑癌基因p53第5～8外显子突变与喉鳞癌关系的研究

为探讨抑癌基因ｐ５３基因突变与喉鳞癌之间的关系,应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染系统,检测６０例喉鳞癌新鲜组织中抑癌基因ｐ５３基因第５￣８外显子的突变情况。结果：６０例喉鳞癌组织中,发生４７例第５￣８外显子迁移率异常的ＳＳＣＰ区带,总的突变率为７８．３％。ＳＳＣＰ阳性病例在外显子５、６、７、８中的突变率由高到低依次为Ｅｘｏｎ５、Ｅｘｏｎ７、Ｅｘｏｎ８、Ｅｘｏｎ６。提示第     

大肠癌组织p53基因突变及其与临床病理关系的探讨

应用非同位素标记ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对３４例大肠癌组织ｐ５３基因第五外显子突变进行了检测。结果：５０％（１１／２２）结肠癌，８．３％（１／１２）直肠癌存在ｐ５３基因突变，低分化腺癌高于高、中分化腺癌（Ｐ＜０．０５），ＤｕｋｅｓＢ、Ｃ期高于ＤｕｋｅｓＡ期（Ｐ＜０．０５），ｐ５３基因第五外显子突变在已发生淋巴转移的大肠癌组织中呈现较强的趋势。提示：检测结肠癌原发灶ｐ５３基因第五外显子突变，对指导结肠癌的诊断、治疗及预后判断具有一定意义     

c－erbB－2癌基因表达及p53抑癌基因突变与乳腺癌临床病理特征的关系

本文应用免疫组化及ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５８例乳腺肿瘤ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因表达及ｐ５３抑癌基因突变进行研究，结果显示乳腺癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２表达率为３８％，ｐ５３表达率为５２％，导管内乳头状瘤均为阴性；ｃ－ｅｒｂＢ－２表达与乳腺癌组织学分级（Ｐ＜０．０１）及淋巴结转移呈负相关（Ｐ＜０．０１），与雌激素受体状态呈正相关（Ｐ＜０．０１）；ｐ５３表达与淋巴结转移呈正相关（Ｐ＜０．０１），且倾相于≥２ｃｍ的肿瘤；两基因的表达均与乳腺上皮细胞的恶性转化及淋巴结转移密切相关，但两基因间无明显相关性；因此，每一基因的改变均可作为不依赖于淋巴结状态的独立预后指标。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析表明，１５例ｐ５３基因表达阳性病例中４例于外显子５，６例于外显子７有该基因的突变（６７％），说明乳腺癌ｐ５３基因突变也多发生于其突变热点部位。     

喉鳞癌中p53基因的检测及其意义

为了探讨喉鳞癌中ｐ５３基因与肿瘤临床分期、病理分化程度及淋巴结转移的关系,应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染系统检测６０例喉鳞癌新鲜组织中抑癌基因ｐ５３基因第７外显子的突变情况。结果：ｐ５３基因第７外显子突变２５例,突变率为４１．７％。临床Ⅰ～Ⅱ期突变率为２６．９％（７／２６）,Ⅲ～Ⅳ期突变率为５２．９％（１８／３４）;高、中、低分程度分布为２３．５％（４／１７）、３７．５（９／２４）、６３．２％（１２／１９）;无淋巴结转移者为２８．１％（９／３２）,有淋巴结转移者为５７．１％（１６／２８）;差异均有显著意义（Ｐ〈０．０５）。结论：提示ｐ５３基因第７外显子突变与喉磷癌临床分期、病理分化程度及肿瘤颈淋巴结转移密切相关。     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨喉癌细胞ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型、相对定量及ｐ５３基因第４至第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌（临床Ⅲ－Ⅳ期）有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转移者（Ｐ＜０．０５）。结论喉癌ｐ５３基因突变与ＨＰＶ１６／１８感染有关,晚期喉癌颈淋巴结转移与ｐ５３基因突变有关。     

用PCR—SSCP方法探讨ras基因,p53基因突变与喉癌的关系

目的：研究ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变与喉鳞状细胞癌发病的关系。方法：应用多聚酶链反应－单链构像多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析４０例喉鳞状细胞癌Ｈ－ｒａｓ,Ｋ－ｒａｓ,和Ｎ－ｒａｓ基因的第１２密码子,ｐ５３基因第５,７外显子中点突变的情况。结果：Ｈ－ｒａｓ基因突变９例,突变率为２２．５％（９／４０）;Ｋ－ｒａｓ基因突变８例,突变率为２０％（８／４０）,Ｎ－ｒａｓ基因突变５例,突变率为１２．５     

应用改进的PCR—SSCP银染色法检测卵巢上皮肿瘤p53基因突变？…

目的：探讨ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法检测基因点突变的准确性和检测卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因的点突变率。方法：建立ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了３６例卵巢上皮癌，１２例卵巢上皮交界瘤和１５例良性卵巢上皮肿瘤ｐ５３基因第５￣９外显子的点突变。结果：ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染正常时出现２条带，突变时出现３条带，卵巢上皮癌ｐ５３基因突变率为３０．６％；第５、６、７、８、９外显子分别为１、１、６、３、０例，突变率在临     

85例非小细胞肺癌中p53基因异常的预后价值

目的：探讨ｐ５３蛋白表达和基因突变在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的预后价值。方法：利用免疫组化方法检测８５例ＮＳＣＬＣ的ｐ５３蛋白表达，聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测３１例肺腺癌ｐ５３基因５、６、７、８外显子突变，研究结果进行单因素生存分析。结果：本组ＮＳＣＬＣ病人的平均年龄为５５．６±８．４岁（中位数５５岁），随访时间的中位数为４７个月，３年、５年总体生存率分别为６６％和６１％。ｐ５３蛋白表达与预后无关（χ２＝１．００，Ｐ＝０．８），而ｐ５３基因突变组病人的生存率显著低于无ｐ５３基因突变组（χ２＝４．８１，Ｐ＝０．０３）。同时，ｐ５３蛋白表达与ＰＣＲ－ＳＣＰ检测的ｐ５３基因突变的一致率仅为５２％。结论：在ＮＳＣＬＣ中ｐ５３蛋白表达和基因突变可能有不同的预后意义，ｐ５３基因突变可作为肺腺癌的辅助预后指标。     

p53单链构象多态性变化与食管鳞癌患者术后生存期的关系

目的探讨p53基因单链构象多态性变化与食管鳞癌患者术后生存期的关系。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)结合银染技术,对47例河南林县食管鳞癌患者癌组织及癌旁正常组织中p53基因第5～8外显子进行比较。结果p53基因第5～8外显子出现异常电泳条带者20例(42.6％);生存期大于5a组与生存期小于5a组,p53基因单链构象多态性变化发生率分别为32．1％(9／28)和57．9(11／19),2组比较,差异无显著性(χ2=3.071,P＞0.05)。结论食管鳞癌组织p53基因第5～8外显子单链构象多态性变化与患者生存期无明显相关关系。     

喉鳞状细胞癌P53蛋白表达和基因突变

目的：探讨喉鳞癌P53蛋白表达和基因移码突变情况。方法：采用SP法检测31例喉鳞癌的P53蛋白表达；人工微切割—PCR—异源双链分析法检测ll例P53蛋白阴性标本第5、6、7、8外显子的移码突变。结果：免疫组织化学显示P53总阳性率为64．5％。T1、T2期阳性率43．8％，T3、T4期为86．7％；有和无淋巴结转移的分别为91．7％、47．4％(P＜0．05)；高分化、中分化及低分化鳞癌中P53蛋白阳性率分别为45．5％(5／11)、66、7％(8／12)、87．5％(7／8)。异源双链分析法分析1例第5外显子和1例第7外显子阳性。结论：在喉鳞癌中，P53蛋白阳性表达多见于T3及T4期肿瘤及有颈淋巴结转移者；p53基因突变率随肿瘤分化程度的降低而升高。     

口腔舌鳞癌p53基因突变及其表达的相关性研究

目的：探讨口腔舌鳞癌中p53基因突变及其蛋白的表达两者相关性。方法：应用Western blot和聚合酶链反应-单链构象多态性方法检测38例口腔舌鳞癌、20例口腔癌前病变及10例正常口腔黏膜组织中p53蛋白表达及p53基因突变情况。结果：p53蛋白在口腔舌鳞癌、癌前病变和正常口腔黏膜组织的阳性表达率分别为42．1％（16／38）、10．0％（2／20）、0％（0／10）。39．5％（15／38）的口腔舌鳞癌存在p53基因第5、8外显子突变。在p53基因突变的病例中，p53蛋白表达与其基因突变密切相关。结论：p53基因突变及其蛋白过量表达与口腔舌鳞癌的发生、发展密切相关。     

PTTG、c-myc和P53在食管癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨PTTG、c-myc和P53蛋白在食管癌及癌前病变组织中的表达、相互关系及其临床意义。方法:应用免疫组化EnVision法检测食管癌、癌前病变及正常食管粘膜组织中PTTG、c-myc和P53蛋白的表达情况。结果:PTTG、c-myc和P53蛋白在正常食管粘膜组织与癌前病变和食管癌组织比较有统计学意义,癌前病变与食管癌组织比较有统计学意义,PTTG和c-myc蛋白的高表达与食管癌的临床分期和淋巴结转移有关;P53蛋白的高表达仅与淋巴结转移有关。结论:PTTG、c-myc和P53蛋白的过度表达参与了食管癌的发生、发展过程,PTTG基因的突变或激活是食管癌发生的早期事件。     

△Np63在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨p53基因家族新成员截短型p63(△Np63)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR法检测50例食管鳞癌及50例正常食管组织中△Np63 mRNA的表达情况,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。结果△Np63 mRNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率(74.0%)及表达水平(1.036±0.157)均显著高于正常食管组织(40.0%,0.954±0.110),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论在食管鳞癌组织中存在△Np63的过表达,并且这种表达可能与食管鳞癌的浸润、转移有关。     

子宫颈癌候选抑癌基因Syk表达及其启动子甲基化的测定

采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测60例宫颈癌、50例宫颈上皮内瘤变（CIN）和20例正常宫颈组织中SykmRNA的表达,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测Syk基因启动子甲基化情况。正常宫颈组织和CINⅠ组织中均有Syk基因表达,CINⅡ-Ⅲ组织56％（18／32）、宫颈癌组织35％（21／60）表达;有淋巴结转移的宫颈癌组织表达比例为1／13,无淋巴结转移者为43％（20／47）。宫颈癌组织中Syk基因启动子甲基化率57％（34／60）,明显高于CIN组织[18％（9／50）,X^2值为7．13,P〈0．01],正常宫颈组织和CINⅠ组织中均无Syk基因启动子的甲基化,淋巴结转移的宫颈癌组织比例为11／13;Syk基因及其启动子甲基化程度与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学类型及病理类型无明显相关性（P〉0．05）,与Syk基因表达缺失明显相关（P〈0．05）。Syk基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,可能与宫颈癌发生发展有关。     

胃癌患者p53基因突变的检测及其临床意义

目的:探讨胃癌患者癌组织及外周血p53基因突变表达情况,评价p53基因作为胃癌患者术后预后判定、转移监测及指导临床治疗的应用价值。方法:利用聚合酶链反应单链构像多态性分析法(PCRSSCP)和银染技术检测32例胃癌患者外周血、癌旁正常组织、癌组织中p53基因外显子5、6、7、8位点及20例健康人外周血p53基因的突变情况,并比较不同组织类型、不同分期、有无淋巴结转移胃癌患者p53基因的突变率。结果:32例胃癌患者癌旁正常组织和20例正常人外周血中未检出p53基因突变;胃癌患者癌组织中的p53基因突变率为37.5%(12/32),与癌旁正常组织无相比差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者的胃癌组织p53基因突变高于无淋巴结转移患者(P<0.05);胃癌患者外周血p53基因突变率为15.6%(5/32),外周血中p53基因突变阳性者其相应癌组织p53基因突变均为阳性,经过3个月随访,其中有1例确诊为肝转移。不同组织类型不同分期胃癌患者p53基因突变率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:p53基因突变对胃癌患者术后预后判定、转移监测及指导临床治疗有一定的意义。     

p53蛋白和ki-67蛋白在食管鳞癌、癌前病变的表达及其临床意义

目的探讨食管鳞癌、癌前病变、正常黏膜p53蛋白和ki-67蛋白的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测35例食管鳞癌、18例轻度不典型增生、11例重度不典型增生、18例食管正常上皮p53蛋白和ki-67蛋白的表达。结果正常黏膜及轻度不典型增生与重度不典型增生、食管鳞癌p53阳性率比较差别有统计学意义（P〈0．01），正常黏膜与轻度不典型增生之间、重度不典型增生与食管鳞癌p53阳性率比较差别无统计学意义（P〉0．05），p53表达与鳞癌分级及淋巴结转移无关（P〉0．05）。正常黏膜与轻度不典型增生、轻度不典型增生与食管鳞癌ki-67阳性检出率比较有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）、轻度不典型增生与重度不典型增生ki-67阳性检出率比较无统计学意义（P〉0．05），重度不典型增生与食管鳞癌、中-高分化鳞癌与低分化鳞癌ki-67高表达率比较有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），ki-67表达与淋巴结转移无关（P〉0．05）。p53与ki-67表达呈正相关（P〈0．01）。结论p53基因的缺失或突变在食管鳞癌的早期阶段；联合检测P53与ki-67作为筛选癌前高危个体可能更有意义。     

PTEN 与 p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的：探讨PTEN基因缺失和p53基因突变在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法：本实验以50例鼻咽癌标本作为病例组,以50例正常子鼻咽部组织作为对照组,应用免疫组织化学技术检测二组中PTEN和p53的表达,分析其不同临床病理特征中的意义及对预后的判断价值。结果：病例组PTEN阴性24例,对照组阴性0例,两组比较差异有显著的统计学意义（P＜0．01）,Ⅲ期和Ⅳ期以及有淋巴结转移的患者PTEN 阴性比例明显高于PTEN 阳性患者,差异有有显著的统计学意义（ P＜0．01）,病例组PTEN阳性38例,对照组阳性22例,两组比较差异有显著的统计学意义（P＜0．01）,有淋巴结转移的患者p53阳性比例明显高于p53阴性患者,差异有有显著的统计学意义（ P＜0．01）。结论：PTEN基因缺失和p53基因突变与鼻咽癌发生和发展密切相关。     

食管癌组织中p53蛋白的表达及临床意义

目的　探讨p5 3基因突变和p5 3蛋白表达与食管癌临床病理的关系。方法　应用银染PCR -SS CP方法和免疫组织化学方法检测了食管癌组织中p5 3基因突变和蛋白的表达。以切缘正常组织为对照。结果　 4 7例食管癌标本中 ,p5 3基因第 5～ 8外显子出现点突变者 2 0例 ,其突变率为 4 2 .6 % ,生存期大于 5年组和生存期小于 5年组 ,p5 3突变率分别为 32 .1%和 5 7.9% ,差异无显著性 (χ2 =3.0 71,P >0 .0 5 ) ;2 2例伴有淋巴结转移的原发癌中 13例出现了突变 ,阳性率为 5 9.1% ,与无淋巴结转移组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。p5 3蛋白表达者 2 9例 ,其表达率为 6 1.7% ,生存期大于 5年组与生存期小于 5年组相比 ,p5 3蛋白阳性表达率分别为 5 0 .0 %和 78.9% ,具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组相比 ,p5 3蛋白表达阳性率分别为 77.3%和 4 8.0 % ,也具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　p5 3基因突变和蛋白表达与食管癌的转移密切相关 ,且是一个判断预后的有用指标